Научная статья на тему 'ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ БРУЦЕЛЛЕЗА'

ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ БРУЦЕЛЛЕЗА Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

CC BY
136
31
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ПОСТВАКЦИНАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА / БРУЦЕЛЛЕЗ / КРУПНЫЙ РОГАТЫЙ СКОТ / РБП / РИД / РА / РСК

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Трофимов И.Г., Заболотных М.В., Лещёва Н.А., Конев А.В.

Отработана технология экспресс-методов диагностики на фоне специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота. Для исследования были использованы: роз-бенгаловая проба (РБП) как наиболее чувствительный метод и реакция иммунодиффузии (РИД) с О-ПС антигеном как дифференциальный тест при оздоровлении стад крупного рогатого скота. Для выявления скрытого течения бруцеллеза, используя метод провокации, исследовали сыворотку крови коров, привитых вакциной из шт. B. abortus 82 в короткие сроки (через 21 день - до 3 месяцев) после иммунизации на фермах с разной эпизоотической ситуацией по бруцеллезу. В стадах неиммунного поголовья как рекогносцировочный тест при установлении предварительного диагноза на бруцеллез используется РБП. Результаты оценки роз-бенгал пробы учитывают только как «положительные» и «отрицательные». Установлено, что поствакцинальные реакции РБП, оцениваемой в крестах, полностью совпадают с показателями реакции агглютинации (РА). У здоровых животных, привитых вакциной из шт. 82, показатели реакций невысокие, в отличие от больных бруцеллезом животных, подтверждается это в экспериментах с искусственным заражением интактных и иммунизированных вакциной шт. 82 коров из неблагополучных по бруцеллезу пунктов. Показатели РБП «+++» и «++++» соответствуют РА в титрах 200 МЕ и выше. Более того, высокие показатели РБП поглощают показатели реакции связывания комплемента (РСК) в разведении 1 : 10 и выше, а также и РИД. Этот факт дал возможность использования РБП взамен классических реакций - РА и РСК. Применение РБП наиболее эффективно при выявлении латентно больных животных, в комплексе с реакцией иммунодиффузии с О-полисахарадным антигеном в короткие сроки после иммунизации вакциной из шт. B. abortus 82.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Трофимов И.Г., Заболотных М.В., Лещёва Н.А., Конев А.В.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

EXPRESS METHODS FOR POST-VACCINAL DIAGNOSIS OF BRUCELLOSIS

The technology of express diagnostic methods against the background of specific prophylaxis of brucellosis in cattle has been developed. The Rose Bengal Test (RBT) as the most sensitive method and immunodiffusion reaction (IDR) with O-PS antigen as a differential test for the improvement of cattle herds were used for the study. Using the provocation method for detection the latent course of brucellosis we studied the blood serum of cows vaccinated with the B abortus 82 strain vaccine in a short time (in 21 days - up to 3 months) after immunization on farms with different brucellosis epizootic situation. According to the instruction of RBT, it is used in herds of non-immune livestock as a reconnaissance test when establishing a preliminary diagnosis for brucellosis. Therefore, the evaluation results of the Rose Bengal Test of the sample are taken into account only as “positiveˮ and “negativeˮ. It was found that the post-vaccination reactions of RBT, evaluated in crosses, completely coincide with the indicators of the agglutination reaction (AR). The experiments with artificial infection of intact and immunized with a strain 82 cows from brucellosis-prone areas confirmed that in healthy animals vaccinated with the vaccine from strain 82, the reaction rates are low, in contrast to animals with brucellosis. RBT indicators “+++ˮ and “++++ˮ correspond to AR in titers of 200 IU and above. Moreover, high levels of RBT absorb the indicators of the complement fixation reaction (CFR) at a dilution of 1 : 10 and above, as well as IDR. This fact made it possible to use RBT instead of the classical reactions - AR and CFR. The use of RBT proved to be the most effective when identifying latently ill animals, in combination with the immunodiffusion reaction with the O-polysaccharide antigen in a short time after immunization with the vaccine from strain B. abortus 82.

Текст научной работы на тему «ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ БРУЦЕЛЛЕЗА»

Vestnik Omsk SAU, 2022, no. 1(45) VETERINARY AND ZOOTECHNY

Научная статья

УДК 619:616.98-07

DOI 10.48136/2222-0364 2022 1 102

ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ БРУЦЕЛЛЕЗА

ИГ. ТРОФИМОВ, М.В. ЗАБОЛОТНЫХ, НА. ЛЕЩЁВАН, А.В. КОНЕВ

Омский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина, Омск, Россия

Аннотация. Отработана технология экспресс-методов диагностики на фоне специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота. Для исследования были использованы: роз-бенгаловая проба (РБП) как наиболее чувствительный метод и реакция иммунодиффузии (РИД) с О-ПС антигеном как дифференциальный тест при оздоровлении стад крупного рогатого скота. Для выявления скрытого течения бруцеллеза, используя метод провокации, исследовали сыворотку крови коров, привитых вакциной из шт. B. abortus 82 в короткие сроки (через 21 день - до 3 месяцев) после иммунизации на фермах с разной эпизоотической ситуацией по бруцеллезу. В стадах неиммунного поголовья как рекогносцировочный тест при установлении предварительного диагноза на бруцеллез используется РБП. Результаты оценки роз-бенгал пробы учитывают только как «положительные» и «отрицательные». Установлено, что поствакцинальные реакции РБП, оцениваемой в крестах, полностью совпадают с показателями реакции агглютинации (РА). У здоровых животных, привитых вакциной из шт. 82, показатели реакций невысокие, в отличие от больных бруцеллезом животных, подтверждается это в экспериментах с искусственным заражением интактных и иммунизированных вакциной шт. 82 коров из неблагополучных по бруцеллезу пунктов. Показатели РБП «+++» и «++++» соответствуют РА в титрах 200 МЕ и выше. Более того, высокие показатели РБП поглощают показатели реакции связывания комплемента (РСК) в разведении 1 : 10 и выше, а также и РИД. Этот факт дал возможность использования РБП взамен классических реакций - РА и РСК. Применение РБП наиболее эффективно при выявлении латентно больных животных, в комплексе с реакцией иммунодиффузии с О-полисахарадным антигеном в короткие сроки после иммунизации вакциной из шт. B. abortus 82.

Ключевые слова: поствакцинальная диагностика, бруцеллез, крупный рогатый скот, РБП, РИД, РА, РСК

Original article

EXPRESS METHODS FOR POST-VACCINAL DIAGNOSIS OF BRUCELLOSIS

I.G. TROFIMOV, M.V. ZABOLOTNYKH, N.A. LESCHEVA® A.V. KONEV Omsk State Agrarian University named after P.A. Stolypin, Omsk, Russia

Abstract. The technology of express diagnostic methods against the background of specific prophylaxis of brucellosis in cattle has been developed. The Rose Bengal Test (RBT) as the most sensitive method and immunodiffusion reaction (IDR) with O-PS antigen as a differential test for the improvement of cattle herds were used for the study. Using the provocation method for detection the latent course of brucellosis we studied the blood serum of cows vaccinated with the B abortus 82 strain vaccine in a short time (in 21 days - up to 3 months) after immunization on farms with different brucellosis epizootic situation. According to the instruction of RBT, it is used in herds of non-immune livestock as a reconnaissance test when establishing a preliminary diagnosis for brucellosis. Therefore, the evaluation results of the Rose Bengal Test of the sample are taken into account only as "positive" and "negative". It was found that the post-vaccination reactions of RBT, evaluated in crosses, completely coincide with the indicators of the agglutination reaction (AR). The experiments with artificial infection of intact and immunized with a strain 82 cows from brucellosis-prone areas confirmed that in healthy animals vaccinated with the vaccine from strain 82, the reaction rates are low, in contrast to ani-

© Трофимов И.Г., Заболотных М.В., Лещёва Н.А., Конев А.В., 2022

Vestnik OmskSAU, 2022, no. 1(45) VETERINARY AND ZOOTECHNY

mals with brucellosis. RBT indicators "+++" and "++++" correspond to AR in titers of 200 IU and above. Moreover, high levels of RBT absorb the indicators of the complement fixation reaction (CFR) at a dilution of 1 : 10 and above, as well as IDR. This fact made it possible to use RBT instead of the classical reactions - AR and CFR. The use of RBT proved to be the most effective when identifying latently ill animals, in combination with the immunodiffusion reaction with the O-polysaccharide antigen in a short time after immunization with the vaccine from strain B. abortus 82.

Keywords: post-vaccination diagnostics, brucellosis, cattle, Rose Bengal Test, immunodiffusion reaction, agglutination reaction, complement fixation reaction

Введение

Бруцеллез - хроническая инфекция, в связи с этим ей присущи разнообразные формы течения болезни: бессимптомная у телят, рожденных от больных коров; хроническая; регионарная, железистая, генерализованная (острая) формы. Бруцелла - это внутриклеточный паразит, следовательно, между микро- и макроорганизмом возможны разнообразные формы сосуществования (персистирования), вплоть до внутригеномно-го слияния [1-6].

Диагностика бруцеллеза насыщена разнообразными серологическими методами: РА, РСК, РДСК, РБП, РКК, РНГА, РИД, ИФА, пЦр. Обилие методов говорит о неполноценности изучения процессов при бруцеллезе, так как в зависимости от стадии заболевания, кратности иммунизации, типа вакцины, способа введения вакцины, способа заражения и т.д. может выпадать одна или две реакции [1-3; 7-9].

Однако до сих пор поствакцинальная диагностика бруцеллеза основана на двух серологических методах - РА и РСК. Слабые агглютиногенные свойства вакцины из штамма B. abortus 82, в отличие от высокоагглютиногенного штамма B. abortus 19, позволяют проводить диагностические исследования в стадах коров через 6 мес после иммунизации [10; 11]. Для уточнения эпизоотической ситуации в случае подозрения на бруцеллез применяют РИД с О-ПС антигеном [7; 8].

Совершенно не используется метод провокации, очень значимый в эпизоотическом отношении. С.И. Джупина уделял этому вопросу особое внимание: «...по нашему мнению, основной причиной неудач борьбы с хроническими инфекциями следует считать отказ от применения метода провокации скрытых форм. Своевременная изоляция больных из стада и весьма тщательная дезинфекция редко предупреждают дальнейшее выявление положительно реагирующих» [12-14].

Однако остается неясным вопрос о диагностической эффективности другого официального метода - пластинчатой реакции агглютинации с роз-бенгал антигеном - роз-бенгал пробы (РБП). Основные преимущества РБП: простая техника постановки, быстрое получение результата, высокая специфичность и чувствительность [15-18].

В качестве официального метода диагностики бруцеллеза в ветеринарно-сани-тарных правилах [11] и других нормативных документах упоминается лишь РБП. Согласно наставлению реакцию с бенгальской розовой применяют как рекогносцировочный тест в хозяйствах, в которых животные не подвергались иммунизации. В стадах иммунного скота совершенно не прописаны условия ее наиболее оптимального применения.

В связи с этим, цель исследования - испытать эффективность роз-бенгал пробы в короткие сроки после иммунизации крупного рогатого скота противобруцеллезной вакциной из шт. 82 в комплексе с РИД с О-ПС антигеном и предложить наиболее эффективную методику ее применения.

Материалы и методы исследования

Для достижения поставленной цели были подобраны группы коров: интактные в отношении антигена бруцелл; после искусственного заражения; здоровые коровы, им-

Vestnik Omsk SAU, 2022, no. 1(45) VETERINARY AND ZOOTECHNY

мунизированные трехкратно вакциной из шт. 82; коровы с разным иммунологическим и эпизоотологическим фоном по бруцеллезу.

Сыворотку крови исследовали, применяя официальные методы: реакцию агглютинации (РА), реакцию связывания комплемента (РСК), пластинчатую реакцию агглютинации с бенгальской розовой (РБП), реакцию иммунодиффузии в агаровом геле (РИД) с О-полисахаридным антигеном, а также использовали феномен провокации.

Выраженность РБП оценивали в крестах «+», «++», «+++», «++++». Показатели реакции сравнивали с показателями классических РА, РСК и РИД с О-ПС антигеном.

Вначале был прослежен иммунный ответ здоровых коров благополучной фермы на трехкратную иммунизацию противобруцеллезной вакциной из шт. B. abortus 82 по двум схемам (табл. 1)

Таблица 1

Схема иммунизации коров

Группа/гол Схема вакцинации (возраст, доза)

3-6 мес. 18-20 мес. После 1 отела

1-я/50 82 п.д. 82 п.д. 82 п.д.

2-я/50 82 п.д. 82 п.д. 82 м.д.

Примечание: п.д. - полная доза; м.д. - малая доза

Динамику поствакцинальных реакций изучали в сроки: 14, 33, 60 и 270 дн. Специфичность и чувствительность РБП в сравнении с РА и РСК изучена в эксперименте на 15 интактных и 10 иммунизированных коровах после искусственного заражения. Исследования проведена в сроки 7, 14, 28, 39 сут после заражения вирулентной культурой бруцелл.

Диагностическая ценность РБП в сравнении с другими методами изучена при купировании очага бруцеллеза на животноводческой ферме одного из хозяйств СевероКазахстанской области.

Результаты исследований

Исходя из того, что согласно наставлению РБП применяли для диагностики бруцеллеза только как рекогносцировочную, ввиду ее высокой чувствительности ее показатели учитывали только как «положительные» и «отрицательные». В то же время при учете результатов РБП мы обратили внимание на существующую параллель с пробирочной РА, при которой выраженность агглютинации при каждом разведении сыворотки крови оценивается в крестах - от одного до четырех. Просматривая визуально выраженность данной реакции, мы также оценивали ее в крестах по 4 показателям: + (один крест) - мелкий агглютинат в малом количестве; ++ (два креста) - мелкий или средний агглютинат в среднем количестве; +++ (три креста) - средний в большом количестве или крупный агглютинат в среднем количестве;

++++ (четыре креста) - крупный агглютинат (хлопья) в большом количестве. Первоначально была поставлена цель - проследить за иммунным ответом здоровых коров благополучной фермы на трехкратную иммунизацию противобруцеллезной вакциной из шт. B. abortus 82 по двум схемам (табл. 2).

Оценивая данные таблицы, убедились, что у здоровых, вакцинированных коров синтез антител кратковременный и регистрируются они в невысоких титрах, улавливаемых в РА 50-100 МЕ, РСК 1 : 5 - реже 1 : 10. Все они перекрываются показателями РБП в один (+) и два (++) креста.

Vestnik OmskSAU 2022, по. 1(45) VETERINARY Л^ ZOOTECHNY

Таблица 2

Динамика образования антител, улавливаемых РБП, РА, РСК, у коров, реиммунизированных вакциной из штамма 82 по двум схемам

Реагировало, %

Схема иммунизации Кол-во животных Срок РА, МЕ РБП+

исследования, сут. 100 и выше 50 МЕ РСК положительно РБП РА РСК

14 73,5 26,5 10,0 46,9 100,0 21,7

№ 1 50 33 60 — 2,0 — — — —

270 - — — — — —

14 34,0 66,0 12,0 26,0 100,0 7,8

№ 2 50 33 60 270 — — — — — —

В соответствии с наставлением по диагностике бруцеллеза поствакцинальные исследования коров с применением РА и РСК проводят не ранее 6 мес после реиммуни-зации вакциной из штамма 82. Такая методика в определенной степени оправдана, если реиммунизации подвергались животные благополучного стада.

Для подтверждения чувствительности РБП был проведен экспериментальный опыт на коровах после искусственного заражения - у 15 интактных и 10 иммунизированных групп коров - по 5 на каждую схему (табл. 3)

Таблица 3

Чувствительность РБП, РА, РСК у интактных и иммунизированных коров после искусственного заражения

Схема иммунизации, количество гол Доза заражения, млн м.т. Срок исслед., сут Реагировало, %

РА, МЕ РСК

100 и выше 50 МЕ положительно РБП

Перед исследованием 0 0 0 0

Интактные 100 7 20 20 — —

(контроль), 15 80 — 60 100,0

5 животных 21 80 20 100 60,0

29 100 — 100 100

41 60 40 60 100

Перед исследованием 0 0 0 0

Интактные 200 7 20 10 10 20

(контроль), 14 100 — 100 100

10 животных 28 86,7 13,3 100 100

39 — 100 100 100

Перед исследованием 0 0 0 0

Иммунизированные 200 7 50 25 100 50

(схема № 1), 14 75 25 100 100

5 животных 28 75 25 100 100

39 50 25 75 100

Перед исследованием 0 0 0 0

Иммунизированные 200 7 80 — 60 100

(схема № 2), 14 80 20 100 80

5 животных 28 100 — 100 100

39 — 20 100 100

Vestnik Omsk SAU, 2022, no. 1(45) VETERINARY AND ZOOTECHNY

Данные таблицы подтверждают высокую специфичность используемых тестов, так как перед заражением все опытные животные имели отрицательные результаты с сывороткой крови в реакции агглютинации (РА), реакции связывания комплемента (РСК) и пластинчатой реакции с бенгальской розовой (РБП). Установили высокую чувствительность РБП, не уступающую показателям РА и РСК. Оптимальными сроками для начала выработки 100%-ного антительного ответа, регистрируемого в РБП, РА и РСК, были определены 14-21-е сут от начала ввода бруцеллезного агента в организм.

Изучали диагностическую значимость серологических методов в очаге бруцеллеза на фермах хозяйств Северо-Казахстанской области. Среди КРС с неизвестными сроками иммунизации была изучена корреляция выраженности показателей РБП и титров РА и РСК с сывороткой крови у коров, иммунизированных вакциной из шт. B. abortus 82, в остром очаге бруцеллеза (табл. 4).

Таблица 4

Корреляция выраженности показателей РБП и титров РА и РСК с сывороткой крови коров, иммунизированных вакциной из шт B.abortus 82 через 4 месяца в остром очаге бруцеллеза

Показатель Напряженность РБП в крестах, показатель / % Показатель Напряженность РБП в крестах, показатель / %

+ ++ +++ ++++ + ++ +++ ++++

РА (1 : 50) + РБП 14/4,5 6/1,9 1/0,3 0 РСК (1 5) + РБП 8/2,6 3/0,9 1/0,3 0

РА (1 : 100) + РБП 2/0,6 1/0,3 2/0,6 0 РСК (1 10) + РБП 1/0,3 0 0 0

РА (1 : 200) + РБП 0 0 1/0,3 0 РСК (1 20) + РБП 1/0,3 2/0,6 1/0,3 0

РА (1 : 400) + РБП 0 0 0 1/0,3 РСК (1 40) + РБП 0 2/0,6 0 1/0,3

РСК (1 80) + РБП 0 0 2/0,6 0

Сумма РА + РБП 16/5,1 7/2,2 4/1,3 1/0,3 Сумма РСК + РБП 10/3,2 7/2,2 4/1,3 1/0,3

Сумма всех реа-гир. в РБП 27/8,6 8/2,6 4/1,3 1/0,3 Сумма всех реагир. в РБП 27/8,6 8/2,6 4/1,3 1/0,3

% совпадения РА + РБП 59,3 87,5 100,0 100,0 % совпадения РСК + РБП 37,0 87,5 100,0 100,0

По данным табл. 4: выраженность реакций РБП с РА на один + и ++ составила более 50% (59% и 87%), тогда как на +++ и ++++ 100%. В свою очередь процент совпадения РБП с РСК на + и ++ креста соответствовал 37% и 87%, но на +++ и ++++ - 100%. В РИД выявлены 5 больных животных, они реагировали по РА, РСК и РБП.

Диагностическая ценность РБП в сравнении с другими методами изучена при купировании очага бруцеллеза на животноводческой ферме одного из хозяйств СевероКазахстанской области (табл. 5).

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Таблица 5

Динамика поствакцинальных реакций у коров в оздоравливаемом стаде после применения малой дозы вакцины из шт. 82

Срок исследования Кол-во проб Результаты исследований

РА, МЕ РСК в разведении РБП РИД

50-100 200-400 5-10 20-40 + ++ +++ ++++

Перед вакцинацией

370 38 14 25 20 30 6 8 12 30

После вакцинации

21 сут 330 249 - 89 41 99 85 16 25 11

3 мес. 239 43 3 1 2 29 20 2 3 5

5 мес. 202 114 4 1 3 2 4 2 2 1

7 мес. 198 64 0 2 0 1 3 0 0 0

Примечание: животных с показателями РБП «+++», «++++» не использовали

Vestnik Omsk SAU, 2022, no. 1(45) VETERINARY AND ZOOTECHNY

Данные табл. 5 показывают, что даже у такой реакции, как РИД - слабо чувствительной, очень высокие показатели - 30 положительнх проб. Это свидетельствует об очень высоком проценте заражения [10; 11]. Поэтому в такой группе провели исследования в короткие сроки после вакцинации, через 21 сут, используя феномен провокации латентных форм бруцеллеза. Аналогичные результаты получены во втором гурте при исследовании на бруцеллез крупного рогатого скота (табл. 6)

Таблица 6

Показатели серологических реакций коров, иммунизированных вакциной из шт. B. abortus 82,

в остром очаге бруцеллеза

№ Срок после вакцинации Реаги] ровало РБП, гол/% РИД, гол/%

в РА (1 : 50-1 : 400), гол/% в РСК (1 : 5-1 : 320), гол/%

1 1,5 мес. 67/20,7 51/15,8 79/24,5 18/5,6

2 3 мес. 63/21,0 51/17,0 84/28,0 20/6,6

3 4 мес. 54/17,3 46/14,7 40/12,8 5/1,6

Сравнивая результаты РБП с РА, РСК и РИД, отметим, что показатели РА + РСК в первых двух (табл. 5) и в первых трех исследованиях (табл. 6) почти полностью совпадают с показателями РА + РСК + РБП, несомненно, это подтверждает диагностическую ценность РБП.

Поэтому в срок после реиммунизации (до 6 мес.) вакциной из шт. 82 возможно убрать РА + РСК и заменить их РБП как самой чувствительной реакцией. Показатели РБП на (+) и (++) согласуются с реакцией РА на 50 МЕ и 100 МЕ, РСК 1 : 5 и считаются сомнительными. Показатели РБП (+++) и (++++) согласуются с показателями РАМЕ 200 и выше и для отличия больного от вакцинированного исследовали далее сыворотку в РИД с О-ПС антигеном (табл. 7).

Таблица 7

Результаты РБП и РА (реакции агглютинации) с сывороткой крови выборочно, для определения агглютиногенной напряженности в стаде

№ п.п № в ведомости № на пробирке РБП РИД с О-ПС антиген 50 МЕ 100 МЕ 200 МЕ 400 МЕ

1 1 3 ++ - ++++ ++ - -

2 2 5 ++ - ++++ ++ - -

3 3 38 ++ - +++ ++ - -

4 9 19 + ++ ++

5 10 23 +++ + ++ ++ ++ ++

6 15 49 ++++ + ++ +++ - -

7 16 53 +

8 23 сом 507 + +++ +++

9 27 сом 804 +++ + +++ +++

10 34 сом 619 +

Полученные данные позволили сделать вывод о возможности включения в систему оздоровительных мероприятий при бруцеллезе взамен РА, РСК высоко чувствительной, легко выполнимой роз-бенгал пробы в комплексе с реакцией иммунодиффу-зии с О-полисахарадным антигеном как индикатором присутствия бруцеллеза в стаде [12—15]. Данная технология оздоровления с успехом апробирована на одной из неблагополучных ферм в Северно-Казахстанской области.

Vestnik Omsk SAU, 2022, no. 1(45) VETERINARY AND ZOOTECHNY

Заключение

Слабые агглютиногенные свойства вакцины из штамма B. abortus 82, в отличие от высокоагглютиногенного штамма B. abortus 19, позволяют проводить диагностические исследования в стадах коров через 6 мес после иммунизации. Так, у здоровых иммунизированных животных поствакцинальные антитела, улавливаемые в РА и РСК, могут обнаруживаться в сыворотке крови до 3 мес. в низких недиагностических титрах (РА 50-100 МЕ и РСК 1 : 5) при отрицательных показателях РИД с О-ПС антигеном [13].

Основываясь на учении о роли вторичного иммунного ответа антителообразова-ния при бруцеллезе, был разработан метод провокации: при повторной реиммунизации организма иммунная система отвечает быстрее и титры антител выше (изучаемые реакции - РА и РСК), идет переключение синтеза иммуноглобулинов М на иммуноглобулины G, у больных животных антителообразование переключается до IgG , которые улавливаются только в РИД со специально разработанным для этих целей О-полисаха-ридным антигеном [5; 6].

Включение в поствакцинальную диагностику бруцеллеза в качестве основного диагностического теста роз-бенгал пробы позволяет упростить и одновременно повысить ее эффективность. Прежде всего, это касается эпизоотологической оценки по бруцеллезу стад в короткие сроки после иммунизации вакциной из штамма 82, которую было невозможно провести в соответствии с наставлением по диагностике бруцеллеза. Прекращение исследований в течение шестимесячного срока из-за сохранения поствакцинальных реакций несло угрозу перезаражения животных с ослабленным иммунитетом. Использование в системе поствакцинальной диагностики РИД с О-поли-сахаридным антигеном дает возможность оценивать эпизоотическую ситуацию в более короткие сроки после иммунизации, но не более того. Применение РИД в процессе оздоровительных мероприятий не дает желаемого эффекта из-за ее низкой чувствительности.

Всестороннее изучение пластинчатой реакции с бенгальским розовым антигеном (РБП) позволило рекомендовать ее в качестве основного диагностического теста при оздоровлении стад КРС в короткие сроки после вакцинации. Успешному применению РБП способствовала оценка ее выраженности в крестах, коррелирующих с титрами РА. Показатели РБП с оценкой «+++», «++++» соответствовали показателям РА в титре 200 МЕ и выше, более того, поглощали показатели РСК в разведении 1 : 20 и выше. Эти данные свидетельствуют о возможности использования РБП взамен РА и громоздкой РСК в короткие сроки после иммунизации вакциной из штамма 82, провоцирующей иммунный ответ у скрытых бруцеллоносителей.

Библиографический список

1. Авилов, В.М. Борьба с бруцеллезом крупного рогатого скота с применением вакцины из штамма 82 / В.М. Авилов, К.М. Салмаков, А.А. Новицкий. — Текст : непосредственный // Ветеринария сельскохозяйственных животных. — 2006. — № 1. — С. 17—21.

2. Бельченко, В.Б. Дифференциация реакций на бруцеллез у больного и иммунизированного скота / В.Б. Бельченко. — Текст : непосредственный // Ветеринария. — 1975. — № 3. — С. 42—46.

3. Бруцеллез / П.А. Вершилова, А.А. Голубе-ва, Е.И. Кайтмазова [и др.]. — Москва, 1972. — 439 с. — Текст : непосредственный.

References

1. Avilov, V.M. Bor'ba s brucellezom krupnogo rogatogo skota s primeneniem vakciny iz shtamma 82 / V.M. Avilov, K.M. Salmakov, A.A. Novickij. - Tekst : neposredstvennyj // Veterinariya sel'skohozyajstven-nyh zhivotnyh. - 2006. - № 1. - S. 17-21.

2. Bel'chenko, V.B. Differenciaciya reakcij na brucellez u bol'nogo i immunizirovannogo skota / V.B. Bel'chenko. - Tekst : neposredstvennyj // Veterinariya. - 1975. - № 3. - S. 42-46.

3. Brucellez / P.A. Vershilova, A.A. Golubeva, E.I. Kajtmazova [i dr.]. - Moskva, 1972. - 439 s. -Tekst : neposredstvennyj.

Vestnik OmskSAU, 2022, no. 1(45)

4. Diaz, R., Garatea, P., Jones, L.M. and Mo-riyon, J. (1979), "Radial immunodifusion test with a Brucella polysaccharide antigen for differentiating infected from vaccinated cattle", J. Clin. Microbiol, Vol. 10, pp. 37-41.

5. Cherwonogrodzky, J.W. and Nielsen, K.H. (1988), "Brucella abortus 1119-3 O-chain polysaccharide to differentiate sera from B.abortus S-19 - Vaccinated and fieldstrain infected cattle by agar gel immunodiffusion", J. Clin. Microb, Vol. 26, no. 6, pp. 1120-1123.

6. Novitsky, A.A., Pleshakova, V.I., Trofimov, I.G., Alekseeva, I.G. and Lorengel, T.I. (2019), "Areas of Concern of Brucellosis Specific Prevention", Advances in Animal and Veterinary Sciences 7 Special Issue 1, no. 1, pp. 94-99.

7. Диагностическая ценность РИД с разными О-ПС антигенами при бруцеллезе крупного рогатого скота / П.К. Аракелян, Г.В. Разницына, Т.А. Янченко [и др.]. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 2016. - № 7. - С. 25-29.

8. Дифференциация вакцинированных и больных бруцеллезом животных / В.М. Чекишев, Ш.Р. Файзрахманов, Б.А. Киселев [и др.]. - Текст : непосредственный // Ветеринария. - 1993. - № 8. -С. 25-32. - Текст : непосредственный.

9. Эффективность диагностических методов исследования бруцеллеза животных / А.И. Федоров, М.И. Искандаров, С.С. Искандарова [и др.]. -Текст : непосредственный // Ветеринария и кормление. - 2020. - № 1. - С. 21-23.

10. Наставление по применению вакцины сухой живой из штамма 82 бруцелла абортус против бруцеллеза крупного рогатого скота: официальный текст: [принят Департаментом ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации 26.02.1996]. - Москва, 1996. - 5 с. - Текст : непосредственный.

11. Санитарные правила СП 3.1. 085-96 Ветеринарные правила ВП 13.3. 1302-96. Профилактика инфекционных болезней. Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных. 2. Бруцеллез. Санитарные правила. Ветеринарные правила: официальный текст: [принят Департаментом ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации 18.06.1996]. - Москва, 1996. -30 с. - Текст : непосредственный.

12. Джупина, С.И. Теория эпизоотического процесса / С.И. Джупина. - Москва, 2004. - 123 с. -Текст : непосредственный

13. Новицкий, А.А. Использование провоцирующих свойств бруцеллезного иммуномодулято-ра для выявления латентных форм бруцеллеза / А.А. Новицкий, А.П. Красиков, М.В. Заболотных. -Текст : непосредственный // Московский экономический журнал. - 2015. - № 3. - С. 9.

VETERINARY AND ZOOTECHNY

4. Diaz, R., Garatea, P., Jones, L.M. and Mo-riyon, J. (1979), "Radial immunodifusion test with a Brucella polysaccharide antigen for differentiating infected from vaccinated cattle", J. Clin. Microbiol, Vol. 10, pp. 37-41.

5. Cherwonogrodzky, J.W. and Nielsen, K.H. (1988), "Brucella abortus 1119-3 O-chain polysaccharide to differentiate sera from B.abortus S-19 - Vaccinated and fieldstrain infected cattle by agar gel immunodiffusion", J. Clin. Microb, Vol. 26, no. 6, pp. 1120-1123.

6. Novitsky, A.A., Pleshakova, V.I., Trofimov, I.G., Alekseeva, I.G. and Lorengel, T.I. (2019), "Areas of Concern of Brucellosis Specific Prevention", Advances in Animal and Veterinary Sciences 7 Special Issue 1, no. 1, pp. 94-99.

7. Diagnosticheskaya cennost' RID s raznymi O-PS antigenami pri brucelleze krupnogo rogatogo skota / P.K. Arakelyan, G.V. Raznicyna, T.A. Yanc-henko [i dr.]. - Tekst : neposredstvennyj // Veterina-riya. - 2016. - № 7. - S. 25-29.

8. Differenciaciya vakcinirovannyh i bol'nyh brucellezom zhivotnyh / V.M. Chekishev, Sh.R. Faj-zrahmanov, B.A. Kiselev [i dr.]. - Tekst : neposredstvennyj // Veterinariya. - 1993. - № 8. - S. 25-32. -Tekst : neposredstvennyj.

9. Effektivnost' diagnosticheskih metodov is-sledovaniya brucelleza zhivotnyh / A.I. Fedorov, M.I. Iskandarov, S.S. Iskandarova [i dr.]. - Tekst : neposredstvennyj // Veterinariya i kormlenie. - 2020. -№ 1. - S. 21-23.

10. Nastavlenie po primeneniyu vakciny suhoj zhivoj iz shtamma 82 brucella abortus protiv brucelleza krupnogo rogatogo skota: oficial'nyj tekst: [prinyat Departamentom veterinarii Ministerstva sel'skogo hozyajstva i prodovol'stviya Rossijskoj Federacii 26.02.1996]. - Moskva, 1996. - 5 s. - Текст : непосредственный.

11. Sanitarnye pravila SP 3.1. 085-96 Veteri-narnye pravila VP 13.3. 1302-96. Profilaktika infek-cionnyh boleznej. Profilaktika i bor'ba s zaraznymi boleznyami, obshchimi dlya cheloveka i zhivotnyh. 2. Brucellez. Sanitarnye pravila. Veterinarnye pravila: oficial'nyj tekst: [prinyat Departamentom veterinarii Ministerstva sel'skogo hozyajstva i prodovol'stviya Rossijskoj Federacii 18.06.1996]. - Moskva, 1996. -30 s. - Текст : непосредственный.

12. Dzhupina, S.I. Teoriya epizooticheskogo processa / S.I. Dzhupina. - Moskva, 2004. - 123 s. -Tekst : neposredstvennyj

13. Novickij, A.A. Ispol'zovanie provociruyush-chih svojstv brucelleznogo immunomodulyatora dlya vyyavleniya latentnyh form brucelleza / A.A. Novickij, A.P. Krasikov, M.V. Zabolotnyh. - Tekst : neposredstvennyj // Moskovskij ekonomicheskij zhurnal. -2015. - № 3. - S. 9.

14. Studencov, K.P. O diagnostike latentnogo brucelleza i differenciacii bol'nogo i vakcinirovannogo

Vestnik Omsk SAU, 2022, no. 1(45)

14. Студенцов, К.П. О диагностике латентного бруцеллеза и дифференциации больного и вакцинированного крупного рогатого скота / К.П. Студенцов. - Текст : непосредственный // Материалы советско-французского симпозиума по бруцеллезу: бюллетень Всесоюзного Ордена Ленина института экспериментальной ветеринарии. -Вып. 10. - Москва, 1971. - С. 38-43.

15. Диагностическая ценность современных и традиционных методов исследований при бруцеллезе мелкого рогатого скота / С.А. Расулов, Д.М. Мирзоев, М.И. Искандаров [и др.]. - Текст : непосредственный // Ветеринария и кормление. -2017. - № 2. - С. 45-51.

16. Дифференциальная серологическая диагностика бруцеллеза у крупного рогатого скота, привитого вакциной из штамма 82, и ее значение в общей системе мер борьбы с данным заболеванием / М.А. Косарев, А.М. Фомин, Г.М. Сафина [и др.]. -Текст : непосредственный // Ветеринарный врач. -2019. - № 5. - С. 23-28.

17. Изучение значимости методов серологической диагностики бруцеллеза крупного рогатого скота / А.А. Новицкий, Л.В. Дегтяренко, Т.Г. Попова [и др.]. - Текст : непосредственный // Инфекционная патология животных : сборник научных трудов юбилейный выпуск / СО РАСХН. - ВНИ-ИБТЖ. - Омск, 2001. - С. 44-51.

18. Изучение диагностической значимости РБП с сывороткой крови крупного рогатого скота, привитого противобруцеллезной вакциной из шт. B. abortus 82, в стадах, имеющих различную эпизоотическую ситуацию по бруцеллезу / Т.Г. Попова, В.Г. Ощепков, А.А. Подкуйко [и др.]. - Текст : непосредственный // Материалы Международной научно-практической конференции: актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных (16-17 мая 2006 г.). - Москва : Изо-графЪ, 2006. - С. 343-347.

Для цитирования: Трофимов И.Г., Забо-лотных М.В., Лещёва Н.А., Конев А.В. Экспресс-методы поствакцинальной диагностики бруцеллеза // Вестник Омского ГАУ. 2022. № 1 (45). С. 102110. DOI 10.48136/2222-0364_2022_1_102.

Информация об авторах

Трофимов Игорь Георгиевич, д-р вет. наук, проф., ig.trofimov@omgau.org;

Заболотных Михаил Васильевич, д-р биол. наук, проф., mv.zabolotnykh@omgau.org;

Лещёва Надежда Алексеевна, канд. вет. наук, доц., na.lescheva@omgau.orgH;

Конев Алексей Владимирович, канд. вет. наук, доц., av.konev@omgau.org.

Статья поступила в редакцию 24.02.2022.

VETERINARY AND ZOOTECHNY

krupnogo rogatogo skota / K.P. Studencov. — Tekst ; neposredstvennyj // Materialy sovetsko-francuzskogo simpoziuma po brucellezu: byulleten' Vsesoyuznogo Ordena Lenina instituta eksperimental'noj veterinarii. — Vyp. 10. — Moskva, 1971. — S. 38—43.

15. Diagnosticheskaya cennost' sovremennyh i tradicionnyh metodov issledovanij pri brucelleze mel-kogo rogatogo skota / S.A. Rasulov, D.M. Mirzoev, M.I. Iskandarov [i dr.]. — Tekst i neposredstvennyj // Veterinariya i kormlenie. — 2017. — № 2. — S. 45—51.

16. Differencial'naya serologicheskaya diag-nostika brucelleza u krupnogo rogatogo skota, privito-go vakcinoj iz shtamma 82, i ee znachenie v obshchej sisteme mer bor'by s dannym zabolevaniem / M.A. Ko-sarev, A.M. Fomin, G.M. Safina [i dr.]. — Tekst i neposredstvennyj // Veterinarnyj vrach. — 2019. — № 5. — S. 23—28.

17. Izuchenie znachimosti metodov serologi-cheskoj diagnostiki brucelleza krupnogo rogatogo skota / A.A. Novickij, L.V. Degtyarenko, T.G. Popova [i dr.]. — Tekst i neposredstvennyj // Infekcionnaya pa-tologiya zhivotnyh i sbornik nauchnyh trudov yubilej-nyj vypusk / SO RASHN. — VNIIBTZh. — Omsk, 2001. — S. 44—51.

18. Izuchenie diagnosticheskoj znachimosti RBP s syvorotkoj krovi krupnogo rogatogo skota, pri-vitogo protivobrucelleznoj vakcinoj iz sht. B. abortus 82, v stadah, imeyushchih razlichnuyu epizooticheskuyu situaciyu po brucellezu / T.G. Popova, V.G. Oshchep-kov, A.A. Podkujko [i dr.]. — Tekst i neposredstvennyj // Materialy Mezhdunarodnoj nauchno-prakticheskoj konferencii: aktual'nye problemy infekcionnoj patolo-gii i immunologii zhivotnyh (16—17 maya 2006 g.). — Moskva i Izograf'', 2006. — S. 343—347.

For citation: Trofimov, I.G., Zabolot-nykh, M.V., Lescheva, N.A. and Konev, A.V. (2022), "Express methods for post-vaccinal diagnosis of brucellosis", Vestnik Omsk SAU, no. 1(45), pp. 102-110, DOI 10.48136/2222-0364_2022_1_102.

Information about the authors

Trofimov Igor G., Doc. of Vet. Sci., Prof., ig.trofimov@omgau. org;

Zabolotnykh Mikhail V., Doc. of Biol. Sci., Prof., mv.zabolotnykh@omgau.org,

Lescheva Nadezhda A., Cand. of Vet. Sci., Ass. Prof., na.lescheva@omgau.orgH;

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Konev AlexeyV., Cand. of Vet. Sci., Ass. Prof., av.konev@omgau.org.

The article was submitted 24.02.2022.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.