CC BY
194. Курмангазина С.С. Новое отечественное лечебно-профи-
лактическое стоматологическое средство: Матер. Респ. науч.-практ. конф. - Алматы, 2013. - С.81-83.
5. Леус П.А., Смирнова Т.А., Пашинина Е.Д. Влияние ми-
нерализующей зубной пасты на содержание кальция и фосфора в эмали зубов человека //Стоматология. -1980. - № 5. - С. 5-7.
6. Сарап Л.Р., К.П.Федоров Изучение клинической эффек-
тивности реминерализующей терапии с применением кальций-фосфатных составов // Concept стоматология (Алматы). - 2013. -№1. - С. 30-33.
7. Кобиясова И.В., Мателло С.К. Реминерализующая терапия
у детей. Выбор средств, схемы и особенности проведения
// Concept стоматология (Алматы). - 2014. - №2. - С. 24-27.
8. Посохова В.Ф. Профилактические материалы фирмы
«ВладМиВа» // Стоматология сегодня. - 2004. - № 2 (33). - С.3.
9. Леонтьев В.К. Первичная профилактика кариеса зубов:
перспективы развития и нерешенные проблемы //Новые методы лечения и профилактики в стоматологии. - Омск, 1984. - С. 3-5.
10. Ботабаев Б.К., Супиева Э.Т., Курмангазина С.С. и др. Первый опыт применения нового реминерализирующего препарата с целью профилактики стоматологических заболеваний/Медицина (Алматы).-2009.-№11.-С. 43-46.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРОФИЛАКТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ОТЕЧЕСТВЕННОГО ПРЕПАРАТА «РЕМИН» ПРИ КАРИЕСЕ ЗУБОВ
С.С. Курмангазина, Т.К.Супиев
Алматинский стоматологический институт последипломного обучения, клиника «Concept стоматология». Казахский национальный медицинский университет им. с.д.асфендиярова (г.
алматы, Казахстан)
Резюме: Учитывая острый недостаток в Республике Казахстан реминерализующих средств, для профилактики и лечения начальных форм кариеса зубов, разработано новое отечественное лечебно-профилактическое стоматологическое средство «Ремин». В эксперименте доказано его реминерализующее действие и противокариозный эффект.
Тиш кариесиндеги ата мекендик «Ремин» дарысынын алдыл алуу активдуулугун эксперимнталдуулук аныктоосу
С.С. Курмангазина, Т.К.Супиев Алматы дипломдон кийинки билим алуу стоматологиялык институту, «Concept стоматология» клиникасы, С. Д Асфендияров атындагы Казак улуттук медициналык университети (Алматы, Казахстан) Корутунду: Тиш кариесинин башталыш формаларын алдын алуу жана дарылоо ыкмаларынын корс кем кансыздандыруулуугун эске алып, жаны ата-мекендик дарылоо-алдын алуу стоматологиялык «Ремин» дарысы иштеп чыгарылган. Ошол дарынын реминирализациялоо жана кариеске каршы таасири эксперимент катары аныкталган.
Experimental study of preventive activity of domestic drug "Remin" in dental caries
Kurmangazina S.S., Supiyev T.K.
Almaty dental institution of postgraduate education, clinic "Concept stomatology" and Kazakh national medical university named after Assfendiyarova S.D. (Kazakhstan, Almaty) Summary: Taking into account the acute shortage of remineralization drugs in the Republic of Kazakhstan, it has developed a new domestic dental treatment drug "Remin" for the prevention and treatment of early forms of dental caries. In experiment its remineralization action and anti-caries effect is proved.
Актуальность проблемы заключается в том, что кариес зуба является самым распространенным заболеванием человека, которым поражено почти все взрослое и детское население земного шара [1,2,3]. Одним из самых перспективных путей профилактики кариеса зубов является направленное использование эффекта реминерализации для повышения резистентности зубных тканей [4,5]. Для этой цели за рубежом разработаны различные кариеспрофилактические препараты, предназначенные для детей и взрослых [6,7]. В РК слабо развита стоматологическая промышленность,
поэтому практически все стоматологические лечебно-профилактические средства высокой стоимости завозятся из зарубежных стран.
Доказано, что Са и Р являются основными компонентами эмали, следовательно они должны составлять основу реминерализующих средств. Их влияние определяется включением в кристаллическую решетку апатитов эмали, а также снижением кислотности бактериального генеза (кальцит) и образованием буферных систем (фосфат). Соли кальция и фосфора поступают в организм в оптимальном соотношении через пищу или при назна-
МЕДИЦИНА
ежемесячный научно-практическии медицинским журнал
чении специальных профилактических препаратов внутрь. В настоящее время препараты кальция и их соединения в стоматологической практике используются широко. Проникая в различные слои эмали, ионы кальция ведут к ее минерализации, новообразованию кристаллов гидроксиапатита, стабилизации и нормализации проницаемости. Итогом профилактического действия является усиление резистентности эмали зуба (кариесре-зистентность).
Основными задачами реминерализующей терапии при первичной профилактике кариеса являются:
• создание условий для полноценного формирования и минерализации твердых тканей зубов;
• обеспечение физиологического течения процесса созревания твердых тканей зуба, и стимуляции его при необходимости;
• предотвращение и устранение кариесогенной ситуации в полости рта.
Кроме этого, реминерализующие средства применяются при консервативном лечении начального, поверхностного, среднего и глубокого кариеса, гиперестезии эмали, при гипоплазии, флюорозе. Реминерализующая терапия проводится на уровне организма, с целью нормализации обмена минеральных веществ и непосредственно на твердых тканях зубов, с целью повышения их резистентности к кариесогенным агентам, восстановления нарушенной функции кристаллов.
Восполняя этот пробел, в Казахстане совместно с химиками и фармацевтами разработана новая формула и технология получения эффективного синтетического реминерализующего средства. Техническим результатом изобретения нового лечебно-профилактического средства является разработка нового эффективного, доступного, удобного в применении реминерализующего средства «Ремин», подтвержденного патентом РК [10].
При создании нового реминерализующего средства для достижения эффекта реминерализа-ции, нами учитывался ряд факторов: реминерали-зующие средства должны содержать минеральные вещества, находящиеся в виде ионов, либо становиться источником ионов кальция и фосфата в полости рта, вступать в контакт с эмалью зубов, химическое сродство компонентов со структурным строением эмали зубов.
Применение компонентов, входящих в состав предлагаемого лечебно-профилактического средства известно, но применение их новой формулы, оптимальное соотношение позволяет сохранить минерализующие компоненты в активной форме, повышая их эффективность. Препарат состоит из пульпы свежеосажденного гидроксилапатита кальция с минимальным размером частиц=10-25А°, хлорид кальция, хлорид натрия, двухзамещенный фосфат калия, не содержит фтора, предназначен для профилактики кариеса, в том числе в зонах с повышенным содержанием фтора в питьевой
воде и для тех, кому применение фторсодержащих средств нежелательно.
Следующим этапом в изучении данного препарата в качестве профилактического средства против кариеса зуба было проведение экспериментального подтверждения. Для этого на модели экспериментального кариеса изучено противока-риозное действие нового отечественного реминерализующего средства ремин.
Цель исследования - на модели экспериментального кариеса зубов у белых крыс изучить противокариозный эффект нового отечественного реминерализующего средства ремин.
Материал и методы. Для получения экспериментального кариеса зубов нами использовалась кариесогенная диета по Stephan, которая является более простой и достаточно эффективной. Эксперимент был выполнен у 36 белых крыс с начальной массой 45,0±5,5 г. Экспериментальные крысы были разделены на 3 группы: 1) - интактные (6), 2) - контрольная, получавшие кариесогенную диету (12) и 3) - подопытная, получавшие кариесогенную диету в сочетании с обработкой зубов ремином (12).
Интактные животные получали стандартный корм вивария. Животные подопытных групп получали карисоегенную диету в составе: сахароза 66 г, 32 г сухого обезжиренного молока и 2 г порошка печени из расчета на 100 г веса животного. К этой диете мы добавляли 22 г пшеничной муки. Подопытным крысам, получавшим кариесоген-ную диету, 12 зубов ежедневно после утреннего кормления обрабатывали новым отечественным реминерализующим средством «Ремин» в течение 2-х месяцев.
В исходном состоянии и еженедельно животных взвешивали для корректировки диеты. В ходе эксперимента одна крыса контрольной группы, получавшая кариесогенную диету, погибла. На 60 и 90 сутки опыта из эксперимента были выведены по 2 интактные и по 5 контрольных и подопытных животных, а через 120 суток - все оставшиеся крысы (интактные - 2, получавшие кариесогенную диету 4, получавшие кариесогенную диету в сочетании с обработкой зубов ремином - 5). Животных выводили из опыта путем ингаляции углекислым газом, содержащим 70% СО2 при скорости потока 30 л/мин в камере.
До выведения животных из опыта и в дни выведения животных из эксперимента проводился забор крови для биохимических исследований. Биохимический анализ крови проводили на биохимическом анализаторе А-25 по следующим параметрам: аланин аминотрансфераза (ALT/GPT); аспартат аминотрансфераза (AST/GOT); Alkaline phosphatase / общий белок; мочевина; креатинин; кальций и фосфор. После усыпления у крыс выделяли блоки челюстей с зубами для определения количества кариозных полостей и гистологических исследований.
У животных вели следующий количественный
Таблица 1 - Содержание общего белка в крови крыс интактных и подопытных групп на 60 сутки наблюдения, в г/л (М±т)
Сроки исследования Интактные животные Получавшие кариесо-генную диету Получавшие кариесо-генную диету + ремин
Исходные 65,2±11,2 65,2±11,2 65,2±11,2
Через 4 недели 68,0±10,4 79,8±12,2 82,5±13,1
Через 8 недель 66,7± 9,2 84,2±12,4 86,7±13,3
*)Различия статистически не достоверны (Р<0,5).
Таблица 2 - Биохимические показатели сыворотки крови интактных и подопытных животных на 60 сутки наблюдения, (М±т)
Показатели Интактные животные (2) Получавшие кариесо-генную диету (4) Получавшие кариесоген-ную диету+ремин (4)
АСТ 143,4±21,4 145,4±18,5 139,5±28,0
АЛТ 79,7 ± 11,3 123,4 ± 10,2* 83,2 ± 12,1**
Белок, г/л 68,0±10,4 79,8±12,2 82,5±13,1
Мочевина, моль/л 5,9 ± 0,9 4,7 ± 0,9 6,2 ± 1,2
Креатинин, мкмоль/л 44,3 ± 1,4 68,70 ± 5,8 40,7 ± 1,2*
Са, моль/л 9,5 ± 0,3 3,2±0,5 11,3 ± 0,7*
Р, моль/л 5,7 ± 0,3 4,5±0,2 6,0 ± 0,2**
*) Различия статистически достоверны по сравнению с показателями интактных крыс (Р<0,05).
**) Различия статистически достоверны по сравнению с показателями крыс, находящихся на кариесогенной диете (Р<0,05).
учет: процент животных, у которых обнаружены кариозные поражения зубов, из общего количества находившихся в данном эксперименте; процент пораженных зубов; среднее число пораженных зубов на одну крысу.
При описании клинической картины экспериментального кариеса придерживались следующей классификации: поверхностный кариес - кариозная полость не выходит за пределы слоя эмали; средний кариес - полость неглубоко проникает в дентин; глубокий кариес - полость проникает глубоко в дентин; перфоративный кариес - переход процесса в пульпу, периодонт и челюстную кость.
Для оценки кариозного процесса по гистологической картине придерживались клинико-морфо-логической классификации экспериментального кариеса у животных по А.А. Прохончукову и Н.А. Жижиной [11], согласно которой выделяют 5 основных стадий:
• Стадия пятна - очаговое нарушение рисунка строения или очаговая пигментация эмали зуба;
• Кариес эмали - некроз эмали, сопровождающийся развитием очагового дефекта. Пигментация эмали по периферии дефекта, частью с распространением пигментации в подлежащий поверхностный слой дентина. Эмалево-дентинная граница сохранена;
• Средний кариес - некроз поверхностного слоя дентина с образованием дефекта. Эмале-во-дентинная граница нечетка, смазана или не выявляется;
• Средний углубленный кариес - обширное разрушение дентина, распространяющееся на значительную глубину. Над пульпой сохраняется небольшой слой неповрежденного дентина.
• Глубокий (перфоративный) кариес - обширный дефект твердых тканей. Кариозная полость
сообщается с пульповой камерой. Осложнения перфоративного кариеса: пульпит, периодонтит, остит, периостит.
Результаты исследований и их обсуждение. Исходная масса экспериментальных белых крыс составили от 39 до 51 г (45,0±5,5 г). У крыс, находящихся на виварийной диете, увеличение массы тела шло равномерно во все сроки наблюдения. У животных, находящихся на кариесогенной диете, масса тела статистически достоверно снизилась, в последующие сроки - достоверно повысилась и к окончанию эксперимента достигли 76,0±3,5, что на 20 г меньше, чем у интактных животных. У подопытных крыс на 90 сутки наблюдения масса животных увеличилась по сравнению с интакт-ными, однако не достигла уровня интактных животных. Обработка зубов ремином сдерживало развитие кариеса, что благоприятно повлияло на общее развитие крыс, масса которых приближался к интактным. Таким образом, карисоегенная диета приводит к достоверному снижению массы тела крыс, применение ремина сопровождается кариес протекторным эффектом, отмечается динамика нормализации показателей массы тела, однако она не достигает уровня интактных крыс.
Биохимическое исследование сыворотки позволило установить, что карисоегенная диета оказывает гепатотоксическое действие: достоверно повышается уровень АЛТ и снижается белоксинте-зирующая функция печени: достоверно снижается концентрация белка и кальция. Наряду с этим, отмечается некоторое снижение концентрации мочевины и фосфора, возрастание креатинина. Применение ремина не сопровождается изменением картины крови, свидетельствующие об их влиянии на функцию печени, почек и минеральный обмен (табл.1).
1у/еду/цу1ца ежемесячный научно-практический медицинский журнал
Таблица 3 - Клинико-морфологическая классификация эксперименталь-ного кариеса у крыс по A.A. Прохон-
чукову и H.A. Жижиной на 120 сутки
Показатели Интактные животные (6) Получавшие кариесо-генную диету (15) Получавшие кариесо-генную диету + ремин (15)
Кариес стадии пятна 0 0 0
Кариес (некроз) эмали 16,7% 0 13,4% (2)
Средний кариес 0 26,5% (4) 26,8% (4)
Средний углубленный кариес 0 33,3% (5) 26,8% (4)
Глубокий (перфоративный) кариес 0 40,2% (6) 0
Всего: 16,7% 100% 67,0%
У животных, находящихся на карисоегенной диете, получавших ремин, не отмечалось достоверно значимых изменений биохимических показателей крови, по сравнению с интактными значениями. Однако, по сравнению с крысами, получавшими карисоегенную диету, происходит достоверно значимое снижение уровня АЛТ у животных, получавших ремин на фоне карисоегенной диеты. Концентрация кальция и фосфора у крыс, получавших ремина, возрастает, концентрация же креатинина достоверно снижается (табл.2).
Таким образом, карисоегенная диета сопровождается токсическим влиянием преимущественно на печень, оказывает гипокальциемический эффект. Использование ремина оказывает гепатопротек-торное и модулирующее влияние на содержание кальция.
Для морфологического исследования после освобождения челюстей от окружающих мягких тканей нами с помощью бинокулярной лупы у каждой крысы визуально, а затем под микроскопом осматривали зубы, затем готовили шлифы для каждой стороны челюсти (для одного животного готовили по 4 шлифа). На каждом шлифе имелись по три моляра, которые являлись объектом исследования. После сошлифовывания на мелкозернистых брусках до прозрачности, пластинки участков челюстей с молярами пропускали через спирты, выдерживали в ксилоле и помещали на покровные стекла с канадским бальзамом. Часть шлифов окрашивали гематоксилином-эозином, другую часть исследовали без окрашивания.
Это позволило нам визуально и на шлифах зубов определить наличие (или отсутствие) кариозного поражения в зубах, распространенность и интенсивность кариеса зубов. Так, среди интактных крыс только на 90 сутки в одном случае был обнаружен кариес зуба (12,5%). У крыс контрольной группы, находящихся на кариесогенной диете, на 60 сутки наблюдения у 5 (33,3%) из 15 крыс выявлен кариес. У подопытных крыс, находящихся на кариесогенной диете и получавших ремин, в эти сроки кариес выявлен у 2 (13,4%). На 90 сутки наблюдения соотношение распространенности кариеса у животных контрольной и подопытной групп соответственно составили 53,6% и 25,0%, а на 120 сутки - 100% и 67%. Изучение интенсивности кариеса у животных показал следующее. У интактных
животных она на 90 сутки составила 0,33±0,06, у крыс, находящихся на кариесогенной диете - 3,45±0,24 и у подопытных крыс, находящихся на кариесогенной диете и получавших реминерали-зирующую терапию ремином - 1,22±0,09.
Морфологическая картина кариозного процесса у экспериментальных крыс была разнообразной (табл. 3).
Согласно клинико-морфологической классификация эксперименталь-ного кариеса, у двух крыс (29,2%) на 60-е сутки эксперимента визуально и морфологически определялся кариес эмали (1 интактная и 2 подопытная крысы). Средний кариес выявлен у 8 крыс (4-контрольная и 4 подопытная), что составила 52,1% (рис.1).
Глубокий (перфоративный) кариес выявлен у 40,2% животных контрольной группы (рис.2), который чаще проявлялся явлениями пульпита (рис.3).
Таким образом, кариес зубов определен у 100% крыс, находившихся на кариесогенной диете при интенсивности процесса - 3,45±0,24 (в подопытной группе 1,22±0,09, Р<0,05). Активное проведение профилактических мероприятий с применением реминерализующего средства ремин животным на фоне кариесогенной диеты, позволило снизить кариозный процесс до 67,0%. Следовательно, под влиянием реминерализующего средства ремин в эксперименте на 33% удалось снизить развитие кариеса зубов у крыс, который протекал в более легкой форме.
Литература
1. Алимский А.В., Мирзабеков ОМ., Базжин АА. Фтор в питьевых водах Казахстана, кариес и флюороз зубов среди школьников// Вопросы стоматологии. - Караганда,1992. - С.3-13.
2. Шалабаева К.З. Изучение динамики стоматологической заболеваемости в регионе, прилежащем к ядерному полигону, разработка и оценка эффективности предложенных мер ее профилактики: автореф.дис. ... докт.мед.наук.: 20.10.1999. ЦНИИС. -М.,1999.- 47 с.
3. Davies B.E., Anderson R.J. The epidemiology of dental caries in relation to environmental trace elements. // Experientia.
- 1987. -Vol. 43, N1. - P. 87—92.
4. Леус П.А., Смирнова Т.А., Пашинина Е.Д. Влияние минерализующей зубной пасты на содержание кальция и фосфора в эмали зубов человека // Стоматология. -1980.
- № 5. - С. 5-7.
5. Леонтьев В.К. Первичная профилактика кариеса зубов:
Рис. 1 - Средний кариес. Шлифы зубов контрольной группы животных экспериментальным кариесом, находящихся на кариесогенной диете на 60 сутки наблюдения. Определяются расширенные дентиновые канальца, четко различима зона прозрачного дентина (в виде линии). Окраска гематоксилин-эозином
(увеличение х 100).
Рис. 2 - Глубокий (перфоративный) кариес. Шлифы зубов контрольной группы животных экспериментальным кариесом, находящихся на кариесогенной диете на 90 сутки наблюдения. Определяются четко различимые три зоны кариозных полостей. Участки с размягченным дентином, участки с расширенными дентиновыми канальцами и между этими участками зона прозрачного дентина. Окраска гематоксилин-эозином (увеличение х 100).
Рис. 3 - Глубокий (перфоративный) кариес. Шлифы зубов контрольной группы животных экспериментальным кариесом, находящихся на кариесогенной диете на 90 сутки наблюдения. Определяются реактивные изменения пульпы при кариесе: Полнокровие и стаз в пульпе. Сетчатость пульпы, картина атрофии. Деструкция дентина, сохранившийся дентин с расширенными канальцами. Окраска гематоксилин-эозином (увеличение х 100).
перспективы развития и нерешенные проблемы //Новые методы лечения и профилактики в стоматологии. - Омск, 1984. - С. 3-5.
6. Авцын А.П., Жаворонков АА., Рыш М.А., Строчкова Л.С. Микроэлементозы человека. - М.: Медицина, 1991. - 496 с.
7. КозловаМ.В., ИвановВ.Н., ПинелисИ.С., Петрович Ю.А. Влияние селена на процессы свободнорадикального окисления в регенератах кости после перелома.//Патологическая физиология и экспериментальная терапия (Москва).
- 1977. - № 2. - С. 35-37.
8. Гапочина Л.Л., Посохова В.Ф. Профилактические материалы фирмы «ВладМиВа» // Стоматология сегодня.
- 2004. - № 2 (33). - С.3.
9. Онайбекова Н.М. Профилактика и лечение с учетом раннего прорезывания постоянных зубов у детей: автореф. дис. ... канд.мед.
наук.:18.01.2012. КГМА. -Бишкек,2012. - 22 с.
10. Ботабаев Б.К., Супиева Э.Т., Курмангазина С.С., Гафа-рова А.Ф., Нурлыбекова А.Б. Первый опыт применения новогореминерализующего препарата с целью профилактики стоматологических заболеваний //Медицина. - 2009. - №11. - С.43-46.
Прохончуков А.А., Жижина Н.А. Экспериментальные модели важнейших стоматологических заболеваний/ Руководство по терапевтической стоматологии. - М.: «Медицина
