CC BY
0
УДК 616.12-009.86:611.018.74:616.995.122 DOI 10.31684/25418475-2023-4-16
ЭНДОТЕЛИАЛЬНАЯ ДИСФУНКЦИЯ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ОПИСТОРХОЗЕ
1Алтайский государственный медицинский университет, г. Барнаул 656038, Алтайский край, г. Барнаул, пр. Ленина, 40
2Алтайский филиал ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Минздрава России, г. Барнаул
656024, Алтайский край, г. Барнаул, ул. Ляпидевского, 1
Момот А. П.1,2, Кудинов А. В.1,2, Карбышева Н. В.1, Бесхлебова О. В.1, Никонорова М. А.1, Иванова М. Э.1, Трухина Д. А.1
Резюме
Актуальность. Основу комплекса взаимосвязанных патологических процессов при описторхозной инвазии в ряде случаев может представлять эндотелиальная дисфункция, провоцирующая риски кардиоваску-лярных событий и являющаяся важным аспектом в установлении патогенетических связей между заболеваниями печени и сердечно-сосудистой системы. При оценке воспалительного процесса в патогенезе инвазии возрастает интерес к вкладу не только клеточных элементов и циркулирующих маркеров воспаления, но и к межклеточной коммуникации и регуляции посредством микровезикул.
Цель исследования. Изучить циркуляцию внеклеточных везикул, связанных с клетками крови и эндотелия, у больных хроническим описторхозом.
Материалы и методы. Исследование проведено на двух группах людей (мужчины и женщины в возрасте от 18 до 55 лет (34,3±1,3 лет)). Опытная группа - больные хроническим описторхозом (n=26), контрольная группа, сопоставимая по полу и возрасту (n=14). Качественный состав и количество внеклеточных везикул (ВВ) определялся методом проточной цитофлюориметрии.
Результаты. В опытной группе наблюдалось значимое увеличение числа CD41+ событий (тромбоцитар-ные ВВ) в 2 раза (с 120 до 245 событий/мкл (p = 0,030), CD45+событий (панлейкоцитарные ВВ) - более чем в 120 раз (с 95 до 11713 событий/мкл (p=0,0330), а также тенденция к увеличению показателя для CD31+ событий в 19,8 раза (с 495 до 9818 событий/мкл (p=0,133) по сравнению с контрольной группой. Скрининговая оценка популяции CD9+тромбоцитарного (CD41+31+CD9+), эндотелиального (CD41-31+9+) и лейкоцитарного (CD45+CD9+) происхождения показала значимое (p=0,0330) увеличение событий, при этом их содержание соответствовало полученным данным по CD31+41+ событиям в количественном выражении. Для эндотелиальных ВВ отмечалось достоверное увеличение доли CD9+ событий с 23,3% в контроле до 46,2% в опытной группе, при этом для лейкоцитарных ВВ статистически значимого изменения процентного соотношения не отмечалось и составляло 9,9% в контроле и 12,9% в опытной группе. Выводы. Данные результаты можно рассматривать с позиции активации тромбоцитов, а также развития воспалительного процесса и эндотелиальной дисфункции, где в качестве потенциальных высокочувствительных маркеров при описторхозной инвазии могут выступать микровезикулы. Ключевые слова: хронический описторхоз, эндотелиальная дисфункция, внеклеточные везикулы, проточная цитофлюориметрия
ENDOTHELIAL DYSFUNCTION IN CHRONIC OPISTORCHIASIS
1Altai State Medical University, Barnaul, Russia
656038, Altai Krai, Barnaul, Lenina Ave., 40
2Altai Branch of the National Medical Research Center for Hematology, Ministry of Health of Russia, Barnaul, Russia
656024, Altai Krai, Barnaul, Lyapidevskogo St., 1
Momot A. P.12, Kudinov A. V.12, Karbysheva N. V.1, Beskhlebova O. V.1, Nikonorova M. A.1, Ivanova M. E.1, Trukhina D. A.1
Abstract
Relevance. The basis of the complex, in some cases, of interrelated pathological processes in opisthorchiasis invasion may be endothelial dysfunction, which provokes the risks of cardiovascular events, and is an important aspect in establishing pathogenetic connections between diseases of the liver and the cardiovascular system. When assessing the inflammatory process in the pathogenesis of invasion, there is increasing interest in the contribution of not only cellular elements and circulating inflammatory markers, but also in intercellular communication and regulation through microvesicles.
Purpose of the study. To study the circulation of extracellular vesicles, which are associated with blood and endo-thelial cells, in patients with chronic opisthorchiasis.
Materials and methods. The study was conducted on two groups of people (men and women aged 18 to 55 years (34.3±1.3 years)). The experimental group included patients with chronic opisthorchiasis (n=26). There was the con-
trol group (n=14) matched by gender and age with experimental group. The qualitative composition and quantity of extracellular vesicles (EVs) was determined by flow cytometry.
Results. In the experimental group, there was a significant increase in the number of CD41+ events (platelet EVs) 2 times (from 120 to 245 events/^l (p = 0.030), CD45+ events (panleukocyte EVs) - more than 120 times (from 95 to 11713 events/^l (p=0. 0330), as well as a trend towards an increase in the rate for CD31+ events by 19.8 times (from 495 to 9818 events/^l (p=0.133) in comparison with control group. Screening assessment of the CD9+ population of platelet EVs (CD41+31+CD9+), endothelial EVs (CD41-31+9+) and leukocyte EVs (CD45+CD9+) showed a significant (p=0.0330) increase in events, while their content corresponded to the data obtained by CD31+41+ events in quantitative terms. For endothelial EVs, there was a significant increase in the proportion of CD9+ events from 23.3% in the control to 46.2% in the experimental group, while for leukocyte EVs there was no statistically significant change in the percentage ratio, and it was 9.9% in the control and 12.9% in the experimental group. Conclusions. These results can be considered from the perspective of platelet activation, as well as the development of the inflammatory process and endothelial dysfunction, where microvesicles can act as potential highly sensitive markers for opisthorchiasis invasion.
Keywords: chronic opisthorchiasis, endothelial dysfunction, extracellular vesicles, flow cytometry
Введение
Описторхоз - биогельминтоз, поражающий преимущественно гепатобилиарную систему, поджелудочную железу с нарушением их структуры и функции. Патологические процессы, обусловленные многолетним пара-зитированием гельминта в организме хозяина, выходят за пределы органов его первичного обитания и обусловливают нарушение функций различных органов и систем (сердечно-сосудистой, дыхательной, пищеварительной, эндокринной). Механизмы полиморфизма клинических проявлений при данной инвазии трактуются с позиций токсического, иммуно-опосредованного воздействия паразитов, вызывающие аллергизацию, нарушение микро-биоты, стимуляцию канцерогенеза в организме хозяина и других проявлений, механизмы которых до конца не изучены. Основу комплекса, в ряде случаев, взаимосвязанных патологических процессов при описторхозной инвазии может представлять эндотелиальная дисфункция, провоцирующая риски кардиоваскуляр-ных событий, являющаяся важным аспектом в установлении патогенетических связей между заболеваниями печени и сердечно-сосудистой системы, а также других органов [1]. В связи с этим, при оценке роли воспалительного процесса в патогенезе инвазии в последние годы возрастает интерес к вкладу не только клеточных элементов и циркулирующих маркеров воспаления, но и к межклеточной коммуникации и регуляции посредством микровезикул.
Первоначально считалось, что внеклеточные везикулы (ВВ) - это просто инертный клеточный мусор, также известный как «клеточная пыль», не имеющий биологического значения. Однако последующие исследования показали, что они играют важную роль в регуляции широкого спектра клеточных физиологических процессов, выяснилась их значимая роль в реализации межклеточных взаимосвязей, воспалении, ангиогенезе и гемостазе [2]. Установлено, что образование микрочастиц характерно для многих типов клеток, в том числе для лейкоцитов, эритроцитов, эндотелиальных, стволовых, а также опухолевых клеток [3, 4].
ВВ способствуют окислительному стрессу, воспалению и вызывают дисфункцию эндотелия, что вносит свой вклад в формирование и про-грессирование атерогенеза [5-8]. Помимо их важной роли в межклеточной коммуникации и вклада в тромботические проявления ряда патологических состояний, включая сердечно-сосудистые заболевания, микровезикулы представляют собой и диагностический инструмент для неинвазивной жидкой биопсии [9]. В ряде исследований показано, что количество и состав микровезикул крови при той или иной патологии весьма специфичны, что определяет их практическую значимость для диагностики, прогноза и терапевтического мониторинга различных клинических состояний [10, 11, 13]. При описторхозной инвазии исследования внеклеточных везикул ранее не проводились, что и определило цель настоящей работы.
Цель исследования: изучить циркуляцию внеклеточных везикул, связанных с клетками крови и эндотелия, у больных хроническим описторхозом.
Дизайн эксперимента
Исследование проведено на двух группах людей обоего пола в возрасте от 18 до 55 лет (34,3±1,3 лет). Первая группа (п=26) включала больных хроническим описторхозом. Диагноз описторхозной инвазии верифицирован микроскопически при обнаружении яиц гельминтов в кале (у 80,0% пациентов), яиц и/или марит описторхиев в дуоденальном содержимом (у 20,0% пациентов). Вторая, контрольная группа (п=14), сопоставимая с обследуемой по полу и возрасту, состояла из условно здоровых добровольцев. Критерии включения в исследование: описторхоз, подтвержденный лабора-торно; возраст от 18 до 45 лет у мужчин, 18-55 лет у женщин, наличие добровольного информированного согласия на участие в исследовании. Критерии исключения из исследования: присутствие других паразитарных инвазий по данным серологического и копроовоскопического исследований (эхинококкоз, трихинеллез, ток-
сокароз, аскаридоз и др.), наличие острых и хронических заболеваний печени инфекционной (вирусные гепатиты) и соматической природы (алкогольные, аутоиммунные, на фоне метаболических нарушений); наличие в анамнезе кардиоваскулярных заболеваний; ранний семейный анамнез сердечно-сосудистых заболеваний (женщины до 65 лет, мужчины до 55 лет); курение, злоупотребление алкоголем; наличие в анамнезе заболеваний, повышающих риск кардиоваскулярных событий: нарушение толерантности к глюкозе, сахарный диабет 1, 2 типов, гипертоническая болезнь, ишемическая болезнь сердца, врожденные пороки развития сердечно-сосудистой системы, заболевания крови, болезни почек (гломерулонефрит, хроническая болезнь почек); наличие ожирения; наличие у женщины менопаузы, эклампсии в анамнезе во время беременности. Каждый пациент был ознакомлен с целью, основными принципами и дизайном исследования до его начала. Дизайн исследования и его документация одобрены локальным комитетом по биомедицинской этике (ЛЭК) ФГБОУ ВО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздрава России.
Материалы и методы
Образцы венозной крови были собраны с использованием 3,2% антикоагулянта - цитрата натрия и обработаны в течение 1 часа после получения крови. Образцы крови первоначально центрифугировали при 2500 g в течение 15 минут при комнатной температуре для получения бедной тромбоцитами плазмы (БТП). Верхний слой (3/4) БТП еще дважды центрифугировали при 2500 g в течение 15 минут в тех же условиях, отбирая на каждом этапе 3/4 верхнего слоя супернатанта для получения свободной от тромбоцитов плазмы (PFP или СТП).
Полученные образцы СТП переносили в криопробирки и замораживали в жидком азоте (-196° С) с последующим хранением при -70° С до проведения анализа (но не более чем 6 месяцев).
В день проведения анализа образцы плазмы размораживали при +37° С на водяной бане. Далее образцы из криопробирок переносили в микроцентрифужные пробирки и проводили дополнительное центрифугирование 2500 g в течение 10 минут. После центрифугирования супернатант использовали для анализа.
Для типирования ВВ использовали следующую панель конъюгированных с флуоро-фором антител: анти-СБ41-РС7 (клон Н1Р8, BioLegend), анти-СБ 31 BV605 (клон WM-59, BioLegend), анти-СБ45-АРС^ге750 (клон Н130, BioLegend), анти-СБ 54-АРС (клон НА58, BioLegend) и анти-СБ9-РЕ (клон Н19а, еВ^йепсе).
В качестве отрицательного контроля использовали неокрашенные образцы в тех 18
же разведениях, что и окрашенный образец. Окрашивание проводили смешиванием 10 мкл рабочей смеси антител (по 2 мкл каждого антитела) с 50 мкл образца, перемешиванием и последующей экспозицией в темном месте в течение 20-30 минут.
Предварительно для описанной панели антител проводили компенсационный эксперимент с целью устранения взаимного влияния, испускаемого с флуорохромов света. Для этого использовали набор Versa Comp согласно прилагаемой к нему инструкции.
Все измерения проводили на проточном цитофлуориметре CytoFlex (Beckman Coulter) с конфигурацией лазеров Red (638 нм) - Blue (488 нм) - Violet (405 нм). Внеклеточные везикулы были охарактеризованы по размеру (0,11,0 мкм) с использованием микрогранул 0,1, 0,2, 0,5, и 1,0 мкм (Flow Cytometry Sub-micron Particle Size Reference Kit, Thermofisher), по которым были выставлены ориентировочный гейт в диапазоне от 0,1 мкм (включительно) до 1,0 мкм. Далее проводили проверку на возможный вклад в «шум» для фосфатно-солевого буфера (Bio-Rad), для рабочей смеси антител, разведенных в фосфатно-солевом буфере в тех же пропорциях, что и окрашенные образцы. После этого проводили измерение для неокрашенных проб, по которым выставляли положительные гейты (по принципу исключения).
Окрашенные пробы по истечении 20-30 минут инкубации повторно перемешивали и проводили измерение после разбавления пробы в 500 раз с помощью фосфатно-солевого буфера. В каждом анализе проводили запись 1 млн всех событий на скорости 30 мкл/мин, предварительно убеждаясь, что в анализируемой области нет объектов более 1000 нм.
После записи событий проводили тест с тритоном X-100 (детергент, разрушающий мембраны эукариотических клеток; производства MP Biomedicals). Для этого смешивали окрашенную пробу в соотношении 1:1 с 2,0% раствора тритона Х-100, выдерживали 5 минут и повторяли запись событий (не менее 1 млн). Убеждались, что после обработки таким образом проб положительные события по указанным маркерам стремились к нулю.
Для статистической обработки использовали параметр количества CD положительных событий (CD+) в 1,0 мкл. Статистический анализ проводился с использованием Statistica 7.0 (StatSoft, США). Результаты были представлены в виде медианы и квартилей (Q1; Q3). По причине малых выборок (менее 30 наблюдений) межгрупповые сравнения для двух независимых групп проводили, используя непараметрический U-критерий Манна-Уитни, где значимость различий определялась при уровне значимости p<0,05.
Рисунок 1. Влияние разбавления пробы на результат фиксации событий при проточной
цитофлюориметрии
Результаты и обсуждение
При подборе условий детектирования событий произведено разведение образца аналита в 500 раз, что позволило получать дотплоты с более выраженно очерченной положительной популяцией по сравнению с 100-кратным разведением для результатов по CD маркерам 31+, 45+ и 9+ (рис. 1).
Анализ внеклеточных везикул проводили по отдельным CD маркерам (CD41, CD31, CD54, CD45 и CD9). В результате измерения образцов СТП контрольной группы было установлено, что медианы CD41+, CD31+ и CD45+ событий составили 120, 495 и 95 событий/мкл соответственно. При этом измеряемые нами
маркеры CD54+ и CD9+ были на уровнях 170 и 30973 событий в мкл, соответственно (табл. 1). В опытной группе наблюдалось статистически значимое увеличение числа CD41+ событий - до 245 событий/мкл, превышающее контрольные значения в 2 раза, а также значимое увеличение CD45+ событий более чем в 120 раз (с 95 до 11713 событий/мкл). Для CD31+ событий отмечалась тенденция к увеличению показателя в 19,8 раза (с 495 до 9818 событий/ мкл). Различий количества CD54+ и CD9+ событий в контрольной и опытной группах не отмечено.
Таблица 1
Количество положительных событий в 1,0 мкл при типировании внеклеточных везикул бестромбоцитарной плазмы в опытной и контрольной группах
Группы наблюдений CD41+ CD31+ CD54+ CD45+ CD9+
Контрольная группа (n=11) 120 (103;175) 495 (280;2423) 170 (160;233) 95 (75;1750) 30090 (28738;43915)
Опытная группа (n=24) 245* (134;334) (p=0,030) 9818 (401;24820) (p=0,132) 225 (150;330) (p=0,540) 11713* (283;24929) (p=0,033) 32538 (27569;58196) (p=0,371)
Примечание: *- здесь и в таблице 2 отмечены статистически
Учитывая, что тромбоцитарные ВВ несут на себе как СБ41, так и СБ31 маркеры, было решено расширить анализ на эту комбинацию, при этом подходе СБ41+СБ31+ соответствуют тромбоцитарным ВВ, СБ41-31+ события - эндотелиальным ВВ. Также была предпринята оценка комбинации с маркером СБ54 (СБ41+31+54+, СБ41-31+54+ и СБ45+54+),
значимые различия.
являющимся молекулой межклеточной адге-зии-1 (1САМ-1), которая способствует адгезии между лейкоцитами и эндотелиальными клетками во время иммунных и воспалительных реакций, тем самым служа маркером воспалительной реакции. Для этого проводили последовательное гейтирование (рис. 2).
Рисунок 2. Стратегия гейтирования для идентификации и типирования внеклеточных везикул
В образцах бестромбоцитарной плазмы на дотплоте Violet SSC-A/FSC-A выделяли область по размерам (на основании результатов калибровки с помощью коммерческого набора (Flow Cytometry Sub-micron Particle Size Reference Kit, Thermofisher) 100-1000 нм, считая эти события внеклеточными везикулами. Да-
лее положительные события из области 0-1000 нм отображали на дотплотах Violet SSC-A/ CD41 и Violet SSC-A/CD31+. Таким образом получали CD41+ (А) и CD31+ (Б) популяции. Затем CD41+ события отображали на дотплоте Violet SSC-A/CD31+, получая таким образом популяцию CD41+CD31+ (В). Используя ото-
бражение всех не попавших в гейт CD41+ (A) событий на дотплоте Violet SSC-A/CD31+, получили популяцию CD41-CD31+ (Г). При отображении полученных популяций CD41+31+ и CD41-31+ на дотплоте CD54 достигли тем самым анализа популяции CD41+31+54+^) и CD41-31+54+ (Е).
В результате проведенного анализа комбинаций CD-маркеров было установлено, что ко-
личесгво тромбоцитарных ВВ (CD41+31+) статистически значимо в 2,0 раза увеличивалось в опытной группе по сравнению с контрольной (табл. 2). При этом популяция эндотелиальных ВВ имела тенденцию к росту с 515 (в контроле) до 10238 событий/мкл в изучаемой группе. Кроме того, не отмечалось изменений количества маркера CD54 на ВВ эндотелиального (CD41-31+54+) и лейкоцитарного (CD45+54+) происхождения.
Таблица 2
Количество тромбоцитарных, эндотелиальных и лейкоцитарных внеклеточных везикул, а также коэкспрессия на них маркера С054 в 1,0 мкл бестромбоцитарной плазмы в опытной
и контрольной группах
Группа CD41+31+ CD41-31+ CD41-31+54+ CD45+54+
Контрольная группа (n=11) 75 (70;113) 515 (210;2960) 5 (0;10) 10 (5;18)
Опытная группа (n=24) 153* (88;260) (p=0,033) 10238 (301;23041) (p=0,115) 5 (0;16) (p=0,371) 18 (4;116) (p=0,390)
На первом этапе работы, при малой выборке и отсутствии статистически значимой разницы по эндотелиальным везикулам в опытной и контрольной группах исследование было дополнено анализом количества экзо-сомальных ВВ в группах всех детектируемых везикул. Известно, что CD9, наряду с маркерами CD63 и CD81, используется как маркер экзосомальных ВВ [12]. Это определило скри-нинговую оценку популяции CD9+ тромбо-цитарного (CD4l+31+CD9+), эндотелиального (Ш41-31+9+) и лейкоцитарного (CD45+CD9+)
происхождения (табл. 3) с размерами событий не менее 100. Было установлено, что в опытной группе количество CD9+41+31+ событий значимо отличалось, при этом их содержание соответствовало полученным данным по С031+41+ событиям в количественном выражении. Также в опытной группе отмечалось статистически значимое увеличение более чем в 71 раз CD9+41-31+ событий и в более чем 134 раза CD9+45+ событий в мкл (р=0,0224) по сравнению с группой контроля.
Таблица 3
Количество CD9+ событий тромбоцитарного, эндотелиального и лейкоцитарного происхождения в 1,0 мкл бестромбоцитарной плазмы в опытной и контрольной группах
Группа CD9+41+31+ CD9+41-31+ CD9+45+
Контрольная группа 75 85 10
(n=11) (70;113) (33;1313) (5;130)
153* 6085* 1348*
Опытная группа (n=24) (88;260) (79;12690) (26;4864)
(p=0,033) (p=0,013) (p=0,022)
Найдено, что все тромбоцитарные ВВ (CD41+31+) как в контрольной, так и в опытной
группах несли на себе маркер CD9 (CD9+41+31+) (табл. 4).
Таблица 4
Процент экзосомальных внеклеточных везикул (на основе CD9+ событий) для родительских популяций ВВ тромбоцитарного, эндотелиального и лейкоцитарного происхождения
Группа Тромбоцитарные ВВ Эндотелиальные ВВ Лейкоцитарные ВВ
Контрольная группа (n=14) 100% (100%; 100%) 23,3% (15,5%; 31,1%) 9,9% (3,5%; 13,6%)
Опытная группа (n=26) 100% (100%; 100%) p=0,847 46,2%* (29,2%; 62,2%) p=0,009 12,9% (6,6%; 20,7%) p=0,299
Для эндотелиальных же ВВ отмечалось достоверное увеличение доли CD9+ событий с 23,3% в контроле до 46,2% в опытной группе, при этом для лейкоцитарных ВВ статистически значимого изменения процентного соотношения не отмечалось и составляло 9,9% в контроле и 12,9% в опытной группе.
Выводы
Таким образом было установлено, что течение описторхоза сопровождается статистически значимым увеличением внеклеточных везикул: тромбоцитарных (CD41+31+), значительным (более чем в 120 раз!) возрастанием числа лейкоцитарных (CD45+) и увеличением экзосомальных ВВ эндотелиального происхождения (CD9+41-31+) по отношению к образцам контрольной группы. Данные результаты можно рассматривать с позиции активации тромбоцитов, а также развития воспалительного процесса и эндотелиальной дисфункции, потенциальными высокочувствительными маркерами которых при описторхозной инвазии могут выступать микровезикулы.
Полученные результаты представляют предварительные данные и нуждаются в увеличении объема выборки исследований для большей убедительности доказательной базы.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Список литературы:
1. Гребенчиков О.А., Долгих В.Т., Прокофьев М.Д. Эндотелиальная Дисфункция как важнейший патогенетический фактор развития критического состояния. Вестник СурГУ. Медицина. 2021; 3(49): 51-60.
2. Игнатьев С.В., Лянгузов А.В. Функциональная роль микровезикул в норме и при патологии. Клиническая физиология кровообращения. 2019; 16(4): 261-266.
3. Rackov G., Garcia-Romero N., Esteban-Rubio S., Camón-Navarro J. et al. Vesicle-mediated control of cell function: the role of extracellular matrix and microenvironment. Frontiers in Physiology. 2018; 9(651): 1-12. https://doi.org/10.3389/ fphys.2018.00651
4. Новикова М.А., Савич Ю.В., Ласюков Е.А., Фролова Р.Л. Внеклеточные везикулы: биологические свойства и их терапевтический потенциал (обзор современных сведений). Лабораторная диагностика. Восточная Европа. 2021; 10(4): 412419.
5. Ohayon L., Zhang X., Dutta P. The role of extracellular vesicles in regulating local and systemic inflammation in cardiovascular disease. Pharmacol Res. 2021; 170(105692): 1-12. https://doi. org/10.1016/j.phrs.2021.105692.
6. Peng M., Liu X., Xu G.J. Extracellular Vesicles as Messengers in Atherosclerosis. Cardiovasc Transl Res. 2020; 13(2): 121-130. https://doi.org/10.1007/ s12265-019-09923- z.
7. Brown P.A., Brown P.D. Extracellular vesicles and atherosclerotic peripheral arterial disease. Cardiovasc Pathol. 2023; 63:107510. https://doi. org/10.1016/j.carpath.2022.107510
8. Yang J., Zou X., Jose P.A., Zeng C. Extracellular vesicles: Potential impact on cardiovascular diseases. Adv Clin Chem. 2021; 105: 49-100. https:// doi.org/10.1016/bs.acc.2021.02.002
9. Garcia-Romero N., Esteban-Rubio S., Rackov G., Carrión-Navarro J. et al. Extracellular vesicles compartment in liquid biopsies: clinical application. Molecular Aspects of Medicine. 2018; 60: 27-37. https://doi.org/10.1016/j.mam.2017.11.009
10. Schindler S.M., Little J.P., Klegeris A. Mi-croparticles: a new perspective in central nervous system disorders. BioMed Research International. 2014; 2014 (756327): 1-17. https://doi. org/10.1155/2014/756327
11. Сироткина О.В., Ермаков А.И., Жиленко-ва Ю.И., Золотова Е.А., Кудлай Д.А., Вавилова Т.В., Гайковая Л.Б. Динамика образования микровезикул клеток крови у больных COVID-19 на разных стадиях заболевания. Профилактическая и клиническая медицина. 2021; 4(81): 68-74.
12. Lugo-Gavidia L.M., Burger D., Matthews V.B., Nolde J.M. et al. Role of Microparticles in Cardiovascular Disease: Implications for Endothe-lial Dysfunction, Thrombosis, and Inflammation. Hypertension. 2021; 77(6): 1825-1844. https://doi. org/10.1161/HYPERTENSI0NAHA.121.16975
13. Карбышева Н.В. Комплексный подход к диагностике хронического описторхоза. Бюллетень медицинской науки. 2017; 1(5): 75-78. https:// doi.org/10.31684/2541-8475.2017.1(5).75-78. EDN ZQJALX.
References
1. Grebenchikov O.A., Dolgikh V.T., Prokofiev M.D. Endothelial Dysfunction as the most important pathogenetic factor in the development of a critical condition. Bulletin of SurGU. Medicine. 2021; 3(49): 51-60. (In Russ.)
2. Ignatiev S.V., Lyanguzov A.V. The functional role of microvesicles in normal and pathological conditions. Clinical physiology of blood circulation. 2019; 16(4): 261-266. (in Russ.)
3. Rackov G., Garcia-Romero N., Esteban-Rubio S., Carrión-Navarro J. et al. Vesicle-mediated control of cell function: the role of extracellular matrix and microenvironment. Frontiers in Physiology. 2018; 9(651): 1-12. https://doi.org/10.3389/ fphys.2018.00651
4. Novikova M.A., Savich Yu.V., Lasyukov E.A., Frolova R.L. Extracellular vesicles: biological properties and their therapeutic potential (review of current information). Laboratory diagnostics. Eastern Europe. 2021; 10(4): 412-419. (In Russ.)
5. Ohayon L., Zhang X., Dutta P. The role of extracellular vesicles in regulating local and systemic inflammation in cardiovascular disease. Pharmacol Res. 2021; 170(105692): 1-12. https://doi. org/10.1016/j.phrs.2021.105692.
6. Peng M., Liu X., Xu G.J. Extracellular Vesicles as Messengers in Atherosclerosis. Cardiovasc Transl Res. 2020; 13(2): 121-130. https://doi.org/10.1007/ s12265-019-09923- z.
7. Brown P.A., Brown P.D. Extracellular vesicles and atherosclerotic peripheral arterial disease. Cardiovasc. Pathol. 2023; 63: 107510. https://doi. org/10.1016/j.carpath.2022.107510
8. Yang J., Zou X., Jose P.A., Zeng C. Extracellu-
lar vesicles: Potential impact on cardiovascular diseases. Adv Clin Chem. 2021; 105: 49-100. https://doi. org/10.1016/bs.acc.2021.02.002
9. Garcia-Romero N., Esteban-Rubio S., Rackov G., Carrion-Navarro J. et al. Extracellular vesicles compartment in liquid biopsies: clinical application. Molecular Aspects of Medicine. 2018; 60: 27-37. https://doi.org/10.1016/j.mam.2017.11.009
10. Schindler S.M., Little J.P., Klegeris A. Mi-croparticles: a new perspective in central nervous system disorders. BioMed Research International. 2014; 2014 (756327): 1-17. https://doi. org/10.1155/2014/756327
11. Sirotkina O.V., Ermakov A.I., Zhilenkova Yu.I., Zolotova E.A., Kudlay D.A., Vavilova T.V., Gaykova L.B. Dynamics of formation of microvesi-cles of blood cells in COVID-19 patients at different stages of the disease. Preventive and clinical medicine. 2021; 4(81): 68-74. (In Russ.)
12. Lugo-Gavidia L.M., Burger D., Matthews V.B., Nolde J.M. et al. Role of Microparticles in Cardiovascular Disease: Implications for Endothe-lial Dysfunction, Thrombosis, and Inflammation. Hypertension. 2021; 77(6): 1825-1844. https://doi. org/10.1161/HYPERTENSI0NAHA.121.16975
13. Karbysheva N.V. Complex approach to the diagnosis of chronic opisthorchiasis. Bulletin of medical science. 2017; 1(5): 75-78. https://doi. org/10.31684/2541-8475.2017.1(5).75-78. EDN ZQ-JALX.
Контактные данные
Автор, ответственный за переписку: Карбышева Нина Валентиновна, д. м. н., профессор, зав. кафедрой инфекционных болезней с курсом ДПО, Алтайский государственный медицинский университет, г. Барнаул.
656038, Алтайский край, г. Барнаул, пр. Ленина, д. 40.
E-mail: nvk80@rambler.ru. Тел.: +7 (3852) 566-964 https://orcid.org/0000-0001-8320-3468
Информация об авторах
Момот Андрей Павлович, д. м. н., профессор, заведующий лабораторией гемостаза института клинической медицины, Алтайский государственный медицинский университет; директор Алтайского филиала ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, г. Барнаул. E-mail: xyzan@yandex.ru https://orcid.org/0000-0002-8413-5484
Кудинов Алексей Владимирович, к. б. н., старший научный сотрудник лаборатории гемостаза института клинической медицины, Алтайский государственный медицинский университет; научный сотрудник Алтайского филиала ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России, г. Барнаул.
E-mail: kudinovalexej@gmail.com. https://orcid.org/0000-0002-0967-6117
Бесхлебова Ольга Васильевна, к. м. н., доцент, доцент кафедры инфекционных болезней с курсом ДПО, Алтайский государственный медицинский университет, г. Барнаул. E-mail: olg.deriglazova@yandex.ru.
https://orcid.org/0000-0003-4561-1019
Никонорова Марина Анатольевна, д. м. н., доцент, профессор кафедры инфекционных болезней с курсом ДПО, Алтайский государственный медицинский университет, г. Барнаул. E-mail: ma.nikulina@mail.ru. Тел. +7(903)910-31-99 https://orcid.org/0000-0001-6621-9310
Иванова Мария Эдуардовна, ассистент кафедры инфекционных болезней с курсом ДПО, Алтайский государственный медицинский университет, г. Барнаул.
E-mail: ivanova.akcomd@yandex.ru
Трухина Дина Анатольевна, младший научный сотрудник лаборатории эпидемиологии и доказательной медицины, Алтайский государственный медицинский университет, г. Барнаул. E-mail: dina.truhina@yandex.ru
Contact information Corresponding author: Nina V. Karbysheva, Dr. Sci. (Med.), Professor, Head of the Department of Infectious Diseases with Advanced Training Course, Altai State Medical University, Barnaul. 656038, Altai Krai, Barnaul, Lenina Ave., 40. E-mail: nvk80@rambler.ru. Tel: +7 (3852) 566-964. https://orcid.org/0000-0001-8320-3468
Author information
Andrey P. Momot, Dr. Sci. (Med.), Professor, Head of the Hemostasis Laboratory, Institute of Clinical Medicine, Altai State Medical University; Director, Altai Branch of National Medical Research Center for Hematology, Barnaul. 656045, Barnaul, Lyapidevskogo Str., 1. E-mail: xyzan@yandex.ru https://orcid.org/0000-0002-8413-5484
Alexey V. Kudinov, Cand. Sci. (Biol.), Senior Researcher, Hemostasis Laboratory, Institute of Clinical Medicine, Altai State Medical University; Researcher, Altai Branch of National Medical Research Center for Hematology, Barnaul. E-mail: kudinovalexej@gmail.com. https://orcid.org/0000-0002-0967-6117
Olga V. Beskhlebova, Cand. Sci. (Med.), Associate Professor, Department of Infectious Diseases with Advanced Training Course, Altai State Medical University, Barnaul. E-mail: olg.deriglazova@yan-dex.ru.
https://orcid.org/0000-0003-4561-1019
Marina A. Nikonorova, Dr. Sci. (Med.), Associate Professor, Professor of the Department of Infectious Diseases with Advanced Training, Altai State Medical University, Barnaul. E-mail: ma.nikulina@mail.ru. https://orcid.org/0000-0001-6621-9310
Maria E. Ivanova, Assistant of the Department of Infectious Diseases with Advanced Training Course, Altai State Medical University, Barnaul. E-mail: ivanova.akcomd@yandex.ru
Dina A. Trukhina, Junior Researcher, Laboratory of Epidemiology and Evidence-based Medicine, Altai State Medical University, Barnaul. E-mail: dina.truhina@yandex.ru
Поступила в редакцию 12.08.2023 Принята к публикации 30.09.2023
Для цитирования: Момот А. П., Кудинов А. В., Карбышева Н. В., Бесхлебова О. В., Никоноро-ва М. А., Иванова М. Э., Трухина Д. А. Эндотели-альная дисфункция при хроническом опистор-
хозе. Бюллетень медицинской науки. 2023; 4(32): 16-24. https://doi.org/10.31684/25418475-2023-4-16
Citation: Momot A. P., Kudinov A. V., Kar-bysheva N. V., Beskhlebova O. V., Nikonorova M. A., Ivanova M. E., Trukhina D. A. Endothelial dysfunction in chronic opistorchiasis. Bulletin of Medical Science. 2023; 4(32): 16-24. https://doi. org/10.31684/25418475-2023-4-16 (In Russ.)
