CC BY
45
Bulletin of Medical Internet Conferences 2012. Volume 2. Issue 2
Стоматология
Ю: 2012-2-5-А-1519 Оригинальная статья
Островская Л.Ю., Захарова Н.Б., Грачева Д.В., Грачев П.П.
Экспериментальное обоснование применения остеотропных препаратов при
пародонтите на фоне остеопороза
ГБОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В.И Разумовского Минздравсоцразвития России, кафедра стоматологии терапевтической,
ЦНИИЛ
Ключевые слова: остеотропный препарат, пародонтит, остеопороз.
Распространенность заболеваний пародонта увеличивается с возрастом. Существенный прирост данной патологии отмечен у женщин в пре- и постменопаузальном периоде. Постменопаузальный остеопороз является фактором риска заболеваний пародонта. Известно, что дефицит эстрогенов, характерный для постменопаузального остеопороза, ускоряет процессы ремоделирования, способствует возникновению дисбаланса между резорбцией и формированием костной ткани, ускоренной потере костной массы, развитию остеопороза и его осложнений. Применение препаратов кальция в комплексном лечении больных генерализованным пародонтитом способствует установлению положительного кальциевого баланса, снижению интенсивности обменных процессов в костной ткани. Доказана принципиальная роль витамина D в процессах регуляции дифференцировки и пролиферации преостеогенныхмезенхимальных клеток, а также в формировании костной ткани. Применение данных препаратов позволяет устранить отрицательный костный баланс, снизить секрецию паратиреоидного гормона.
Цель: изучить процессы ремоделирования костной ткани на модели экспериментального пародонтита у старых крыс-самок.
Объект исследования: Были подвергнуты анализу особенности регенерации костной у молодых и старых крыс-самок. Объектом исследования были 12 нелинейных крыс массой 200-250г.Животные были распределены на 3 группы по 4 особи в каждой:
1-ая группа - контроль: молодые животные возрастом 2-3 мес.
2 группа - старые животные возрастом 22-24 мес.
3 группа - старые(возрастом 22-24 мес.) с предварительным введением в рацион глюконата кальция и витамина Д3.
Животных содержали в стандартных условиях вивария при свободном доступе к воде и лабораторному корму.
Метод воспроизведения экспериментального пародонтита (Воложин А.И. 2003): у наркотизированных гексеналом (75 мг/кг) и фиксированных на операционном столе животных делали кожный разрез на внутренней поверхности правого бедра размером 1,5-2 см, обнажали сустав, шаровидным бором № 9 при помощи бормашины проводили трепанацию медиальной части дистального эпифиза бедренной кости на глубину головки бора.Дефект заполнялся кровяным сгустком. Рана послойно ушивалась кетгутом.
Животных декапитировали под наркозом через 15-е, 30-е сутки после операции, бедренные кости выделяли и фиксировали в 10%-ном нейтральном формалине. Данные сроки отражают основные этапы репарати вногоостеогенеза.
Методы исследования: В сыворотке крови крыс проводили определение содержания общего белка, кальция (Са), фосфора неорганического (Фн) и активности щелочной фосфатазы (ЩФ). Материал для гистологического исследования фиксировали в 10%-м нейтральном водном растворе формалина, проводили обезвоживание в спиртах, заключение в парафин по общепринятой методике. Изготавливали срезы толщиной 7-8мкм, окрашивали, растворами гематоксилина Эрлиха и водно-спиртовым эозином.
Результаты: На ранних этапах (к 15-тым суткам после нанесения повреждения) развития репаративного остеосинтеза у молодых крыс отмечается клеточная инфильтрация, полнокровие сосудов, стаз форменных элементов крови. В сыворотке крови снижется уровень общего белка и Са. Это говорит о затухании острого воспалительного процесса в костной и окружающих мягких тканях и активации функции остеобластов. Повышение содержания Фн связано с его резорбцией из костной ткани и поступлению в кровь.
На поздних этапах (к 30-тым суткам после нанесения повреждения) имеет место пролиферация остеогенных клеток, утолщение фиброзного слоя надкостницы, новообразование костной ткани с формированием костных балок. В сыворотке крови отмечается повышение уровня общего белка до исходных значений, снижается активность щФ и уровень Са. Такое соотношение в белково-минеральном обмене в процессе регенерации костной ткани соответствует существующим биологическим представлениям о том, что в первую очередь формируется белковая матрица, а затем идет кристаллизация минеральных веществ. У старых крыс на поздней стадии развития репаративного остеосинтеза развивается очаговая пролиферация остеобластов в костных
www.medconfer.com
© Bulletin of Medical Internet Conferences, 2012
Бюллетень медицинских Интернет-конференций 2012. Том 2. № 1
каналах на фоне сохранения выраженных дистрофических изменений хрящевой ткани и фиброза. Гистологические изменения коррелируют с биохимическими показателями в сыворотке крови: даже к 30-м суткам показатели ЩФ остаются низкими на фоне снижения общего белка, что говорит о развитии и ацидоза в костной ткани, по-видимому, преобладании кислой фосфатазы, повышении активности остеокластов, возникающих на фоне воспалительной реакции.
У старых крыс, в рацион которых в течение месяца предварительно вводился кальций и витамин Д3, поздняя стадия репаративного остеосинтеза характеризовалась появлением отдельных участков новообразований костной ткани, пролиферацией остеогенного слоя надкостницы, появлением отдельных участков фиброза. В сыворотке крови отмечается повышение уровня общего уровня белка и активности щелочной фосфатазы.
Предварительное введение в рацион старых животных кальция и витамина Д3 улучшает течение репаративных процессов в костной ране, что проявлялось ускорением образования более совершенного мягко-тканного, а затем и костного репарата. При этом наблюдалось повышение темпов и объема образования эндостального и периостальногорепараторных ростков.
Таблица. Показатели белково-минерального обмена в сыворотке крови крыс при экспериментальном пародонтите
Группы крыс Общий Активность Общий Са, Общий Фн,
белок, g/l шелочной фосфатазы, u/l mmol/l mmol/l
Группа сравнения - молодые крысы 82,62±1,07 160±4,03 2,3±0,01 1.58±0,04
экспериментальный пародонтит через 7-14 78,36±0,92 195±1,25 0,88±0,01 2,69±0,48
дней после воспроизведения
экспериментальный через 30 дней после 85,32±0,65 131±4,82 0,83±0,02 2,84±0,01
воспроизведения
Группа сравнения - старые крысы 79,94±0,53 153±5,18 2,11±0,05 1,35±0,06
экспериментальный через 7-14 дней после 77,98±1,54 141±3,26* 1,12±0,03* 2,99±0,05
воспроизведения
экспериментальный пародонтит через 30 82,5±0,79* 116±2,09* 1,2±0,02* 3,18 ±0,06*
дней после воспроизведения
экспериментальный пародонтит через 7-14 82,0±0,56*# 112±5,4*#
дней после воспроизведения на фоне 1,17±0,06* 2,9 ±0,04
остеотропных препаратов
экспериментальный пародонтит через 30 дней
после воспроизведения на фоне остеотропных 82,3±0,74* 120±3,95 1,25±0,06* 3,11±0,11*
препаратов
Примечание: *- показатели имеют достоверные различия по сравнению со значениями в группе старых и молодых крыс (р<0,05), #- показатели имеют достоверные различия по сравнению со значениями в группе старых крыс, где не использовались остеотропные препараты(р<0,05).
Выводы:
1. Полученные результаты дают основание считать, что при воспроизведении экспериментальной модели пародонтита у крыс только к 30 суткам после нанесения повреждения можно проводить оценку степени активности репаративных процессов в костной ткани.
2. Изменения уровня кальция, фосфора неорганического, активности щелочной фосфотазы в сыворотке крови отражает метаболическое состояние остеобластов - клеток, отвечающих за формирование кости.
3. Предварительное введение в рацион питания в течение месяца у старых крыс глюконата кальция и витамина Д3 обеспечивает более полноценное восстановление костной ткани к 30 суткам от начала воспроизведения экспериментальной модели пародонтита.
Литература
1. Ершов К.И.Протеогликаны и минеральный состав костной ткани крыс в норме и при развитии остеопороза: дисс... к.б.н. - Новосибирск, 2008. - 144с.
2. Стрюкова Р. Л. Клинико-диагностические особенности течения стоматологических заболеваний у женщин в перименопаузе: дис.. к.м.н. - М., 2006. - 99с.
3. The RECORD Trial Group. Oral Vitamin D3 and calcium for secondary prevention of low-trauma fractures in elderly people (Randomised Evaluation of Calcium Or Vitamin D, RECORD): a randomised placebo-controlled trial. Lancet 2005; 365:1621-1628.
© Бюллетень медицинских Интернет-конференций, 2012.
www.medconfer.com
