CC BY
2
Российский медико-биологический вестник
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Том 32, № 3, 2024 имени академика И. П. Павлова
УДК 618.177-02:618.147-007.4151-07 DOI: https://doi.org/10.17816/PAVL0VJ105496
Эндометриоз-ассоциированное бесплодие: роль биомаркеров апоптоза и пролиферации в ранней неинвазивной диагностике
М . А. Киселев1 и, Н. Б. Репина1, А. А. Никифоров1, Л. В . Никифорова1, М . Н. Дмитриева1, И . А. Усачев2, А. М. Киселев3
1 Рязанский государственный медицинский университет имени академика И . П . Павлова, Рязань, Российская Федерация;
2 Рязанский областной клинический перинатальный центр, Рязань, Российская Федерация;
3 Тамбовский государственный университет имени Г Р . Державина, Тамбов, Российская Федерация
АННОТАЦИЯ
Введение. Эндометриоз — распространенное заболевание, поражающее до 15% женщин репродуктивного периода и ведущее к бесплодию в 25-50% случаев . Диагностика эндометриоза задерживается на годы в связи со стертой и многообразной клинической картиной, поэтому поиск неинвазивного биомаркера эндометриоза является актуальной проблемой современной медицины .
Цель. Изучить значимость изменений профиля биомаркеров: регулятора сигнального пути Wnt/ß-катенин (англ . : axis inhibition protein 1; AXIN-1), растворимого фрагмента цитокератина 19 (англ . : cytokeratin fragment antigen 21-1; CYFRA-21-1), ракового антигена 125 (англ . : carbohydrate antigen 125; CA-125) в плазме крови пациентов с эндометриоз-ассоциированным бесплодием (до операции и в послеоперационном периоде)
Материалы и методы. В исследование были включены две группы пациенток . В первую группу вошли 20 пациенток репродуктивного возраста с эндометриоидными кистами яичников и бесплодием . Всем пациенткам проводили оперативное вмешательство лапароскопом с видеосистемой, у всех пациенток диагноз эндометриоза подтверждён гистологически . Трижды в установленные сроки (до операции, на 10 сутки послеоперационного периода, спустя 6 месяцев) у пациенток с эндометриоидными кистами и бесплодием был выполнен забор биоматериала (кровь) c дальнейшим определением в плазме AXIN-1, CYFRA-21-1, CA-125 . Вторая группа представлена пациентками репродуктивного возраста без гинекологической патологии Во второй группе забор биоматериала (кровь) c дальнейшим определением в плазме AXIN-1, CYFRA-21-1, CA-125 проводился однократно .
Результаты. На основании анализа данных замеров и сравнения их уровней было установлено, что содержание исследуемых биомаркеров AXIN-1, CA-125 у пациенток с эндометриоидными кистами яичников и бесплодием выше, чем у пациенток без гинекологической патологии (p < 0,05) . В послеоперационном периоде биомаркеры AXIN-1, CA-125 показывают значимое снижение показателей по сравнению с дооперационными значениями . В случае с биомаркером CYFRA-21-1 отмечены изначально более низкие показатели по сравнению с группой контроля (p < 0,05), однако в послеоперационном периоде содержание CYFRA-21-1 повышается и достигает значений, близких к показателям здоровых пациенток
Заключение. Определение уровней биомаркеров апоптоза AXIN-1, CYFRA-21-1 и биомаркера пролиферации CA-125 в крови пациенток с эндометриоз-ассоциированным бесплодием создает представление о патофизиологических процессах, протекающих в эндометриоидных кистах яичников, и может способствовать разработке новых способов неинвазивной диагностики и таргетных методов лечения .
Ключевые слова: эндометриоз; биомаркеры; CA-125; CYFRA-21-1; AXIN-1 Для цитирования:
Киселев М.А., Репина Н.Б., Никифоров А.А., Никифорова Л.В., Дмитриева М.Н., Усачев И.А., Киселев А.М. Эндометриоз-ассоциированное бесплодие: роль биомаркеров апоптоза и пролиферации в ранней неинвазивной диагностике // Российский медико-биологический вестник имени академика И. П. Павлова. 2024. Т. 32, № 3. С. 359-368. D0I: https://doi.org/10.17816/PAVL0VJ105496
Рукопись получена: 27. 03. 2022
Рукопись одобрена: 22 . 01. 2024
Опубликована: 30. 09. 2024
© Эко-Вектор, 2024 Все права защищены
ORIGINAL STUDY ARTICLES 360 -
DOI: https://doi.org/10.17816/PAVLOVJ105496
Endometriosis-Associated Infertility: The Role of Biomarkers of Apoptosis and Proliferation in Early Noninvasive Diagnosis
Mikhail A. Kiselev1 Natal'ya B . Repina1, Aleksandr A. Nikiforov1,
Larisa V . Nikiforova1, Mariya N . Dmitriyeva1, Il'ya A. Usachev2, Anton M . Kiselev3
1 Ryazan State Medical University, Ryazan, Russian Federation;
2 Ryazan Regional Clinical Perinatal Center, Ryazan, Russian Federation;
3 Derzhavin Tambov State University, Tambov, Russian Federation
ABSTRACT
INTRODUCTION: Endometriosis is a common disease that affects up to 15% of women in the reproductive period and leads to infertility in 25%-50% of cases . The diagnosis of endometriosis is delayed for years due to blurred and diverse clinical presentation, therefore, search for a noninvasive biomarker of endometriosis is an important problem of modern medicine
AIM: To study the significance of changes in the profile of biomarkers: regulator of Wnt/0-catenin signaling pathway (axis inhibition protein 1; AXIN-1), soluble cytokeratin 19 fragment (cytokeratin fragment antigen 21-1; CYFRA-21-1), cancer antigen 125 (carbohydrate antigen 125; CA-125) in blood plasma of patients with endometriosis-associated infertility (before surgery and in the postoperative period) .
MATERIALS AND METHODS: The study included two groups of female patients . The first group consisted of 20 patients of reproductive age with cystic ovarian endometriosis and infertility. All the patients underwent surgical intervention using a laparoscope and a video system, in all the patients the diagnosis of endometriosis was confirmed histologically. Three times in specified periods (before surgery, on the 10th day of the postoperative period, at 6 months), patients with cystic ovarian endometriosis and infertility were taken biomaterial (blood) with further determination of AXIN-1, CYFRA-21-1, CA-125 in blood plasma . The second group consisted of patients of reproductive age with no gynecological pathology In the second group, biological material (blood) was taken once with further determination of AXIN-1, CYFRA-21-1, CA-125 in blood plasma .
RESULTS: Based on the analysis of the measurement data and comparison of their levels, it was found that the content of the studied AXIN-1, CA-125 biomarkers in patients with cystic ovarian endometriosis and infertility was higher than in patients without gynecological pathology (p < 0 . 05). As for CYFRA-21-1 biomarker, initially lower values were noted compared to the control group (p < 0 . 05), however, in the postoperative period, the content of CYFRA-21-1 increased and reached values close to those of healthy patients .
CONCLUSION: Determining the levels of AXIN-1, CYFRA-21-1 apoptosis biomarkers and CA-125 proliferation biomarker in blood of patients with endometriosis-associated infertility gives an insight into the pathophysiological processes in the endometrioid ovarian cysts and may be helpful in development of new noninvasive diagnostic methods and target treatment methods
Keywords: endometriosis; biomarkers; CA-125; CYFRA-21-1; AXIN-1
For citation:
Kiselev MA, Repina NB, Nikiforov AA, Nikiforova LV, Dmitriyeva MN, Usachev IA, Kiselev AM. Endometriosis-Associated Infertility: The Role
of Biomarkers of Apoptosis and Proliferation in Early Noninvasive Diagnosis. I. P. Pavlov Russian Medical Biological Herald. 2024;32(3):359-368. DOI: https://doi.org/10.17816/PAVLOVJ105496
Received: 27 . 03 . 2022 Accepted: 22 . 01. 2024 Published: 30. 09. 2024
ECO. vector £) Ecu-Vector 2024
All rights reserved
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ед . — единица
УЗИ — ультразвуковое исследование ЭК — эксперимент
ЭДТА — этилендиаминтетрауксусная кислота
AXIN-1 — axis inhibition protein (регулятор сигнального пути
Wnt/P-катенин)
CA-125 — carbohydrate antigen 125 (раковый антиген 125) CYFRA-21-1 — cytokeratin fragment antigen 21-1 (фрагмент цитокератина 19) Wnt — сигнальный путь Wnt
ВВЕДЕНИЕ
Эндометриоз — одно из наиболее часто встречающихся гинекологических заболеваний женщин репродуктивного возраста, в основе которого лежит формирование эктопических очагов пролиферации эндометрия [1] . Эндометриоз является рефрактерным заболеванием с обширным поражением, разнообразной морфологией, инвазией и рецидивами [2]. Частота заболевания колеблется в пределах 6-10% [3] . Различные источники указывают на постоянный рост числа заболевших, достигающий почти 15% во всем мире [4] . По данным Федеральной службы государственной статистики, за последние 15 лет заболеваемость эндо-метриозом в России выросла почти вдвое . Заболевание поражает женщин независимо от возраста (от подростков 10-11 лет до женщин в постменопаузе), социально-экономического статуса и расовой принадлежности . Достаточная распространенность эндометриоза среди молодых женщин в наиболее продуктивный период их жизни, резкое снижение качества жизни, бесплодие с учетом демографических проблем в стране, рецидивирующее течение и необходимость в повторных хирургических вмешательствах в случае несвоевременного или неадекватного послеоперационного лечения позволяет рассматривать его как важнейшую научную, медицинскую и социально значимую проблему [5] .
Долгое время «золотым» стандартом диагностики эндометриоза являлась визуализация очагов путем диагностической лапароскопии с гистопатологическим заключением, что, в свою очередь, создавало высокий барьер для диагностики и приводило к длительной, более 11 лет, диагностической задержке [6, 7]. Необходимо также отметить, что лапароскопическая хирургия не всегда помогает выявить эндометриоз, особенно это касается ранних стадий, и во многом инвазивная диагностика зависит от опыта хирурга, выполнявшего вмешательство . Кроме того, как и все оперативные вмешательства, диагностическая лапароскопия может быть сопряжена с риском интраоперационных и послеоперационных осложнений
Таким образом, для расширения возможностей ранней диагностики и лечения эндометриоза необходим активный поиск биомаркеров, которые позволят
предотвратить прогрессирование заболевания, ненужную терапию и повторные хирургические вмешательства, что, в свою очередь, улучшит качество жизни пациента . В настоящее время клинически одобренных биомаркеров эндометриоза нет, что делает их поиск еще более актуальным [8, 9].
На сегодняшний день сформулировать единую модель патогенеза данной патологии не представляется возможным в связи с многообразием ее проявлений и множеством клинических форм . Наиболее обсуждаемая в последние годы теория эндометрио-за — теория апоптоза. В норме клетки эндометрия, отторгнутые в фазу десквамации, не способны выживать за пределами полости матки из-за апоптоза, но при его нарушении могут дать начало эндометриозу [10] .
Полученные данные последних лет показали, что как негативный регулятор передачи сигналов канонического сигнального пути (англ : Wnt signaling pathway; Wnt), так и регулятор сигнального пути Wnt/ß-катенин (англ . : axis inhibition protein 1; AXIN-1) действуют в качестве супрессора опухолей . В недавнем исследовании шведских ученых K. Dihm, M . Ek (2020) высказано предположение, что аберрантная активация сигнального пути Wnt может способствовать развитию эндометриоза за счет увеличения миграции и инвазии клеток [11] .
Фрагмент цитокератина 19 (англ . : cytokeratin fragment antigen 21-1, CYFRA-21-1) — это один из белков цитоскелета эпителиоцитов, относящийся к промежуточным филаментам (нитевидным структурам) Предполагается, что при интенсивной пролиферации с дальнейшим распадом клеток в эндометриоидных ге-теротопиях происходит высвобождение вышеуказанного белка . В метаанализе от 2020 г . группой китайских ученых во главе с T . Tang было предложено дальнейшее изучение CYFRA-21-1 у пациенток с эндометрио-зом как его перспективного биомаркера [12] .
Раковый антиген 125 (англ . : carbohydrate antigen 125, CA-125) — один из наиболее изученных гликопротеи-дов, его повышение связано с рядом злокачественных и доброкачественных заболеваний. Наиболее активно СА-125 используется в диагностике рака яичников . Известно, что эндометриальные и мезотелиальные клетки секретируют данный гликопротеид в кровь, в связи
с этим была обнаружена возможность использования его в диагностике эндометриоза [13].
Цель. Изучить значимость изменений профиля биомаркеров: АХ1М-1, СУРРА-21-1, СА-125 в плазме крови пациентов с эндометриоз-ассоциированным бесплодием (до операции и в послеоперационном периоде) .
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Исследование одобрено Локальным этическим комитетом Рязанского государственного медицинского университета имени академика И . П. Павлова (Протокол № 4 от 09 .1 1.2021) . Все пациентки подписали письменное информированное согласие на участие в данном исследовании
В ходе исследования были сформированы 2 группы: - первая группа (группа исследования, п = 20) — женщины с эндометриоидными кистами яичников и бесплодием, средний возраст 29,5 (26,0-32,5) лет. Всем пациенткам проводили оперативное вмешательство
лапароскопом (Karl Storz, Германия) с видеосистемой; диагноз «эндометриоз» подтверждён гистологически .
Критерии включения в первую группу:
• репродуктивный возраст пациенток (20-40 лет);
• установленный диагноз эндометриодные кисты яичников и бесплодие;
- вторая группа (контрольная группа, n = 20) — женщины без гинекологической патологии, средний возраст 29,5 (27,5-36,5) лет (p > 0,05) .
Критерии невключения:
• беременность;
• психические нарушения;
• злокачественные новообразования;
• эндокринные заболевания;
• системные воспалительные заболевания;
• острые воспалительные заболевания малого таза;
• пациентки, принимающие глюкокортикостерои-ды и цитостатики .
В таблицах 1 и 2 представлена краткая клинико-анамнестическая характеристика групп исследования .
Таблица 1. Сравнительная клинико-анамнестическая характеристика женщин в исследуемых группах
Параметры Группа исследования Контрольная группа р
п 20 20 -
Возраст, Ме (0,-03), годы* 29,5 (27,5-36,5) 29,5 (26,0-32,5) 0,27
Возраст менархе, Ме (0,-03), годы* 13,0 (12,0-14) 13,0 (12-14,0) 0,82
Продолжительность менструального цикла, Ме (0,-03), дни* 28,0 (28,0-28,5) 28,0 (26,7-29,0) 0,68
Длительность менструации, Ме (0,-03), дни* 6,5 (5,0-7,0) 5,0 (4,0-6,0) 0,045
Интенсивность менструации, п (%)** 8 (40) 2 (10) 0,29
Болезненность менструации, п (%)** 12 (60) 4 (20) 0,0098
Начало половой жизни, Ме (0,-03), годы* 18,0 (18,0-18,5) 18,5 (18,0-20,0) 0,20
Жалобы, п (%)** 20 (100) 4 (20) < 0,0001
Соматические заболевания, п (%)** 8 (40) 2 (10) 0,029
Гинекологические заболевания, п (%)** 17 (85) 0 -
Количество успешных беременностей, п (%)** 5 (25) 12 (60) 0,025
Примечания: * — данные представлены как медиана и интерквартильный размах, 11-тест Манна-Уитни; ** — данные представлены как доли пациенток в % и абсолютное число пациенток, х2-тест
Были обнаружены следующие различия в клини-ко-анамнестической характеристике пациенток двух групп (табл . 1) . У пациенток с эндометриоидными кистами и бесплодием отмечаются чаще болезненные менструации (р = 0,0098), более высокая частота гинекологических жалоб, представленных болезненными, обильными менструациями, тянущей болью внизу живота (р < 0,0001), высокая частота сопутствующих соматических и гинекологических заболеваний . В структуре соматической патологии ведущее место занимает
хронический гастрит — 25% (п = 5), на втором месте: артериальная гипертензия — 10% (п = 2), на третьем месте: хронический пиелонефрит — 5% (п = 1) . Во второй группе (контроль) соматическая патология была представлена одним случаем хронического гастрита и одним случаем артериальной гипертензии (по 5%) . Сопутствующая гинекологическая патология в первой группе: эрозия шейки матки 55% (п = 11), субсерозная миома матки 30% (п = 6) . Количество успешных беременностей значимо выше во второй группе, чем
в первой (табл . 1) . В сравниваемых группах не было получено статистически значимых различий по следующим критериям: возраст, возраст менархе, продолжительность менструального цикла, длительность менструации, начало половой жизни
В таблице 2 представлена клинико-анамнестиче-ская характеристика группы с эндометриоз-ассоцииро-ванным бесплодием . Были обнаружены следующие особенности группы: с более высокой частотой встречались
случаи с односторонним поражением яичника, по локализации эндометриоза чаще был поражен левый яичник, максимальный размер кист в нашем исследовании составил 5 см, при этом длительность оперативного вмешательства 52,5 мин . (40,0-71,3), объем операции в 65% случаев был представлен эндоскопической цистэктомией с разделением спаек, а в 30% случаев выполнялась эндоскопическая цистэктомия с разделением спаек и консервативной миомэктомией .
Таблица 2. Клинико-анамнестическая характеристика группы с эндометриоз-ассоциированным бесплодием
Параметры Результат
Общее количество пациентов, п 20
Поражение яичника, п (%): - одностороннее - двустороннее 13 (65) 7 (35)
Локализация кист, п (%): - левый яичник - левый и правый яичник - правый яичник 9 (45) 7 (35) 4 (20)
Максимальный размер кисты, Ме (0,-03), см 5 (4-6)
Длительность операции, Ме (0,-03), мин. 52,5 (40,0-71,3)
Длительность лечения, Ме (0,-03), койко-дни 6,0 (6,00-7,25)
Объем оперативного вмешательства, п (%): - эндоскопическая операция цистэктомия - эндоскопическая операция цистэктомия с разделением спаек - эндоскопическая операция цистэктомия с разделением спаек, консервативной миомэктомией 1 (5) 13 (65) 6 (30)
Всем пациенткам, включенным в исследование (п = 40), выполнено: сбор анамнеза, общий и гинекологический осмотр, клинико-лабораторное обследование, ультразвуковое исследование (УЗИ) органов малого таза, при необходимости использовались дополнительные методы исследования и консультации врачей-специалистов
В установленные сроки (до операции, на 10 сутки послеоперационного периода, спустя 6 месяцев) у пациенток с эндометриоидными кистами и бесплодием натощак был выполнен забор биоматериала (кровь) из периферической вены на АХ1М-1, СУРРД-21 -1, СА-125 в пробирку с этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА, Завод медицинских технологий, Россия) . В зависимости от сроков забора крови результаты далее учитываются как:
- эксперимент 1 (ЭК1, п = 20) — забор крови до операции;
- эксперимент 2 (ЭК2, п = 20) — забор на 10 сутки послеоперационного периода;
- эксперимент 3 (ЭК3, п = 20) — забор на 6 месяц послеоперационного периода
В группе женщин без гинекологической патологии забор биоматериала проводился однократно . Для исследования уровней AXIN-1, CYFRA-21-1, CA-125 использовалась плазма, которую получали путем центрифугирования (CM-6MT, Elmi, Латвия) в течение 10 мин . при 3000 g цельной крови, взятой в пробирки с ЭДТА, и последующего аликвотирования . До исследования образцы плазмы крови хранились в морозильной камере при -70°С. Оценка уровня AXIN-1 проводилась методом ИФА с помощью системы SEC191Hu ELISA Kit for Axis Inhibition Protein (AXIN, Cloud-clone Corp ., США), полученные результаты выражали в нг/мл . Оценка уровня CYFRA-21-1 проводилась методом ИФА с помощью системы Enzyme-linked Immunosorbent Assay Kit For Cytokeratin Fragment Antigen 21-1 (CYFRA-21-1, Cloud-clone Corp , США), результаты выражали в нг/мл Определение содержания CA-125 проводилось на тест-системе CA-125 ИФА (ХЕМА, Россия), результаты выражали в ед /мл
Статистический анализ полученных данных проводился с применением пакетов программ прикладного статистического анализа Statistica 10 0 (Stat Soft Inc ,
США) . При анализе количественных данных в исследуемых группах определяли тип распределения данных (графический анализ данных, тест Колмогорова-Смирнова) . При типе распределения данных, не относящемся к нормальному, использовали методы непараметрической статистики . Для проверки гипотезы о равенстве/различии значений биомаркеров между независимыми группами использовался непараметрический критерий Манна-Уитни . Выполнено межгрупповое сравнение по непараметрическому критерию Вилкоксона для сравнения показателей исследуемых биомаркеров до операции и в послеоперационный период В качестве меры центральной тенденции количественных признаков указана медиана (Ме), а в качестве интервальной оценки — нижний (О,) и верхний (О3) квартили. Для оценки межгрупповых различий значений признаков применяли и-критерий Манна-Уитни, критерий Вилкоксона . Для всех критериев и тестов различия признавали статистически значимыми при р < 0,05 .
РЕЗУЛЬТАТЫ
На первом этапе исследования проводили сравнительный анализ содержания биомаркеров АХ1М-1, СУРРА-21-1, СА-125 у пациенток группы контроля и пациенток с эндометриоидными кистами яичников и бесплодием (ЭК1, ЭК2, ЭК3).
По АХ1М-1 группа контроля отличается от группы исследования (р < 0,05) . На 10 сутки послеоперационного периода повышение АХ1М-1 было статистически незначимое (р = 0,247) по сравнению со значениями группы до операции (рис 1) В послеоперационном периоде при сравнении показателя на 10 сутки и через 6 месяцев отмечено снижение АХ!Ы-1 (р = 0,0095) . Таким образом, обнаружена динамика снижения АХ!М-1 у пациентов группы исследования в послеоперационном периоде по сравнению с показателями до операции Кроме этого, следует отметить в послеоперационном периоде уровень АХ!М-1 в группе исследования достигал приближался к показателям группы контроля на уровне тенденции
Рис. 1. Сравнение уровней АХ!1М-1 у женщин группы исследования (ЭК1 — до операции, ЭК2 — 10 сутки после операции, ЭК3 — 6 месяцев после операции) и группы контроля.
Примечания: * — р < 0,05, и-критерий Манна-Уитни; ЭК — эксперимент.
Для уровня СУРРА-21-1 между группой исследования и группой контроля были получены статистически значимые отличия (р < 0,05, рис . 2) . Послеоперационный период у пациенток с эндометриоидными кистами и бесплодием сопровождался постепенным ростом уровня СУРРА-21-1, который к 6 месяцу исследования приближается к показателям пациентов без гинекологической патологии (р = 0,298) . Таким образом, обнаружена тенденция к росту показателей СУРРА-21-1
в послеоперационном периоде в группе с эндометриоз-ассоциированным бесплодием
Результаты, представленные на рисунке 3, демонстрируют статистически значимое отличие значений СА-125 в группе исследования по сравнению со значениями группы контроля (р < 0,05) Важно отметить, что постепенное снижение уровня статистической значимости, которое достигает своего минимума при сравнении показателей, полученных на 6
Рис. 2. Сравнение уровней СУРРД-21-1 у женщин группы исследования (ЭК1 — до операции, ЭК2 — 10 сутки после операции, ЭК3 — 6 месяцев после операции) и группы контроля.
Примечания: * — р < 0,05, 11-критерий Манна-Уитни; ЭК — эксперимент.
Рис. 3. Сравнение уровней СД-125 у женщин группы исследования (ЭК1 — до операции, ЭК2 — 10 сутки после операции, ЭК3 — 6 месяцев после операции) и группы контроля.
Примечания: * — р < 0,05, 11-критерий Манна-Уитни; ЭК — эксперимент.
месяц после операции, и группой контроля (р = 0,015) . Выполнено межгрупповое сравнение по СА-125 до операции и после операции на 10 сутки и 6 месяц: до операции и спустя 10 дней (р = 0,262), спустя 10 дней и 6 месяцев (р = 0,0008), при оценке периодов —
до операции и спустя 6 месяцев (р = 0,0017) . В соответствии с полученными результатами установлено статистически значимое снижение показателя СА-125 в послеоперационном периоде
ОБСУЖДЕНИЕ
Несмотря на значительные достижения в инструментальных методах диагностики, по-прежнему существуют трудности в постановке диагноза эндометриоз, поэтому поиск биомаркеров эндометриоза находится в центре внимания многих исследователей
В настоящем исследовании установили отличие в группах с эндометриоз-ассоциированным бесплодием и здоровыми пациентами — зарегистрированы более высокие показатели АХ!М-1 и СА-125 в группе с эндометриоидными кистами по сравнению с группой пациенток без эндометриоза В свою очередь, биомаркер СУРРА-21-1 имел более низкие показатели по сравнению с группой контроля При анализе показателей в послеоперационном периоде обнаружено значимое снижение в подгруппах по АХ!М-1 и СА-125 и приближение их к показателям группы контроля, в то время как в случае СУРРА-21-1 отмечен рост показателя и также его стремление к показателям группы контроля, что может свидетельствовать о процессе реабилитации .
Обнаруженные изменения могут быть объяснены патофизиологическими механизмами, протекающими в эндометриоидных кистах яичника и организме пациенток в целом
Высокий показатель АХ!М-1 — это компенсаторно-приспособительная реакция в ответ на чрезмерную пролиферативную активность эпителиальных клеток в очаге эндометриоза с попыткой ее супрессии . В своих исследованиях по АХ!М-1 группа шведских ученых во главе с М . Ек (2019) делает вывод об исключительно аберрантной активации канонического пути Wnt в случае эндометриоза, чем объясняются высокие показатели АХ!М-1 [14] . В отличие от ранее проведенных зарубежными авторами работ, данное исследование включало пациенток исключительно репродуктивного периода, все групповые сравнения были скорректированы с учетом возраста с целью минимизации разницы в синтезе АХ!Ы-1. В полученных результатах обращает на себя внимание повышение уровня АХ!М-1 в послеоперационном периоде на 10 сутки, мы полагаем, что данные изменения связаны с непосредственным контактом содержимого эндометриоидной кисты и сосудистого русла пациенток в момент удаления капсулы кисты и необходимостью в усилении супрессивного действия АХ!М-1. Дальнейшая динамика уровня АХ!М-1 отражает статистически значимое снижение показателя .
Особо отметим интересные результаты, касающиеся показателей СУРРА-21-1. В мировой литературе существует ряд работ с неоднозначными результатами [15, 16] . В проведенном исследовании было подтверждено, что показатели СУРРА-21-1, имеющие исходно более низкие значения до операции, впоследствии с течением времени имеют дальнейший
рост показателей до уровня здоровых пациенток . Как было сказано выше, CYFRA-21-1 представляет собой часть цитоскелета клетки. При нормально протекающих процессах апоптоза фермент каспаза 3 разрушает цитоскелет клетки с образованием CYFRA-21-1. C . A . Stratopoulou и M. d'Argent (2023) установили, что в клетках эндометриоидных гетеротопий существует дефицит каспазы 3 [17] . Таким образом, низкий уровень каспазы 3 приводит к неполному распаду цитоскелета клетки, а соответственно, к снижению образования CYFRA-21-1. Проведение цистэктомии нормализует показатели каспазы 3, и уровень CYFRA-21-1 в после-операционном периоде приближается к показателям контрольной группы .
В случае с СА-125 нами зарегистрирована динамика маркера, описанная в мировой литературе, — снижение уровня в послеоперационном периоде [12, 18] .
Полученные данные о динамике изменения биомаркеров дополняют имеющиеся сведения, полученные ранее в мировой литературе Все изменения биомаркеров имеют статистически значимые изменения как в межгрупповом сравнении, так и в сравнении с группой контроля . Несмотря на очевидную динамику изменений биомаркеров, несомненно, необходим более длительный период наблюдения за пациентками
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Определение уровней биомаркеров апоптоза AXIN-1, CYFRA-21-1 и биомаркера пролиферации CA-125 в крови пациенток с эндометриоз-ассоциированным бесплодием создает представление о патофизиологических процессах, протекающих в эндометриоидных кистах яичников, и может способствовать разработке новых способов неинвазивной диагностики и таргет-ных методов лечения
Было установлено, что уровень биомаркера апоптоза AXIN-1 и биомаркера пролиферации CA-125 выше у пациенток с эндометриоидными кистами яичников и достоверно снижается в послеоперационном периоде, что может стать объективным маркером неинвазивной диагностики данной патологии у пациенток с бесплодием
Определение CYFRA-21-1 подтверждает информацию о нарушениях процессов апоптоза на разных его уровнях в клетках эндометриоидных гетерото-пий . Для пациенток с эндометриоз-ассоциированным бесплодием характерны более низкие показатели CYFRA-21-1, которые имели тенденцию к повышению и приближению к показателям женщин без гинекологической патологии в послеоперационном периоде
Таким образом, повышение уровней AXIN-1, CA-125 и снижение CYFRA-21-1 ассоциированы с высоким риском эндометриоз-ассоциированного бесплодия
ДОПОЛНИТЕЛЬНО
Финансирование. Авторы заявляют об отсутствии внешнего финансирования при проведении исследования. Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Вклад авторов: Киселев М. А. — концепция и дизайн исследования, статистическая обработка, анализ и интерпретация данных, написание текста; Репина Н. Б. — концепция и дизайн исследования, редактирование; Никифоров А. А, Никифорова Л. В. — лабораторная диагностика; Усачев И. А. — концепция и дизайн исследования; Дмитриева М. Н., Киселев А. М. — статистическая обработка, анализ и интерпретация данных. Авторы подтверждают соответствие своего авторства международным критериям 1СМ^ (все авторы внесли существенный вклад в разработку концепции и подготовку статьи, прочли и одобрили финальную версию перед публикацией).
Funding. This study was not supported by any external sources of funding.
Conflict of interests. The authors declare no conflicts of interests. Contribution of the authors: M. A. Kiselev — concept and design of study, statistical processing, analysis and interpretation of data, writing the text; N. B. Repina — concept and design of study, editing; A. A. Nikiforov, L. V. Nikiforova — laboratory diagnostics; I. A. Usachev — concept and design of study; M. N. Dmitriyeva, A. M. Kiselev — statistical processing, analysis and interpretation of data. The authors confirm the correspondence of their authorship to the ICMJE International Criteria. All authors made a substantial contribution to the conception of the work, acquisition, analysis, interpretation of data for the work, drafting and revising the work, final approval of the version to be published and agree to be accountable for all aspects of the work.
СПИСОК ИСТОЧНИКОВ
1. Ихтиярова Г.А., Аслонова М.Ж., Курбанова З.Ш., и др. Перспективы диагностики эндометриоза с учетом роли генетических факторов в патогенезе заболевания // РМЖ. Мать и дитя. 2021. Т. 4, № 1. С. 12-16. doi: 10.32364/2618-8430-2021-4-1-12-16
2. Zhang A., Wang G., Jia L., et al. Exosome-mediated microRNA-138 and vascular endothelial growth factor in endometriosis through inflammation and apoptosis via the nuclear factor-кВ signaling pathway // Int. J. Mol. Med. 2019. Vol. 43. No. 1. P. 358-370. doi: 10.3892/ijmm.2018.3980
3. Anastasiu C.V., Moga M.A., Neculau A.E., et al. Biomarkers for the Noninvasive Diagnosis of Endometriosis: State of the Art and Future Perspectives // Int. J. Mol. Sci. 2020. Vol. 21, No. 5. P. 1750. doi: 10.3390/ijms21051750
4. Moga M.A., Bälan A., Dimienescu O.G., et al. Circulating miRNAs as Biomarkers for Endometriosis and Endometriosis-Related Ovarian Cancer — An Overview // J. Clin. Med. 2019. Vol. 8, No. 5. P. 735. doi: 10.3390/jcm8050735
5. Оразов М.Р., Духин А.О., Шкрели И., и др. Прогнозирование фер-тильности у женщин с рецидивирующим овариальным эндометри-озом // Research'n Practical Medicine Journal. 2016. № Спецвыпуск. С. 120-121.
6. Falcone T., Flyckt R. Clinical Management of Endometriosis // Obstet. Gynecol. 2018. Vol. 131, No. 3. P. 557-571. doi: 10.1097/ aog.0000000000002469
7. Hamilton K.M., Van Hise K., Truong M.D., et al. Surgical management of endometriosis to optimize fertility // Curr. Opin. Obstet. Gynecol. 2023. Vol. 35, No. 4. P. 389-394. doi: 10.1097/gco.0000000000000876
8. Hudson Q.J., Perricos A., Wenzl R., et al. Challenges in uncovering non-invasive biomarkers of endometriosis // Exp. Biol. Med. (Maywood). 2020. Vol. 245, No. 5. P. 437-447. doi: 10.1 177/1535370220903270
9. Kiesel L., Sourouni M. Diagnosis of endometriosis in the 21st century // Climacteric. 2019. Vol. 22, No. 3. P. 296-302. doi: 10.1080/13697137.2019.1578743
10. Украинец Р.В., Корнева Ю.С. Нарушение процесса апоптоза клеток эндометрия на фоне гормонального дисбаланса как ключевой фактор в развитии эндометриоза // Проблемы эндокринологии. 2019. Т. 65, № 2. С. 140-144. doi: 10.14341/probl9983
11. Dihm K., Ek M., Roth B., et al. Plasma AXIN1 expression exhibit negative correlations with inflammatory biomarkers and is associated with gastrointestinal symptoms in endometriosis // Biomed. Rep. 2020. Vol. 12, No. 5. P. 211-221. doi: 10.3892/br.2020.1282
12. Tang T., Lai H., Huang X., et al. Application of serum markers in diagnosis and staging of ovarian endometriosis // J. Obstet. Gynaecol. Res. 2021. Vol. 47, No. 4. P. 1441-1450. doi: 10.1111/jog.14654
13. Luisi S., Pinzauti S., Regini C., et al. Serum markers for the noninvasive diagnosis of endometriosis // Womens Health (Lond). 2015. Vol. 11, No. 5. P. 603-610. doi: 10.2217/whe.15.46
14. Ek M., Roth B., Engstrom G., et al. AXIN1 in Plasma or Serum Is a Potential New Biomarker for Endometriosis // Int. J. Mol. Sci. 2019. Vol. 20, No. 1. P. 189. doi: 10.3390/ijms20010189
15. Cho H.-Y., Kyung M.S. CYFRA 21-1 and Placental Growth Factor as Screening Markers for Endometriosis // Med. Sci. Monit. 2019. Vol. 25. P. 1087-1092. doi: 10.12659/msm.912787
16. Shu S., Fan Q.B., Lang J.H. Investigation on endometrium from menstrual blood as a source of non-invasive tissue // Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi. 2019. Vol. 54, No. 8. P. 527-533. doi: 10.3760/ cma.j.issn.0529-567x.2019.08.005
17. d'Argent M., Stratopoulou C.A., Cussac S., et al. Are lower levels of apoptosis and autophagy behind adenomyotic lesion survival // Reprod. Biomed. Online. 2023. Vol. 47, No. 3. P. 103248. doi: 10.1016/j. rbmo.2023.06.003
18. Burghaus S., Drazic P., Wolfler M., et al. Multicenter evaluation of blood-based biomarkers for the detection of endometriosis and adenomyosis: A prospective non-interventional study // Int. J. Gynaecol. Obstet. 2024. Vol. 164, No. 1. P. 305-314. doi: 10.1002/ ijgo.15062
REFERENCES
1. Ikhtiyarova GA, Aslonova MZh, Kurbanova ZSh, et al. Promising diagnostic tools for endometriosis given the pathogenic role of genetic factors. Russian Journal of Woman and Child Health. 2021;4(1):12-6. (In Russ). doi: 10.32364/2618-8430-2021-4-1-12-16
2. Zhang A, Wang G, Jia L, et al. Exosome-mediated microRNA-138 and vascular endothelial growth factor in endometriosis through inflammation and apoptosis via the nuclear factor-KB signaling pathway. Int J Mol Med. 2019;43(1):358—70. doi: 10.3892/ijmm.2018.3980
3. Anastasiu CV, Moga MA, Elena Neculau A, et al. Biomarkers for the Noninvasive Diagnosis of Endometriosis: State of the Art and Future Perspectives. Int J Mol Sci. 2020;21(5):1750. doi: 10.3390/ijms21051750
4. Moga MA, Bälan A, Dimienescu OG, et al. Circulating miRNAs as Biomarkers for Endometriosis and Endometriosis-Related Ovarian Cancer — An Overview. J Clin Med. 2019;8(5):735. doi: 1 0.3390/ jcm8050735
5. Orazov MR, Dukhin AO, Shkreli I, et al. Forecasting of fertility in women with recurrent ovarian endometriosis. Research'n Practical Medicine Journal. 2016;(S):120-1. (In Russ).
6. Falcone T, Flyckt R. Clinical Management of Endometriosis. Obstet Gynecol. 2018;131(3):557—71. doi: 10.1097/aog.0000000000002469
7. Hamilton KM, Van Hise K, Truong MD, et al. Surgical management of endometriosis to optimize fertility. Curr Opin Obstet Gynecol. 2023;35(4):389-94. doi: 10.1097/gco.0000000000000876
8. Hudson QJ, Perricos A, Wenzl R, et al. Challenges in uncovering non-invasive biomarkers of endometriosis. Exp Biol Med (Maywood). 2020;245(5):437-47. doi: 10.1 177/1535370220903270
9. Kiesel L, Sourouni M. Diagnosis of endometriosis in the 21st century. Climacteric. 2019;22(3):296-302. doi: 10.1080/13697137.2019.1578743
10. Ukrainets RV, Korneva YuS. Endometrial cell apoptosis impairment associated with hormonal imbalance as a key factor in the development
of endometriosis. Problems of Endocrinology. 2019;65(2):140-4. (In Russ). doi: 10.14341/probl9983
11. Dihm K, Ek M, Roth B, et al. Plasma AXIN1 expression exhibit negative correlations with inflammatory biomarkers and is associated with gastrointestinal symptoms in endometriosis. Biomed Rep. 2020;12(5):211-21. doi: 10.3892/br.2020.1282
12. Tang T, Lai H, Huang X, et al. Application of serum markers in diagnosis and staging of ovarian endometriosis. J Obstet Gynaecol Res. 2021;47(4):1441-50. doi: 10.1111/jog.14654
13. Luisi S, Pinzauti S, Regini C, et al. Serum markers for the non-invasive diagnosis of endometriosis. Womens Health (Lond). 2015;1 1(5):603-10. doi: 10.2217/whe.15.46
14. Ek M, Roth B, Engström G, et al. AXIN1 in Plasma or Serum Is a Potential New Biomarker for Endometriosis. Int J Mol Sci. 2019; 20(1):189. doi: 10.3390/ijms20010189
15. Cho H-Y, Kyung MS. CYFRA 21-1 and Placental Growth Factor as Screening Markers for Endometriosis. Med Sci Monit. 2019;25:1087-92. doi: 10.12659/msm.912787
16. Shu S, Fan QB, Lang JH. Investigation on endometrium from menstrual blood as a source of non-invasive tissue. Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi. 2019;54(8):527-33. (In Chin.). doi: 10.3760/cma.j.issn.0529-567x.2019.08.005
17. d'Argent M, Stratopoulou CA, Cussac S, et al. Are lower levels of apoptosis and autophagy behind adenomyotic lesion survival? Reprod Biomed Online. 2023;47(3):103248. doi: 10.1016/j.rbmo.2023.06.003
18. Burghaus S, Drazic P, Wölfler M, et al. Multicenter evaluation of blood-based biomarkers for the detection of endometriosis and adenomyosis: A prospective non-interventional study. Int J Gynaecol Obstet. 2024;164(1):305-14. doi: 10.1002/ijgo.15062
ОБ АВТОРАХ
'Киселев Михаил Антонович;
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-8294-9038; eLibrary SPIN: 7098-2877; e-mail: michail.kiselev@mail.ru
Репина Наталья Борисовна, к.м.н., доцент; ORCID: https://orcid.org/0000-0001-5916-3574; eLibrary SPIN: 41 19-5550; e-mail: nrepina62@gmail.com
Никифоров Александр Алексеевич, к.м.н., доцент; ORCID: https://orcid.org/0000-0003-0866-9705; eLibrary SPIN: 8366-5282; e-mail: a.nikiforov@rzgmu.ru
Никифорова Лариса Владимировна;
ORCID: https://orcid.org/0000-0003-4369-0729; eLibrary SPIN: 8735-8565, e-mail: alnik003@yandex.ru
Усачев Илья Александрович;
ORCID: https://orcid.org/0000-0003-2257-5297; eLibrary SPIN: 6548-7363; e-mail: usachevi@rambler.ru
Дмитриева Мария Николаевна, к.пед.н., доцент; ORCID: https://orcid.org/0000-0003-0915-026X; eLibrary SPIN: 1083-9650; e-mail: dmitrm05@mail.ru
Киселев Антон Михайлович, к.м.н., доцент; ORCID: https://orcid.org/0000-0002-8288-1395; eLibrary SPIN: 6719-5527, е-mail: antonmkiselev@gmail.com
AUTHORS' INFO
*Mikhail A. Kiselev;
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-8294-9038; eLibrary SPIN: 7098-2877; e-mail: michail.kiselev@mail.ru
Natal'ya B. Repina, MD, Cand. Sci. (Med.), Associate Professor; ORCID: https://orcid.org/0000-0001-5916-3574; eLibrary SPIN: 4119-5550; e-mail: nrepina62@gmail.com
Aleksandr A. Nikiforov, MD, Cand. Sci. (Med.), Associate Professor; ORCID: https://orcid.org/0000-0003-0866-9705; eLibrary SPIN: 8366-5282; e-mail: a.nikiforov@rzgmu.ru
Larisa V. Nikiforova;
ORCID: https://orcid.org/0000-0003-4369-0729; eLibrary SPIN: 8735-8565, e-mail: alnik003@yandex.ru
Il'ya A. Usachev;
ORCID: https://orcid.org/0000-0003-2257-5297; eLibrary SPIN: 6548-7363; e-mail: usachevi@rambler.ru
Mariya N. Dmitriyeva, Cand. Sci. (Pedagogy), Associate Professor; ORCID: https://orcid.org/0000-0003-0915-026X; eLibrary SPIN: 1083-9650; e-mail: dmitrm05@mail.ru
Anton M. Kiselev, MD, Cand. Sci. (Med.), Associate Professor;
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-8288-1395;
eLibrary SPIN: 6719-5527, e-mail: antonmkiselev@gmail.com
* Автор, ответственный за переписку / Corresponding author
