CC BY
197
УДК 616.12-008.331.1+ 611-018.7]: 53.082.73
ЭЛЕКТРОКИНЕТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ КЛЕТОК БУККАЛЬНОГО ЭПИТЕЛИЯ У БОЛЬНЫХ ГИПЕРТОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ
О.В. Мячина, А.А. Зуйкова, А.Н. Пашков
ГБОУ ВПО "Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко" Минздравсоцразвития России
E-mail: [email protected]
ELECTROKINETIC ACTIVITY OF BUCCAL EPITHELIAL CELLS IN PATIENTS WITH HYPERTENSION
O.V. Myachina, A.A. Zuykova, A.N. Pashkov
Voronezh State Medical Academy n.a. N.N. Burdenko
Цель исследования: изучение показателя электрокинетической активности ядер клеток буккального эпителия (ЭАЯ, %) у больных, страдающих гипертонической болезнью (ГБ). Исследование основано на методе внутриклеточного микроэлектрофореза при изучении клеток человека, разработанном В.Г. Шахбазовым и соавт. Электрокинетичес-кая активность буккальных эпителиоцитов изучена у 45 человек: 22 больных ГБ и 23 практически здоровых лиц (контрольная группа). Средний возраст обследованных составил 60,55±1,91 лет среди больных и 60,78+2,44 лет -среди здоровых. В ходе исследования выявлено, что у лиц, страдающих гипертонической болезнью, ЭАЯ буккального эпителия статистически значимо ниже по сравнению с контрольной группой. Изменения электрокинетической активности буккальных эпителиоцитов при ГБ являются косвенным отражением функционального состояния организма.
Ключевые слова: буккальный эпителий, электроотрицательность ядер, гипертоническая болезнь, функциональное состояние организма.
The aim of the study was to examine electrokinetic activity of buccal epithelial cell nuclei in patients with hypertension. The experimental approach was based on the method of intracellular microelectrophoresis introduced by V.G. Shahbasov et al. The study included 22 hypertensive patients and 23 healthy control subjects. Mean age was 60.55±1.91 in patients with hypertension and 60.78+2.44 in control group. The study showed that hypertensive patients had significantly lower electrokinetic activity of buccal epithelial cell nuclei in comparison with control group suggesting that changes in this parameter seen in hypertensive patients indirectly reflect functional state of the organism.
Key words: buccal epithelium, nuclei electronegativity, hypertension, functional state of the organism.
Введение
Буккальные эпителиоциты, как и все эпителиальные клетки слизистых оболочек, принимают активное участие в системе гуморально-клеточного гомеостаза [2]. Отклонения морфофункциональных, физико-химических и биохимических показателей, возникающие под воздействием различных экзогенных и эндогенных факторов, приводят к изменениям дифференцировки эпителия, регистрируемым морфологически (размер, характер ядер и гранул, признаки цитолиза), а также изменению заряда на поверхности ядра живой клетки, что в свою очередь нарушает электрокинетические свойства ядер. Эти особенности предложено учитывать при скрининговой оценке состояния здоровья, стрессирующих воздействий, вредных факторов внешней среды, соматической патологии, биологического возраста человека [6, 7].
ГБ относится к числу полиэтиологичных заболеваний, ее развитию способствуют средовые, неврогенные и гуморальные влияния. В Российской Федерации повышенный уровень артериального давления (АД) имеют около 40% взрослого населения [3], поэтому исследование электрокинетической активности буккальных эпителиоцитов при этой патологии представляет несомненный практический интерес.
Цель исследования: изучение показателя электроки-нетической активности ядер клеток буккального эпителия (ЭАЯ, %) у больных ГБ.
Материал и методы
Электрокинетическая активность буккальных эпителиоцитов изучена у 45 человек, из них 22 человека страдали ГБ II степени. Обследование больных проводилось амбулаторно в период обострения заболевания. В контрольную группу вошли 23 человека, которые вели активный образ жизни и были относительно здоровы. На момент обследования они отмечали хорошее самочувствие. Поскольку динамика изменений электрокинетической активности не однозначна на протяжении всей жизни человека, исследуемые группы были сопоставимы по возрастному критерию. Средний возраст составил б0,55±1,91 среди больных и 60,78+2,44 - среди здоровых.
Исследование буккального эпителия имеет ряд преимуществ по сравнению с рутинными методами лабораторной диагностики в связи с простотой и удобством сбора материала, неинвазивностью и безболезненностью этой процедуры. Исследование основано на методе внутриклеточного микроэлектрофореза при изучении клеток
О.В. Мячина и соавт.
ЭЛЕКТРОКИНЕТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ КЛЕТОК...
Таблица
Электрокинетическая активность ядер буккального эпителия у обследуемых (M±m), %
Исследуемая группа Количество, человек Возраст, лет Показатель ЭАЯ, %
ГБ 22 60,55+1,91 25,29+1,99*
Контроль 23 60,78+2,44 36,73+2,50
Примечание: * - уровень статистической значимости р<0,05 по отношению к контрольной группе.
человека, разработанном В.Г Шахбазовым и соавт. [7]. Соскоб со слизистой оболочки щеки брали в утренние часы до приема лекарственных препаратов. Затем пробу клеток в нативном состоянии, в буферном растворе при pH 7 помещали в камеру для внутриклеточного микроэлектрофореза. Частота смены полярности на электродах составляла 1 Гц. Исследование материала проводили в световом микроскопе BIOLAR PI при увеличении x400. Учитывали неповрежденные клетки с ядрами округлой формы. В каждом препарате просматривали не менее 100 клеток и определяли процент смещающихся электроактивных ядер (ЭАЯ, %).
Для определения значимости различий между независимыми группами использовали методы математической и медицинской статистики при помощи пакета анализа данных (надстройка) Microsoft Office Ехсе1. Анализ выборок на нормальность распределения был проведен посредством применения критерия х2 с коррекцией Йетса. Данные представлены в виде среднего (M) ± стандартное отклонение (SD). Для определения значимости различий между независимыми группами использовали двухвыборочный t-тест с одинаковыми дисперсиями. Во всех случаях равенство дисперсий в группах проверялось посредством применения критерия Фишера-Снедекора. Статистически значимым считали различие при p<0,05.
на буккальные эпителиоциты, является слюна, количество и химический состав которой варьируется в широких пределах в зависимости не только от времени суток, но и от возраста, эмоционального состояния человека, принятой пищи, наличия сопутствующих заболеваний, а также состояния вегетативной и центральной нервной системы. Результаты проведенных нами ранее исследований показали, что у больных ГБ содержание оксида азота (NO) в секретах больших слюнных желез резко увеличено [4]. Помимо этого рецепторный аппарат буккальных эпите-лиоцитов подвергается воздействию протеолитических и гликозидазных ферментов секрета ротовой полости. Их содержание повышается во время критических состояний [10, 12]. Следствием метаболических и гормональных сдвигов могут явиться изменения дифференциров-ки эпителия [1].
Результаты и обсуждение
Установлено, что у больных ГБ показатель электроки-нетической активности ядер (ЭАЯ, %) буккального эпителия статистически значимо снижался по сравнению с контрольной группой (таблица).
Однозначно судить о причине этого явления, учитывая полиэтиологичность исследуемой патологии и лабильность показателя ЭАЯ, не представляется возможным. На электрокинетический потенциал клеток могут оказывать воздействие многочисленные нейрогуморальные сдвиги, происходящие в организме больного ГБ. В свою очередь, биологически активные вещества посредством взаимодействия с мембранными рецепторами и проникновения в цитоплазму клеток влияют на состояние генетического аппарата, степень конденсации хроматина и метаболических систем клетки. В частности, катехоламины, гидрокортизон, мелатонин вызывают конденсацию хроматина в ядрах, что снижает ЭАЯ, в то время как инсулин, приводящий к деконденсации хроматина, повышает этот показатель [9]. С одной стороны, координированные изменения заряда ядра и структуры хроматина обеспечивают регуляцию функциональной активности клеточного ядра. С другой стороны, на заряде клетки могут отражаться изменения кинетики трансмембранного перемещения ионов. Так, уменьшение концентрации хлорида натрия и избыток ионов Ca2+ в межклеточной среде сопровождаются сдвигами электрокинетического потенциала клетки [5]. Это позволило нам рассматривать ЭАЯ как интегральный показатель обмена веществ в организме в целом.
Еще одним важным фактором, также воздействующим
Заключение
Таким образом, на основании полученных данных можно считать, что в условиях клинической картины ГБ в клетках буккального эпителия наблюдается уменьшение ЭАЯ. Так как показатель ЭАЯ является информативным маркером состояния физиологических и патофизиологических реакций в организме, то его определение можно использовать с диагностической целью при скрининговых исследованиях состояния здоровья у лиц одинакового возраста.
Литература
1. Быков В.Л. Функциональная морфология эпителиального барьера слизистой оболочки полости рта // Стоматология.
- 1997. - Т. 76, № 3. - С. 12-17.
2. Калашник Ю.М. Характеристика глоточного эпителия у больных с хроническим гипертрофическим фарингитом и гастроэзофагеальной рефлюксной болезнью в динамике // Експериментальна 1 кшшчна медицина. - 2009. - № 3. -С. 132-135.
3. Максимов М.Л., Ермолаева А.С., Дралова О.В. Артериальная гипертония, ожирение, эректильная дифункция. Какой препарат выбрать? // Кардиология. - 2011. - Т. 51, № 7. -С. 58-64.
4. Мячина О.В., Зуйкова А.А., Пашков А.Н. и др. Особенности секреции оксида азота в слюнных железах у человека в норме и при патологии // Вестник ВГУ; серия химия, биология, фармация. - 2006. - № 1. - С. 137-140.
5. Самойлов В.О. Медицинская биофизика : учебник для вузов. - 2-е изд., испр. и доп. - СПб. : СпецЛит, 2007. - 560 с.
6. Хусаинова И.С., Варулева И.Ю., Кожина Н.А. Оценка цитологических показателей буккального эпителия для диагностики функционального состояния человека // Клиничес-
кая лабораторная диагностика. - 1997. - № 3. - С. 10-12.
7. Шахбазов В.Г., Колупаева Т.В., Набоков А.Л. Новый метод определения биологического возраста человека // Лабораторное дело. - 1986. - № 7. - С. 404-407.
8. Шкорбатов Ю.Г., Шахбазов В.Г. Биоэлектрические свойства клеточных ядер // Успехи современной биологии. - 1992.
- Т. 112, № 4. - С. 449-511.
9. Шкорбатов Ю.Г. Структурні та електрокінетичні властивості ядер клітин букального епітелію людини у зв’язку з діею фізико-хімічних факторів та зміною функціонального стану організму : автореф. дис.... докт. біол. наук. - Киев : Нац. ун-т ім. Т. Шевченка, 2005. - 40 с.
10. Quinn М.О., Miller V.E., Dal Nogare A.R. Increased salivary exoglycosidase activity during critical illness // Am. J. Respir. Crit. Care Med. - 1994. - Vol. 150. - P. 179-183.
11. Shckorbatov Y.G., Shakhbazov V.G., Grigoryeva N.N. et al. Microwave irradiation influences on the state of human cell nuclei // Bioelectromagnetics. - 1998. - Vol. 19. - P. 414-419.
12. Weinmeister K.D., Dal Nogare A.R. Buccal cell carbohydrates are altered during critical illness // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1994. - Vol. 150. - P. 131-134.
Поступила 22.03.2012
Сведения об авторах
Мячина Ольга Владимировна, к.м.н., ассистент кафедры биологии ГБОУ ВПО “ВГМА им. Н.Н. Бурденко” Минздравсоцразвития России.
Адрес: 394036, Воронеж, ул. Студенческая, 10.
E-mail: [email protected].
Зуйкова Анна Александровна, д.м.н., профессор, заведующая кафедрой поликлинической терапии и общей врачебной практики ГБОУ ВПО “ВГМА им. Н.Н. Бурденко” Минздравсоцразвития России.
Адрес: 394036, Воронеж, ул. Студенческая, 10. Пашков Александр Николаевич, докт. биол. наук, профессор, заведующий кафедрой биологии ГБОУ ВПО “ВГМА им. Н.Н. Бурденко” Минздравсоцразвития России.
Адрес: 394036, г. Воронеж, ул. Студенческая, 10.
