CC BY
56
№ 2 - 2013 г.
14.00.00 медицинские и фармацевтические науки
УДК 616-001.32:615.225
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ КОРВИТИНА ПРИ СИНДРОМЕ ДЛИТЕЛЬНОГО РАЗДАВЛИВАНИЯ
В. Д. Лукьянчук, И. И. Гаврилов, Н. В. Рисухина
ГУ «Луганский государственный медицинский университет» (г. Луганск, Украина)
Исследования фармакотерапевтической эффективности корвитина показали, что введение данного препарата реализуется стабильным снижением уровня маркеров эндотоксикоза — МСМ и ТБК-реактантов, «обрывом» свободно-радикальних реакций, коррекцией дисбаланса в энергообмене и сохранением функционирования системы детоксикации в условиях СДР. Кроме того, корвитин корректирует уровень высокоспецифического маркера рабдомиолиза — миоглобина.
Ключевые слова: корвитин, синдром длительного раздавливания, фармакотерапия, посттравматический эндотоксикоз.
Лукьянчук Виктор Дмитриевич — доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой фармакологии ГУ «Луганский государственный медицинский университет», email: r.i.n.a@bk.ru
Гаврилов Иван Иванович — соискатель кафедры фармакологии ГУ «Луганский государственный медицинский университет», врач-травматолог Луганской городской больницы № 8, e-mail: r.i.n.a@bk.ru
Рисухина Наталья Владимировна — кандидат медицинских наук, ассистент кафедры фармакологии ГУ «Луганский государственный медицинский университет», e-mail: r.i.n.a@bk.ru
Введение. В настоящее время большинство исследователей склоняются к мнению, что синдром длительного раздавливания (СДР) следует отнести к раннему периоду тяжелой травматической болезни [1]. К сожалению, оказание помощи при СДР особенно на догоспитальном этапе характеризуется дефицитом высокоэффективных и безопасных средств монофармакотерапии.
Учитывая многовекторность патогенеза СДР, в последнее время внимание специалистов привлекают препараты политропного действия, которые, кроме прочего, способны проявлять выраженную детоксицирующую активность. Среди существующих
лекарственных средств таким требованиям отвечают биофлавоноиды, а именно, кверцетинсодержащий препарат — корвитин [2].
Таким образом, учитывая наличие общих точек соприкосновения звеньев патогенеза раннего посткомпрессионного периода СДР и фармакодинамических эффектов корвитина, целью настоящего исследования было экспериментальное обоснование целесообразности применения корвитина в условиях СДР.
Методы исследования. Экспериментальной моделью СДР служил патологический процесс, развивающийся у животных вследствие раздавливания мягких тканей задних конечностей в течение 5 часов в специальном устройстве с контролем давления (15 кг/см2)
[3].
Животные были разделены на 4 группы по 6-8 крыс в каждой. Животным опытной группы внутрибрюшинно вводили корвитин (200 мг/кг) непосредственно перед декомпрессией и в такой же дозе через 8 часов в посткомпрессионном периоде. Контрольной группе в таком же режиме вводили 0,9 % раствор NaCl. В качестве препарата сравнения избран тиотриазолин, применяемый в ранее установленном режиме дозирования [3].
Степень эндотоксикоза при СДР оценивали по состоянию маркеров эндогенной интоксикации — молекул средней массы (МСМ) в сыворотке крови [4] и конечных продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) — ТБК-реактантов в гомогенате печени животных [5].
Содержание миоглобина в крови определяли в динамике с помощью реакции обратной пассивной гемагглютинации (РОПГА).
Содержание АТФ, АДФ и АМФ определяли методом [6], а концентрацию фосфора неорганического (Фн) с помощью наборов «Филисит-Диагностика» (Украина).
Активность лактатдегидрогеназы (ЛДГ) и креатинкиназы (КФК) — определяли на химическом анализаторе «Accent-200» (Cormay S.A., Польша).
Состояние прооксидантно-антиоксидантного гомеостаза в условиях эксперимента исследовали с привлечением метода биохемилюминисценции (БХЛ).
Эффективность препарата также оценивали по динамике активности супероксиддисмутазы (СОД) [7], каталазы [8] и по фактору антиоксидантной активности
[9].
Детоксицирующую функцию печени животных при СДР под влиянием корвитина оценивали по активности — аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (АСТ), щелочной фосфатазы (ЩФ) и гамма-глютамилтрансферазы (ГГТ) с помощью анализатора «Accent-200» (Cormay S.A., Польша), а также по продолжительности тиопенталового сна [10].
Результаты исследования. Установлено, что введение корвитина в условиях СДР реализуется стабильным снижением (в среднем на 38 % по сравнению с контролем) уровня МСМ и ТБК-продуктов (см. рис. 1).
Исследование содержания высокоспецифического маркера рабдомиолиза — миоглобина, показали, что его концентрация в опытной группе существенно отличается от контрольной серии, о чем свидетельствуют данные, представленные на рис. 1. Так, уже на 3-м часу раннего посткомпрессионного периода содержание миоглобина в сыворотке и моче животных, которых лечили корвитином, в 2,2 раза и на 20 % соответственно ниже, чем в контрольной группе крыс. А на 9-й и 24-й час после декомпрессии под влиянием корвитина концентрация изучаемого маркера в сыворотке крови в 4 и 3,5 раза и в моче в 2,3 раза и на 45,5 % соответственно ниже по сравнению с контрольной серией.
Рис. 1. Влияние корвитина на уровень МСМ (усл. ед.), ТБК-реактантов (усл. ед. х 10 ) и миоглобину (нг/мл х 10 ) в сыворотке крови крыс с СДР (п = 6-8). Примечание: * — P < 0,001-0,05 — достоверно в сравнении с интактной группой; ■ — с контрольной группой; • — с референтной группой
Изучение состояния энергетического гомеостаза при СДР показало, что применение корвитина нормализует соотношение в пуле макроэргов за счет сохранения содержания АТФ (на 24 %) и АДФ (на 13 %). При этом корвитин повышает концентрацию Фн (на 13 %), корригируя таким образом все параметры энергообмена: энергетический заряд и потенциал, индекс фосфорилирования, термодинамический контроль дыхания и сравнительный коэффициент. Наряду с этим корвитин снижает активность ЛДГ в среднем на 17 % и КФК на 26 % в сравнении с контролем. Все это в комплексе способствует предупреждению перехода энергосинтеза на менее эффективный анаэробный путь.
БХЛ-анализа показал, что корвитин при СДР в крови корригирует все изучаемые параметры: амплитуды быстрой и медленной вспышек БХЛ-свечения, латентный период генерации медленной вспышки, конечное значение интенсивности свечения и общую светосумму реакции.
Изучение влияния корвитина на активность компонентов ферментативного звена АОС у крыс с СДР показало, что препарат повышает активность СОД в крови в среднем на 57,5 % и в печени на 71 % относительно контроля (табл. 2). Положительная динамика наблюдается и при анализе активности каталазы, уровень которой в сыворотке крови опытных животных на 9 часов на 19 %, а на 24 часа на 24 % ниже, чем у животных группы контроля, не имея при этом достоверных различий с интактными крысами (на 3 и 9 часов).
Примечательно, что такой показатель АОС организма как фактор антиоксидантной активности (Р) при применении корвитина в условиях СДР значительно (в 6,5; 3,8 и 14 раз соответственно срокам исследования, Р < 0,001) выше величин F контрольной группы.
Таблица 1
Влияние корвитина на активность СОД (усл.ед./мл) в печени животных при СДР
в динамике (п = 7)
Г руппа животных Статистический показатель Сроки исследования (часы)
3 9 24
Интактная M ± m 59,72 ± 1,74
Контрольная M ± m P1 23,90 ± 0,97 < 0,001 21,02 ± 1,61 < 0,001 25,33 ± 1,22 < 0,001
M ± m 31,23 ± 1,78 34,26 ± 1,56 54,67 ± 1,81
Опытная P1 < 0,001 > 0,001 > 0,05
P2 < 0,05 < 0,01 < 0,001
P3 < 0,001 > 0,05 < 0,01
M ± m 48,15 ± 2,51 35,18 ± 2,83 41,33 ± 2,78
Референтная P1 < 0,01 < 0,001 < 0,001
P2 < 0,001 < 0,01 < 0,01
При исследовании детоксицирующей активности корвитина установлено, что его применение снижает по сравнению с контролем активности АСТ (на 10 %) и АЛТ (в 1,72,5 раз), а также коэффициент де Ритиса (на 44 %), что в итоге указывает на весьма существенное торможение процессов цитолиза гепатоцитов в условиях СДР. Также при применении корвитина на фоне СДР достоверно снижаются активности ЩФ и ГГТ на 1029 и на 14 % соответственно по сравнению с контрольной серией. Одновременно доказана способность корвитина уменьшать продолжительность тиопенталового сна по сравнению с контрольной серией (рис. 2).
Рис. 2. Влияние корвитина на динамику продолжительности тиопенталового сна (мин) в условиях эндотоксемии при СДР (п = 6).
Примечание: * — P < 0,001-0,05 — достоверно по сравнению с интактной группой; ** — с контрольной группой; *** — с референтной группой
Таким образом, подводя итог обоснованию целесообразности применения биофлавоноидсодержащего водорастворимого препарата корвитин, есть все основания утверждать, что этот препарат способен эффективно предупреждать формирование распространенной мембранопатии в условиях посттравматического эндотоксикоза при СДР. Это, по нашему мнению, происходит как за счет непосредственного взаимодействия компонентов препарата с биомембранами и эндотоксинами, так и за счет его антиоксидантных, антирадикальных, антигипоксантных и детоксицирующих свойств. В итоге это реализуется эффективным функционированием защитно-компенсаторных механизмов и, в первую очередь, антиоксидантной защиты и естественных путей детоксикации, направленных на уменьшение гиперпродукции эндотоксинов, «обрывом» свободнорадикальных цепных реакций, коррекцией дисбаланса в энергетическом обмене, что, в конце концов, обеспечивает сохранение жизнеспособности организма в условиях
СДР.
Список литературы
1. Шор Н. А. К вопросу о терминологии последствий компрессионной травмы и острого нарушения кровотока в конечностях / Н. А. Шор // Вестн. хирургии. — 2005. — № 2. — С. 87-88.
2. Stauth D. Studies force new view on biology of flavonoids / D. Stauth // Oregon State University. — 2007. — N 4. — P. 18-21.
3. Болгов Д. М. Лікувально-профілактична ефективність тіотриазоліну при синдромі тривалого роздавлювання : автореф. дис. ... канд. мед. наук : спец. 14.03.05 «Фармакологія» / Д. М. Болгов. — Інститут фармакології та токсикології АМН України. — Київ, 2003. — 20 с.
4. Корякина Е. В. Молекулы средней массы как интегральный показатель метаболических нарушений (обзор литературы) / Е. В. Корякина // Клин. лаб. диагностика. — 2004. — № 3. — С. 3-7.
5. Стальная И. Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты / И. Д. Стальная, Г. Г. Гаршвили // Современные методы в биохимии / Под ред. В. И. Ореховича. — М. : Медицина, 1977. — С. 57-59.
6. Захарова Н. Б. Тонкослойная хроматография нуклеотидов эритроцитов на пластинках силуфол / Н. Б. Захарова, В. И. Рубин // Лаб. дело. — 1980. — № 12.
— С. 735-738.
7. Костюк В. А. Простой и чувствительный метод определения активности супероксиддисмутазы, основанный на реакции окисления кверцетина / В. А. Костюк, А. И. Потапович, Ж. А. Ковалев // Вопр. мед. химии. — 1990. — № 2. — С. 88-91.
8. Королюк М. А. Метод определения активности каталазы / М. А. Королюк, Л. И. Иванова, И. Г. Майорова // Лаб. дело. — 1988. — № 1. — С. 16-18.
9. Доклинические исследования лекарственных средств : метод. рекомендации / под ред. член-кор. АМН Украины А. В. Стефанова. — К., 2002. — 567 с.
10. Доклінічні дослідження ветеринарних лікарських засобів : методические
рекомендации / под ред. д-ра ветеринарних наук, проф. І. Я. Коцюмбаса. — Львів : Тріада плюс, 2006. — 360 с.
EXPERIMENTAL JUSTIFICATION OF KORVITIN APPLICATION AT COMPRESSION SYNDROME
V. D. Lukyanchuk, 1.1. Gavrilov, N. V. Risukhina
SE «Lugansk State Medical University» (Lugansk, the Ukraine)
Researches of pharmacotherapeutic efficiency of korvitin showed that introduction of this preparation is realized by stable depression of endointoxication level markers such as MSM and TBA reactants, «break» free radical reactions, imbalance correction in an energy exchange and conservation of functioning in detoxicating system at CS. Besides, korvitin corrects the level of high-specific marker such as rhabdomyolysis — myoglobin.
Keywords: korvitin, compression syndrome, pharmacotherapy, posttraumatic endointoxication.
About authors:
Lukyanchuk Victor Dmitriyevich — doctor of medical sciences, professor, head of pharmacology chair at SE «Lugansk State Medical University», e-mail: r.i.n.a@bk.ru
Gavrilov Ivan Ivanovich — competitor of pharmacology chair at SE «Lugansk State Medical University», traumatologist at Lugansk municipal hospital № 8, e-mail: r.i.n.a@bk.ru
Risukhina Natalia Vladimirovna — candidate of medical sciences, assistant of pharmacology chair at SE «Lugansk State Medical University», e-mail: r.i.n.a@bk.ru
List of the Literature:
1. Shor N. A. Terminology of consequences of compression trauma and acute disturbance of bloodstream in extremities / N. A.Shor // Bull. of surgery. — 2005. — № 2. — P. 8788.
2. Stauth D. Studies force new view on biology of flavonoids / D. Stauth // Oregon State University. — 2007. — N 4. — P. 18-21.
3. Bolgov D. M. Treatment-and-prophylactic efficiency of tiotriazolini at syndrome of long compression failure: autoref. dis. ... cand. of medical sciences: speciality 14.03.05 «Pharmacology» / M. Bolgov. — Institute of pharmacology and toxicology of AMN of the Ukraine. — Kiev, 2003. — 20 P.
4. Koryakina E. V. Molecules of average mass as integrated indicator of metabolic disturbances (literature review) / E. V. Koryakina // Clin. lab. diagnostics. — 2004. — № 3. — P. 3-7.
5. Stalnaya I. D. Method of definition of malonic dialdehyde by means of tiob thiobarbituric acid / I. D. Stalnaya, G. G. Garshvili // Modern methods in biochemistry / Under the editorship of V. I. Orekhovich. — M: Medicine, 1977. — P. 57-59.
6. Zakharova N. B. Thin-layer chromatography of nucleotides of erythrocytes on silupfol plates / N. B. Zakharova, V. I. Rubin // Lab. business. — 1980 . — № 12. — P. 735-738.
7. Kostyuk V. A. Simple and sensitive method of determination of superoxide dismutase activity, based on reaction of oxidation of Quercetinum / V. A. Kostyuk, A. I. Potapovich, Zh. A. Kovalev // Issues of medical chemistry. — 1990 . — № 2. — P. 88-91.
8. Korolyuk M. A. Method of determination of catalase activity / M. A. Korolyuk, L. I. Ivanov, I. G. Mayorova // Lab. business. — 1988 . — № 1. — P. 16-18.
9. Preclinical researches of medicines: method. references / under the editorship of member cortices. AMS of the Ukraine of A.V. Stefanov. — K. 2002 . — 567 P.
10. Preclinical researches of veterinary medicines: methodical guidance / Under the editorship of Dr. of veterinary sciences, prof. I. Ya. Kotsyumbas. — M: Triad plus, 2006.
— 360 P.
