CC BY
15Q-—--^^--—•у ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^ Научные статьи
УДК 616.71-018.3-003.93:611-018.52/.54:616.21-089.844 doi: 10.18692/1810-4800-2016-3-91-99
экспериментальное обоснование применения обогащенной
ТРОМБОЦИТАМИ ПЛАЗМЫ ДЛЯ СТИМУЛЯЦИИ РЕГЕНЕРАЦИИ
хрящевых аутотрансплантатов
Скибицкая Н. Ф.1, Семенов Ф. В.1, Евглевский А. А.2
ГБОУ ВПО «Кубанский государственный медицинский университет» Минздрава России,
350063, Краснодар, Россия
С1 Зав. каф. болезней уха, горла и носа - проф. Ф. В. Семенов;
2 зав. каф. гистологии с эмбриологией - проф. Г. М. Могильная)
EXPERIMENTAL suBsTANTIATION OF PLATELET ENRICHED PLAsMA APPLICATION FOR sTIMuLATION OF CARTILAGE AuTOGRAFTs REGENERATION
Skibitskaya N. F.1, Semenov F. V.1, Evglevskii A. A.2
State Budget Educational Institution of Higher Vocational Education Kuban State Medical University
of the Ministry of Healthcare of Russia, Krasnodar, Russia
1 СChair of ENT Diseases;
2 Chair of Histology with Embryology)
Целью работы было поставлено изучить с помощью морфологических методов влияние обогащенной тромбоцитами плазмы крови на регенерацию хрящевой ткани после ее механической деструкции. Было произведено изъятие и дробление участков хрящевой ткани обеих ушных раковин кроликов, с последующей реимплантацией измельченной хрящевой ткани на то же место в левую ушную раковину и измельченной хрящевой ткани, смешанной с обогащенной тромбоцитами плазмой, полученной из крови этого же лабораторного животного, в правую ушную раковину. Затем производился срез и изучались особенности регенерации хряща на 10-й, 20-й дни и через 1, 2 и 3 месяца после оперативного вмешательства. Также производился подкол вновь полученной обогащенной тромбоцитами плазмы в место дефекта на правой ушной раковине 1 раз в неделю. В ходе исследования выяснилось, что в опытной группе в условиях применения обогащенной тромбоцитами плазмы регенерация хрящевой ткани происходит более адекватно в сравнении с контрольной группой, а также сопровождается ускорением процессов заживления, выражающихся в активации клеток фибробластического и хондробластических дифферонов.
Ключевые слова: регенерация хрящевой ткани, хондрогенез, обогащенная тромбоцитами плазма, факторы роста.
Библиография: 13 источников.
The objective of this work was to study the influence of platelet enriched plasma on regeneration of cartilage tissue after its mechanical destruction using morphological methods. In the process of study, withdrawal and fragmentation of cartilage tissue sections of both ear conches of rabbits was performed with subsequent reimplantation of the crushed cartilage tissue to the same place in the left ear and crushed cartilage tissue mixed with plateletenriched plasma obtained from the blood of the same laboratory animal - to the right auricle. After that a cut was made and the peculiarities of regeneration of the cartilage on the 10th, 20th days and after 1, 2 and 3 months after surgery were studied. After that the platelet enriched plasma was injected in the defect site on the right ear conch once a week. The study revealed that in the experimental group in terms of platelet enriched plasma application, regeneration of cartilage tissue occurred more adequately in comparison with the control group, and was accompanied by the acceleration of healing processes, which was expressed in activation of fibroblastic and chondroblastic of programed differentiation.
Key words: cartilage tissue regeneration; chondrogenesis; platelet enriched plasma; growth factors.
Bibliography: 13 sources.
Проблема замещения трансплантатами органов и тканей, поврежденных в результате воспалительных заболеваний, травм или хирургического вмешательства, является актуальной. В оториноларингологии хрящевые аутотранс-плантаты применяют во время септопластики,
ринопластики, ларингопластики, мастоидопла-стики и др. В ряде случаев перед использованием хрящ подвергается измельчению скальпелем или деструкции с помощью специального пресса. Регенерация хрящевой ткани идет медленно, что побудило нас исследовать в эксперименте воз-
Т а б л и ц а
Факторы роста, обнаруженные в обогащенной тромбоцитами плазме, и их физиологические эффекты
Фактор Функции
Эпидермальный фактор роста (PD-EGF) Активация пролиферации эпидермальных и эпителиальных клеток, закрытие кожной раны, стимулирование ангиогенеза
Трансформирующий ростовой фактор-бета (TGF-b1, Ь2) Регуляция метаболизма костной ткани, апоптоз, усиление синтеза белков межклеточного матрикса
Тромбоцитарный фактор роста (PDGF А+В) Активация фибробластов и миоцитов гладкомышечной ткани, формирование матрикса коллагена и кости с участием костных морфогенетических белков, стимулирование ангиогенеза
Инсулиноподобные факторы (TGF-I, II) Стимуляция пролиферации клеток костной и хрящевой тканей, активация ан-гиогенеза, стимуляция заживления мышечной ткани
Сосудисто-эндотелиальный фактор роста (VEGF ECGF) Стимуляция роста новых кровеносных сосудов, антиапоптоз
Основной фактор роста фи-бробластов (bFGF) Стимуляция ангиогенеза и пролиферации фибробластов, экспрессия в костной ткани, улучшение заживления мышечной ткани
можность ее стимуляции с помощью обогащенной тромбоцитами плазмы (ОТП).
Процесс регенерации различных тканей, подвергшихся альтерации в результате механической травмы, включает комплексную и четко определенную серию аутогенных реакций. Важная роль в этом процессе отводится тромбоцитам. В месте повреждения они высвобождают факторы роста, запускающие процесс восстановления поврежденной ткани и подавляющие воспаление. На понимании этого основано лечение обогащенной тромбоцитами плазмой крови, стимулирующее аутогенную регенерацию за счет высокой концентрации факторов роста. Факторы роста - это регуляторные пептиды (тканевые гормоны), которые находятся в альфа-гранулах тромбоцитов и отвечают за регенерацию биологической ткани, т. е. стимулируют репарацию сухожилий, хряща, мышц, кожи, костей и т. п.
Выделяют 6 основных ростовых факторов: Transforming Growth Factor - Alfa (TGF-a), Transforming Growth Factor - Beta (TGF-ß), Platelet Derived Growth Factor (PDGF), Epithelial Growth Factor (EGF), Insulinoidea Growth Factor (IGF), Fibroblast Growth Factor (FGF). Каждый из этих факторов выполняет свою специфическую функцию (табл.).
Первые упоминания о местном использовании ОТП встречаются в публикациях M. C. Oz, V. Jeevanandam et al. (1992) [1], которые пришли к выводу о целесообразности изготовления фи-бринового геля из крови пациента, теряемой им во время операции. Тогда еще не использовался термин «обогащенная тромбоцитами плазма». Лишь впоследствии выяснилось, что полезные свойства, которыми обладает этот субстрат, обусловлены высокой концентрацией тромбоцитов.
В настоящее время наибольшее применение ОТП нашла в стоматологической импланталогии при операциях с использованием большого объ-
ема костных материалов - синус-лифтинг, наращивание альвеолярного гребня и др. [2]. Авторы использовали ОТП при восстановительных операциях на нижней челюсти. Перечислялись многочисленные положительные свойства ОТП: стимуляция миграции фибробластов и остеобластов, ускорение реваскуляризации и регенерации мезенхимальных тканей, а также уменьшение кровотечения и снижение бактериальной обсе-мененности [3]. Многочисленные исследования, направленные на изучение эффективности использования ОТП при проведении синус-лифтин-га, доказали его положительное влияние на остео-синтез [4]. Применение ОТП позволяет сократить сроки роста и созревания костной ткани. В настоящее время использование ОТП не ограничивается лишь стоматологией. В ортопедии ОТП применяют при хирургических и консервативных видах лечения воспалительных заболеваний суставов [5], в глазной хирургии эта методика используется при блефаропластике [6], в эндокринологии -для лечения диабетических язв [7] и т. д.
Появляются публикации, в которых обсуждается возможность применения ОТП в оториноларингологии: для облитерации околоносовых пазух [8] при реконструкции передней стенки верхнечелюстной пазухи после операции по Коллдуэл-Люку [9], при эндоскопических операциях в полости носа в целях предотвращения возникновения сращений между латеральной стенкой полости носа и средней носовой раковиной [10] Ф. В. Семенов и И. Ю. Якобашвили (2009) описывают методику использования ОТП для профилактики кровотечений и ускорения регенерации послеоперационной раны при тонзиллэк-томии [11].
Несмотря на многочисленные работы, подтверждающие эффективность применения ОТП при различных видах патологии, многие аспекты течения раневого процесса в условиях примене-
ния ОТП остаются неясными и требуют экспериментального подтверждения эффективности данного метода лечения.
Цель исследования. Изучить с помощью морфологических методов влияние обогащенной тромбоцитами плазмы крови на регенерацию хрящевой ткани после ее механической деструкции.
Материалы и методы исследования. В качестве объекта исследования были выбраны кролики-самцы калифорнийской породы (10 животных, 20 ушных раковин). Исследования на животных выполнялись в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных», разработанными и утвержденными Министерством здравоохранения в 1977 г. После введения в наркоз на выбритом от шерсти участке наружной поверхности каждой ушной раковины производили дугообразный разрез кожи до хряща. Из ушной раковины вырезали кусочек хряща округлой формы диаметром около 1,5 см. Ушной хрящ подвергали деструкции в стандартном прессе, используемом для размягчения аутохряща носовой перегородки перед его реим-плантацией во время септопластики. Половину раздробленного хряща имплантировали в левую ушную раковину, а остаток вместе с обогащенной тромбоцитами плазмой - в правую ушную раковину. Раны зашивали.
Животным обеих групп накладывали асептические повязки, в дальнейшем проводили ежедневную обработку разреза асептическими растворами, швы снимали на 7-е сутки. В опытной группе животным 1 раз в неделю через кожу в область реимплантированного хряща вводили жидкую часть ОТП с концентрацией тромбоцитов не менее 700 тыс. мкл, необходимой для получения стимулирующего эффекта при регенерации тканей.
Для получения ОТП использовали методику однократного центрифугирования цельной венозной крови. До введения животному лекарственных препаратов (последнее нарушает возможность получения ОТП) из подкожной вены бедра брали кровь в объеме 3-5 мл (рис. 1).
Кровь помещали в специальные пробирки фирмы Vacuette, содержащие на стенках в напыленном виде активатор свертывания SiO. Пробирки ставили в лабораторную программируемую центрифугу ЕВА 20 и центрифугировали в течение 10 мин при скорости 3000 об/ мин (рис. 2). При этом происходило разделение цельной крови на три фракции: бедную тромбоцитами плазму, ОТП и эритроцитарную массу. Одновременно в самой пробирке происходила активация тромбоцитов. В результате этого процесса в каждой пробирке получалось около 2-3 мл ОТП в виде активированного сгустка (рис. 3),
которую извлекали из пробирки стерильным инструментом и помещали в чашку Петри (рис. 4). От полученного сгустка отделяли нижнюю часть, содержащую эритроциты.
Качественные и количественные характеристики получаемой нами ОТП были проверены при помощи автоматизированной системы подсчета форменных элементов крови и микроскопическом исследовании с окраской по Романовскому-Гимзе. Средняя концентрация тромбоцитов при использовании данной методики достигала 850 тыс. в 1 мкл плазмы. Микроскопия показала наличие большого количества тромбоцитов в сгустке ОТП (рис. 5).
Через 10, 20 суток, 1, 2, и 3 месяца животных выводили из опыта и забирали материал для морфологического исследования. Материал фиксировали в 10% забуференном формалине, после проводки на гистопроцессоре замкнутого цикла TISSUE TEK@VIPtm5Jr с вакуумом образцы заливали в гистомикс Extra с использованием станции парафиновой заливки TISSUE-tek TEC 5 с температурой плавления 56-58 °С. Срезы толщиной 5 мкм готовили на ротационном микротоме Accu-Cut@SRMтм200, помещали на предметные стекла с матовым краем Menzel, окрашивали ге-матокслин-эозином по общепринятой методике. Окрашенные срезы подвергали визуальному па-томорфологическому изучению с помощью светового микроскопа с использованием сухих апо-хроматических систем с общим увеличением 100х. Дополнительно срезы фотографировали в стандартных условиях с помощью цифровой камеры DCM-310 c разрешением 3 мегапикселя в формате TIF. Полученные изображения подвергали морфометрии методом равноудоленных точек по Ташке (1980) [12] с определением объемной плотности 16 градационных параметров с последующим расчетом уровня интегральной энтропии [13]. Энтропия означает меру неупорядоченности системы: чем меньше элементы системы подчинены какому-либо порядку, тем выше энтропия. При достижении энтропией максимального значения биологическая система перестает функционировать как система, все ее элементы теряют функциональную взаимосвязь и превращаются в ничем не связанный набор элементов, т.е. погибает. Таким образом, мера неупорядоченности (энтропии) морфологических систем в условиях нормы и патологии, в отличие от традиционной описательной морфологии, позволяет объективно судить о динамике процесса.
Результаты и обсуждение. Исследование материала показало, что через 10 суток в контрольной группе хрящ в месте повреждения расположен в виде фрагментов из хондроцитов, состоящих из беспорядочно ориентированных коротких клеточных тяжей. Хрящ плотно окружен
Рис. 1. Взятие крови из подкожной вены бедра.
Рис. 3. БТП - бедная тромбоцитами плазма; ОТП - обогащенная тромбоцитами плазма; ЭМ - эритроцитарная масса.
Рис. 2. Центрифуга для приготовления обогащенной тромбо- Рис. 4. Сгусток обогащенной тромбоцитами плазмы.
цитами плазмы.
а)
б)
Рис. 5. Микроскопическая картина плазмы в жидкой фазе (увеличение в 950 раз): а - плазма с нормальной концентрацией тромбоцитов (стрелками указаны единичные тромбоциты); б - обогащенная тромбоцитами плазма (стрелками указаны тромбоцитарные скопления).
Рис. 6. Типичная картина зоны экспериментальной травмы уха кролика на 10-е сутки после нанесения травмы: а - контрольная группа; б - опытная группа; окраска гематоксилином-эозином; об. 10*, ок. 10*.
Рис. 7. Типичная картина зоны экспериментальной травмы уха кролика на 20-е сутки после нанесения травмы: а - контрольная группа; б - опытная группа; окраска гематоксилином-эозином; об. 10*, ок. 10*.
Рис. 8. Типичная картина зоны экспериментальной травмы уха кролика через 1 месяц после нанесения травмы: а - контрольная группа; б - опытная группа; окраска гематоксилином-эозином; об. 10*, ок. 10*).
соединительной тканью, содержащей большое количество мелких кровеносных сосудов, заметно большее количество фибробластов, определяется наличие полиморфно-клеточных инфильтратов, состоящих из лимфоцитов, эозинофильных и базофильных, нейтрофильных гранулоцитов, кроме того, в центре видны скопления эритроцитов с неизмененной окраской и отложения фибрина. Коллагеновые волокна толстые, местами
собранные в короткие пучки. При световой микроскопии коллагеновые ацидофильные волокна окрашиваются в розовый цвет (рис. 6, а). Уровень интегральной энтропии составил 3,8±0,1. В опытной группе морфологическая картина в целом аналогична наблюдаемой в контрольной группе. Однако хрящ расположен в виде более упорядоченных по сравнению с контролем, тяжей продольной ориентации и окружен коллагеновыми
волокнами, ориентированными вдоль оси этих тяжей, наблюдается умеренная воспалительная инфильтрация соединительной ткани с большим количеством эозинофильных, базофильных, ней-трофильных гранулоцитов, большое количество мелких кровеносных сосудов с умеренными явлениями стаза эритроцитов, количество фибробла-стов умеренное (рис. 6, б). Следует отметить, что уровень интегральной энтропии ткани снижен по сравнению с контролем на 15,8% и составляет 3,2±0,04 (р < 0,001).
Спустя 20 суток после нанесения раны в контрольной группе гиалиновый хрящ в месте повреждения расположен в виде неупорядоченных пластов, состоящих из хондроцитов, окруженных большим количеством интертерриториального матрикса. Окружающая соединительная ткань содержит большое количество клеток воспаления: лимфоцитов, эозинофилов, базофилов. Заметно большое количество мелких кровеносных сосудов. Определяются фибробласты, а толстые коллагеновые волокна, расположенные параллельно, имеют извилистый ход. Воспалительная инфильтрация умеренная, в виде очаговых скоплений вокруг сосудов, состоящая из лимфоцитов, базофильных и эозинофильных гранулоци-тов (рис. 7, а). Уровень интегральной энтропии составил 3,40±0,07. Напротив, в опытной группе хрящ в месте повреждения расположен в виде отдельных, упорядоченных фрагментов, состоящих из хондроцитов, объединенных в центральных отделах в изогенные группы, окруженные интертерриториальным матриксом. Хрящ плотно окружен соединительной тканью, содержащей большое количество мелких кровеносных сосудов, явления стаза эритроцитов сохраняются, заметно наличие фибробластов с признаками секреторной активности, коллагеновые волокна тонкие, имеют извилистый ход, визуально более удлинены по сравнению с контролем, окрашиваются в розовый цвет. Воспалительная инфильтрация минимальная в виде очаговых скоплений вокруг сосудов, состоит из лимфоцитов, базофильных и эозинофильных гранулоцитов (рис. 7, б). Уровень интегральной энтропии ткани снижен по сравнению с контролем на 14,7% и составил 2,90±0,05 (р < 0,001).
Через 1 месяц после нанесения раны в контрольной группе хрящ в месте повреждения расположен в виде пластинок, фрагменты хряща как бы подтягиваются к друг другу, образуя своеобразные конгломераты и состоят из зрелых хондроцитов, объединенных в центральных отделах в изогенные группы. Окружающая соединительная ткань содержит мелкие кровеносные сосуды, отмечается наличие фибробластов удлиненной формы, толстых коллагеновых волокон (рис. 8, а). Уровень интегральной энтропии со-
ставил 3,10±0,05. В опытной группе в целом морфологическая картина аналогична наблюдаемой в контроле - хрящ в месте повреждения также расположен в виде удлиненных пластинок, эти пластинки подходят близко друг к другу. В местах, где нет хряща, большое количество соединительной ткани, содержащей большое количество фи-бробластов, небольшое количество эозинофиль-ных, базофильных гранулоцитов, лимфоцитов, а также мелкие кровеносные сосуды. Коллагеновые волокна тонкие, с упорядоченным параллельным ходом. При световой микроскопии коллагено-вые волокна ацидофильные, окрашиваются в розовый цвет (рис. 8, б). Однако уровень интегральной энтропии ткани снижен по сравнению с аналогичным значением, характерным для животных контрольной группы, на 22,6% и составляет 2,40±0,08 (р < 0,001).
Через 2 месяца после нанесения раны в контрольной группе в месте повреждения хрящевая ткань превалирует над соединительной. Гиалиновый хрящ в месте повреждения - в виде пластов, состоящих из хондроцитов, объединенных в изогенные группы. Окружающая соединительная ткань содержит фибробласты, толстые коллагеновые волокна с параллельно идущим ходом, извилистого, удлиненного вида. При световой микроскопии коллагеновые волокна ацидофильные, окрашиваются в розовый цвет. Воспалительная инфильтрация отсутствует (рис. 9, а). Уровень интегральной энтропии составил 2,80±0,09. В опытной группе в целом морфологическая картина аналогична наблюдаемой в контроле - хрящ в месте повреждения расположен в виде упорядоченных фрагментов с тенденцией построения в один ряд, состоящих из большей частью зрелых хондроцитов, объединенных в центральных отделах в изогенные группы, которые окружены интертерриториальным матрик-сом. Окружающая хрящ соединительная ткань содержит большое количество мелких кровеносных сосудов, большое количество фибробластов, тонкие коллагеновые волокна с параллельно идущим ходом, удлиненного вида. При световой микроскопии коллагеновые волокна ацидофильные, окрашиваются в розовый цвет. Воспалительная инфильтрация отсутствует (рис. 9, б). Однако уровень интегральной энтропии ткани снижен по сравнению с контролем на 15% и составляет 2,10±0,04 (р < 0,001).
Через 3 месяца после нанесения раны гиалиновый хрящ в месте повреждения в виде упорядоченных фрагментов удлиненного вида с тенденцией построения в ряд, состоящий из хон-дроцитов, большей частью зрелых, объединенных в центральных отделах в изогенные группы, окруженные интертерриториальным матриксом. Хрящ плотно окружен соединительной тканью,
а)
б)
Рис. 9. Типичная картина зоны экспериментальной травмы уха кролика через 2 месяца после нанесения травмы: а - контрольная группа; б - опытная группа; окраска гематоксилином-эозином; об. 10*, ок. 10*).
а)
б)
Рис. 10. Типичная картина зоны экспериментальной травмы уха кролика через 3 месяца после нанесения травмы: а - контрольная группа; б - опытная группа; окраска гематоксилином-эозином; об. 10*, ок. 10*).
е 3,5
о р
т3 н
э
й 2,5
о н
льн 2 а
рга 1,5
е
инте 1
и
нь 0,5
е в
ов 0
ШШт.
10 сут
20 сут 1 мес.
Сроки исследования
□ Контроль □ Опыт
2 мес.
3 мес.
Рис. 11. Динамика уровня интегральной энтропии тканей в процессе репарации в условиях применения ОТП.
4
содержащей большое количество мелких кровеносных сосудов, большое количество фибро-бластов, коллагеновые волокна с параллельно идущим ходом, местами в виде коротких пучков. При световой микроскопии коллагеновые волокна ацидофильные, окрашиваются в розовый цвет. Уровень интегральной энтропии составил
2,10±0,04. В опытной группе (рис. 10, а) морфологическая картина практически идентична наблюдаемой в контроле - хрящ в месте повреждения расположен в виде упорядоченных фрагментов, они как бы подтягиваются к друг другу и выстраивается в один ряд, состоят из зрелых хон-дроцитов, объединенных в центральных отделах
в изогенные группы. Окружающая соединительная ткань, содержит мелкие кровеносные сосуды, фибробласты удлиненной формы, тонкие колла-геновые волокна с параллельно идущим ходом, удлиненного вида. При световой микроскопии коллагеновые волокна ацидофильные окрашиваются в розовый цвет. Воспалительная инфильтрация отсутствует. Уровень интегральной энтропии ткани практически не отличается от наблюдаемого у животных контрольной группы (рис. 10, б) и составляет 2,00±0,06 (р >0,05).
Таким образом, динамика изменений уровня интегральной энтропии (рис. 11), а также анализ морфологического эквивалента изменений, происходящих в ране после применения ОТП, свидетельствуют о более адекватном по сравнению с контролем нарастании тканевой упорядоченности при репарации в условиях применения ОТП и сопровождается улучшением процессов заживления, выражающихся в активации клеток фибробластического и хондробластических диф-феронов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Oz M. C., Jeevanandam V., Smith C. R., Williams M. R., Kaynar M., Frank R. A., Mosca R., Reiss R. F., Rose E. A. Autologous fibrin glue from intraoperatively collected platelet rich plasma. 1992. Vol. 103. P. 194.
2. Rosenberg E. S., Torosian J. Sinus grafting using platelet-rich plasma--initial case presentation // Pract. Periodontics Aesthet. Dent. 2000. N 12 (9). P. 843-850.
3. Tayapongsak P., Wimsatt J. A., LaBanc J. P., Dolwick M. F. // Oral. Surg. Oral. Med. Oral. Pathol. 1994. Vol. 78 (3). P. 296-300.
4. Danesh-Meyer M. J., Filstein M. R., Shanaman R. Histological evaluation of sinus augmentation using platelet rich plasma (PRP): a case series. J Int Acad Periodontol. 2001. N 3 (2). P. 48-56.
5. Mishra A., Pavelko T. Treatment of chronic elbow tendinosis with buffered platelet-rich plasma // Am Jurn. Sports Med. 2006. N 34 (11). P. 1774-1778.
6. Vick V. L., Holds J. B., Hartstein M. E., Rich R. M., Davidson B. R. Use of autologous platelet concentrate in blepharoplasty surgery // Ophthal. Plast. Reconstr Surg. 2006. N 22 (2). P. 102-104.
7. Driver V. R., Hanft J., Fylling C. P., Beriou J. M. A prospective, randomized, controlled trial of autologous platelet-rich plasma gel for the treatment of diabetic foot ulcers // Ostomy Wound Manage. 2006. N 52 (6). P. 68-74.
8. Mendonca-Caridad J. J., Juiz-Lopez P., Rubio-Rodriguez J. P. Frontal sinus obliteration and craniofacial reconstruction with platelet rich plasma in a patient with fibrous dysplasia // Int Jurn. Oral Maxillofac Surg. 2006. N 35 (1). P. 8891.
9. Thor A. Reconstruction of the anterior maxilla with platelet gel, autogenous bone, and titanium mesh: a case report // Clin Implant Dent Relat Res. 2002. N 4(3). P. 150-155.
10. Rice D. H. Platelet-rich plasma in endoscopic sinus surgery // Ear Nose Throat Jurn. 2006. Vol. 85(8). P. 516, 518.
11. Семенов Ф. В., Якобашвили И. Ю. Применение обогащенной тромбоцитами плазмы в качестве гемостатиче-ского и аналгезирующего средства при тонзиллэктомии: автореф. дис. ... канд. мед. наук. СПб., 2009. 113 с.
12. Ташке К. Введение в количественную цито-гистологическую морфологию. Изд-во АН Румынии, 1980. 191 с.
13. Автандилов Г. Г. Медицинская морфометрия. М.: Медицина, 1990. 384 с.
Скибицкая Наталья Федоровна - заочный аспирант каф. болезней уха горла и носа Кубанского ГМУ. Россия,
350007, Краснодар, врач-оториноларинголог КБ № 3, г. Краснодар, ул. Захарова, д. 59; тел. 8-989-815-89-29, e-mail:
semenovanatasha1990@mail.ru
Семенов Федор Вячеславович - докт. мед. наук, профессор, зав. каф. болезней уха горла и носа, главный врач
КБ № 3. Россия, 350007, г. Краснодар, ул. Захарова, д. 59; тел. 8-918-431-27-02, e-mail: ent@mail.kuban.ru
Евглевский Андрей Александрович - канд. мед. наук, доцент каф. гистологии с эмбриологией; тел. 8-989-82501-46, e-mail: evglandr@mail.ru
REFERENCES
1. Oz M. C., Jeevanandam V., Smith C. R., Williams M. R., Kaynar M., Frank R. A., Mosca R., Reiss R. F., Rose E.A. Autologous fibrin glue from intraoperatively collected platelet rich plasma. 1992, 103: 194.
2. Rosenberg E. S., Torosian J. Sinus grafting using platelet-rich plasma--initial case presentation. Pract Periodontics Aesthet Dent. 2000; 12 (9): 843-850.
3. Tayapongsak P., Wimsatt J. A., LaBanc J. P., Dolwick M. F. Oral Surg Oral Med Oral Pathol. 1994; 78 (3): 296-300.
4. Danesh-Meyer M. J., Filstein M. R., Shanaman R. Histological evaluation of sinus augmentation using platelet rich plasma (PRP): a case series. J. Int Acad Periodontol. 2001; 3 (2): 48-56.
5. Mishra A., Pavelko T. Treatment of chronic elbow tendinosis with buffered platelet-rich plasma. Am J. Sports Med. 2006; 34 (11): 1774-1778.
6. Vick V. L., Holds J. B., Hartstein M. E., Rich R. M., Davidson B. R. Use of autologous platelet concentrate in blepharoplasty surgery. Ophthal Plast Reconstr Surg. 2006; 22 (2): 102-104.
7. Driver V. R., Hanft J., Fylling C. P., Beriou J. M. A prospective, randomized, controlled trial of autologous platelet-rich plasma gel for the treatment of diabetic foot ulcers. Ostomy Wound Manage. 2006; 52 (6): 68-74.
8. Mendonca-Caridad J. J., Juiz-Lopez P., Rubio-Rodriguez J. P. Frontal sinus obliteration and craniofacial reconstruction with platelet rich plasma in a patient with fibrous dysplasia. Int J. Oral Maxillofac Surg. 2006; 35 (1): 88-91.
9. Thor A. Reconstruction of the anterior maxilla with platelet gel, autogenous bone, and titanium mesh: a case report. Clin Implant Dent Relat Res.; 2002; 4(3): 150-155.
10. Rice D. H. Platelet-rich plasma in endoscopic sinus surgery. Ear Nose Throat J. 2006; 85(8): 516, 518.
^98 35=.
Научные статьи
11. Semenov F. V., Jakobashvili I. Ju. Primenenie obogashchennoi trombotsitami plazmy v kachestve gemostaticheskogo i analgeziruyushchego sredstva pri tonzillektomii [The use of platelet-rich plasma as a haemostatic and analgesic funds tonsillectomy]: Autoref. dis. ... cand. med. science. SPB.; 2009: 113 (in Russian).
12. Tashke K. Vvedenie v kolichestvennuyu tsito-gistologicheskuyu morfologiyu [Introduction to quantitative cyto-histological morphology]. AN Romania; 1980: 191 (in Russian).
13. Avtandilov G. G. Meditsinskaya morfometriya [Medical morphometry]. M.: Medicina; 1990: 384 (in Russian).
Natal'ya Fedorovna Skibitskaya - post-graduate student of day-time department of the Chair of ENT Diseases of Kuban State Medical University. Russia, 350007, Krasnodar, otorhinolaryngologist of the Krai Hospital No3, Krasnodar, 59, Zakharova Str., tel. 8-989815-89-29, e-mail: semenovanatasha1990@mail.ru
Fedor Vyacheslavovich Semenov - MD, Professor, Head of the Chair of ENT Diseases, Chief Doctor of the Krai Hospital No3, Krasnodar, 59, Zakharova Str., tel. 8-918-431-27-02, e-mail: ent@mail.kuban.ru
Andrei Aleksandrovich Evglevskii - MD Candidate, Associate Professor of the Chair of Histology with Embryology, tel. 8-989-82501-46, e-mail: evglandr@mail.ru
