CC BY
6их роль в передаче возбудителей москитных лихорадок // Автореф. дисс. канд. биол. наук. - М., 1995. - 23 с. [Volkova T.V. Sand flies of the Tadjikistan and theirs role in transmission of agents of sand flies fevers. Avtoreferat diss. candidate of biologist science. M., 1995, p -23].
5. Искандаров Ф.МКровососущие двукрылые (Diptera: Ceratopogonidae, Culicidae, Psychodidae, Tabanidae) - компоненты гнуса санаторно-курортных зон Центрального Таджикистана // Дисс. канд. биол. наук. - Душанбе, 2017. - 128 с. [Diptera insect blood suck (Diptera: Ceratopogonidae, Culicidae, Psychodidae, Tabanidae) - are component of gnus of sanatorium-health zones of Central Tajikistan. Diss. cand. biol. Science. Dushanbe, 2017. 128 pp].
6. Перфильев П.П. К систематике и распространению москитов в Таджикистане и Узбекистане // Животные паразиты и некоторые паразитарные болезни человека в Таджикистане. - Л. 1929. - С.70-83. [Perfiliew P.P. Whith systematic and spread of sand flies in the Tajikistan and Uzbekistan. Parasites of animals and some diseases of man in the Tajikistan. L., 1929, p. 70-83].
7. Перфильев П.П. К фауне москитов Средней Азии // Материалы по паразитам и фауне южного Таджикистана. - М.-Л., 1935. - С. 93-114. [Perfiliew P.P. Whith fauna of sand flies of the
Central Asia. [Materials about parasites and fauna of the Southern Tajikistan. M-L., 1935, p. 93-114].
8. Петрищева П.А., Брегетова Н.Г. Видовое и качественное соотношение фауны Phlebotomus естественных и хозяйственных биотопов в Гис-сарском районе // Тр. Тадж. базы АН СССР - 1936. - XVI. - С. 211-219.[Petrischeva P.A., Bregetova N.G. Balance of species and quality of fauna of Phlebotomus natural and national biotops in the Gissar region. Mental labour of Tajik. Base AS USSR. 1936, v. VI, p. 211-219.
9. Щуренкова А.И. Фауна флеботомусов Таджикистана //Проблемы кожного лейшманио-за. - Ашхабад: Туркменгосиздат, 1941. - С. 3741. [Schurenkova A.I. Fauna Phlebotomus of the Tajikistan. Problems of cutaneous leishmaniasis. Ashhabad, Turkmenstatepublishers, 1941, p. 3741].
Поступила 25.01.19
© М.М АСЛАНОВА., К.Ю. КУЗНЕЦОВА, А.В ЗАГАЙНОВА., М.А. КУЗНЕЦОВА M.M. ASLANOVA, K.YU. KUZNETSOVA, A.V. ZAGAYNOVA, M.A. KUZNETSOVA, 2019
doi: 10.33092/0025-8326mp2019.1.10-17
М.М. Асланова1, К.Ю. Кузнецова 12, А.В. Загайнова\ М.А. Кузнецова1,2 M.M. Aslanova1, K.Yu. Kuznetsova1,2, A.V. Zagaynova1, M.A. Kuznetsova1,2
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ РАЗРАБОТКА МЕТОДА ПРОБОПОДГОТОВКИ ДЛЯ ОПТИМИЗАЦИИ САНИТАРНО-ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА ПОЧВ С ПРИМЕНЕНИЕМ МЕТОДА ИММУНОМАГНИТНОЙ СЕПАРАЦИИ С ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНТНЫМ МЕЧЕНИЕМ ПАРАЗИТАРНЫХ ПАТОГЕНОВ EXPERIMENTAL DEVELOPMENT OF A SAMPLING METHOD FOR OPTIMIZATION OF SANITARY AND PARASITOLOGICAL ANALYSIS OF SOILS USING THE METHOD OF IMMUNOMAGNETIC SEPARATION WITH IMMUNOFLUORESCENT LABELING
OF PARASITIC PATHOGENS
'ФГБУ «Центр стратегического планирования и управления медико-биологическими рисками здоровью»
Министерства здравоохранения Российской Федерации 2 ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет) 'FGBU « Center for strategic planning and management of biomedical health risks» of the Ministry of health of the
Russian Federation. Moscow.
2FGAOU First MSMU n.a. I. M. Sechenov of Ministry of Healthcare (Sechenovsky University,) Moscow, Russia.
Цель исследования - усовершенствование этапов пробоподготовки и оптимизации санитарно-паразитоло-гического анализа различных видов почв (песка) на наличие цист Lamblia intestinalis и ооцист Criptosporidium parvum с применением метода иммуномагнитной сепарации с последующим иммунофлюоресцентным ме-
чением кишечных протозоозов (ИМС-ИФМ).
Проанализировано 30 проб почв отобранных на детских площадках и парковых зонах г. Москвы, проведено 2240 исследований с применением четырех методов пробоподготовки и диагностики.
Выводы:
1. Метод ИМС-ИФМ позволит установить причинно-следственные связи заболеваемости с показателями загрязнённости почв.
2. Метод ИМС-ИФМ позволяет одновременно обнаруживать комплекс паразитарных возбудителей в исследуемых образцах почв с высокой степенью выявляемости (L. intestinalis - до 90%, C. parvum - до 70%).
3. Модифицированный метод ИМС-ИФМ позволит в одной пробе определять возбудителей разных таксономических групп; снизить время, затраченное на пробоподготовку с 3 суток до 35 минут; уменьшить число подготовительных и стандартизированных процедур с 7 до 3; даёт возможность проводить исследования в день доставки проб в лабораторию; исключить применение высокотоксичных химических реактивов; улучшить качество определения паразитологических параметров и гигиенических условий труда.
4. Использование метода ИМС-ИФМ в работе ИЛЦ позволит унифицировать методы лабораторного контроля.
Ключевые слова: цисты лямблий, ооцисты криптоспоридий, пробоподготовка, почва, метод иммуно-магнитной сепарации с последующим иммунофлюоресцентным мечением, паразитарные патогены.
The purpose of the study - the improvement stages of sample preparation and optimization of sanitary and parasitological analysis of different types of soil (sand) in the presence of cysts L. intestinalis (Giardia) and oocysts C. parvum (cryptosporidium) using the method of immunomagnetic separation followed by immunofluorescence labeling intestinal protozoozov (IC-IMP ).
Analyzed 30 soil samples taken at playgrounds and park areas of Moscow, 2240 studies were conducted using 4 methods of sample preparation and diagnostics.
Findings:
1. The method of IMC-IPM will allow establishing causal relationships of morbidity with soil contamination indicators.
2. The IMS-IPM method allows simultaneously detecting a complex of parasitic pathogens in the studied soil samples with a high degree of detectability (L. intestinalis up to 90%, C. parvum up to 70%).
3. The modified IMS-IPM method will allow identifying pathogens of different taxonomic groups in one sample; reduce the time spent on sample preparation from 3 days to 35 minutes; reduce the number of preparatory and standardized procedures from 7 to 3; provides an opportunity to conduct research on the day the samples are delivered to the laboratory; exclude the use of highly toxic chemical reagents; improve the quality of the determination of parasitological parameters and hygienic working conditions.
4. The use of the IMC-IPM method in the work of the ILC will allow to unify the methods of laboratory control.
Keywords: Giardia cysts, oocysts of cryptosporidia, sample preparation, soil, immunomagnetic separation method followed by immunofluorescence labeling, parasitic pathogens, adopted method, approved methods.
Введение
Паразитарная безопасность объектов окружающей среды, в том числе почв, регламентирована санитарными правилами и нормативами СанПиН 3.2.3215-14 «Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации» [10].
Одними из контролируемых показателей являются цисты Lamblia intestinalis и ооцисты Criptosporidium parvum, имеющие наибольшее эпидемиологическое значение в возникновении и развитии заболеваемости населения паразитозами [2, 4].
Данные федеральной статистики о санитарном состоянии объектов окружающей среды, в том числе почв, не отражают полной картины паразитарного загрязнения, так как получены вследствие регулярного применения архаичных методов паразитологи-ческих исследований различными испытательными лабораторными центрами (ИЛЦ). При чрезвычайно низкой инфицирующей
дозе цист L. intestinalis и ооцист C. parvum первостепенным является внедрение в работу ИЛЦ эффективной методики определения этих показателей в почвах, что позволило бы получать достоверные результаты отличные от нуля и прогнозировать инфекционную паразитарную заболеваемость [7, 9, 11, 13].
Изменения социально-бытовых и производственных условий жизни населения Российской Федерации, заключающиеся в развитии частной собственности, фермерства и индивидуального производства, усиливающейся миграции населения не только внутри страны, но и в странах ближнего и дальнего зарубежья, интенсификации процессов антропогенного преобразования природы, изменяющиеся условия обитания возбудителей паразитарных болезней в окружающей среде, участившиеся стихийные природные явления настоятельно требуют корректировки и совершенствования существующих и разработки новых подходов к их профилак-
тике [7, 15, 21, 24].
На сегодняшний день практически не изучены эпидемические последствия нерегла-ментированного использования необеззара-женных сточных вод и их осадков, навоза и стоков животноводческих ферм в сельском, городском, индивидуальных и фермерских хозяйствах способствует контаминации инвазионным материалом почвы, сельскохозяйственных, овощных и ягодных культур, создавая тем самым высокий риск новых заражений животных и людей возбудителями гельминтозов и кишечных протозойных заболеваний.
Нормативная база, существующая на территории РФ, не предусматривает проведения эффективного и регулярного мониторинга паразитарного состояния почв (песка) после различных техногенных загрязнений
[3, 8, 19, 21].
В связи с вышеперечисленными проблемами современным паразитологам настоятельно требуется изменить стратегию и тактику диагностики и профилактики па-разитозов на территории РФ. Современные тенденции обеспечения санитарно-эпидемиологического благополучия населения связаны с развитием системы мониторинговых исследований объектов среды обитания и совершенствованием лабораторного контроля за факторами передачи инфекционных и паразитарных болезней, среди которых почва (песок) имеет немаловажное значение
[1, 2, 4, 16].
Ежегодно в мире 1,4 миллиона смертных случаев от паразитарных инфекций могли бы быть предотвращены за счет качественной диагностики паразитарных заболеваний и совершенствования методик определения паразитарных патогенов как в клиническом материале, так и в объектах окружающей среды [8, 9, 11, 17].
Многочисленные исследования можно подвести к следующему итогу: где отмечалась высокая распространенность кишечных паразитозов, особенно гельминтозов, там же неизменно отмечается низкий уровень жизни населения [10, 11, 13].
В настоящее время в практическом здравоохранении применяют около 40 методов санитарно-паразитологических исследований объектов окружающей среды, которые основаны на рутинных нестандартизирован-ных процедурах пробоподготовки образцов и характеризуются низкой воспроизводимостью этапов исследования и подтверждения
полученных результатов [12, 14, 20].
Существующие в паразитологических лабораториях диагностические методы, которые применяются при исследованиях различных проб, морально устарели и не соответствуют стандартам лабораторных исследований, а при невысоких загрязнениях почв показывают низкую эффективность
[1, 6, 15].
Эти проблемы свидетельствуют не только о чрезвычайной актуальности изучения паразитарных болезней в современных условиях, но и требуют поиска новых подходов к их диагностике, лечению и профилактике, которые были бы приемлемы и доступны в повседневной работе во всех звеньях практического здравоохранения [2, 8, 16, 18].
Целью нашего исследования явилось усовершенствование этапов пробоподготовки и оптимизации санитарно-паразитологиче-ского анализа различных видов почв (песка) на наличие цист L.intestinalis (лямблии) и ооцист C. parvum (криптоспоридии) с применением метода иммуномагнитной сепарации с последующим иммунофлюорес-центным мечением кишечных протозоозов (ИМС-ИФМ).
Материал и методы
Для реализации поставленных в работе целей было проанализировано 30 проб почв отобранных на детских площадках и парковых зонах г. Москвы, проведено 2240 исследований с применением различных методов пробоподготовки и диагностики.
В нашей работе применяли следующие методы исследования:
• метод Падченко утвержденный МУК 4.2.2661-10 «Методы санитарно-паразито-логических исследований»;
• методом количественного учета цист и ооцист простейших, рекомендованный ВОЗ (1991 г.);
• метод окраски препаратов по Цилю -
Нильсену на определение ооцист крипто-
споридий в соответствии с МУК 4.2.3145-13 «Лабораторная диагностика гельминтозов и протозоозов».
Один таксономический вид простейших -цисты L. intestinalis без их количественного учёта не позволяет оценить степень эпидемической опасности почвы и риски заболевания на территориях обследуемых объектов.
Кроме того, метод Падченко является энергоёмким: временные затраты на про-
ведение одного исследования составляют свыше 24 часов и не включены в действующие методические указания МУК 5.1.973-00 «Расчётные затраты времени на основные виды паразитологических исследований в центрах Госсанэпиднадзора», что затрудняет планирование работы лаборатории на одного специалиста.
Эффективность метода составляет 5560%. Ооцисты C. parvum этим методом не обнаруживаются. Для их обнаружения применяется дополнительный метод окрашивания по Цилю - Нильсену, который утверждён и рекомендован только для исследования клинического материала (МУК 4.2.3145-13).
За счёт применения 2-х разных методов и многочисленных промывок идут потери паразитарных патогенов.
Полученные данные подтверждали натурными исследованиями почвенных проб, которые показали высокую степень выяв-ляемости цист L. intestinalis методом ИМС-ИФМ - 60% (табл.1), что в 2,6 раз выше показателя утверждённого в нормативных документах метода Падченко (23,5%).
Степень выявляемости цист L. intestinalis и ооцист C. parvum методом ИМС-ИФМ при применении новой процедуры пробоподго-товки почвы была апробирована в экспериментальных исследованиях с искусственным заражением.
При проведении наших исследований установлено, что за счёт слипания (адгезии) паразитарных патогенов с почвенными частицами в ходе процедуры пробоподго-товки происходит частичная потеря цист L. intestinalis до 10-15%, C. parvum - 20-30%.
Одной из важных задач по разработке метода подготовки различных видов почв для
паразитологических исследований методом ИМС-ИФМ было комплексное определение цист L. intestinalis и ооцист C. parvum в одной пробе в одном ходе паразитологическо-го анализа.
Метод ИМС-ИФМ позволил нам обнаруживать паразитарные патогены разных ток-сономических групп, в том числе цисты L. intestinalis и ооцисты C. parvum в одной пробе в одном ходе исследования (табл.1).
С целью сохранения патогенов в исследуемых пробах методом ИМС-ИФМ, в процедуре пробоподготовки исключили многократную промывку образцов.
При сопоставлении утверждённых и предлагаемого методов паразитоло-гических исследований различных видов почв (песка) обнаружено, что метод ИМС-ИФМ позволяет (табл. 2):
- определять возбудителей разных таксономических групп в одной пробе;
- уменьшить время, затраченное на про-боподготовку с 3 суток до 35 минут;
- сократить число подготовительных и стандартизированных процедур с 7 до 3;
- исключить применение высокотоксичных химических реактивов (вместо соляной кислоты, диэтилового эфира, применяется принципиально отличный от них класс диаг-ностикумов, основанный на использовании моноклональных антител), что позволяет улучшить качество определения паразито-логических параметров и гигиенические условия труда;
- исключить многократные промывки почвы, чтобы предотвратить потери патогена;
- проводить количественную оценку полученных результатов исследования с возможностью их последующей проверки и
Метод исследования Общее количество исследованых проб Общее количество проведенных исследований % нестандартных проб Число обнаруженных цист патогенных кишечных простейших
Метод Падченко 10 17 L. intestinalis - 23,5 C. parvum - 0 L. intestinalis - 4 C. parvum - 0
Метод окрашивания по Цилю-Нильсену 10 17 L. intestinalis - 0 C. parvum - 8,0 L. intestinalis - 0 C. parvum - 1
Метод ИМС-ИМФ 10 10 L. intestinalis - 60 C. parvum - 30 L. intestinalis - 6 C. parvum - 3
Таблица 1. Сравнительная оценка результатов исследования проб почвы на наличие цист L. intestinalis и ооцист C. parvum с применением ИМС-ИФМ и утвержденных методов.
подтверждения;
- проводить количественную оценку полученных результатов исследования с возможностью их последующей проверки и подтверждения;
- увеличить выявляемость цист L. intestinalis от 55 до 90% и ооцист C. parvum от 0 -70%.
Обсуждение результатов
Анализ литературных данных, статистической отчетности и результатов натурных и экспериментальных исследований почвы, показал, что метод ИМС-ИФА обладает большей чувствительностью и специфичностью для целенаправленного определения цист L. intestinalis и ооцист C. parvum и может являться референтным для применения в практической работе паразитологических лабораторий.
Аналогичные технологические процессы частично заимствованы и хорошо себя зарекомендовали при исследованиях различных видов вод, как за рубежом, так и на территории Российской Федерации (МУК 4.2.231408).
Например в Великобритании еще в 2001
году на работу методом ИМС-ИФМ было аккредитовано только 13 лабораторий, а на сегодняшний день этот метод в работе применяют более 200 лабораторий.
Таким образом, выполненные нами исследования доказали высокую чувствительность и специфичность усовершенствованного метода по сравнению с утверждёнными в нормативных документах методами в отношении патогенных простейших цист L. intestinalis и ооцист C. parvum в различных видах почв.
Выводы
1. Метод ИМС-ИФМ позволит проводить более эффективную оценку риска возникновения паразитарных заболеваний, в очагах острых кишечных инфекций для установления причинно-следственных связей заболеваемости с показателями загрязнённости почв.
2. Метод ИМС-ИФМ, позволяет одновременно обнаруживать комплекс паразитарных возбудителей в исследуемых образцах почв с высокой степенью выявляемости: для цист L. intestinalis с 55 до 90% для ооцист C. parvum с 0 - 70%, что свидетельствует о
Применяемые методы Почва
Время, затраченное на пробоподготовку
Утверждённые до 3 суток
ИМС-ИФМ 35 мин
Число подготовительных и стандартизированных процедур
Утверждённые 7
ИМС-ИФМ 3
Применяемые химические реактивы
Утверждённые Формалин, 1% р-р Люголя, Набор для окраски по Цилю-Нильсену
ИМС-ИФМ Диагностикум 100FLK Agua-Glo G/C Direct
Учёт результатов исследований
Утверждённые качественный
ИМС-ИФМ количе ственный
Чувствительность методов
L. intestinalis C. parvum
Утверждённые 55% 0%
ИМС-ИФМ 90% 70%
Таблица 2. Сравнительная оценка технологических параметров утверждённых методов и метода ИМС-ИФМ.
высокой чувствительности разработанных методических подходов.
3. Модифицированный метод ИМС-ИФМ позволит в одной пробе определять возбудителей разных таксономических групп; снизить время, затраченное на пробопод-готовку с 3 суток до 35 минут; уменьшить число подготовительных и стандартизированных процедур с 7 до 3, а также даёт возможность проводить исследования в день доставки проб в лабораторию; исключить применение высокотоксичных химических реактивов; улучшить качество определения паразитологических параметров и гигиенических условий труда.
4. Использование метода ИМС-ИФМ в работе ИЛЦ позволит унифицировать методы лабораторного контроля с целью количественного учёта загрязнённости различных видов почв паразитарными патогенами для оценки риска возникновения протозойных паразитарных заболеваний среди населения.
ЛИТЕРАТУРА
1. Борзунов В.М., Веревщиков В.К., Донцов Г. И. Протозойные инвазии и гельмин-тозы человека. Учебное пособие. - Екатеринбург: Уральская государственная медицинская академия. 2004: 175 [Borzunov V.M., Verevschikov V.K., Dontsov G.I. Protozoan infestation and helminth infections of man. A training manual Yekaterinburg: Ural state medical Academy. 2004: 175. (in Russian)].
2. Бородина О.Н. Жукова Э.В., Кравец 3.Ф. Обнаружение возбудителя криптоспо-ридиоза у человека и животных в Туркменистане // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1994;1: 8-11 [Borodina O.N., Zhukova E.V., Kravets 3.Ф. Detection of the causative agent of cryptosporidiosis in humans and animals in Turkmenistan// Med. Parasitol. - 1994; 1: 8-11. (in Russian)].
3. Бельмер С.В. Лямблиоз у детей. Рус. мед. журн. 2004; 3: 141-144 [Belmer S. V. Giardiasis in children. Rus. med. journal. 2004; 3: 141-144. (in Russian)].
4. Гузеева Т. М. Сергиев В. П. Состояние диагностики паразитарных заболеваний в Российской Федерации // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2011. №4. С.43-45. [Guzeeva T. M. V. P. Sergiev. State of diagnosis of parasitic diseases in the Russian Federation / Med. Parasitol. 2011; 4: 43-45. (in Russian)].
5. Дубровский Ю.А. Емельянова Л.П./ Эпидемиологическое значение почвы и водоемов в природных очагах криптоспо-ридиоза / Микробиология. 2003. № 4. С. 100-103. [Dubrovsky Yu. A., Yemelyanova L. P. Epidemiological importance of soil and water in the natural foci of cryptosporidiosis /// Microbiology. 2003; 4: 100-103. (in Russian)].
6. Дрынов И.Д., Сергиев В.П., Малышев Н.А. Влияние преобразования природы на распространенность паразитарных и инфекционных болезней // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1999; 3: 3-6 [Drynov I.D., Sergeev V. P., Malyshev N. Ah. Influence of nature transformation on the prevalence of parasitic and infectious diseases / / Medical Parasitology and parasitic diseases. 1999; 3: 3-6. (in Russian)].
7. Долбин Д.А., Лутфуллин М.Х., Латы-пов Д. Г. Сравнительная эффективность различных гельминтоовоскопических методов для диагностики неоаскаридоза телят. // Тр. ВИГИС. 2005; Т. 41:154 - 160. [Dolbin D.A., Lutfullin M.H., Latypov, D.G. The comparative effectiveness of various organoelemental methods for the diagnosis of neoascaris calves. // Tr. VIGIS. 2005; Vol. 41: 154 - 160. (in Russian)].
8. Долбин Д.А., АгафоноваЕ.В., Смирнова Л.Р., Хазиева С.М. Пути улучшения качества лабораторной диагностики гельминтозов. // Казмед ж. - 2007; Т. LXXXVIII; 4: 398 - 402. [Dolbin D. A., Agafonova E.V., Smirnova L.R., Khazieva S.M. Ways to improve the quality of laboratory diagnosis of helminthiasis. // KAZ honey Zh. - 2007; Vol. LXXXVIII; 4: 398 -402. (in Russian)].
9. Емельянова Л.П., Лисина С.В., Дубровский Ю.А., Дубровский В.Ю. Распространенность криптоспоридий в естественных экосистемах. Медицинская паразитология и паразитарные болезни, 1999; 3: 1418. [Emelyanova L.P. Lisin S.V., Dubrovsky J.A., Dubrovsky V.Y. The Prevalence of Cryptosporidium oocysts in natural ecosystems. // Med. Parasiol. 1999; 3: 14-18. (in Russian)].
10. Онищенко Г.Г. О мерах по усилению профилактики паразитарных болезней в России / Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2003; 3: 3-7. [Onishchenko G.G. on measures to strengthen the prevention of parasitic diseases in Russia // Med. Parasitol. 2003; 3: 3-7. (in Russian)].
11. Карташев В.В. Амбалов Ю.М., Донцов Д.В., Пономаренко Я.В., Малышева М.И. Криптоспоридиоз у больных ВИЧ-инфекцией в Ростове-на-Дону // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2008.
№3. С. 19-21.[Kartashev V.V. Ambalov Yu.M, Dontsov D.V., Ponomarenko Ya.V., Malysheva M.I. Cryptosporidiosis in patients with HIV infection in Rostov-on-Don. Epidemiology and infectious diseases. 2008; 3: 19-21. (in Russian)].
12. Лавдовская М.В. Лысенко А.Я. Современные представления об эпидемиологии криптоспоридиоза. // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1993. № 8. С. 49-53.[Lavdovskaya M.V. Lysenko A.I. Modern concepts of the epidemiology of cryptosporidiosis. Med. Parasitol. 1993; 8: 4953. (in Russian)].
13. Рахманин Ю.А., Синицына О.О. Состояние и актуализация задач по совершенствованию научно-методологических и нормативно-правовых основ в области экологии человека и гигиены окружающей среды // Гигиена и санитария. 2013; 5: 4-10 [Rakhmanin Y.A., Sinitsyna O.O. Status and actualization of tasks to improve the scientific-methodological and regulatory frameworks in the field of human ecology and environmental health // Hygiene and sanitation. 2013; 5: 4-10. (in Russian)].
14. Сергиев В.П. Регистрация и истинная распространенность паразитарных болезней // Медицинская паразитология. 1991; 2:3-6 [Sergiev V. P. Check and the true prevalence of parasitic diseases // Medical Parasitology. 1991; 2: 3-6. (in Russian)].
15. Методические указания МУК 4.2.2661-10 «Методы санитарно-паразито-логических исследований», утверждены Постановлением главного государственного санитарного врача 23.07.2010г. [Methodical instructions of torments 4.2.2661-10 «Methods of sanitary and parasitological researches», are approved by the resolution of the Chief state sanitary doctor of 23.07.2010. (in Russian)].
16. АслановаМ.М., КузнецоваК.Ю., Синицына О.О. Эпидемиологические и экологические предпосылки развития паразитарных и инфекционных болезней в современных условиях развития мирового сообщества. // Материалы Международного форума Научного совета Российской Федерации по экологии человека и гигиене окружающей среды, посвященного 85-летию ФГБУ «НИИ ЭЧ и ГОС им. А.Н. Сысина» Минздрава России «Современные методологические проблемы изучения, оценки и регламентирования факторов окружающей среды, влияющих на здоровье человека», г. Москва, 15-16 декабря 2016 г. - М., 2016; Том 1: 60-63. [Aslanova M.M., Kuznetsova K.Yu., Sinitsyna O.O. Epidemiological and ecological preconditions of development of parasitic and infectious
diseases in modern conditions of development of the world community. // Materials of the International forum of the Scientific Council of the Russian Federation on human ecology and environmental hygiene, dedicated to the 85th anniversary of FGBU «research Institute and STATE. Ahh. Sysina «Ministry of health of Russia» Modern methodological problems of study, assessment and regulation of environmental factors affecting human health», Moscow, 15-16 December 2016 - Moscow, 2016; Volume 1: 60-63. (in Russian)].
17. Сергиев В.П., Кузнецова К.Ю. Современные проблемы в сфере паразитарных болезней и их терапии. Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. 2014; 1: 12-16. [Sergiev V. P., Kuznetsova, K.Y. Modern problems in the field of parasitic diseases and their therapy. Infectious diseases: news, opinions, training. 2014; 1: 12-16. (in Russian)].
18. Сергиев В.П., Малышев Н.А., Дрынов И.Д. Значение паразитарных болезней в патологии человека //Эпидемиология и инфекционные болезни. — 1999; 4: 4-9.[Sergiev V. P., Malyshev N.A., Drynov I.D. the Importance of parasitic diseases in human pathology // Epidemiology and infectious diseases. - 1999; 4: 4-9. (in Russian)].
19. Асланова М.М., Черникова Е.А. Эпидемиологический мониторинг за паразито-зами. // Здоровье населения и среда обитания. - 2013; 7(244): 22-24. [Aslanova M.M., Chernikova E.A. Epidemiological monitoring of parasitoses. / The health of the population and habitat. - 2013; 7(244): 22-24. (in Russian)].
20. Черкасский Б.Л. Инфекционные и паразитарные болезни человека. М: ГЭО-ТАР Медицина. 2004; 246. [Cherkasky B.L. Infective and parasitic human diseases. M: GEOTAR Medicine. 2004; 246. (in Russian)].
21. Савилов Е.Д., Мамонова Л.М., Астафьев В.А., Жданова С.Н. Применение статистических методов в эпидемиологическом анализе. - М.: «МЕДпресс-информ», 2004; 21 - 26 [Savilov E.D., Mamontova L. M., Astafyev V. M., Zhdanova S.N. Application of statistical methods in epidemiological analysis. - M.: «Medpress-inform», 2004; 2126. (in Russian)].
22. Ларин В.Е. Состояние методического обеспечения санитарно-паразитологическо-го контроля качества воды в России // ЭК-ВАТЕК-2002: Материалы конгресса. Под общ. ред. проф. Л. И. Эльпинера. М. 2002; 712 [Larin V. E. The state of methodological support of sanitary and parasitological control
of water quality in Russia // ECWATECH-2002: Proceedings of the Congress. Under the General editorship of Professor L. I. Elpiner. M. 2002;712. (in Russian)].
23. Лутфуллин М.Х., Латыпов Д.Г. Кор-нишина М.Д. Ветеринарная гельминтология. - Казань, 2007, - С. 231 [Lutfullin M. H., Latypov D. G., Kornishina M. D. Veterinary helminthology. - Kazan, 2007, - P. 231. Lutfullin M. H., Latypov D. G., Kornishina M. D. Veterinary helminthology. - Kazan, 2007; 231. (in Russian)].
24. Малышева Н.С. Почва как фактор высокого риска заражения населения геогель-минтозами на территории Курской области /Современные тенденции в современном образовании: сборник научных трудов в честь 70-летия Курского государственного университета. Курск. 2004; 87-90.[Malysheva N.S. The Soil as the factor of high risk of infection of the population geohelminthoses on the territory of Kursk region // Modern trends in contemporary education: proceedings in honor of the 70th anniversary of the Kursk state University. Kursk. 2004; 87-90. (in Russian)].
25. Малышева Н.С. Борзосеков А.Н., Пе-хова С.С. Санитарно-гельминтологическая характеристика осадков сточных вод и методов их дезинвазин / Научные труды Федерального научного Центра гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана. Вып. №15. Липецк. 2005; 421-425 [Malysheva N.C., Barzasekov A. N., Pehowa S.S. Sanitary and helminthological characteristics of sewage sludge and methods of their desinvasion/ Proceedings of the Federal research Center of hygiene named. F.F. Erisman. Vol. No. 15. Lipetsk. 2005; 421-425. (in Russian)].
26. Полякова М.Ф. Оценка рисков лабораторных ошибок и вопросы страхования ответственности лаборатории при выполнении работ в области оценки соответствия на примере ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Липецкой области» //Здоровье населения и среда обитания. 2015. 2 (263):51. [PolyakovaM.F. laboratory error risk Assessment and laboratory liability insurance issues in the implementation of the laboratory conformity assessment on the example of the FBIH «Center of hygiene and epidemiology in the Lipetsk region». Health of the population and habitat. 2015. 2 (263): 51.(in Russian)].
27. Попова А.Ю. Стратегические приоритеты Российской Федерации в области экологии с позиции сохранения здоровья нации // Здоровье населения и среда обитания. 2014. 2 (251):4-7. [Popova A. Yu. The Strategic priorities of the Russian Federation in the field of ecology from the position of
preserving the health of the nation. 2014. 2 (251):4-7. (in Russian)].
28. Русаков Н.В., Русакова Е.В. Неинфекционная эпидемиология и гигиена окружающей среды в охране здоровья населения / Здоровье населения и среда обитания. 2015. (267):4 [Rusakov N.V.,. Rusakova E.V. Non-Infectious epidemiology and environmental hygiene in public health / Public Health and habitat. 2015. (267): 4. (in Russian)].
29. Хроменкова Е.П, Димидова Л.Л., Упы-рев А.В. Пособие по санитарной паразитологии / Ростов-на-Дону: Дониздат, 2015; 33 [Khromenkova E.P., Dimidova L.L., Upirev A.V. Manual on sanitary Parasitology/Rostov-on-Don: Monistat, 2015; 33. (in Russian)].
30. Сергиев В.П., Успенский А.В., Ро-маненко Н.А., Горохов В.В., Супряга В.Г., Старкова Т.В., Морозов Е.Н., Черникова Е.А. «Новые и возвращающиеся» гельмин-тозы как потенциальный фактор социально-эпидемических осложнений в России. Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2005. 4:6-8 [Sergiev, V. P., Uspensky, Romanenko, N. Ah. Gorokhov V. V., Supryaga V. G., Starkova T. V., Morozov E.N., Chernikova E.A. «New and reemerging» helminthiasis as a potential factor of social and epidemic complications in Russia. Med. Parasitol. 2005. 4: 6-8. (in Russian)].
31. Долбин Д.А, Хамзина Е.В., Идрисов А.М, Лутфуллин М.Х., Лутфуллина Н.А. Способ выявления яиц гельминтов, клещей и ооцист простейших в пробах почвы. Патент RU 2466388:G01N33/24 -грунтов. [Dolbin D. A., Khamzina E. V., Idrisov A. M., Lutfullin M. H., Lutfullina N. A. Method of detection of helminth eggs, ticks and oocysts of protozoa in soil samples. Patent RU 2466388: G01N 33/24 -primers. (in Russian)].
Поступила 01.03.19
