CC BY
75
РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, № 4, 2015
Авдалян А.М.1, Климачев В.В.2, Бобров И.П.2, Лазарев А.Ф.1, Лушникова Е.Л.3, НепомнящихЛ.М.3
амплификация гена HER2/NEU при лейомиосаркоме тела матки: встречаемость, клинико-морфологические особенности, связь с прогнозом
'Алтайский филиал ФГБНУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н.Блохина», г. Барнаул, Россия; 2ГБОУ ВПО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Барнаул, Россия; 3ФГБНУ «Научно-исследовательский институт региональной патологии и патоморфологии», г. Новосибирск, Россия
В настоящее время практически постулированы закономерности течения злокачественных новообразований ряда локализаций с амплификацией HER2. Амплификация гена HER2 частое событие в инва-зивном раке молочной железы, связанное с плохим прогнозом, резистентностью к гормонотерапии и ответом опухоли на терапию HER2 моноклональны-ми антителами. Амплификация гена HER2 найдена также и при злокачественных опухолях желудка, толстой кишки, легких, что открывает возможность таргетной терапии опухолей этих локализаций. С точки зрения статуса гена HER2 при лейомиосарко-ме тела матки (ЛМС) в мировой литературе практически нет никаких данных ни о встречаемости, ни о взаимосвязи с биомолекулярными параметрами и прогнозом. Целью нашего исследования было выявление факта амплификации гена HER2 в ЛМС тела матки и, при наличии таковой, выявление связи с другими биомолекулярными параметрами и прогнозом. В исследование вошли 44 больных ЛМС тела матки с известным прогнозом (ретроспективно - 34 случая, проспективно - 10 за период 1996 - 2012 гг.). Для оценки статуса гена, минуя выявление экспрессии белка, проводили гибридизацию in situ в автоматизированном стейнере Ventana. Было выявлено, что амплификация гена встречается относительно часто - в 29,5% (13 случаев). Были выявлены интересные особенности амплификации гена в клеточном пуле ЛМС: наиболее часто наличие амплификации встречается в анаплазированном компоненте опухолевых клеток. Из 13 случаев в 5 обнаружена нормосомия, в 8 - гиподисомия. Следует отметить, что нормосо-мия в гладкомышечной клетке нечастое событие, и в неизмененном миометрии гиподисомия встречалась в 100% случаев, а в клетках ЛМС с наличием или без амплификации нормосомия встретилась в 15 случаях, гиподисомия - в 28, а полисомия (возможно неистинная) - всего в 1. При сопоставлении наличия амплификации гена с клинико-морфоло-гическими параметрами ЛМС не было выявлено значимых корреляций со стадией процесса, наличием рецидивирования/метастазирования, степенью злокачественности (критерии FNCLCC), размером опухоли (г<0,3). С точки зрения корреляции амплификации с биомолекулярными параметрами (в том числе связанными с системами апотоза и пролиферации) не было выявлено взаимосвязи с общим количеством аргирофильных белков обла-
сти ядрышкового организатора, рецепторным статусом, индексом пролиферативной активности по экспрессии Ki-67, экспрессией Bcl2, p53, и нуклео-фосмином. В то же время была обнаружена корреляция с экспрессией Topoisomerase lia (r=0,42), наличием ядерной транслокации HSP70 (r=0,42). Наличие амплификации в клетках ЛМС было взаимосвязано с 10-летней выживаемостью (r=0,37): в группе долгоживущих амплификация гена выявлена в 16% случаев (n=4), а в группе с неблагоприятным течением - в 47,4% (n=9). Таким образом, результаты работы показали, что амплификация гена HER2 может быть одним из важных ключевых событий в прогрессии ЛМС. Одновременно этот факт может стать одним из направлений в изучении способов таргетной терапии у больных этой локализации.
Авдалян А.М.1, Кобяков Д.С.2, Лазарев А.Ф.1, Бычкова Е.Ю.1, Лушникова Е.Л.3, Непомнящих Л.М.3
экспрессия маркеров апоптоза (p53, bcl-2, bax) и пролиферации (ki-67, топоизомеразы iia, ag-яор-белков) в норме и при немелкоклеточном раке легкого
'Алтайский филиал ФГБНУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н.Блохина», г. Барнаул, Россия; 2Бюджетное учреждение «Когалымская городская больница», г. Когалым, Россия; 3ФГБНУ «Научно-исследовательский институт региональной патологии и патоморфо-логии», г. Новосибирск, Россия
Цель - исследовать маркеры апоптоза (p53, bcl-2 и bax) и пролиферации (Ki-67, топоизомеразы IIa (ТороИа) и аргирофильных белков ядрышкообразу-ющих районов (Ag-ЯОР-белков) во взаимосвязи с клинико-морфологическими параметрами немелко-клеточного рака легкого (НМКРЛ) и в норме.
Материал и методы. Исследованы 237 операционных материалов НМКРЛ, средний возраст больных - 59 лет, 203 мужчины и 34 женщины. Патоги-стологическая характеристика опухолей определена согласно классификации TNM 7-го пересмотра. Также исследованы кусочки нормального легкого в 10 случаях. После стандартной проводки приготовлены гистологические срезы толщиной 4 мкм. Иммуноги-стохимическим методом окрашивали на Ki-67 (клон MIB-1), ТороПа (клон JS5B4), р53 (клон DO-7), bcl-2 (клон 124) и bax (клон SP47) и определяли индекс метки (ИМ). Для изучения Ag-ЯОР-белков срезы окрашивали азотнокислым серебром по одностадийной методике. Определяли индекс площади (ИП) Ag-ЯОР-белков в мкм2 в 100 клетках. Компьютерный анализ изображений проводили в программе ImageJ 1.42. Статистический анализ проведен в Statistica 6.0. Применяли U-тест Манна - Уитни, критерий Фишера, коэффициент Спирмена. Достоверность оценивали при р<0,05.
Результаты. В ядрах клеток патологически неизмененного эпителия альвеол отсутствовала экспрессия p53, bcl-2 и bax, ИМ Ki-67 и ТороИа составил ме-
РОССИЙСКАЯ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ
нее 1%, ИП Ag-ЯОР-белков - 1,31±0,20. В эпителии бронхов отсутствовали р53-положительные клетки, Ьс1-2-положительные клетки определялись только в базальном слое, Ьах-положительные клетки - во всех слоях; ИМ Ю-67 составил 4 (1-8)%, ИМ ТороПа
- менее 1%, ИП Ag-ЯОР-белков - 1,85±0,24. При НМКРЛ положительная экспрессия р53 составила 104 (44%) случая, Ьс1-2 - 43 (18%) случая и Ьах -130 (55%) случаев; ИМ Ю-67 составил 25 (18-42)%, ИМ ТороПа - 19 (12 - 27)% и ИП Ag-ЯОР-белков
- 6,52±1,66. При НМКРЛ наблюдалось снижение экспрессии Ьах и повышение экспрессии р53, Ьс1-2, ИМ Ю-67, ИМ ТороПа и ИП Ag-ЯОР-белков по сравнению с нормальным легким (р<0,001). Найдена корреляция (р<0,05) экспрессии р53, Ьс1-2 и Ьах с клинико-морфологическими параметрами НМКРЛ: ИМ Ьс1-2 и р53 выше при плоскоклеточном раке, ИМ Ьах выше при аденокарциноме и у женщин, ИМ Ьс1-2 выше при N0 и I стадии. Отсутствовала корреляция между маркерами апоптоза р53, Ьс1-2 и Ьах. В НМКРЛ ИМ Ю-67 и ТороПа имели различия в группах и коррелировали с полом, наибольшим размером опухоли, гистогенезом и дифференцировкой (р<0,01). ИП Ag-ЯОР-белков имел различия в группах и коррелировал с полом, показателем Т, наибольшим размером опухоли, показателем N стадией заболевания, гистогенезом и дифференцировкой (р<0,001). В НМКРЛ найдена корреляция между маркерами пролиферации - ИП Ag-ЯОР-белков, ИМ Ю-67 и ИМ ТороПа (р<0,001). Найдено увеличение пролиферации при положительной экспрессии р53. При положительной экспрессии Ьс1-2 уменьшается ИП Ag-ЯОР-белков, Ьах - ИМ Ю-67 и ТороПа. В НМКРЛ найдена статистически значимая корреляция между маркерами апоптоза (р53, Ьс1-2 и Ьах) и пролиферации (Ю-67, ТороПа и Ag-ЯОР-белков): между ИП Ag-ЯОР-белков и р53, Ьс1-2; между ИМ Ki-67 и р53, Ьах; между ИМ ТороПа и р53, Ьах.
Заключение. При НМКРЛ по сравнению с нормой изменяется экспрессия маркеров апоптоза и пролиферации. Экспрессия маркеров апоптоза и пролиферации взаимосвязана с полом и клинико-мор-фологическими параметрами НМКРЛ. При НМКРЛ экспрессия маркеров апоптоза взаимосвязана с пролиферацией.
Апсаликов Б.А., Манамбаева З.А., Мусульмано-ва М.А., Оспанов Е.А., Кудайбергенова А.С.
роль генетических факторов
риска в развитии рака
молочной железы у лиц, рожденных от облученных родителей, на примере
населения семейского региона
Государственный медицинский университет города Семей, г. Семей, Республика Казахстан
Рак молочной железы (РМЖ) в течение последних десятилетий занимает одно из первых ранговых мест, а в настоящее время является наиболее рас-
пространенным в структуре заболеваемости злокачественными новообразованиями среди женщин. Ситуация усложняется также тем, что значительная часть нововыявленных случаев РМЖ, особенно в условиях здравоохранения развивающихся стран, относятся к поздним неоперабельным стадиям, а большинство остальных, даже при возможности радикального лечения требуют проведения обширных и травматичных вмешательств.
В процессе настоящего исследования нами на базе Регионального онкологического диспансера г. Семей и в Научно-исследовательском институте радиационной медицины и экологии были определены распространенность, прогностические и клинические взаимосвязи генов - предикторов РМЖ в зоне радиоэкологического неблагополучия Семейского региона. Изучены динамика и уровень заболеваемости РМЖ и его отдельными формами в популяции Семейского региона в сравнительном аспекте с данными национальной статистики и региональным контролем в период 2009-2015 гг.
Исследованы зависимости уровня заболеваемости РМЖ от возрастных характеристик и дозы непосредственного облучения и облучения родителей. Изучены связи полиморфных вариантов генов BRCA1, BRCA2, ТР53 и их сочетаний с частотой РМЖ у облученных и женщин, рожденных от облученных родителей. Более того, проведен сравнительный анализ течения РМЖ у женщин с наличием и отсутствием маркеров генетической предрасположенности.
Материал и методы. Исследование проведено методом случай - контроль в период с 2009 по 2015 г. соответственно протоколу. Морфологические (цитологические и гистологические) исследования, выделение ДНК из опухолевой ткани с последующим глубоким секвенированием. Исследование генов BRCA1 (HBCX17 c.6033_6034del, p.(Ser2012GlnfsTer5); HBCX10 c.9106C>T, p.(Gln3036Ter)), BRCA2 (c.2957delA, p.(Asn986llefsTer14) (heterozygote), HCC1937 BRCA1 c.5266dupC p.(Gln1756ProfsTer74) (homozygote) and BT474 BRCA2 c.9281C>A p.(Ser3094Ter) (heterozygote)), ТР53 (Ex4+119 G>C, Arg72Pro, rs1042522), IVS3 16 bp, rs17878362), IVS6+62 G>A, rs1625895). В исследовании приняли участие 120 женщин с подтвержденным диагнозом РМЖ, непосредственно проживавших на территориях, подвергавшихся контаминации радионуклидами, и рожденных от облученных родителей; 60 женщин больных РМЖ, не имевших радиационного анамнеза, в том числе семейного, 60 женщин без РМЖ, облученных или рожденных от облученных родителей; 60 женщин без РМЖ, не имеющих радиационного анамнеза.
Полученные результаты предопределяют кли-нико-генетическую характеристику риска развития РМЖ среди женщин, рожденных от родителей подвергавшихся радиационному воздействию, проживавших на территории Семипалатинского ядерного полигона, и оценку взаимосвязи наличия маркеров генетической предрасположенности к РМЖ и их сочетаний с клиническим течением у больных, пролеченных с использованием различных подходов (хирургических и специфической противоопухолевой терапии). Разработан алгоритм по определению предрасположенности к развитию РМЖ у женщин, рожденных от облученных родителей.
