CC BY
87
лабораторные и экспериментальные исследования
УДК: 616.33-006.6-091.8-076
экспрессионные характеристики диффузного и кишечного типов рака желудка
М.В. Эавьялова1-2, и.В. Степанов, С.В. Вторушин12, о.В. Савенкова1, Е.С.григорьева1 , А.В. Августинович1, С.ф.Берестень3, С.г Афанасьев1, н.В.чердынцева1, В.М. перельмутер12
фгБУ «НИИ онкологии СО РАМН», г. Томск1 фгБОУ ВпО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздраввсоцразвития России, г. Томск2 Институт молекулярной биологии им. В.А. энгельгардта РАН, г. Москва3 634050, г. Томск, Московский тракт, 2, e-mail: [email protected]
Проведена оценка экспрессии стандартных маркеров Ki67, p53, CDX2, MUC2, MUC5, а также белков циклофилина А и AKR1B10 в разных структурах паренхиматозного компонента опухоли в операционном материале, полученной от 107 у больных с различными гистологическими типами рака желудка (РЖ) T1_3N0_3M0 стадии. При диффузном типе рака чаще наблюдался более молодой возраст больных и более выраженное лимфогенное метастазирование, кроме того, при этом гистотипе чаще регистрировалась экспрессия р53 в клетках опухоли, чем у пациентов с кишечным гистотипом, тогда как для других маркеров - Ki67, MUC5, MUC2 - не выявлено различий в зависимости от гистологического типа опухоли. При диффузном типе РЖ процент экспрессии CypA был ниже в сравнении с экспрессией этого маркера в цитоплазме клеточных элементов карциномы кишечного типа. Обнаружена закономерность снижения экспрессионной способности опухолевых клеток в отношении CDX2, MUC2, AKR1B10, циклофилина А, преимущественно в группе с кишечным типом новообразования, по мере нарастания глубины инвазии в стенку органа. Для р53, bcl2 и MUC5 такого изменения не выявлено. Таким образом, получены новые данные о связи экспрессионной способности клеток опухоли с параметрами инвазивного роста опухоли, природа данного феномена нуждается в дальнейшем изучении.
Ключевые слова: рак желудка, интестинальный, диффузный типы, экспрессия маркеров, иммуногистохимия.
EXPRESSION CHARACTERISTICS OF DIFFUSE-AND INTESTINAL- TYPE GASTRIC CARCINOMAS M.V. Zavyalova12, I.V Stepanov, S.V Vtorushin12, O.V Savenkova1, E.S. Grigoryeva1 , A.V Avgustinovich1, S.F. Beresten3,
S.G. Afanasyev1, N.V Cherdyntseva1, VM. Perelmuter12 Cancer Research Institute, SB RAMS, Tomsk1 Siberian State Medical University, Tomsk2 VA. Engelhardt Institute of Molecular Biology, Russian Academy of Sciences, Moscow3 2, Moskovsky Tract Street, 634050-Tomsk, Russia, e-mail: [email protected]
Expression of the standard markers: Ki67, p53, CDX2, MUC2 and MUC5 as well as cyclophilin A and AKR1B10 proteins in different structures of parenchimatous component of a tumor in surgical specimen obtained from 107 patients with different histological types of T1-3N0-3M0 stage gastric cancer was assessed. The diffuse-type gastric carcinoma was characterized by younger age of patients and more pronounced lymphogenic metastasis. Furthermore, p53 expression in cancer cells was registered more frequently in patients with diffuse-type than in patients with intestinal-type gastric carcinoma. However, no significant difference in expression of ki67, MUC5 and MUC2 markers between two types of gastric carcinoma was found. The level of CypA gene expression was lower in diffuse-type gastric carcinoma than in intestinal-type gastric carcinoma. In intestinal-type gastric carcinoma, the lower the levels of CDX2, MUC2, AKR1B10 and cyclophilin A, the deeper tumor invasion in the gastric wall. No such changes were found for р53, bcl2 and MUC5 markers. Thus, new findings on the relation of expression ability of tumor cells with tumor growth parameters were obtained, that requires further studies.
Key words: gastric cancer, intestinal-and diffuse-type gastric cancer, expression of markers, immunohistochemistry.
Рак желудка является одним из наиболее часто встречающихся злокачественных новообразований и характеризуется высокими показателями летальности [3, 4]. Одним из принципов гистологической классификации рака желудка является деление опухолей на кишечный и диффузный типы [15]. Данные типы рака желудка имеют существенные отличия по ряду клинических, морфологических и экспрессионных параметров. Известно, что рак желудка диффузного типа чаще возникает у молодых пациентов, он склонен к более агрессивному течению и более частому метастазированию [24, 26].
Согласно современным представлениям, молекулярный патогенез интестинального и диффузного типов рака желудка, несмотря на целый ряд общих черт, существенно различается. Спорадические злокачественные новообразования желудка диффузного типа ассоциированы с нарушениями функционирования генов RUNX3, CDH1 и FGFR2/ KSAM, CDKN2A [5, 6, 11]. К характерным для спорадических новообразований желудка кишечного типа генетическим изменениям относятся инактивация гена HMLH1 и мутации CDX2 ^audal type homeobox transcription factor 2) - транскрипционного фактора, вовлеченного в процесс диффе-ренцировки эпителия в кишечнике, поджелудочной железе и желчных путях, а также в генах ps2, RARB, HER-2/neu и др. В ряде исследований была показана связь уровня экспрессии CDX2 с риском развития рака желудка [22, 25]. Обнаружилось, что экспрессия CDX2 была значительно снижена в образцах с неполной кишечной метаплазией, при которой экспрессируются оба желудочных муцина (MUC5AC и MUC6) и кишечный муцин (MUC2), в отличие от образцов с полной кишечной метаплазией, при которой экспрессируется только кишечный муцин (MUC2) [12, 13, 19, 23]. Экспрессия CDX2 при раке желудка была обратно пропорциональна экспрессии желудочных муцинов. Неполная кишечная метаплазия связана с более высоким риском развития рака желудка. Наблюдение снижения экспрессии CDX2 при неполной кишечной метаплазии, дисплазии эпителия желез и раке желудка позволило предположить, что CDX2 играет антиканцерогенную роль [7, 8, 12]. CDX2 взаимодействует с генами опухолевой супрессии APC и E-cadherin, а также с bcl-2 [5, 11]. Потеря экспрессии CDX2 может быть сигналом прогрессии
опухоли в случаях раннего рака желудка и рака с кишечным фенотипом [21, 22, 25].
При раке желудка кишечного типа чаще, чем при раке диффузного типа, отмечается экспрессия белка опухолевой супрессии р53, одного из ключевых регуляторов процессов репарации ДНК и апоптоза, выше экспрессия маркера пролиферации Ki67 [9, 14, 16, 24]. Следует отметить, что данные различных авторов о возможности использования указанных маркеров апоптоза, пролиферации и клеточной дифференцировки для оценки прогноза клинического течения РЖ разных гистотипов не всегда согласуются между собой, и исследования в этом направлении остаются актуальными, так же как и поиск новых прогностических маркеров при раке желудка.
В наших предыдущих исследованиях при проведении 2D протеомного анализа и биоинформати-ческого поиска были выявлены 2 гена, кодирующие потенциальные белковые маркеры рака желудка: циклофилин А и AKR1B10. При этом впервые были получены сведения о дифференциальной экспрессии указанных генов в злокачественных новообразованиях желудка и нормальной слизистой при использовании парных образцов ткани одного и того же пациента, у больных раком желудка в российской популяции [1, 2]. AKR1B10 - НАД(Ф)-зависимая оксидоредуктаза, участвующая в метаболическом пути ретиноевой кислоты, играющей важную роль в регуляции клеточной дифферен-цировки и осуществляющей рост-супрессивные эффекты в трансформированных клетках [10]. Циклофилин А (CypA, PPIA) относится к семейству иммунофилинов и играет важную роль в формировании компетентного фолдинга белков, хемотаксисе и сигнальной трансдукции. В последние годы получены данные о гиперэкспрессии CypA в злокачественных опухолях различных локализаций и его прогностическом значении, однако сведений о связи с раком желудка нами не найдено [17, 20].
Таким образом, в настоящее время существует потребность в поиске новых подходов к прогнозированию прогрессии кишечного и диффузного типов карциномы желудка. С одной стороны, это предполагает поиск новых ассоциированных с РЖ маркеров, с другой - совершенствование способа оценки экспрессии белковых маркеров на основе учета экспрессионных характеристик разных структур паренхиматозного компонента новооб-
разования, располагающихся на различной глубине инвазии.
Целью исследования являлась сравнительная оценка экспрессии стандартных экспрессионных маркеров Ki67, p53, CDX2, MUC2, MUC5, а также белков циклофилина А и AKR1B10 в разных структурах паренхиматозного компонента опухоли у больных с различными гистологическими типами рака желудка.
Материал и методы
Исследован операционный материал от 107 больных раком желудка (РЖ) T1_3N0_3M0 стадии, в возрасте от 31 до 82 лет (средний возраст - 58,5 ± 10,7 года), находившихся на лечении в торако-абдоминальном отделении НИИ онкологии СО РАМН с 2003 по 2009 г. Работа проведена с соблюдением принципов добровольности и конфиденциальности в соответствии с «Основами законодательства РФ об охране здоровья граждан» (Указ Президента РФ от 24.12.93 N° 2288), получено разрешение этического комитета института, от всех пациентов получено информированное согласие на включение материала в исследование. Больные не получали неоадъювантной химиотерапии. В 66 (61,8 %) случаях была выполнена субтотальная дистальная резекция желудка, в 38 (36 %) - га-стрэктомия, в 1 (0,8 %) - проксимальная резекция желудка, в 1 (0,8 %) - панкреато-дуоденальная резекция, в 1 (0,8%) - операция по типу Льюиса.
Морфологическому исследованию подвергался операционный материал. Оценивалась ткань первичного опухолевого узла и все удаленные лимфатические узлы. Взятые образцы тканей помещались в нейтральный формалин. Материал проводился по стандартной методике и заливался в парафин. Срезы толщиной 5-6 мкм окрашивались гематоксилином и эозином. Гистологический тип рака желудка (кишечный или диффузный) устанавливался согласно классификации Lauren [15].
В паренхиматозном компоненте опухолей диффузного и кишечного типов выделялись железистоподобные, трабекулярные, солидные, кри-брозные структуры и дискретно расположенные группы опухолевых клеток, отмечалось наличие перстневидных клеток. Оценивалась глубина инвазии опухоли по отношению к толще стенки желудка разными типами опухолевых структур. В регионарных лимфатических узлах определялось наличие метастатического поражения.
Иммуногистохимическое исследование проводилось по стандартной методике. При исследовании применялись антитела фирмы <^ако» к Ю67 (клон М1В-1, RTU, мышиные), фирмы «Novocastra» к р53 (клон СМ1, рабочее разведение 1:150), к Ьс12 (клон Ьс12/100/05, рабочее разведение 1:80), к CDX2 (клон АМТ28, рабочее разведение 1:100), к РР1А (циклофилин А) (рабочее разведение 1:1200), к МиС2 (клон FPм5l3, RTU, мышиные), к МиС5 (клон FPM488, RTU, мышиные). Для детекции экспрессии белка AKR1B10 использовались высокоаффинные моноклональные антитела, полученные в Институте молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН (НОУ-ХАУ, Протокол № 02.445.11.7354-4 от 25 марта 2008 г.). Чувствительность антител в дот-блоте составила 100 пкг, в Вестерн-блоте - 100 пкг. Использовалось рабочее разведение антител 1:300.
Экспрессия всех маркеров оценивалась по процентному содержанию положительно окрашенных клеток в каждом варианте структур паренхиматозного компонента первичной опухоли на различной глубине инвазии. Число клеток с позитивной экспрессией изучаемого маркера определялось на 100 клеток в 10 полях зрения при увеличении *400.
Обработка полученных данных выполнялась с использованием пакета программ <^а^йса 6.0». Применялся дисперсионный, корреляционный анализ по Спирмену, критерий %2. Обсуждаются результаты со значимостью различий при р<0,05 и с тенденцией различий при р<0,1.
Результаты и обсуждение
Было обнаружено 64 (60 %) случая с кишечным и 43 (40 %) - с диффузным типом рака желудка. Больные с диффузным типом опухоли были моложе. Средний возраст этих пациентов составил 54,3 ± 10,8 года, в то время как у больных с кишечном типом новообразований он составил 61,7 ± 8,9 года ^=14,7; р=0,0002). Распределение больных по полу, стадии заболевания, размерам, локализации первичной опухоли, частоте лимфогенного метастазирования в изучаемых группах было одинаковым. В то же время при диффузном типе рака желудка отмечалась тенденция к метастатическому поражению большего числа лимфатических узлов - 5,5 ± 4,1 и 9,7 ± 11,9 соответственно ^=3,4; р=0,07). Локорегионарные рецидивы и отдаленные метастазы выявлялись при кишечном и диффузном типах карциномы с одинаковой частотой.
Новацией настоящего исследования явилось то, что определяемые экспрессионные параметры оценивались не только по отношению к опухоли в целом, но и в клетках, образующих разные структуры паренхиматозного компонента новообразования, располагающиеся на различной глубине инвазии. Оказалось, что пролиферативная активность опухоли, определяемая по проценту экспрессии Ю67, не различалась при кишечном и диффузном типе рака желудка - 33,7 ± 27,7 и 24,5 ± 27,9 соответственно (р=0,21). При кишечном типе новообразования отмечалось снижение пролиферативной активности в клетках, формирующих железистоподобные структуры при нарастании инвазии опухоли в стенку органа. Доля клеток, экспрессирующих Ю67, была выше в железистоподобных структурах, располагающихся в слизистой оболочке - 33,7 ± 22,7 %, по сравнению с экспрессией в подобного рода структурах, находящихся в серозной оболочке - 4,8 ± 3,3 % (р=0,02). При диффузном типе рака уровень экспрессии Ю67 в
мелких группах опухолевых клеток, находящихся в слизистой оболочке, был также выше - 24,5 ± 27,9 %, по сравнению с этим показателем в аналогичных структурах, располагающихся в серозной оболочке - 3,2 ± 1,6 % (р=0,07).
Частота выявления случаев с позитивной экспрессией CDX2 не различалась при кишечном и диффузном типах рака желудка - 95 % и 93 % соответственно (р=0,86). Не различалась и доля клеток с позитивной экспрессией CDX2 в анализируемых группах - 31,6 ± 1б,9 % и 27,5 ± 16,7 % соответственно ^=0,4; р=0,53). При кишечном типе рака желудка по мере увеличения глубины инвазии опухоли в стенку органа, снижался уровень экспрессии CDX2 в железистоподобных структурах. Подобного рода закономерность определялась и в случаях с диффузным типом новообразования (табл. 1, 2).
Позитивная экспрессия Ьс12 чаще наблюдалась при кишечном типе рака желудка в сравнении с диффузным - 77 % и 31 % соответственно (р=0,01).
Таблица І
процент клеток с экспрессией cdx2, bcl2, р53, Muc2, Muc5, AKR1B10, cypa в железистоподобных структурах опухоли на различной глубине инвазии у больных с кишечным типом рака желудка (M ± S.D.)
Показатель Уровень опухолевой инвазии в стенку желудка
Слизистый слой Подслизистый слой Мышечный слой Серозный слой
I II III IV
СDX2 52,5 і 28,6 % (n=14) 39,7 і 3Q,8 % (n=15) 3Q,8 і 24,6 % (n=9) р^^ 7,5 і 7,7 % (n=2)
bcl2 Q,9 і 1,Q % (n=9) Q,6 і Q,9 % (n=7) 1,6 і 1,9 % (n=2) -
р53 51,Q і 39,7 % (n=6) 6Q,3 і 42,1 % (n=6) 36,Q і 17,3 % (n=3) 48,Q і 1,4 % (n=2)
MUC2 31,2 і 27,6 % (n=15) рп=°,°9 18,5 і 17,8 % (n=12) 2Q,8 і 24,6 % (n=8) -
MUC5 48,1 і 37,7 % (n=15) 47,7 і 31,1 % (n=13) 57,2 і 34,9 % (n=7) -
AKR1B1Q 87,2 і 16,9 % (n=27) 79,9 і 22,7 % (n=27) 73,4 і 31,2 % (n=16) 36,7 і 3Q,1 % (n=3) рI=Q,QQQQ рII=Q,QQ2 рIII=Q,Q38
CypA 48,Q і 33,9 % (n=23) 28,7 і 25,6 % (n=22) рI=Q,Q1 13,5 і 13,9 % (n=11) р^ДО -
Процент же клеток с позитивной экспрессией Ьс12 не различался в исследуемых группах - 0,55 ± 0,5 % и 0,7 ± 0,4 % (р=0,24). Как при кишечном, так и при диффузном типе рака желудка выраженность экспрессии Ьс12 не отличалась в разных вариантах опухолевых структур, находящихся на разной глубине инвазии (табл. 1, 2).
Позитивная экспрессия р53 чаще наблюдалась при диффузном типе рака желудка в сравнении с кишечным - 100 % и 72 % соответственно (р=0,04). Доля опухолевых клеток, экспрессирующих р53, не различалась при кишечном и диффузном типах рака желудка - 27,2 ± 33,3 % и 34,2 ± 32,3 % (р=0,36). Как при кишечном, так и при диффузном типе рака желудка выраженность экспрессии р53 не отличалась в разных вариантах опухолевых структур с учетом глубины инвазии их в стенке желудка (табл. 1, 2).
Частота случаев с позитивной экспрессией МиС2 была одинаковой при кишечном и диффузном типах рака желудка - 86% и 94% соответственно (р=0,43), так же как и процент клеток, экспрессирующих МиС2 - 19,4 ± 11,8 % и 18,1 ± 16,9 % соответственно. В случаях с кишеч-
ным типом рака желудка отмечалось снижение экспрессии МиС2 в клетках, формирующих железистоподобные структуры при нарастании глубины инвазии. При диффузном типе новообразования доля клеток, экспрессирующих МиС2, была одинаковой в разных слоях стенки органа (табл. 1, 2).
Позитивная экспрессия МиС5 наблюдалась в 83 % при кишечном и в 88 % - при диффузном типе рака желудка (р=0,73). Процент экспрессии МиС5 не различался при кишечном и при диффузном типах рака желудка - 39,0 ± 30,9 % и 57,2 ± 30,2 % (р=0,12). Ни при кишечном, ни диффузном типах РЖ не отмечено изменений уровня экспрессии МиС5 при нарастании глубины инвазии в стенку органа (табл. 1, 2).
Во всех случаях при кишечном и диффузном типах рака желудка наблюдалась экспрессия протеина AKR1B10 в цитоплазме опухолевых клеток. У пациентов с кишечным типом рака желудка экспрессия протеина AKR1B10 в опухолевых клетках железистоподобных структур снижалась по мере нарастания инвазии опухоли в стенку желудка. В паренхиматозном компоненте диффузного рака желудка уровень экспрессии протеина AKR1B10
Таблица 2
Процент клеток с экспрессией ODX2, bcl2, р53, MUC2, MUC5, AKR1B10, CypA в дискретных группах опухолевых клеток на различной глубине инвазии у больных с диффузным типом
рака желудка
Показатель Уровень опухолевой инвазии в стенку желудка
Слизистый слой Подслизистый слой Мышечный слой Серозный слой
I II III IV
СDX2 41,0 і 28,4 % (n=12) 22,9 і 20,6 % (n=14) р=0,03 13,7 і 13,9 % (n=12) р=0,003 16,3 і 20,5 % (n=3) р=0,09
bcl2 0,7 і 0,4 % (n=4) 1,2і 1,1 % (n=3) 0,5 і 0,4 % (n=2) -
р53 34,2 і 32,3 % (n=11) 49,8 і 30,2 % (n=11) 54,2 і 27,4 % (n=6) -
MUC2 18,1 і 16,9 % (n=9) 16,8 і 19,0 % (n=15) 16,2 і 17,0 % (n=7) -
MUC5 57,2 і 30,2 % (n=10) 37,2 і 26,4 % (n=12) 23,8 і 15,5 % (n=5) 21,0 і 12,7 % (n=2)
AKR1B10 70,4 і 26,3 % (n=17) 68,8 і 26,7 % (n=17) 68,4 і 30,9 % (n=11) 66,8 і 36,6 % (n=5)
CypA 9,4 і 4,9 % (n=7) 7,6 і 8,6 % (n=12) 12,2 і 15,9 % (n=7) -
в дискретных группах опухолевых клеток не зависел от глубины их расположения в стенке желудка (табл. 1, 2). Частота встречаемости случаев с позитивной экспрессией CypA не различалась у больных с кишечным и диффузным типами рака желудка - 9Q % и 88 % ^Q^). При диффузном типе рака желудка процент экспрессии CypA был ниже в сравнении с экспрессией этого маркера в цитоплазме клеточных элементов карциномы кишечного типа - 7,7 ± 7,Q % и 24,6 ± 19,3 % соответственно (F=1Q,5; р=0,002). При раздельном изучении уровня экспрессии CypA в каждом из вариантов опухолевых структур с учетом глубины инвазии выявлены следующие закономерности. Оказалось, что при кишечном типе рака желудка экспрессия CypA в опухолевых клетках железистоподобных структур снижается при нарастании глубины инвазии. В паренхиматозном компоненте при диффузном типе рака желудка процент экспрессии CypA в дискретных группах опухолевых клеток не зависел от глубины их расположения в стенке желудка (табл. 1, 2).
Результаты проведенных исследований подчеркивают биологические различия кишечного и диффузного рака желудка. Часть полученных данных согласуется с описанными в литературе фактами: более молодой возраст и более выраженное лимфогенное метастазирование отмечаются у пациентов с диффузным типом рака. В то же время мы показали, что у больных с диффузным типом РЖ чаще наблюдалась экспрессия р53 в клетках опухоли, чем у пациентов с кишечным гистотипом, тогда как для других маркеров - Кі67, MUC5, MUC2 - не выявлено различий в зависимости от гистологического типа опухоли. Эти данные не согласуются с представленными в литературе о более выраженной экспрессии указанных маркеров в опухолях кишечного типа [9, 14, 16, 24]. Такие расхождения, скорее всего, связаны с тем, что в настоящем исследовании в группе с кишечной карциномой были представлены преимущественно случаи с умеренно- и низкодифференцированными опухолями.
Таким образом, в настоящем исследовании получены новые данные о связи экспрессионной способности клеток опухоли с параметрами инвазивного роста опухоли. Обнаружена закономерность снижения экспрессионной способности опухолевых клеток, преимущественно в группе с
кишечным типом новообразования, по мере нарастания глубины инвазии в стенку органа. Таким изменениям подвергалась экспрессия показателя пролиферативной активности Ki67, показателя кишечного органогенеза CDX2, кишечного муцина MUC2, показателя дифференцировки и рост-супрессивных эффектов трансформированных клеток AKR1B10, а также циклофилина А. Не претерпевали подобной трансформации показатели апоптоза р53 и bcl2 и желудочный муцин MUC5. Природа данного феномена нуждается в дальнейшем изучении.
Работа поддержана ФЦП «Научные и научнопедагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 гг.. госконтракт №02.740.11.0769 от 12 апреля 2010 г.
ЛИТЕРАТУРА
1. ГригорьеваЕ.С.,БукуроваЮ.А., КрасновГ.С. и др. Идентификация белков с повышенным уровнем синтеза в злокачественных опухолях желудка: сравнение результатов двумерного электрофореза и биоинформатического поиска // Молекулярная биология. 2011. Т. 45, № 4. С. 738-743.
2. Григорьева Е.С., Букурова Ю.А., Чердынцева Н.В. и др. 2D-протеомика рака желудка: идентификация белков с повышенным синтезом в опухоли // Сибирский онкологический журнал. 2009. № 5 (35). С. 37-42.
3. Злокачественные новообразования в России в 2009 году (заболеваемость и смертность) / Под ред. В.И. Чиссова, В.В. Старинского, ГВ. Петровой. М.: ФГУ «МнИоИ им. П.А. Герцена», 2011. 260 с.
4. Имянитов Е.Н. Эпидемиология и биология рака желудка // Практическая онкология. 2009. Т.10, № 1. С. 1-6.
5. Степанов И.В., Завьялова М.В., Григорьева Е.С. и др. Клинико-морфологические и молекулярно-генетические особенности интестинального и диффузного типов карцином желудка // Сибирский онкологический журнал. 2010. № 4 (40). С. 55-66.
6. Alves M.K., Ferrasi A.C., Lima VP. et al. Inactivation of COX-2, HMLH1 and CDKN2A gene by promoter methylation in gastric cancer: relationship with histological subtype, tumor location and Helicobacter pylori genotype // Pathobiology. 2011. Vol. 78 (5). P. 266-276.
7. BarrosR., da CostaL.T., Pinto-de-Sousa J. et at. CDX2 autoregulation in human intestinal metaplasia of the stomach: impact on the stability of the phenotype // Gut. 2011. Vol. 60 (3). P. 290-298.
8. Barros R., Camilo V, Pereira B. et al. Pathophysiology of intestinal metaplasia of the stomach: emphasis on CDX2 regulation // Biochem. Soc. Trans. 2010. Vol. 38 (2). P 358-363.
9. Cletus A. Ki-67 proliferation index and gastric cancer: Answers or more questions // J. Surg. Oncology. 2010. Vol. 102 (3). P. 199-200.
10. Diez-DacalB., Gayarre J., Gharbi S. et al. Identification of aldo-keto reductase AKR1B10 as a selective target for modification and inhibition by prostaglandin A(1): implications for antitumoral activity // Cancer Res. 2011. Vol. 71 (12). P. 4161-4171.
11. Ferrasi A.C., Pinheiro NA., Rabenhorst S.H. et al. Helicobacter pylori and EBV in gastric carcinomas: methylation status and micros atellite instability// World J. Gastroenterol. 2010. Vol. 16 (3). P. 312-317.
12. Kang J.M., Lee B.H., Kim N., LeeH.S. CDX1 and CDX2 expression in intestinal metaplasia, dysplasia and gastric cancer // J. Korean Med. Sci. 2011. Vol. 26 (5). P. 647-653.
13. Kim H.S., Lee J.S., Freund J.N. CDX-2 homeobox gene expression in human gastric carcinoma and precursor lesions // J. Gastroenterol. Hepatol. 2006. Vol. 21. P. 438-442.
ЭКСПРЕССИОННЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ДИФФУЗНОГО И КИШЕЧНОГО ТИПОВ РАКА ЖЕЛУДКА
--------------------------------------------------------------------------------- V3
14. Kyu Eun Lee, Hyuk-Joon Lee, Yoon Ho Kim. Prognostic significance of p53, nm23, PCNA and c-erbB-2 in gastric cancer // Jap. J. Clin. Oncol. 2003. Vol. 33. P. 173-179.
15. Lauren P. The two histological main types of gastric carcinoma: diffuse and so-called intestinal-type carcinoma // Acta. Pathol. Microbiol. Scand. 1965. № 64. P. 31^9.
16. Lazar D., Taban S., Sporea I. et al. Ki-67 expression in gastric cancer. Results from a prospective study with long-term follow-up // Rom. J. Morphol. Embryol. 2010. Vol. 51 (4). P. 655-661.
17. Lee J. Role of Cyclophilin A during Oncogenesis // Arch. Pharm. Res. 2010. Vol. 33. P. 181-187.
18. Leteurtre E., Zerimech F., Piessen G. Relationships between mucinous gastric carcinoma, MUC2 expression and survival // World J. Gastroenterol. 2006. Vol. 12. P. 3324-3331.
19. Namikawa T., HanazakiK. Mucin phenotype of gastric cancer and clinicopathology of gastric-type differentiated adenocarcinoma // World J. Gastroenterol. 2010. Vol. 16. P. 4634-4639.
20. Obchoei S., Weakley S.M., Wongkham S. et al. Cyclophilin A enhances cell proliferation and tumor growth of liver fluke-associated cholangiocarcinoma // Mol Cancer. 2011. Vol. 10. P. 102.
21. Park do Y., Srivastava A., Kim G.H. et al. CDX2 expression in the intestinal-type gastric epithelial neoplasia: frequency and significance // Mod. Pathol. 2010. Vol. 23 (1). P 54-61.
22. Qiang Liu, Ming Teh, Kosei Ito CDX2 expression is progressively decreased in human gastric intestinal metaplasia, dysplasia and cancer // Modern Pathol. 2007. Vol. 20. P 1286-1297.
23. Shin N., Kim H.Y., Kim W.K. Molecular biological characteristics of differentiated early cancer on the basis of mucin expression // Korean J. Pathol. 2011. Vol. 45. P. 69-78.
24. Sym S., Hong J., Cho E. et al. Prognostic impact of immuno-histochemical expression of Ki-67 in patients with advanced gastric cancer who underwent curative resection // J. Clin. Oncol. 2011. Vol. 29. P. 1133-1137.
25. Xie Y., Li L., Wang X. et al. Overexpression of CDX2 inhibits progression of gastric cancer in vitro // Int. J. Oncol. 2010. Vol. 36 (2). P. 509-516.
26. Zhang Y.Z., Zhang L.H., Gao Y. et al. Discovery and validation of prognostic markers in gastric cancer by genome-wide expression profiling // World J. Gastroenterol. 2011. Vol. 17 (13). P. 1710-1717.
Поступила 20.04.12
