Экспериментальное исследование связывающей способности альбумина при введении ацетилсалициловой кислоты Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СВЯЗЫВАЮЩЕЙ СПОСОБНОСТИ АЛЬБУМИНА ПРИ ВВЕДЕНИИ АЦЕТИЛСАЛИЦИЛОВОЙ КИСЛОТЫ

Э. И. Начкина, кандидат медицинских наук

Современная медицина обладает широким арсеналом лекарственных средств. Однако многие из применявшихся ранее препаратов оказались недостаточно эффективными или токсичными. Вместе с тем некоторые традиционно используемые средства прочно сохранили свое место в «золотом фонде». Одним из них, безусловно, является ацетилсалициловая кислота (АСК). Ее высокая действенность неоднократно показана в контролируемых испытаниях, соответствующих стандартам «медицины доказательств». Это касается первичной и вторичной профилактики инфаркта миокарда, тромбоэмболических осложнений у больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями [6; 7]; поражений сосудов на фоне атеросклероза и сахарного диабета; состояний после операций аортокоронарного шунтирования или баллонной ангиопластики, ишемического инсульта или транзиторной ишемической атаки и т. д. [3; 5].

Нередко больные в течение длительного времени, а иногда пожизненно вынуждены принимать АСК, что приводит к развитию побочных эффектов, преимущественно со стороны желудочно-кишечного тракта. Однако ацетилсалициловая кислота гидролизуется в стенке желудочно-кишечного тракта и печени до салициловой кислоты, которая в плазме связана в основном с альбумином [4], поэтому, вероятно, оказывает влияние и на физико-химические свойства его молекулы.

Одним из защитных механизмов, занимающих важное место в обеспечении дезинтокси-кационных функций организма, выступает образование комплексов различных соединений с белком плазмы крови при увеличении концентрации продуктов метаболизма или поступлении экзогенных лигандов. Значительной способностью к комплексообразованию обладает сывороточный альбумин, молекула

которого имеет множество активных центров с высоким сродством к соединениям разного химического строения.

В последнее десятилетие установлено, что в патогенезе ряда заболеваний играют роль физико-химические изменения белков плазмы крови, выражающиеся в патологических нарушениях их конформации. При изучении модификаций самого известного из белков — альбумина плазмы открылись новые механизмы, объясняющие патогенез абсцессов, флегмон, сепсиса, почечной недостаточности, множественной травмы, пневмонии, анемии, инфаркта миокарда и др. [1; 2]. Было показано, что течение и исход многих интоксикаций существенно зависит от состояния транспортных функций сывороточного альбумина. Этому белку принадлежит ведущая роль в связывании гидрофобных токсинов и их доставке к местам детоксикации.

Несмотря на активное обсуждение в литературе данного вопроса, процессы, происходящие в молекулах альбумина при введении лекарственных препаратов в организм, до сих пор изучены недостаточно. Коррекция нарушения конформации молекулы альбумина нередко может предотвратить прогрессирование патологического процесса или облегчить его течение. Поэтому важно знать, как влияют лекарственные препараты, применяемые для лечения тех или иных заболеваний, на физико-химические свойства альбумина, поскольку характер их изменений под воздействием лекарственного средства может быть одним из показателей, диктующих выбор препарата при данной патологии.

В связи с этим представляют несомненный интерес механизмы регуляции конформацион-ных изменений молекулы альбумина на фоне введения ацетилсалициловой кислоты. Целью работы явилось исследование дозозависимого

© Э. И. Начкина, 2006

Серия «Медицинские науки*

143

влияния АСК на количественные показатели срок наблюдения подопытные животные нахо-физико-химических свойств альбумина в экс- дились в обычных условиях содержания вива-перименте при введении интактным животным и в условиях моделирования гиперхолестери-немии и гипергликемии.

Экспериментальные исследования были выполнены в зимнее время года на 120 белых нелинейных мышах обоего пола массой 20 —

25 г. В первых трех опытных группах (п]23 = 15) интактные животные получали ацетилсалициловую кислоту внутрь зондовым способом в дозах 3, 9 и 30 мг/кг в течение 30 суток. В четвертой (контрольной) группе (п = 15) воспроизводилось нарушение углеводного и липидного обмена путем однократного внутрибрюшинного введения аллоксана в дозе 135 мг/кг и 20-суточного введения масляного раствора холестерина внутрь в дозе 40 мг/кг через 10 дней после введения аллоксана. Пятая, шестая и седьмая опытные группы (п567 = 15) дополнительно на фоне введения холестерина получали ацетилсалициловую кислоту внутрь зондовым способом в дозах 3, 9 и 30 мг/кг в течение 20 суток. Ин-тактную группу составили 15 мышей. Весь

рия без ограничения доступа к пище и воде.

На 31-е сутки эксперимента животных де-капитировали после предварительного введения этаминала натрия в дозе 50 мг/кг внут-рибрюшинно и проводили одновременный забор крови. Для получения сыворотки кровь центрифугировали при 1 500 об/мин в течение 15 мин. В сыворотке крови определяли общее содержание белка биуретовым методом; общую концентрацию альбуминов (ОКА), концентрацию эффективного альбумина (ЭКА) флюресцентным способом с использованием набора реактивов ГМП НИМВЦ «Зонд». Исходя из ОКА и ЭКА рассчитывали резерв связывания альбумина (РСА) и индекс токсичности (ИТ) по формулам:

РСА = ЭКА/ОКА; ИТ = ОКА/ЭКА-1

Статистический анализ проводили с использованием ¿-критерия Стъюдента.

% 600

.. /

500

/

400

300

200

100

0

/

м жт

Общий белок

ОКА

ЭКА

РСА

ИТ

3 мг/кг

□ 9 мг/кг

30 мг/кг

Рисунок 1

Динамика показателей белкового обмена при 30-суточном введении ацетилсалициловой кислоты, % к данным интактных животных

* — достоверность отличия от данных интактной группы (р < 0,05)

144

ВЕСТНИК Мордовского университета | 2006 | № 2

При курсовом введении ацетилсалициловой кислоты в ежедневной дозе 3 мг/кг в сыворотке крови животных первой опытной группы отмечалось снижение ЭКА до 57 % и рост ИТ до 266 % от данных интактных животных (рис. 1). Оставшаяся связывающая способность альбумина, определяемая показателем РСА, уменьшалась на 32 %. ОКА составила 32,00 0,52 г/л при 39,00 0,34 г/л у интактных животных (р < 0,001).

Увеличение дозы АСК до 9 мг/кг способствовало дальнейшему падению ЭКА до 46 % и подъему ИТ до 355 % от показателей интактных животных. ОКА снижалась на 22 %, а РСА был равен 59 % от показателей интакт-ной группы.

АСК в максимальной изученной дозе изменяла ЭКА с 28,24 0,43 г/л до 9,16 0,84 г/л

(р < 0,01) с сопутствующим уменьшением РСА до 44 % и ростом ИТ в 5,8 раза по сравнению с данными интактных животных. ОКА

составила 73 %.

%

900

800 700

600

500

400

300

200 100

0

□ Аллоксан + холестерин * Аллоксан + холестерин + аспирин 3 мг/кг I

■ Аллоксан + холестерин + аспирин 9 мг/кг & Аллоксан + холестерин + аспирин 30 мг/кг

Рисунок 2

Динамика показателей белкового обмена при введении ацетилсалициловой кислоты в

условиях моделирования аллоксанового диабета и гиперхолестеринемии,

% к данным интактных животных

* — достоверность отличия от данных интактной группы (р < 0,05); # — достоверность отличия от данных контрольной группы № 1 (р < 0,05)

Серия «Медицинские науки» 145

Таким образом, увеличение дозы ацетилсалициловой кислоты от 3 до 30 мг/кг усиливало конформационные изменения молекулы альбумина. Даже в низких, близких к терапевтическим, дозах АСК вызывала резкий рост ИТ, падение ЭКА и РСА, что свидетельствует о заполнении свободных альбуминовых центров, обусловленном повышением связи салициловой кислоты с молекулой альбумина.

При моделировании аллоксанового диабета с дополнительной нагрузкой экзогенным холестерином в контрольной группе по сравнению с данными группы интактных животных наблюдалось снижение ОКА, ЭКА и РСА соответственно до 85, 67 и '78 % и рост ИТ с 0,380 ± 0,013 до 0,75 ± 0,02 усл. ед. (р < 0,001) (рис. 2). Однако выраженность изучаемых показателей здесь была слабее, чем при введении ацетилсалициловой кислоты во всех используемых дозах. Дополнительное применение АСК на фоне углеводного и ли-пидного дисгомеостаза способствовало про-

#

V-«

-V * - * V 0 Л* Л*

» «Л

.••ла••«:а»«

#

#

—

■АМгй/Ш

# #

#

4ШРЖ

» * * тлл •

Общий белок

ОКА

ЭКА

РСА

ИТ

грессирующему уменьшению ЭКА, РСА и подъему ИТ, достигающему максимального значения при введении препарата в дозе 30 мг/кг (3,06 ± 0,19 усл. ед. при 0,380 ± ± 0,013 усл. ед. у интактных животных). При этом изменение изучаемых величин было более существенным, чем при введении АСК ин-тактным животным.

Согласно полученным данным, ацетилсалициловая кислота вызывает значительные дозо-зависимые изменения связывающей способности молекулы альбумина при введении интак-тным животным и при моделировании нарушений углеводного и липидного обмена. Блокирование и перегрузка связывающих центров

альбумина лекарственным препаратом и продуктами метаболизма вызывают изменение комплексообразующей способности и тем самым нарушают его транспортную функцию. Следовательно, направленность альбумина на связывание и перенос лекарственного препарата или его метаболита препятствует осуществлению детоксицирующей функции в отношении токсинов, образующихся в ходе заболевания или в процессе жизнедеятельности организма, и усугубляет эндогенную интоксикацию. Поэтому при назначении терапии необходимо учитывать влияние лекарственного препарата на физико-химические свойства альбумина.

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

1. Альбумин сыворотки крови в клинической медицине / под ред. Ю. А. Грызунова, Г. Е. Добрецова. М., 1998. Кн. 2. 440 с.

2. Андреева О. JL Изменения связывающих центров в молекуле альбумина при остром инфаркте миокарда / О. JI. Андреева, Г. Е. Добрецов, JI. Г. Шмелева // Кардиология. 1997. № 9. С. 68 — 69.

3. Насонов Е. JI. Поражения желудка, связанные с приемом нестероидных противовоспалительных препаратов (часть I) / Е. Л. Насонов, А. Е. Каратеев // Клин, медицина. 2000. № 3. С. 4 — 10.

4. Румянцев Д. О. Клиническая фармакокинетика и метаболизм ацетилсалициловой кислоты. Современное состояние проблемы / Д. О. Румянцев, Е. В. Кокурина, Ф. С. Байбуртский / Эксперим. и клин, фармакология. 1998. Т. 61. № 6. С. 76 — 80.

5. Chesebro J. Н. Effects of dipyridamole and aspirin on vein graft patency after coronary bypass operations / J. H. Chesebro // Thromb. Res. 1990. Vol. 60. P. 5.

6. Fatah K. Acetylsalicylic acid may protect the patient by increasing fibrin gel porosity. Is withdrawing of treatment harmful to the patient? / K. Fatah, H. Bevingt, A. Albagett // Eur. Heart J. 1996. Vol. 17. P. 1362 — 1366.

7. Patrono C. Aspirin as an antiplatelet drug / C. Patrono // New Engl. J. Med. 1994. Vol. 330. P. 1287 — 1294.

Поступила 29.03.06

146

ВЕСТНИК Мордовского университета | 2006 | № 2