ЭЛЕКТРОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ВАРИАБЕЛЬНОСТИ СЕРДЕЧНОГО РИТМА КОРОВ ДЖЕРСЕЙСКОЙ ПОРОДЫ Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

УДК 619:615:636.22/.28

ЭЛЕКТРОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ВАРИАБЕЛЬНОСТИ СЕРДЕЧНОГО РИТМА КОРОВ ДЖЕРСЕЙСКОЙ ПОРОДЫ

НАУМОВ М.М.,

доктор ветеринарный наук, профессор, ФГБОУ ВО Курская ГСХА, e-mail: Naumovmm@rambler.ru, 89192771714.

СТЕПУРА ЕЕ.,

кандидат биологических наук, доцент, ГОУ ВО МО Государственный социально-гуманитарный университет, e-mail: chimik89@mail.ru.

ПАХОМОВ В.А.,

аспирант, ФГБОУ ВО Курская ГСХА, e-mail: Vetpahomov2@yandex.ru 89207108084. УСАЧЕВ И.И.,

доктор ветеринарных наук, доцент, профессор кафедры терапии, хирургии, ветакушерства и фармакологии, ФГБОУ ВО Брянский ГАУ.

ШВЕЦ О.М.,

доктор ветеринарных наук, доцент, профессор кафедры ветеринарно-санитарной экспертизы и биотехнологии, ФГБОУ ВО Курская ГСХА.

Реферат. Актуальность темы исследования электрофизиологических показателей вариабельности сердечного ритма (ВСР) у коров джерсейской породы с разным уровнем вегетативной регуляции ранее не проводились, и их нормальные значения в доступной литературе не описаны. Учитывая тонкость механизмов вегетативной регуляции сердца, существует потребность в расширении базы диагностики весьма распространенных заболеваний сердца у животных. Целью исследований - изучение электрофизиологических параметров вариабельности сердечного ритма у крупного рогатого скота для оценки возможности включения их в комплексный подход к анализу функционирования сердца у животных. Исследовали 103 здоровых коровы джерсейской породы. Изучена зависимость изменения электрофизиологических показателей вариабельности сердечного ритма от вегетативного статуса животного. Для регистрации кардиоинтервалограмм использовали компьютерную комплексную электрофизиологическую лабораторию «CONAN -4.5». Запись проводилась у крупного рогатого скота в спокойном состоянии в положении стоя. Изучены электрофизиологические показатели ВСР. В связи с этим оценку этих параметров целесообразно включить в базовый набор комплекса методик диагностики заболеваний сердца у крупного рогатого скота.

Ключевые слова: индекс напряжения, электрофизиологические показатели, вариабельность сердечного ритма, сердце.

ELECTROPHYSIOLOGICAL PARAMETERS OF HEART RATE VARIABILITY OF JERSEY COWS

NAUMOV MM.,

Doctor of Veterinary Sciences, Professor, Kursk State Agricultural Academy, e-mail: Naumovmm@ramdler.ru, 89192771714.

STEPURA EE.,

Candidate of Biological Sciences, Associate Professor, State Social and Humanitarian University, e-mail: chimik89@mail.ru.

PAKHOMOV V.A.

Postgraduate student, Kursk State Agricultural Academy, e-mail: Vetpahomov2@yandex.ru.

USACHEV II.,

Doctor of Veterinary Sciences, Associate Professor, Professor of the Department of Therapy, Surgery, Veterinary Obstetrics and Pharmacology, Bryansk State Agrarian University.

SHVETS O.M.,

Doctor of Veterinary Sciences, Associate Professor, Professor of the Department of Veterinary and Sanitary Expertise and Biotechnology, Kursk State Agricultural Academy.

Essay. Die Relevanz des Themas der Untersuchung der elektrophysiologischen Indikatoren der HRV bei Jerseykühen mit unterschiedlichen Ebenen der vegetativen Regulierung wurde bisher nicht durchgeführt und ihre normalen Werte werden in der verfügbaren Literatur nicht beschrieben. Angesichts der Feinheit der Mechanismen der autonomen Regulierung des Herzens besteht die Notwendigkeit, die Basis für die Diagnose von sehr häufigen Herzerkrankungen bei Tieren zu erweitern. Das Ziel der Forschung ist es, die elektrophysiologischen Parameter der Herzfrequenzvariabilität bei Rindern zu untersuchen, um die Möglichkeit zu bewerten, sie in einen integrierten Ansatz zur Analyse der Funktion des Herzens bei Tieren aufzunehmen. 103 gesunde Kühe der Gerseerrasse wurden untersucht. Die Abhängigkeit der Veränderung der elektrophysiologischen Parameter der Herzrhythmusvariabilität vom vegetativen Status des Tieres wurde untersucht. Um Kardiointervalogramme zu registrieren, wurde das computerkomplexe elektrophysiologische Labor «CONAN - 4.5» verwendet. Die Aufzeichnung wurde bei Rindern in ruhigem Zustand im Stehen durchgeführt. Die elektrophysiologischen Indikatoren der HRV wurden untersucht. In diesem Zusammenhang ist es ratsam, die Bewertung dieser Parameter in den grundlegenden Satz von Methoden zur Diagnose von Herzerkrankungen bei Rindern aufzunehmen.

Keywords: stress index, electrophysiological parameters, heart rate variability, heart.

Введение. Одной из самой древних и жирномолочных культурных разновидностей являются коровы джерсейской породы. Разведение данной породы как племенной скот началось на острове Джерси, так она и получила свое наименование.

Коровы данной породы долго сохраняли свою чистокровность (племенную книгу завели в 1886 г.), а в начале XIX века животные были вывезены за пределы своей родины в Англию и США. Затем коровы джерсейской породы получили свое распространение во всем мире.

Данная порода является лучшим жирномолочным видом. За один год корова может давать свыше 4000 л молочной продукции, а при качественном рационе данный показатель может увеличиваться иногда до 10000 л (средний показатель жирности составляет не менее 6 %) [1].

Молоко данной породы содержит повышенные показатели жирности и белка. Поэтому одно из предприятий Рязанской области ООО «Вакинское Агро» содержат этот скот. Они приобрели себе этих коров, опираясь на повышенное содержание жира в молоке, а также достаточное присутствие белка и кальция.

В литературных источниках отсутствуют электрофизиологические параметры ВСР ЭКГ коров джерсейской породы, и учитывая тон-

кость механизмов вегетативной регуляции сердца, существует потребность в расширении базы диагностики весьма распространенных заболеваний сердца у животных [2-9]. Исследования подобного рода ранее не проводились за рубежом и, в частности, в странах Западной Европы и США [10-14].

Целью исследовательской работы - установить электрофизиологические параметры ЭКГ и проанализировать их у животных с разным вегетативным статусом.

Задачи исследовательской работы:

1) провести регистрацию ЭКГ у исследуемых животных;

2) провести математический анализ ВСР с помощью электрофизиологической лаборатории «CONAN - 4.5»;

3) установить вегетативный статус животного;

4) проанализировать полученные значения электрофизиологических параметров.

Методы исследования. Снятие электрокардиограмм у животных проводилась по методике М.П. Рощевского, за 3 - 3,5 часа до приема пищи. Полученные в ходе исследования ЭКГ была подвергнуты математической обработке с помощью лаборатории «CONAN-4.5» (фото 1 и 2).

Рисунок 1 - Комплексная электрофизиологическая Рисунок 2 - Запись ЭКГ у иссле-лаборатория «CONAN 4.5» дуемых животных

Таблица 1 - Значение индекса напряжения коров джерсейской породы с разным вегетативным статусом___

Индекс напряжения, у.е. Количество Животных, шт. Исходный вегетативный тонус по индексу напряжения

<50 9 Ваготония

51-150 25 Нормотония

151-250 52 С импатикотония

>251 17 Гиперсимпатикотония

Исследуемые животные содержатся на животноводческом комплексе ООО «Вакинское Агро», с. Вакино (Рязанская область, Рыбнов-ский район). Система содержания животных круглогодовая стойловая.

Для анализа полученных числовых показателей использовались биометрические методы статистического анализа с расчетом средних величин, стандартов отклонения [2-9]. Статистическую обработку материала проводили с использованием программы «Statistica 10.0» Оценивали нормальность распределения полученных данных с помощью критерия Колмогорова-Смирнова, в зависимости от чего использовали параметрические или непараметрические методы оценки. Производили вычисление средних значений показателей и стандартной ошибки (M±SE), а также ^критерия Стьюдента при нормальном распределении, в противном случае получали медиану и межквартильный размах (Me, 25L; 75Ц) и определяли ^критерий Ман-на-Уитни. Для анализа связи между признаками применяли вычисление коэффициентов корреляции и детерминации, свидетельствующего о достаточной адекватности построенных моделей. Уровень вероятности не менее 95% считали статистически значимым (р<0,05).

Результаты исследований. В ходе проведенного исследования у коров джерсейской породы были сняты и математически обработаны электрокардиограммы по методике разработанной Р.М. Баевским. Полученные соотношения животных по вегетативному тонусу, представлены в таблице 1.

При анализе таблицы 1 первая группа исследуемых животных составило - 9 объектов, с индексом напряжения до 50 у.е. с предполагаемым ИВТ - «ваготония» - характеризовалась преобладанием парасимпатической ВНС.

Вторую группу составило - 25 животных, с индексом напряжения от 51 до 150 у.е. с предполагаемым ИВТ - «нормотония». Данная группа характеризовалась равновесным состоянием ВНС между ПО и СО, что свидетельствовало об активности ПО ВНС.

Третья группа животных составила 52 коровы, характеризовалась преобладанием симпатической ВНС с индексом напряжения от 151 до 250 у.е. с предполагаемым ИВТ -«симпатикотония».

Для четвертой группы животных составило - 17 голов, характеризовались повышенными показателями симпатической ВНС с ИН > 251 у.е., с предполагаемым ИВТ - «гипер-симпатикотония».

Зубец-Р возникает при возбуждении правого и левого предсердий. Значения зубца-Р, представлены в таблице 2.

У группы ваготоников, ПО преобладает над СО ВНС, значение показателя зубца-Р составило - 0,079±0,001 сек. Данное значение меньше, чем у нормотоников, симпатикотоников и ги-персимпатикотоников на 0,002 сек, 0,009 сек и 0,017 сек соответственно.

Значение показателя зубца-Р у нормотони-ков - 0,081±0,001 сек - характеризовались равновесным состоянием ВНС между ПО и СО, что свидетельствовало о тонусе парасимпатического отдела ВНС.

У симпатикотоников, которая характеризовалась смещением вегетативного баланса в сторону симпатической вегетативной нервной системы значение зубца-Р- 0,088±0,001 сек. Данное значение больше, чем у ваготоников и нор-мотоников на 0,009 сек и 0,007 сек соответственно, и меньше, чем у гиперсимпатикотоников 0,008 сек.

У гиперсимпатикотоников наблюдается наибольшее значение зубца-Р -0,096±0,001сек.

Другим показателем вариабельности сердечного ритма у животных с разным вегетативным статусом был проанализирован зубец Т. Значения зубца-Т, у животных с разным вегетативным тонусом, представлены в таблице 3.

Для ваготоников данный показатель составил - 0,129±0,01 сек, характеризовалась активностью парасимпатического отдела.

Значение показателя зубца-Т у нормотони-ков - 0,134±0,01 сек - характеризовались равновесным состоянием ВНС между ПО и СО.

Группа симпатикотоников, которая характеризовалась смещением вегетативного баланса в сторону симпатической вегетативной нервной системы зубца-Р- 0,146±0,01 сек, а у гиперсим-патикотоников - 0,165±0,01 сек.

Таким образом, при повышении значения зубца Т увеличивается симпатическая активность ВНС, а уменьшение наблюдается при раздражении парасимпатической нервной системы.

Таблица 2 - Значение зубца-Р коров исследуемых животных

Индекс напряжения, у.е. Исходный вегетативный тонус по индексу напряжения Зубец Р, сек

<50 «ваготония» 0,079±0,001

51-150 «нормотония» 0,081±0,001

151-250 «симпатикотония» 0,088±0,001

>251 «гиперсимпатикотония» 0,096±0,001

Примечание: достоверность различий зубца-Р оценивалась между группами с применением ^критерия Стьюдента, р<0,05

Таблица 3 - Значение зубца-Т исследуемых животных

Индекс напряжения, у.е. Исходный вегетативный тонус по индексу напряжения Зубец Т, сек

<50 ваготония 0,129±0,01

51-150 нормотония 0,134±0,01

151-250 симпатикотония 0,146±0,01

>251 гиперсимпатикотония 0,165±0,01

Примечание: достоверность различий зубца-Р оценивалась между группами с применением ^критерия Стьюдента, р<0,05

Примечание: достоверность различий зубца-Р оценивалась между группами с применением ^критерия Стьюдента, р<0,05

Таблица 4 - Значения интервалов Р^ у исследуемых животных

Индекс напряжения, у.е. Исходный вегетативный тонус по индексу напряжения Интервал Р^

<50 ваготония 0,27±0,01

51-150 нормотония 0,21±0,01

151-250 симпатикотония 0,15±0,01

>251 гиперсимпатикотония 0,12±0,01

Примечание: достоверность различий зубца-Р оценивалась между группами с применением

^критерия Стьюдента, р<0,05

Другим показателем вариабельности сердечного ритма у животных с разным вегетативным статусом был проанализирован интервал Р-0. Установлено, что продолжительность интервала Р - Q зависит от ЧСС. Значения интервалов Р^, у животных с разным вегетативным тонусом, представлены в таблице 4.

Для ваготоников значение интервала Р^ -0,27±0,01 сек, у данной группы преобладает ПО ВНС.

Значение показателя интервала Р^ у нор-мотоников - 0,21±0,01 сек - характеризовались равновесным состоянием ВНС между ПО и СО.

У группы симпатикотоников значение интервала Р-Q - 0,15±0,01 сек, характеризовалась смещением вегетативного баланса в сторону симпатического отдела вегетативной нервной системы, а для гиперсимпатикотоников -0,12±0,01 сек.

Таким образом, у животных с преобладанием симпатической вегетативной нервной системы наблюдается увеличение длительности зубцов P и T и соответственно увеличивается молочная продуктивность.

В таблице 5 представлены значения показателей А.Я. Каплана и электрофизиологические показатели коров джерсейской породы с разным вегетативным тонусом. Особенность индексов А.Я. Каплана заключается в оценке медленно и быстроволновых компонентов вариабельности кардиоинтервалов без привлечения сложных методов спектрального анализа [8]. Существуют следующие показатели или индексы А.Я. Каплана, которые также отражают активность симпатической и парасимпатической вегетативной нервной системы.

Для ваготоников индекс дыхательной модуляции (ИДМ) составил 8,16±0,02%, индекс

симпатоадреналовой системы - 43±0,1%, а индекс медленноволновой аритмии - 0,8±0,1%. У данной группы коров парасимпатический отдел преобладает над симпатическим отделом вегетативной нервной системы.

Для нормотоников значение индекса дыхательной модуляции (ИДМ) составило 4,14±0,03%, индекс симпатоадреналовой системы - 96±0,2%, а индекс медленноволновой аритмии - 2,5±0,2%. Данная группа характеризуется равновесным состоянием между симпатическим и парасимпатическим отделами вегетативной нервной системой.

Индекс дыхательной модуляции для симпа-тикотоников составил 2,78±0,03%, индекс сим-пато-адреналовой системы - 195±0,2%, а индекс медленноволновой аритмии - 8,2±0,1%. Симпатикотоники характеризуются преобладанием симпатическим отделом вегетативной нервной системы над парасимпатическим.

Индекс дыхательной модуляции для гипер-симпатикотоников составил 1,34±0,02%, индекс симпато-адреналовой системы -588,17±0,1%, а индекс медленноволновой аритмии - 11,45±0,3%. Гиперсимпатикотоники характеризуются преобладанием сверхсимпатическим отделом вегетативной нервной системы над парасимпатическим.

Таким образом, в ходе проведенного исследования математической обработки электрокардиограммы были получены и проанализированы показатели А.Я. Каплана и установлены как породные особенности. Полученные значения могут быть использованы при проведении лекционных занятий по физиологии животных и для дальнейших научных исследований.

Таблица 5 - Значения показателей А.Я. Каплана и электрофизиологические показатели коров джерсейской породы с разным вегетативным тонусом__

ИН, у.е. ИВТ по ИН Зубец Р, сек Зубец Т, сек Интервал Р-Q Показатели А.Я. Каплана

ИДМ, % ИСАТ, % ИМА, %

<50 ваготония 0,079±0,001 0,129±0,01 0,27±0,01 8,16±0,02 43±0,1 0,8±0,1

51-150 нормотония 0,081±0,001 0,134±0,01 0,21±0,01 4,14±0,03 96±0,2 2,5±0,2

151-250 симпатикото-ния 0,088±0,001 0,146±0,01 0,15±0,01 2,78±0,03 195±0,2 8,2±0,1

>251 гиперсимпа-тикотония 0,096±0,001 0,165±0,01 0,12±0,01 1,34±0,02 588±0,1 11,4±0,3

Примечание: достоверность различий зубца-Р оценивалась между группами с применением ^критерия Стьюдента, р<0,05

Заключение. В ходе проведенных исследований, мы пришли к следующим выводам:

1. У коров джерсейской породы в ходе исследования провели регистрацию электрокардиограммы с помощью современной комплексной электрофизиологической лаборатории «CONAN - 4.5»;

2. У коров джерсейской породы в ходе исследования получили числовые значения индекса напряжения и значения зубца -Р, зубца -Т и интервала P-Q;

3. При математическом анализе электрокардиограмм установили породные особенности вариабельности сердечного ритма коров джерсейской породы с учетом вегетативного тонуса. В связи с этим оценку этих параметров целесообразно включить в базовый набор комплекса методик диагностики заболеваний сердца у крупного рогатого скота.

4. В работе установлены электрофизиологические показатели А.Я. Каплана, как породные особенности коров джерсейской породы.

Список использованных источников

1. Антипина В.П., Оконешникова Ю.А., Иванова И.П. Характерные особенности джерсейской породы крупного рогатого скота / XVII International scientific conference. - 2021. - № 4. - С. 97-99.

2. Клиническая электрофизиология животных / А.С. Емельянова, Н.М. Наумов, Е.Е. Степу-ра, И.А. Брусенцев // Учебное пособие. - Курск, 2020. - 228 с.

3. Баевский P.M., Берсенева А.П. Оценка адаптационных возможностей организма и риск развития заболеваний: учебное пособие. - М.: Изд-во Медицина, 1997. - С. 265.

4. Емельянова А.С. Сравнительный анализ электрокардиографических показателей высокопродуктивных и низкопродуктивных коров-первотелок с разным исходным вегетативным тонусом регуляторных систем // Зоотехния. - 2010. - № 4. - С. 6-8.

5. Емельянова А.С. Индекс вегетативного равновесия у телок с разной вегетативной реактивностью // Молочное и мясное скотоводство. - 2010. - № 4. - С. 28-29.

6. Емельянова А.С. Анализ изменения длительности сегментов ЭКГ при физической нагрузке у телочек с разным исходным вегетативным тонусом // Сельскохозяйственная биология. - 2010. - Т. 45. - № 2. - С. 77-81.

7. Никитов C.B., Емельянова А.С. Повышение молочной продуктивности с использованием биологически активной добавки «Витартил» у коров с разным уровнем функционирования регуляторных систем // Ветеринария и кормление. - 2012. - №2. - С. 38-40.

8. Емельянова A.C., Лупова Е.И. Повышение адаптационных возможностей коров первотелок к острому стрессу с использованием метаболита «Янтарная кислота» // Вестник ФГБОУ ВПО РГАТУ. - 2012. - № 4. - С. 25-26.

9. Кулаичев А.П. Компьютерная электрофизиология: учебное пособие. - М.: Изд-во Московского университета, 2002. - 379 с.

10. Berger, R. D. Assessment of autonomic response by broad-band respiration / R. D. Berger, J. P. Saul, R. J. Cohen // Trans. Biomed. Eng. - 1989. - Vol. 36. - P.1061-1065.

11. Bigger J.T., Fleiss J.L., Kleiger R. The Multicenter Postinfarction Research Group: The relationship among ventricular arrhythmias, left ventricular dysfunction, and mortality in 2 years after myocardial infarction // Ibid. -1984. - Vol. 69. - P. 250.

12. Bigger J. T., FleissJr, J. L., Rolnitzky L. M. Stability over time of heart period variability in patients with previous myocardial infarction and ventricular arrhythmias. The CAPS and ESVEM investigators // Am. J. Cardiol. - 1992. -Vol. 69. - P. 718-723.

13. Bigger J.T., FleissJr, J. L. , Rolnitzky L.M. The ability of several short-term measures of RR variability to predict mortality after myocardial infaction // Circulation. - 1993. - Vol. 88. - P. 927-934.

14. Bigger J.T., Steinman Jr,R.C., Rolnitzky L.M. Power law behavior of RR-interval variability in healthy middle-aged persons, patients with recent acute myocardial infarction, and patients with heart transplants // Ibid. - 1996. - Vol. 93. - P. 2142-2151.

Spisok ispoFzovanny'x istochnikov

1. Antipina V.P., Okoneshnikova Yu.A., Ivanova I.P. Xarakterny'e osobennosti dzhersejskoj porody' krupnogo rogatogo skota / XVII International scientific conference. - 2021. - № 4. - S. 97-99.

2. Klinicheskaya e'lektrofiziologiya zhivotny'x / A.S. Emel'yanova, N.M. Naumov, E.E. Stepura, I.A. Brusencev // Uchebnoe posobie. - Kursk, 2020. - 228 s.

3. Baevskij P.M., Berseneva A.P. Ocenka adaptacionny'x vozmozhnostej organizma i risk razvitiya zabolevanij: uchebnoe posobie. - M.: Izd-vo Medicina, 1997. - S. 265.

4. Emel'yanova A.S. Sravnitel'ny'j analiz e'lektrokardiograficheskix pokazatelej vy'sokoproduktivny'x i nizkoproduktivny'x korov-pervotelok s razny'm isxodny'm vegetativny'm tonusom regulyatorny'x si-stem // Zootexniya. - 2010. - № 4. - S. 6-8.

5. Emel'yanova A.S. Indeks vegetativnogo ravnovesiya u telok s raznoj vegetativnoj reak-tivnost'yu // Molochnoe i myasnoe skotovodstvo. - 2010. - № 4. - S. 28-29.

6. Emel'yanova A.S. Analiz izmeneniya dlitel'nosti segmentov E'KG pri fizicheskoj na-gruzke u telochek s razny'm isxodny'm vegetativny'm tonusom // Sel'skoxozyajstvennaya biologiya. - 2010. -T. 45. - № 2. - S. 77-81.

7. Nikitov C.B., Emel'yanova A.S. Povy'shenie molochnoj produktivnosti s ispol'zovaniem biologicheski aktivnoj dobavki «Vitartil» u korov s razny'm urovnem funkcionirovaniya regulyatorny'x sistem // Veterinariya i kormlenie. - 2012. - №2. - S. 38-40.

8. Emel'yanova A.C., Lupova E.I. Povy'shenie adaptacionny'x vozmozhnostej korov pervotelok k ostromu stressu s ispolzovaniem metabolita «Yantarnaya kislota» // Vestnik FGBOU VPO RGATU. - 2012. - № 4. - S. 25-26.

9. Kulaichev A.P. Komp'yuternaya e'lektrofiziologiya: uchebnoe posobie. - M.: Izd-vo Moskovskogo universiteta, 2002. - 379 s.

10. Berger, R. D. Assessment of autonomic response by broad-band respiration / R. D. Berger, J. P. Saul, R. J. Cohen // Trans. Biomed. Eng. - 1989. - Vol. 36. - P.1061-1065.

11. Bigger J.T., Fleiss J.L., Kleiger R. The Multicenter Postinfarction Research Group: The relationship among ventricular arrhythmias, left ventricular dysfunction, and mortality in 2 years after my-ocardial infarction // Ibid. -1984. - Vol. 69. - P. 250.

12. Bigger J. T., FleissJr, J. L., Rolnitzky L. M. Stability over time of heart period variability in patients with previous myocardial infarction and ventricular arrhythmias. The CAPS and ESVEM investigators // Am. J. Cardiol. - 1992. -Vol. 69. - P. 718-723.

13. Bigger J.T., FleissJr, J. L. , Rolnitzky L.M. The ability of several short-term measures of RR variability to predict mortality after myocardial infaction // Circulation. - 1993. - Vol. 88. - P. 927-934.

14. Bigger J.T., Steinman Jr, R.C., Rolnitzky L.M. Power law behavior of RR-interval variability in healthy middle-aged persons, patients with recent acute myocardial infarction, and patients with heart transplants // Ibid. - 1996. - Vol. 93. - P. 2142-2151.