CC BY
12
УДК 616-003.9:616-002.5
DOI: 10.15372/SSMJ20190403
экспрессия генов белков, сопряженных с фибропластическими процессами, в легких мышей при развитии туберкулезного воспаления
Петр Михайлович КОЖИН1, Антон Владимирович ЧЕЧУШКОВ1, Наталья Сергеевна ЗАЙЦЕВА1, Марина Валерьевна ХРАПОВА1, Лилия Александровна ЧЕРДАНЦЕВА12, Елена Брониславовна МЕНЬЩИКОВА1, Александр Васильевич ТРОИЦКИЙ1, Вячеслав Алексеевич ШКУРУПИЙ1,3
1 НИИ экспериментальной и клинической медицины ФИЦ фундаментальной и трансляционной медицины
630117, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 2
2 Новосибирский НИИ травматологии и ортопедии им. Я.Л. Цивьяна Минздрава России 630091, г. Новосибирск, ул. Фрунзе, 17
3 Новосибирский государственный медицинский университет Минздрава России 630091, г. Новосибирск, Красный просп., 52
В настоящем исследовании проведен анализ экспрессии генов белков, участвующих во внутриклеточных сигнальных путях, сопряженных с профибротическим ответом, активацией эпителиально-мезенхимального и эндо-телиально-мезенхимального переходов, при моделировании туберкулезного гранулематоза и фармацевтических воздействиях. Материал и методы. Исследование проводили на мышах-самцах линии BALB/c двухмесячного возраста с массой тела 18-22 г. Генерализованный туберкулезный гранулематоз моделировали однократным внутривенным (ретроорбитально) введением 0,5 мг вакцины БЦЖ в 0,2 мл изотонического водного раствора NaCl (ФР), через 4 мес. часть мышей начинала получать препараты лечения, через 2 мес. животных выводили из эксперимента путем декапитации и выделяли легкие (через 6 мес. после введения вакцины БЦЖ). Мыши были разделены на шесть групп, по пять особей в каждой: интактные, которым внутривенно ретроорбитально вводили 0,2 мл ФР; инфицированные БЦЖ и получавшие внутрибрюшинные инъекции ФР; инфицированные БЦЖ и получавшие внутрибрюшинные инъекции раствора гидразида изоникотиновой кислоты (ГИНК); инфицированные БЦЖ и получавшие внутрибрюшинные инъекции раствора декстразида (конъюгат окисленного декстрана 40 кДа и ГИНК); инфицированные БЦЖ и получавшие внутрибрюшинно либо ингаляционно раствор молеку-лярно-наносомальных фармацевтических композиций окисленного декстрана (МНФК). По окончании эксперимента в ткани легкого мышей методом ПЦР в реальном времени определяли экспрессию мРНК матриксной металлопротеиназы-9, проколлагена типа III, TGF-ß и транскрипционных факторов ZEB1 и Snai1. Результаты. Обнаружено, что моделирование генерализованного туберкулезного гранулематоза сопровождается индукцией эпителиально-мезенхимального перехода и активацией профибротических процессов, что через 6 мес. проявлялось в повышении экспрессии цепи а1 коллагена III типа и TGF-ß. Назначение животным в течение 2 мес. традиционных (ГИНК) и оригинальных (декстразид, МНФК) препаратов с противотуберкулезной активностью обладает ингибирующей активностью разной степени выраженности в отношении различных маркеров данных процессов.
Ключевые слова: туберкулезный гранулематоз, фиброз, окисленный декстран, декстразид, матриксная ме-таллопротеиназа-9, проколлаген типа III, TGF-ß, ZEB1, Snai1.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии возможных конфликтов интересов.
Благодарности. Исследование выполнено с использованием оборудования ЦКП «Современные оптические системы» НИИ экспериментальной и клинической медицины ФИЦ фундаментальной и трансляционной медицины.
Автор для переписки: Меньщикова Е.Б., е-mail: lemen@centercem.ru
Для цитирования: Кожин П.М., Чечушков А.В., Зайцева Н.С., Храпова М.В., Черданцева Л.А., Меньщикова Е.Б., Троицкий А.В., Шкурупий В.А. Экспрессия генов белков, сопряженных с фибропластическими процессами, в легких мышей при развитии туберкулезного воспаления. Сибирский научный медицинский журнал. 2019; 39 (4): 22-29. doi: 10.15372/SSMJ20190403.
EXPRESSION OF PROTEIN GENES PARTICIPATING IN FIBROPLASTIC PROCESSES IN MICE LUNG DURING THE DEVELOPMENT OF TUBERCULOUS INFLAMMATION
Peter Mikhaylovich KOZHIN1, Anton Vladimirovich CHECHUSHKOV1, Natal'ya Sergeevna ZAYTSEVA1, Marina Valer'yevna KHRAPOVA, Liliya Aleksandrovna CHERDANTSEVA1,2, Elena Bronislavovna MENSHCHIKOVA1, Aleksandr Vasil'yevich TROITSKY1, Vyacheslav Alekseevich SHKURUPY13
1 Research Institute for Experimental and Clinical Medicine of Federal Research Center for Basic and Translational Medicine
630117, Novosibirsk, Timakov str., 2
2 Novosibirsk Research Institute of Traumatology and Orthopaedics n.a. Ya.L. Tsivyan 630091, Novosibirsk, Frunze str., 17
3 Novosibirsk State Medical University of Minzdrav of Russia 630091, Novosibirsk, Krasny av., 52
The study analyzes the expression of protein genes involved in intracellular signaling pathways associated with a profibrotic response, activation of epithelial-mesenchymal and endothelial-mesenchymal transitions, in modeling tuberculous granulomatosis and pharmaceutical effects. Material and methods. The study was performed on male BALB/c mice aged two months and weighing 18-22 g. Generalized tuberculous granulomatosis was simulated by a single intravenous (retro-orbital) injection of 0.5 mg BCG vaccine in 0.2 ml of isotonic aqueous NaCl solution (SS), after 4 months a part of mice started to receive treatment drugs, after 2 months the animals were sacrificed by decapitation (6 months after BCG vaccine administration) and their lung tissues were collected. Mice were divided into 6 groups, 5 males in each: intact, which were intravenously into the retro-orbital sinus injected with 0.2 ml SS (C); infected with BCG and receiving SS intraperitoneal injections (BS); infected with BCG and received intraperitoneal injections of isonicotinic acid hydrazide solution (INAH) (BI); infected with BCG and received intraperitoneal injections of dextrazide solution (conjugate of 40 kDa oxidized dextran and INAH) (BD); infected with BCG and received intraperitoneal or inhalation injections of solution of molecular-nanosomal pharmaceutical compositions of oxidized dextran (MNPC) (BMP and BMH, respectively). Finally, the expression of mRNA of matrix metalloproteinase 9, type III procollagen, TGF-p, and transcription factors ZEB1 and Snail was determined by real-time PCR in mice lung tissue. Results. The modeling of generalized tuberculous granulomatosis was found to be accompanied by the induction of epithelial-mesenchymal transition and the activation of profibrotic processes, which after 6 months was manifested in increase of the type III collagen al-chain and TGF-p mRNA expression. Administration of traditional (INAH) and original (dextrazide, MNPC) preparations with anti-tuberculosis activity within two months has inhibitory activity of varying severity in relation to various markers of these processes.
Key words: tuberculous granulomatosis, fibrosis, oxidized dextran, dextrazide, matrix metalloproteinase 9, type III procollagen, TGF-P, ZEB1, Snail.
Conflict of interests. Authors declare lack of the possible conflicts of interests.
Acknowledgments. This work was performed using the equipment of centre of collective usage «Modern Optical Systems» of Research Institute for Experimental and Clinical Medicine of Federal Research Center for Basic and Translational Medicine
Correspondence author: Menshchikova E.B., e-mail: lemen@centercem.ru
Citation: Kozhin P.M., Chechushkov A.V., Zaytseva N.S., Khrapova M.V., Cherdantseva L.A., Menshchikova E.B., Troitsky A.V., Shkurupy V.A. Expression of protein genes participating in fibroplastic processes in mice lung during the development of tuberculous inflammation. Sibirskiy nauchnyy meditsinskiy zhurnal = Siberian Scientific Medical Journal. 2019; 39 (4): 22-29. [In Russian]. doi: 10.15372/SSMJ20190403.
Фиброзирование является частым прогрессирующим ответом на хроническое воспаление. Накопление компонентов внеклеточного матрик-са, продуцируемого активированными интерсти-циальными миофибробластами, в сочетании с нарушением его реорганизации приводит к нарушению нормальной архитектуры ткани и, тем самым, функции органа [10]. Белки семейства матриксной металлопротеиназы (ММР) участвуют в распаде внеклеточного матрикса в нормальных физиологических процессах, таких как эмбриональное развитие, размножение, ангиоге-нез, развитие костей, заживление ран, миграция клеток, обучение и память, а также в патологических процессах, таких как артрит, внутримоз-говое кровоизлияние, метастазы [9, 13]. К числу важных ферментов, участвующих в ремоделиро-вании структур внеклеточного матрикса, относится ММР-9; данный фермент ассоциирован с многочисленными патологическими процессами, включая воспалительные, онкологические, иммунологические и сердечно-сосудистые заболевания [2]. Основу соединительной ткани организма составляют коллагены - фибриллярные белки, обеспечивающие ее прочность и эластичность; 95 % всего коллагена в дерме человека составляют коллагены I и III типов, коллаген III типа также содержится в других растяжимых соединительных тканях (легкие, сосудистая система), часто в сочетании с коллагеном типа I [15].
В процессе воспаления мононуклеары и макрофаги инфильтрируют область воспаления и секретируют различные цитокины, необходимые для клеточной миграции, активации, дифферен-цировки. Фибробласты активируются и дифференцируются в миофибробласты и начинают синтезировать белки внеклеточного матрикса (коллаген, фибронектин, эластин, протеоглика-ны) для восстановления поврежденного матрикса и поддержания гомеостаза ткани. В физиологических условиях этот процесс достигается за счет баланса между уровнем синтеза белков внеклеточного матрикса и уровнем их разрушения за счет протеолитических ферментов.
Существует много сигнальных путей, приводящих к активации фибробластов (опосредованных TGF-P, ¡Ь-1Р, ^-4, ^-6, EGF). К основным индукторам активации фибробластов относится TGF-p. Он принадлежит к ТЪ1-цитокинам и синтезируется многими клетками, включая макрофаги, лимфоциты и фибробласты [3, 11]. TGF-P осуществляет передачу сигнала от поверхности клетки к ядру за счет активации Smad-сигнального пути. Цитокин связывается с конститутивно активным TGF-P-рецептором II, который стимулирует TGF-P-рецептор I и образует с ним
активный комплекс, фосфорилирующий цито-плазматические сигнальные молекулы Smad2 и Smad3. Активированные Smad2 и Smad3 соединяются с Smad4, и образовавшийся комплекс транслоцируется в ядро, где взаимодействует со Smad-связывающим элементом, что в конечном итоге приводит к транскрипции целевых генов и синтезу коллагена. TGF-P также активирует инги-бирующую сигнальную молекулу Smad7, которая взаимодействует с рецептором TGF-P и блокирует фосфорилирование Smad2/3, контролируя таким образом магнитуду сигнального ответа на TGF-P за счет образования петли негативной обратной связи [3, 11]. Существуют альтернативные пути передачи сигнала, например, МАР-киназный и РВ/Ак/РКВ-киназный [12]. Образование большого количества коллагена может быть также связано с уменьшением количества репрессо-ров TGF-P-связанных сигнальных путей: Smad7, PPAR-y, р53, Fli-1. Кроме того, цитокины ТОТ-а, ШК-у снижают TGF-P-опосредованный синтез коллагена за счет активации супрессоров (ОТ-кВ, STAT-1, АР-1).
Фибробласты являются основным источником белков внеклеточного матрикса. Изначально предполагалось, что зрелые фибробласты образуются из эмбриональных мезенхимальных клеток, а пролиферирующие резидентные фибробласты и циркулирующие фиброциты являются основным источником миофибробластов, участвующих в процессе фиброгенеза. Однако показано, что зрелые фибробласты также образуются из эпителиальных (эпителиально-мезенхимальный переход, ЭМП) и эндотелиальных клеток (эндотелиально-мезенхимальный переход) [3, 14]. Эпителиальные клетки приобретают фибробластоподобную морфологию и начинают экспрессировать маркеры фибробластов/миофибробластов, такие как FSP-1, а^МА, К-кадгерин, виментин, теряя при этом эпителиальные маркеры - Е-кадгерин, окклюдин, десмоплакин. ЭМП характеризуется трансформацией эпителиальных и эндотелиальных клеток в мигрирующие и инвазивные мезенхимальные клетки. При этом происходит разъединение плотных и адгерентных контактов, растворение дес-мосом, потеря апикально-базальной ориентации клеток, реорганизация актинового цитоскелета и инициация миграции клеток.
Гиперактивация ЭМП играет важную роль в развитии и прогрессии фиброза в различных органах. Во время такого перехода происходит утрата эпителиальных и эндотелиальных маркеров и появление мезенхимальных маркеров (а^МА, коллаген). Основным индуктором ЭМП являются белки семейства TGF-P, активирующие транскрипционные факторы семейства SMAD
[6], которые ингибируют транскрипцию эпителиальных генов и активируют гены транскрипционных факторов, участвующих в ЭМП, - Snail, ZEB и bHLH. Клетки первичного альвеолярного эпителия под воздействием TGF-P на протяжении 3-6 дней подвергаются трансформированию в фибробласты и миофибробласты [16]. Молекулярное репрограммирование, происходящее при ЭМП, управляется различными транскрипционными факторами (EMT-activating transcription factors): Snail, Twist, ZEB1 [5, 14]. Эти факторы работают как молекулярные переключатели, отвечающие за известные сигнальные пути, и регулируют ЭМП [3, 8]. Одновременно TGF-P активирует SMAD-независимые сигнальные каскады, которые необходимы для потери межклеточных контактов, а также активации пролиферации и миграции клеток: Rho ГТФазы, киназы ERK/ MAP, PAR6 и PI3 [7].
Интересно, что фиброз, опосредуемый различными этиологическими факторами, ассоциирован с активацией ТЫ7-клеток, которая происходит при воздействии TGF-P и IL-6 на наивные Th-клетки [4]. Данные клетки рассматриваются как одна из причин фибротических осложнений, их активность ассоциирована с тяжестью поражения легких [17].
В настоящем исследовании проведен анализ экспрессии генов белков, участвующих во внутриклеточных сигнальных путях, сопряженных с профибротическим ответом, активацией эпители-ально-мезенхимального и эндотелиально-мезен-химального переходов, при моделировании туберкулезного гранулематоза и фармацевтических воздействиях.
материал и методы
Исследование проводили на мышах-самцах линии BALB/c двухмесячного возраста массой тела 18-22 г, полученных из Государственного научного центра вирусологии и биотехнологии «Вектор» (Кольцово). Генерализованный туберкулезный гранулематоз моделировали однократным внутривенным (ретроорбитально) введением 0,5 мг вакцины БЦЖ в 0,2 мл изотонического водного раствора NaCl (ФР) [1], через 4 мес. часть мышей начинала получать препараты лечения внутрибрюшинно либо ингаляционно по описанной ниже схеме, выведение из эксперимента путем декапитации - через 2 мес. после начала назначения препаратов (через 6 мес. после введения вакцины БЦЖ). Животные были разделены на шесть групп, по пять особей в каждой. Группа «К» - интактные мыши, которым внутривенно ретроорбитально вводили 0,2 мл ФР. Группа
«БФ» - мыши, инфицированные вакциной БЦЖ и получавшие внутрибрюшинные инъекции ФР. Группа «БГ» - мыши, инфицированные вакциной БЦЖ и получавшие 2 раза в неделю внутрибрюшинные инъекции раствора гидразида изонико-тиновой кислоты (ГИНК) (14 мг/кг массы тела, 50 мкл). Группа «БД» - мыши, инфицированные вакциной БЦЖ и получавшие 2 раза в неделю внутрибрюшинные инъекции декстразида (конъ-югат окисленного декстрана с молекулярной массой 40 кДа и ГИНК, 2%-й раствор, 50 мкл). Группа «БМВ» - мыши, инфицированные вакциной БЦЖ и получавшие 2 раза в неделю вну-трибрюшинные инъекции раствора молекулярно-наносомальных фармацевтических композиций окисленного декстрана (МНФК: сме сь 2%-го декстразида и 1%-го фосфатидилхолина; 50 мкл). Группа «БМИ» - мыши, инфицированные вакциной БЦЖ и получавшие 2 раза в неделю ингаля-ционно раствор МНФК (животных помещали на 5 мин в затравочную камеру с распыленным раствором МНФК из расчета 50 мкл на мышь).
РНК из ткани легкого выделяли с использованием TRIzol Reagent согласно инструкции. Для получения кДНК проводили обратную транскрипцию с использованием набора реагентов iScript cDNA Syntesis Kit согласно инструкции. Изменения экспрессии мРНК генов исследовали методом TaqMan ПЦР в режиме реального времени на амплификаторе CFX96 («Bio-Rad Laboratories», США). Реакцию амплификации выполняли в следующих условиях: реакционная смесь ПЦР объемом 20 мкл содержала буфер для ПЦР, 2,5 мМ MgCl2, 0,2 мМ dNTP's, 1,25 е.а. Taq-полимеразы. Амплификацию проводили согласно следующей программе: 3 мин при 95 °С начальной денатурации, далее 40 циклов: 10 с при 95 °С для денатурации, 20 с при 60 °С для гибридизации праймеров, съем флуоресцентного сигнала, 20 с при 72 °С для элонгации. Уровень экспрессии мРНК генов нормировали относительно референсного гена Gapdh. Уровень экспрессии рассчитывали согласно методу Pfaffl. Подобранные с помощью программы PrimerQuest Tool (Integrated DNA Technologies, США) пары праймеров (прямых и обратных) и TaqMan-зондов приведены в таблице.
Статистическую обработку результатов исследования проводили, вычисляя среднее арифметическое значение (М), ошибку среднего арифметического значения (m), и представляли в виде M ± m. Различия между группами оценивали с помощью критерия Стьюдента, достоверными считались результаты при р < 0,05. Связь между различными признаками в исследуемой выборке определяли с помощью корреляционного анализа величиной коэффициента корреляции Пирсона (г).
Таблица
Перечень генов, подобранных пар прямых (F) и обратных (R) праймеров, TaqMan-зондов (Pr)
Table
List of genes, forward (F), reverse (R) primer sequences and TaqMan probes (Pr)
Ген GenBank ассоциированный номер Последовательность праймера
Gapdh NM 001289726.1 NM_008084.3 F: 5'-AACTTTGGCATTGTGGAAGGGCTC-3' R: 5'-ACCAGTGGATGCAGGGATGATGTT-3' Pr: R6G-5'-ATGACCACAGTCCATGCCATCACTGCCA-3'-Q
Mmp9 NM_013599.4 F: 5'-CTCCAACCTCACGGACAC-3' R: 5'-GACTGCTTCTCTCCCATCATC-3' Pr: Fam-5'-AGCTGGCAGAGGCATACTTGTACC-3'-BHQ1
Col3a1 NM_009930.2 F: 5'-CCCTTCTTCATCCCACTCTTATT-3' R: 5'-GATCCTGAGTCACAGACACATATT-3' Pr: Fam-5'-TCATCTACGTTGGACTGCTGTGCC-3'-BHQ1
Tgfb1 NM_011577.2 F: 5'-CCTGAGTGGCTGTCTTTTGA-3' R: 5'-CGTGGAGTTTGTTATCTTTGCTG-3' Pr: Fam-5'-CCCTGTATTCCGTCTCCTTGGTTCA-3'-BHQ1
Zeb1 NM_011546.3 F: 5'-AGACACCGCCGTCATTTATC-3' R: 5'-CAGGTGAGCAACTGGGAAA-3' Pr: Fam-5'-ACACCAGAAGCCAGCAGTCATGAT-3'-BHQ1
Snai1 NM_011427.3 F: 5'-CTGCACGACCTGTGGAAAG-3' R: 5'-GTTGGAGCGGTCAGCAAA-3' Pr: Fam-5'-ACCCACACTGGTGAGAAGCCATTC-3'-BHQ1
результаты и их обсуждение
На рисунке представлены результаты анализа экспрессии мРНК MMP-9 (рисунок, а), проколла-гена типа III (рисунок, б), TGF-ß (рисунок, в) и транскрипционных факторов ZEB1 (рисунок, г) и Snai1 (рисунок, д). Развитие генерализованного туберкулезного гранулематоза закономерно сопровождалось индукцией ЭМП и активацией профибротических процессов, что проявлялось в повышении экспрессии цепи а1 коллагена III типа и TGF-ß (см. рисунок, б, в). В легких мышей через 6 мес. после инъекции вакцины БЦЖ экспрессия гена участвующего в индукции ЭМП транскрипционного фактора ZEB1 не изменялась (см. рисунок, г), а содержание мРНК фактора Snai1 даже уменьшалось (см. рисунок, д). Экспрессия гена TGF-ß уменьшалась только в результате введения декстразида. Однако несмотря на снижение экспрессии гена основного индуктора активации фибробластов, TGF-ß [3, 11], декстразид не разрывал биохимического каскада ЭМП, не оказывая статистически значимого влияния ни на экспрессию исследованных генов транскрипционных факторов, участвующих в ЭМП, ни на экспрессию генов MMP-9 и про-коллагена III.
Содержание мРНК MMP-9 было одинаковым практически во всех группах, за исключением инфицированных БЦЖ животных, получавших
МНФК внутрибрюшинно. Данный факт можно рассматривать как потенциально позитивный терапевтический эффект, поскольку известно, что Mycobacterium tuberculosis индуцирует гиперпродукцию клетками хозяина протеаз, главным образом MMP, что приводит к образованию полостей и формированию антибиотикорезистентности [13]. Под действием тестируемых соединений содержание мРНК проколлагена III снижалось (в случае ГИНК и МНФК внутрибрюшинно -статистически значимо), возвращаясь к уровню, характерному для животных контрольной группы, что косвенно свидетельствует об угнетении дифференцировки фибробластов в миофибро-бласты. Следует отметить, что, согласно полученным нами данным, традиционно использующийся в терапии туберкулеза ГИНК оказывает влияние на течение туберкулезного гранулема-тоза, минуя TGF-P-зависимый путь, не влияя на уровень экспрессии гена TGF-P, но подавляя экспрессию гена проколлагена III. Внутрибрю-шинное введение МНФК приводило к снижению экспрессии ZEB1 у инфицированных животных, что согласуется с уменьшением экспрессии в их легочной ткани мРНК MMP-9; на сопряженность процессов с участием MMP-9 и ZEB1 указывает и наличие значимой корреляционной связи между величинами этих показателей (r = 0,68; p = 0,0013). К сожалению, менее инвазивный ингаляционный путь введения МНФК оказал-
1,6-,
1,2-
а\ а.
0,8-
■
О н
1,8-
1,4-
1,0-
0,6
* #
0,4
к бф бг бд бмв бми
2,6-i ф в
2,2-
к бф бг бд бмв бми
1,б-|
1,4-
1,2-
•а
я и
1,0-
0,8-
0,6
2,2 п
Н 1,8-1
св К
1,4-
§
г| 1,0
0,6
к бф бг бд бмв бми
1,6-, г
1,41,21,00,8-
0,6
ifl
к бф бг бд бмв бми
к бф бг бд бмв бми
Рис. Экспрессия мРНК белков, сопряженных с фибропластическими процессами, в легких мышей при развитии туберкулезного воспаления. Результаты нормированы на контроль, выбросы исключены с использованием критерия Шовене. Обозначены статистически значимые (p < 0,05) отличия от величин соответствующих значений: * - контроля, # - группы «БФ», А - группы «БГ» Fig. Expression of protein genes participating in fibroplastic processes in mice lung during the development of tuberculous inflammation. Results are normalized to control, outliers excluded using Chauvenet's criterion. * - p < 0.05 compared with control, # - p < 0.05 compared with BS group
ся неэффективен в отношении исследованных нами показателей.
Таким образом, обнаружено, что моделирование генерализованного туберкулезного гра-нулематоза сопровождается индукцией ЭМП и активацией профибротических процессов, что через 6 мес. проявлялось в повышении экспрес-
сии цепи а1 коллагена III типа и TGF-p. Назначение животным в течение 2 мес. традиционных (ГИНК) и оригинальных (декстразид, МНФК) препаратов с противотуберкулезной активностью обладает ингибирующей активностью разной степени выраженности в отношении различных маркеров данных процессов.
список литературы
1. Филимонов П.Н., Шкурупий В.А., Куру-нов Ю.Н., Пупышев А.Б., Панасенко С.Г. Исследование процессов фиброзирования в печени и легких при лечении лизосомотропным препаратом изони-азида хронического туберкулеза у мышей. Пробл. туберкулеза. 1999; (1): 63-65.
Filimonov P.N., Shkurupiy V.A., Kurunov Yu.N., Pupyshev A.B., Panasenko S.G. Investigation of fibrosis processes in the liver and lungs in the treatment of chronic tuberculosis in mice with a lysosomotropic isoniazid preparation. Problemy tuberkuleza = Problems of Tuberculosis. 1999; (1): 63-65. [In Russian].
2. Corbel M., Belleguic C., Boichot E., Lagente V. Involvement of gelatinases (MMP-2 and MMP-9) in the development of airway inflammation and pulmonary fibrosis. Cell Biol. Toxicol. 2002; 18 (1): 51-61.
3. Das V., Bhattacharya S., Chikkaputtaiah C., Hazra S., Pal M. The basics of epithelial-mesenchymal transition (EMT): A study from a structure, dynamics, and functional perspective. J. Cell. Physiol. 2019. doi 10.1002/jcp.28160
4. Goncalves R.S.G., Pereira M.C., Dantas A.T., Almeida A.R., Marques C.D.L., Rego M., Pitta I.R., Duarte A., Pitta M.G.R. IL-17 and related cytokines involved in systemic sclerosis: Perspectives. Autoimmunity. 2018; 51: (1). 1-9. doi: 10.1080/08916934.2017.1416467.
5. Gonzalez D.M., Medici D. Signaling mechanisms of the epithelial-mesenchymal transition. Sci. Signal. 2014; 7 (344): re8. doi: 10.1126/scisignal.2005189.
6. Kage H., Borok Z. EMT and interstitial lung disease: a mysterious relationship. Curr. Opin. Pulm. Med. 2012; 18 (5): 517-523. doi: 10.1097/ MCP.0b013e3283566721.
7. Mamuya F.A., Duncan M.K. aV integrins and TGF-beta-induced EMT: a circle of regulation. J. Cell. Mol. Med. 2012; 16 (3): 445-455. doi: 10.1111/j.1582-4934.2011.01419.x.
8. Pardali K., Moustakas A. Actions of TGF-beta as tumor suppressor and pro-metastatic factor in human cancer. Biochim. Biophys. Acta. 2007; 1775 (1): 21-62. doi: 10.1016/j.bbcan.2006.06.004.
9. Robert S., Gicquel T., Victoni T., Valenca S., Barreto E., Bailly-Maitre B., Boichot E., Lagente V. Involvement of matrix metalloproteinases (MMPs) and inflammasome pathway in molecular mechanisms of fibrosis. Biosci. Rep. 2016; 36 (4): e00360. doi: 10.1042/BSR20160107.
10. Rosenbloom J., Castro S.V., Jimenez S.A. Narrative review: fibrotic diseases: cellular and molecular mechanisms and novel therapies. Ann. Intern. Med. 2010; 152 (3): 159-166. doi: 10.7326/0003-4819-1523-201002020-00007.
11. Saito A., Horie M., Nagase T. TGF-beta signaling in lung health and disease. Int. J. Mol. Sci. 2018; 19 (8): E2460. doi: 10.3390/ijms19082460.
12. Samarakoon R., Higgins P. J. Integration of non-SMAD and SMAD signaling in TGF-beta1-induced plasminogen activator inhibitor type-1 gene expression in vascular smooth muscle cells. Thromb. Haemost. 2008; 100 (6): 976-983.
13. Squeglia F., Ruggiero A., Berisio R. Collagen degradation in tuberculosis pathogenesis: the biochemical consequences of hosting an undesired guest. Biochem. J. 2018; 475 (19): 3123-3140. doi: 10.1042/ BCJ20180482.
14. Stone R.C., Pastar I., Ojeh N., Chen V., Liu S., Garzon K.I., Tomic-Canic M. Epithelial-mesenchymal transition in tissue repair and fibrosis. Cell Tissue Res. 2016; 365 (3): 495-506. doi: 10.1007/s00441-016-2464-0.
15. Weiskirchen R., Weiskirchen S., Tacke F. Organ and tissue fibrosis: Molecular signals, cellular mechanisms and translational implications. Mol. Aspects Med. 2019; 65: 2-15. doi: 10.1016/j.mam.2018.06.003
16. Willis B.C., Liebler J.M., Luby-Phelps K., Nicholson A.G., Crandall E.D., du Bois R.M., Borok Z. Induction of epithelial-mesenchymal transition in alveolar epithelial cells by transforming growth factor-beta1: potential role in idiopathic pulmonary fibrosis. Am. J. Pathol. 2005; 166 (5): 1321-1332.
17. Wilson M.S., Madala S.K., Ramalingam T.R., Gochuico B.R., Rosas I.O., Cheever A.W., Wynn T.A. Bleomycin and IL-1beta-mediated pulmonary fibrosis is IL-17A dependent. J. Exp. Med. 2010; 207 (3): 535-552. doi: 10.1084/jem.20092121.
Сведения об авторах:
Кожин П.М., к.м.н., ORCID 0000-0002-9989-9778, e-mail: kozhinpm@gmail.com Чечушков А.В., к.м.н., ORCID 0000-0002-0238-4533, e-mail: achechushkov@gmail.com Зайцева Н.С., к.б.н., e-mail: natasha115@list.ru
Храпова М.В., к.б.н., ORCID 0000-0003-3397-8067, e-mail: khrapova@centercem.ru Черданцева Л.А., к.м.н., ORCID 0000-0002-4729-3694, e-mail: cherdanceff@yandex.ru Меньщикова Е.Б., д.м.н., ORCID 0000-0003-2367-0114, e-mail: lemen@centercem.ru Троицкий А.В., к.м.н., e-mail: pharm2008@yandex.ru
Шкурупий В.А., академик РАН, проф., д.м.н., ORCID 0000-0002-5078-4216, e-mail: shk@centercem.ru Information about authors:
Kozhin P.M., candidate of medical sciences, ORCID 0000-0002-9989-9778, e-mail: kozhinpm@gmail.com Chechushkov A.V., candidate of medical sciences, ORCID 0000-0002-0238-4533, e-mail: achechushkov@gmail.com Zaytseva N.S., candidate of biological sciences, e-mail: natasha115@list.ru
Khrapova M.V., candidate of biological sciences, ORCID 0000-0003-3397-8067, e-mail: khrapova@centercem.ru Cherdantseva L.A., candidate of medical sciences, ORCID 0000-0002-4729-3694, e-mail: cherdanceff@yandex.ru Menshchikova E.B., doctor of medical sciences, ORCID 0000-0003-2367-0114, e-mail: lemen@centercem.ru Troitsky A.V., candidate of medical sciences, e-mail: pharm2008@yandex.ru
Shkurupy V.A., academician of RAS, professor, doctor of medical sciences, ORCID 0000-0002-5078-4216, e-mail: shk@centercem.ru
