CC BY
47
УдК 577.2.04
Короткова А.М., Давыдова О.К.
Оренбургский государственный университет E-mail: [email protected], [email protected]
ЭФФЕКТЫ СИНТЕТИЧЕСКИХ АЛКИЛРЕЗОРЦИНОВ НА ТОПОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ДНК, ОПОСРЕДОВАННЫЕ АКТИВНЫМИ ФОРМАМИ КИСЛОРОДА, В СИСТЕМЕ IN VITRO
Проблема защиты живых систем от окислительного стресса с помощью различных низкомолекулярных органических соединений, способных обезвреживать активные формы кислорода, привлекает все больший интерес к поиску, экспериментальному исследованию и перспективам практического использования как природных, так и синтетических антиоксидантов. Алкилрезор-цины, известные своей функцией адаптогенов у растений и микроорганизмов, также могут быть отнесены к их числу. В свою очередь, хорошо документированными эффектами алкилрезорцинов в отношении биополимеров и целых клеток является изменение их функциональной активности и устойчивости к экстремальным воздействиям. В связи с тем, что генетический аппарат - одна из самых уязвимых мишеней различных деструктивных факторов, в т. ч. индукторов окислительного стресса, целью работы является экспериментальное обоснование роли синтетических алкилре-зорцинов, отличающихся особенностями химического строения, в защите ДНК от активных форм кислорода.
Эффекты деструкции топологически различных молекул препарата плазмидной ДНК pUC19, связанные с образованием одноцепочечных разрывов и выражающиеся в изменении соотношения суперскрученных и кольцевых молекул, под действием радикалов кислорода оценены методом агарозного гель-электрофореза. В качестве модели окислительного стресса использована система фотохимической индукции супероксид аниона путем спонтанного реокисления фотовосстанов-ленного флавина с последующим образованием множественных активных форм кислорода. Показано существенное предупреждение глубокой деградации ДНК в присутствии алкилрезорцинов, прямо зависящее как от длины их алкильного радикала, так и от используемой концентрации по сравнении с окисленными пробами. На основании данных инфракрасной спектроскопии обсуждается вопрос возможных превращений алкилрезорцинов, защищающих конформацию ДНК в условиях окислительного стресса. Проведенные экспериментальные исследования протекторных эффектов алкилрезорцинов от активных форм кислорода в отношении молекул ДНК формируют основу для разработки кандидатных фармацевтических препаратов.
Ключевые слова: алкилрезорцины, метилрезорцин, гексилрезорцин, додецилрезорцин, анти-оксидантное действие, активные формы кислорода, повреждение дНк, плазмидная ДНК pUC19.
Проблема адаптации живых организмов к окислительному стрессу является одной из наиболее актуальных проблем современной науки. Накапливается все больше данных о том, что, несмотря на многоуровневую внутриклеточную защиту, под действием неблагоприятных факторов среды происходит повышение концентрации активных форм кислорода (АФК) и запуск каскадного механизма окислительного стресса, приводящего к деструкции липидов клеточных мембран, белков, нуклеиновых кислот и других жизненноважных клеточных компонентов, вплоть до гибели клетки [1-2]. В этом аспекте наиболее вредные и далеко идущие последствия возникают при прямом и опосредованном воздействии АФК на молекулу ДНК, результатом которого является образование более 20 разновидностей окисленных продуктов ДНК (тиминовых гликолей, 5-гидроксицитозина, 8-гидроксигуанина, формамидопиримидино-вых производных пуринов) и модификаций в виде трансверсий G^■Т [3]. Особенно опасным
с этой точки зрения является супероксидный анион-радикал, сам по себе обладающий большим временем жизни и миграционной способностью и спонтанно дисмутирующий до более реакционноспособных гидроксильного радикала и синглетного кислорода [2].
Однако, в последние годы обнаружена группа фенольных соединений, обладающая свойствами «ловушек» АФК, обеспечивающих защиту ДНК и оказывающих антигенотоксиче-ские свойства [4]. К данной группе соединений относят алкилрезорцины (АР), в русскоязычной литературе обозначаемые как алкилоксибензо-лы, широко распространенные в живой природе и выполняющие роль адаптогенов у растений и микроорганизмов [5-6].
Согласно литературным данным в аспекте антиоксидантных (АО) эффектов АР отмечают способность служить донором протонов водорода путем перераспределения электронной плотности по всей молекуле [7], участие в подавлении реакций окисления, индуцированных
ионами металлов переменной валентности [8], снижение скорости окисления липидов [9-10], ингибирование прооксидантных ферментов [11-12], влияние на экспрессию анти-оксидантных генов [13-14]. Однако, в засимо-сти от условий, гомологи АР могут приводить не только к затуханию свободно-радикальных реакций, но и к изменению в топологии ДНК [15-16], повышая вероятность генетических событий, приводящих к мутагенному эффекту, сопряженно с обратимыми внутригеномными перестройками [17].
В связи с этим выяснение эффекта структурно различающихся АР как антиоксидантов в процессах повышения устойчивостии стабилизации клеточных ДНК представляется важным для решения практических задач защиты организмов от неблагоприятных факторов среды с целью разработки биологически активных соединений с потенциальными антиоксидантными и ДНК-протекторными свойствами.
При проведении исследований использованы синтетические АР, различающиеся длиной и расположением гидрофобного алкильного радикала (табл. 1): 5-метилрезорцин (С1-АР), 4-н-гексилрезорцин (С6-АР) и 4-н-додецилрезорцин (С12-АР) («Sigma», США). Непосредственно перед проведением экспериментов готовили серии водных растворов исследуемых веществ
с концентрациями 0,01-1 мМ. Для лучшего растворения водных растворов и разделения мицелл гомологов С6- и С12-АР добавляли 96 %-ный этиловый спирт до концентрации 1 % («Гиппократ», Россия) и дополнительно обрабатывали в ультразвуковой ванне («Сапфир», Россия) при частоте 50 кГц в течение 5 мин.
В лабораторной практике для создания стресса главным образом используют редок-сциклизаторы, которые снимают электроны и восстанавливают кислород досупероксид-анион радикала (паракват, метиленовый синий, рибофлавин). В нашем случае использовалась молекулярная модель фотохимической индукции АФК, основанная на спонтанном реокисле-нии фотовосстановленного флавина, который в аэробных условиях способен одноэлектронно восстанавливаться и окисляться с образованием радикальных форм, которые взаимодействуя с молекулярным кислородом приводят к образованию либо супероксид-аниона, либо перекиси, либо того и другого [18]. На рисунке 1 в упрощенном виде приведена схема фотодинамического реокисления флавина кислородом, катализируемого ТЕМЕДом. Супероксид-анион в водных растворах нестабилен и достаточно быстро неферментативно дисмутирует с образованием перекиси, а ее последующее одно-электронное восстановление приводит к воз-
Таблица 1. Характеристики синтетических гомологов алкилрезорцинов, используемых в экспериментальном исследовании
Аббревиатура, №CAS
Химическая формула
Международное наименование IUPAC, синонимы
С1-АР, 504-15-4
5-метилрезорцин(ол) (5-метилбензол-1,3-диол, орцинол)
С6-АР, 136-77-6
4-н-гексилрезорцин(ол) (4-гексилбензол-1,3-диол, капрокол)
С12-АР, 24305-56-4
4-н-додецилрезорцин(ол) (4-додецилбензол-1,3-диол, 4-лаурилрезорцинол)
никновению крайне реакционноспособного гидроксил-радикала [19].
Система генерации АФК включала 100 мкл 0,05 тМ раствора коммерчески доступного рибофлавина-мононуклеотида («Фармстан-дарт», Россия) и 15 мкл 1 мМ раствора катализатора восстановления рибофлавина в лейко-рибофлавин - «х.ч.» тетраметилэтилендиамина (ТЕМЕД) (<ЖеапаЬ>, Венгрия) [20]. В последующем к 10 мкл полученного двухкомпонентного раствора добавляли такой же объем раствора плазмидной ДНК риС19, разведенной биди-стиллированной водой в 2 раза от исходной концентрациии, и 5 мкл АР в концентрации 0,01, 0,1 и 1 мМ. В контрольный образец вместо АР добавляли аналогичное количество бидистил-лированной воды.
Сразу после смешения растворов пробы заклеивали клейкой лентой для предотвращения испарения и изменения концентраций, помещали под лампу спектра видимого диапазона мощностью 20 Вт на расстоянии от оси источ-
ника света 10 см и облучали при температуре 20±1°С в течении 0-240 мин.
В обсуждаемом аспекте проблемы нас интересовали эффекты АР в развитии ДНК-защитных реакций на процессы динамичной структурной реорганизации и топологической модификации молекул плазмидной ДНК в условиях описанной выше системы генерации АФК. Поэтому чувствительность ДНК к АФК оценивали на примере коммерческого препарата плазмиды pUC19 («Сибэнзим», Россия) с исходной концентрацией 200 мг/мл, выделенной из штамма Escherichia coli XL 1 -Blue (буфер хранения: 10 цМ трис-HCl, 1 mM ЭДТА, pH 7.8), представлявшего собой кольцевую двух-цепочечную молекулу ДНК длиной 2686 пар оснований, представленную совокупностью преимущественно кольцевых суперскручен-ных (форма I), незначительного количества кольцевых релаксированных (форма II) и следового - линеаризованных (форма III) молекул. Топологические изменения ДНК анализирова-
Рисунок 1. Схематическое изображение вероятных химических превращений в системе генерации АФК при фотодинамическом реокисленим рибофлавина, катализируемом ТЕМЕДом
ли методом горизонтального электрофореза в 1 %-ном агарозном геле («AppliChem», Германия) в присутствии 0,5 мкг/мл этидия бромида («Laboratory building «А», Russia). Электрофорез проводили в трис-боратном буфере (0,04 M трис-HCl, 0,002 M ЭДТА, 0,089 М борной кислоты, pH 7,2) с использованием источника питания «Эльф-8» («ДНК-Технология», Россия) при напряженности 5 В/см и силе тока 100 мА в течение 2 часов, оценивая результат на тран-сллюминаторе («Vilber Lourmat», Франция). После проведения процедуры электрофореза гели фотографировали, а полученные цифровые изображения обрабатывали с помощью инструментов универсальной компьютерной программы «ImageJ» («National Institutes of Health», США) [21].
Количественная оценка участия АР в развитии ДНК-защитного эффекта проводилась при электрофоретическом разделении кольцевой релаксированной и суперскрученной формы плазмиды pUC19 в описанных выше условиях в течение 7,5 мин. С учетом того, что в кольцевую релаксированную молекулу ДНК этидий бромид при электрофорезе проникает более эффективно, при расчете интенсивности полосы суперскрученной формы проводили умножение на 1,24, а интенсивность полос этих форм нормализовали так, что их сумма составляла 100 % [22]. Коэффициент ДНК-защитного эффекта рассчитывали по формуле:
К =
Содержание су перекрученной формы (I) Содержание кольцевой формы (II)
Рисунок 2. Электрофоретическое изображение суперскрученной конформаци (I) и кольцевой релаксированной (II) форм плазмидной ДНК риС19 (1) после 7,5-минутной инкубации в системе генерации АФК (2) (слева); профили интенсивности полос для расчета ДНК-защитного эффекта (справа)
Сложный характер накопления окисленных продуктов АР в среде системы генерации АФК затрудняет их идентификацию, поэтому мы исследовали модификации функциональных групп ИК-спектров жидких хлороформных экстрактов исходных реактивов АР и продуктов их взаимодействия с компонентами системы генерации АФК (без ДНК). Пробоподготовка заключалась в предварительном высушивании образцов в герметически закрытых пробирках («Eppendorf», Германия) в термоциклере при температуре 50±5°С. Далее к образовавшимся выпаренным сухим экстрактам добавляли 1 мл хлороформа («Компонент-Реактив», Россия) и диспергировали полученные суспензионные растворы в ультразвуковой ванне, как описано выше. Непосредственно для снятия ИК-спектров брали аликвоту анализируемого раствора (100 мкл) и наносили микропипеткой между двумя слоями солевых пластинок из NaCl разборной жидкостной кюветы толщиной 0,1 мм.
ИК-спектры записывали в режиме пропускания в диапазоне частот 4000-400 см-1 при комнатной температуре с разрешением 1 см-1 на сканирующем инфракрасном Фурье-спектрометре марки «ИнфраЛЮМ ФТ-02» («Люмэкс», Россия), управляемом с помощью персонального компьютера в программе «Спек-тралюм» («Люмэкс-Маркетинг», Россия). Последующая обработка спектров проводилась в программе EZ «Omnic» («Thermo electron corporation», США). В качестве фонового снимали спектр чистого растворителя - хлороформа. Статистическую обработку данных проводили с использованием программы «Microsoft Exel», причем данные представлены в виде средних значений из трех повторностей и их стандартных ошибок.
Длительный контакт с АФК оказывал на электрофорети-ческие свойства плазмиды комплексное влияние, проявляющееся в исчезновении типичных полос или изменении их относительной интенсивности.
При этом наблюдался переход суперскрученной формы
плазмиды (форма I) при образовании одноцепо-чечных разрывов в кольцевую релаксированную (форма II), а затем в линейную (форма III), в результате формирования двунитевых разрывов. Дальнейшая глубокая деградация ДНК при электрофорезе проявлялась в формировании единого «трека» из линейных фрагментов вариабельной молекулярной массы (рис. 3).
Однако, основные топологические переходы ДНК, связанные с образованием одноцепо-чечных разрывов и выражающиеся в изменении соотношения суперскрученных и кольцевых молекул без образования двухцепочечных разрывов, происходили в первые минуты контакта с АФК. Так, доля суперскрученных молекул через 12,5 минут контакта снижалась до нуля с одновременным возрастанием количества кольцевых и линейных форм.
Поэтому для дальнейшего исследования влияния АР на топологические изменения ДНК была выбрана 7,5-минутная экспозиция в присутствии АФК, при которой наблюдались значительные различия изменения содержания ДНК формы I и формы II.
Инкубация плазмидной ДНК в присутствии АР не приводила к формированию полос с аномальной электрофоретической подвижностью при 7,5-минутной экспозиции совместно с АФК, но существенно предупреждала ее глубокую деградацию. При этом использование АР в концентрации от 0,01 до 1 мМ позволяло сохранять суперскрученную форму в 1,05-1,85 раза выше аналогичных величин в окисленных пробах (рис. 4).
Наблюдалась прямая зависимость степени выраженности эффекта от используемой концентрации и длины алкильного радикала вносимых в систему АР, так присутствие АР с концентрацией 1мМ позволяло сохранить ДНК в составе исходных конформаций в 1,85 раз больше при использовании С12-АР и в 1,79 раз больше при использовании С6-АР и С1-АР по сравнению с окисленными пробами ДНК.
Следующим этапом эксперимента явилась косвенная оценка модификаций молекул АР методом отнесения интенсивности и сдвигов отдельных характеристических частот в ИК-спектрах окисленных образцов по сравнению со спектрами чистых субстанций (рис. 5). Так, в высокочастотной области валентных колебаний
простых Х-Н связей интерпретируемых спектров окисленных продуктов С1-АР (рис. 5А) и С6-АР (рис. 5Б) по сравнению с исходными образцами видны следующие изменения: во-первых, расщепление полосы средней интенсивности при ~3618 см-1 (1), характеризующей «свободные» (не участвующие в образовании водородной связи) О-Н-группы, и свидетельствующее о появлении дополнительных гидрок-силов; во-вторых, увеличение интенсивности широкой полосы пропускания «связанных» О-Н-групп при ~3450 см-1 (2), что обусловливает образование посредством межмолекулярных водородных связей ди- и полимеров АР. Далее перемещаясь в область колебаний С-Н-связей ИК-спектра, обнаруживается смещение и увеличение интенсивности сложных полос пропускания симметричных и несимметричных валентных колебаний алифатических СН3-, СН2-групп, ароматических О-Н и С-Н-групп в виде основного пика при ~2977 см-1 (3) с плечами ~ 2927 (4) и 2896 см-1 (5), которым соответствуют внеплоскостные деформационные колебания этих групп при ~1470, 1390 см-1 (8, 9) и ниже 900 см-1 (13) [23]. Изменение интенсивности и смещения ряда полезных для отнесения частот в области «кратных» связей и «отпечатков пальцев» ИК-спектра представлено модификацией хиноновой группы в области ~1650 см-1 (6) [24], валентных скелетных колебаний С-С и С-О-групп при ~1500 см-1 (7) и ~1220 см-1 (10), плоскостных деформационных колебаний О-Н-групп при ~1400 см-1 (7) и ~1140 см-1 (11) [23].
Итак, в присутствии гомологов АР различные по конформации ДНК характеризуются повышенным уровнем устойчивости к действию АФК, это проявляется в предупреждении их деградации, особенно при повышении концентрации гомологов в среде. Вероятно, увеличение ДНК-защитного эффекта С6- и С12-АР связано с гидрофобным взаимодействием с лигандами биомолекул за счет длинного алкильного радикала [4, 7], которое, в свою очередь, приводит к смещению электронной плотности и уменьшению энергии связи О-Н и, тем самым, усилению АО-эффекта [24]. Наряду с этим, наблюдаемый незначительный ДНК-защитный и АО-эффект С1-АР может быть обоснован положением ОН-группы в п-положении, при котором молекулы
Рисунок 3. Изменение топологии плазмидной ДНК риС19 в присутствии продуктов системы генерации АФК: 1 - риС19, 2-12 - риС19 после инкубации 2,5; 5; 7,5; 10; 12,5; 15; 30; 60; 120 и 240 минут, соответственно, в системе генерации АФК; I - суперскрученная, II - кольцевая релаксированная, III - линейная формы
■---" С|-АР
АФК - 1 -1- 1- + + 1 1 1 1 +
АР, мМ - 0.01 0,1 1 0,01 0.1 1 0,01 0,1 1
У ь о 1 < | г4? V ^ I 1 н Р 1 М у
г€ г I М 1 2 3 «иё 4 5 6 7 Ьм1 9 10 11
К 1.21 1.46 1,96 2.17 1,28 1,37 2,16 1,46 1,61 2,24
Выражен ность тт :тт ттт 1 : ТТТ ТТ ТТ ТТ"
Рисунок 4. Изменение топологии плазмидной ДНК риС19 (1) в присутствии продуктов системы генерации АФК (2) и различных концентраций АР после 7,5-минутной инкубации: 3-5 - 0,01, 0,1 и 1 мМ С1-АР; 6-8 - 0,01, 0,1 и 1 мМ С6-АР; 9-11 - 0,01, 0,1 и 1 мМ С12-АР, соответственно; I - суперскрученная, II - кольцевая релаксированная формы
с п.
с
■101Ю 5500 3000 2000 1500 1001)
Частота, см-1
А
Рисунок 5. ИК-спектры С1- (А) и С6-АР (Б) (верхний график) и после инкубации в системе генерации АФК
в течение 240 минут (нижний график)
Б
лишены стерических препятствий и подвержены окислению [25, 26]. Возможно, увеличение количества водородных связей, а соответственно, ди- и полимерных фенольных структур, дополнительных связанных и свободных ОН-групп в ИК-спектре, свидетельствует о рекомбинации С1-АР до хиноидных структур [28], промежуточных феноксильных радикалов [29] с последующем образованием «красных форм»
бифенолов [30], которые относят к более сильным антиоксидантам [11, 14].
Таким образом, АР могут выступать в качестве легко доступных химических субстанций из группы фенолов с антиоксидантными и ДНК-защитными свойствами для применения с профилактической целью в пищевой и фармацевтической промышленности.
12.04.2015
Исследования выполнены при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (проект 13-04-97052 р_поволжье_а)
Список литературы:
1. El-Bahr S.M. Biochemistry of free radicals and oxidative stress // Scien. Intern. - 2013. - Vol. 1. - №5. - P. 111-117.
2. Alfadda A.A., Sallam R.M. Review article. reactive oxygen species in health and disease // J. Biomed. Biotech. - 2012. - Vol. 2012.
- 14 p.
3. Jena N.R. DNA damage by reactive species: mechanisms, mutation and repair // J. Biosci. - 2012. - №37(3). - Р. 503-517.
4. Parikka K., Rowland I.R., Welch R.W., Wahala K. In vitro antioxidant activity and antigenotoxicity of 5-n-alkylresorcinols // J. Agric. Food Chem. - 2006. №54. Р. 1646-1650.
5. Stasiuk M., Kozubek A. Biological activity of phenolic lipids // Cell. Mol. Life Sci. 2010. - Vol. 67. - P. 841-860.
6. Эль-Регистан Г.И., Мулюкин А.Л., Николаев Ю.А., Сузина Н.Е., Гальченко В.Ф., Дуда В.И. Адаптогенные функции внеклеточных ауторегуляторов микроорганизмов // Микробиология. - 2006. - Т. 75. - №4. - С. 446-456.
7. Hladyszowski J., Zubik L., Kozubek A. Quantum mechanical and experimental oxidation studies of pentadecylresorcinol, olovetol, orcinol and resorcinol // Free Rad. Res. 1998. - Vol. 28. Р. 359-368.
8. Kamnev A.A., Dykman R.L., Kovacs K., Pankratov A.N., Tugarova A.V., Homonnay Z., Kuzmann E. Redox interactions between structurally different alkylresorcinols and iron (III) in aqueous media: frozen-solution Fe Mossbauer spectroscopic studies, redox kinetics and quantum chemical evaluation of the alkylresorcinolreactivities // Struct. Chem. - 2014. - Vol. 25. - P. 649-657.
9. Kozubek A., Nienartowicz B. Cereal grain resorcinolic lipids inhibit H2O2-induced peroxidation of biological membranes // Acta. Biochim. Polon. - 1995. - №42. - Р. 309-316.
10. Struski D.G., Kozubek A., Naturforsch Z. Cereal grain alk(en)ylresorcinols protect lipids against ferrous ions-induced peroxidation // Biosc. - 1992. - Vol. 47. - P. 41-46.
11. Степаненко И.Ю., Страховская М.Г., Беленикина Н.С., Николаев Ю.А., Мулюкин А.Л., Козлова А.Н., Ревина А.А., Эль-Регистан Г.И. Защита Saccharomyces cerevisiae алкилоксибензолами от окислительного и радиационного поражения // Микробиология. - 2004. - Т. 73. - С. 204-210.
12. Грязева И.В., Давыдова О.К., Дерябин Д.Г., Свиридова Т.Г., Свиридов А.П. Прогнозируемая и экспериментально выявляемая антиоксидантная активность алкилоксибензолов (алкилрезорцинов) // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2013. - №8. - С. 41-46.
13. Голод Н.А., Лойко Н.Г., Лобанов К.В., Миронов А.С., Воейкова Т.А., Гальченко В.Ф., Николаев Ю.А., Эль-Регистан Г.И. Роль микробных ауторегуляторов - алкилоксибензолов, в контроле экспрессии стрессовых регулонов // Микробиология. - 2009.
- Т. 78. - №6. - С. 731-741.
14. Gryzeva I.V., Davydova O.K., Deryabin D.G. Evaluation of the potential of alkylresorcinols as superoxide anion scavengers and sox-regulon modulators using nitroluetetrazolium and bioluminescent cell-based assays // Cell. Mol. Biology Let. - 2015. - Vol. 20.
- №1. - Р. 24-37.
15. Давыдова О.К., Дерябин Д.Г., Никиян А.Н., Эль-Регистан Г.И. О механизмах взаимодействия ДНК с химическими аналогами микробных аутоиндукторов анабиоза // Микробиология. - 2005. - Т. 74. - №5. - С. 616-625.
16. Давыдова О.К., Дерябин Д.Г., Эль-Регистан Г.И. Исследование влияния химических аналогов ауторегуляторных d1-факторов микроорганизмов на структурные переходы ДНК методом ИК-спектроскопии // Микробиология. — 2007. - Т. 76. - №3. - С. 306-311.
17. Мулюкин A^., Вахрушев M.A., Стражевская Н.Б., Шмырина A.Q, Жданов Р.И., Сузина Н.Е., Дуда В.И., Козлова А.Н., Эль-Регистан Г.И. Влияние микробных аутоиндукторов анабиоза - алкилоксибензолов - на структурную организацию ДНК P. aurantiaca и индукцию фенотипической диссоциации // Микробиология. 2005. Т. 74. №2. С. 157-165.
18. Massey V. Activation of molecular oxygen by flavins and flavoproteins // J. Biol. Chem. - 1994. - Vol. 269. - №36. - Р. 459-462.
19. Гривенникова В.Г., Виноградов А.Д. Генерация активных форм кислорода митохондриями // Успехи биологической химии.
- 2013. - Т. 53. - С. 245-296.
20. Брудастов Ю.А., Бачурская Н.С., Петрова Е.В., Брудастов А.Н. Бактерицидные эффекты активных метаболитов кислорода // Вестник ОГУ. -2006. - №12. - С. 27-31.
21. Давыдова О.К., Дерябин Д.Г., Эль-Регистан Г.И. Влияние химических аналогов микробных ауторегуляторов на чувствительность ДНК к УФ-облучению // Микробиология. - 2006. - Т. 75. - №5. - С. 654-661.
22. Perron N., Garcia C., Pinzon J., Chaur M., Brumaghim J. Antioxidant and prooxidant effects of polyphenol compounds on copper-mediated DNA damage // J. Inorg. Biochem. - 2011. - Vol. 105. - P. 745-753.
23. Преч Э. Определение строения органических соединений. Таблицы спектральных данных / Э. Преч, Ф. Бюльманн, К. Аф-фольтер. - М.: Мир, «Бином. Лаборатория знаний», 2012. - 438с.
24. Perez-Gonzalez A., Rebollar-Zepeda A.M., Leon-Carmona J.R., Galano A. Reactivity indexes and O-H bond dissociation energies of a large series of polyphenols: implications for their free radical scavenging activity // J. Mex. Chem. Soc. - 2012. - №56(3). - Р. 241-249.
25. Foti M.C., Amorati R., Pedulli G.F., Daquino C., Pratt D.A. Ingold K.U. Influence of «remote» intramolecular hydrogen bonds on the stabilities of phenoxyl radicals and benzyl cations // J. Org. Chem. - 2010. - №75(13). - Р. 34-40.
26. Дыкман Р. Л. Физико-химические закономерности окислительно-восстановительных процессов с участием алкилрезорцинов и железа(Ш) / Автореф. дисс. на соиск. канд. хим. наук. - Саратов. - 2014. - 24с.
27. Dayan F.E., Watson S.B., Nanayakkara N.P. Biosynthesis of lipid resorcinols and benzoquinones in isolated secretory plant root hairs // J. Exper. Bot. -2007. - Vol. 58. - №12. - Р. 1-10.
28. Shadyro O.I. Quinones as free-radical fragmentation inhibitors in biologically important molecules / O.I. Shadyro, G.K. Glushonok, T.G. Glushonok, I.P. Edimecheva, A.G. Moroz, A.A. Sosnovskaya, I.L. Yurkova, G.I. Polozov // Free Rad. Res. - 2002. - Vol. 36.
- №8. - P. 859-867.
29. Shimazaki Y., Yamauchi O. Recent advances in metal-phenoxyl radical chemistry Ind // J. Chem. - 2011. - Vol. 50. - P. 383-394.
30. Ревина А.А., Ларионов О.Г, Кочетова М.В., Луцик Т.К., Эль-Регистан Г.И. Спектрофотометрическое и хроматографическое исследование продуктов радиолиза аэрированных водных растворов алкилрезорционов // Изв. АН. Сер. хим. - 2003. - №11.
- С. 2257-2263.
Сведения об авторах:
Короткова Анастасия Михайловна, аспирант, лаборант-исследователь Института биоэлементологии Оренбургского государственного университета, e-mail: [email protected]
Давыдова Ольга Константиновна, доцент кафедры микробиологии Оренбургского государственного университета, кандидат биологических наук, доцент, e-mail: [email protected]
460018, Оренбург, пр-т Победы 13, тел. (3532) 37-24-81
