CC BY
148
УДК 616.441-008.64; 616.441-008.61; 616-008.9 ББК 54.15
Н.В. ТУКТАНОВ
ЭФФЕКТЫ ИНФУЗИОННОЙ ОЗОНОТЕРАПИИ У ПАЦИЕНТОВ С НАРУШЕНИЕМ ФУНКЦИИ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
Ключевые слова: перекисное окисление липидов, щитовидная железа, гипотиреоз, гипертиреоз, хемилюминесценция, озонотерапия.
Изучены активность перекисного окисления липидов (ПОЛ) и антиоксидантной защиты, а также влияние на них инфузионной озонотерапии у 23 больных гипотиреозом, 43 больных тиреотоксикозом. Контролем служила группа из 29 здоровых лиц. Наряду с содержанием тиреоидных гормонов учитывали максимальную интенсивность хемилюминесценции (Imax), показатель светосуммы (S), их отношение (Lax/S), содержание триеновых и диеновых конъюгатов, малонового диальдегида, активность супероксиддисмутазы Выявлены повышенная активность ПОЛ при гипотиреозе и тиреотоксикозе, снижение активности супероксиддисмутазы при тиреоток-си-козе. Инфузионная озонотерапия способствует улучшению результатов терапии тиреотоксикоза без существенного влияния на активность ПОЛ, активации пере-кисного окисления липидов у больных гипотиреозом.
N.V. TUKTANOV EFFECTS OF INFUSION OF OZONE THERAPY IN PATIENTS WITH THYROID DYSFUNCTION Key words: lipid peroxidation, the thyroid gland, hypothyroidism, hyperthyroidism, chemi-luminescence, ozone therapy.
Studied the activity of lipid peroxidation (LPO) and antioxidant protection, and the impact on them of infusion of ozone therapy in 23 patients with hypothyroidism, 43 patients with thyrotoxicosis. Served as a control group of 29 healthy individuals. Along with the content of thyroid hormones into account the maximum intensity of chemiluminescence (Imax), indicator light sum (S), their ratio (Imax/S), the content of triene and diene conjugates, malondialde-hyde, activity superoksiddisumatazy revealed increased activity of lipid peroxidation in hypothyroidism and hyperthyroidism, a decrease in superoxide dismutase activity in thyrotoxicosis. Infusion ozone therapy helps to improve the results of treatment of hyperthyroidism without significant effect on the activity of lipid peroxidation, is able to activate lipid peroxidation in patients with hypothyroidism.
Озонотерапия (ОТ) - активно развивающееся направление клинической медицины. Она относится к группе методов окислительной терапии, в которую входят гипербарическая оксигенация, ультрафиолетовое облучение крови, низкоинтенсивное лазерное излучение, фотодинамическая терапия. Биологическая активность озона - результат динамического равновесия, которое поддерживается прооксидантными свойствами озона и его производных, с одной стороны, и компонентами антиоксидантной защиты (АОЗ) - с другой [11].
Низкие концентрации озона не проявляют токсического действия, так как свободные радикалы нейтрализуются антиоксидантной системой защиты организма. При внутривенном введении озонированного физиологического раствора проявляются системные эффекты вследствие появления в крови индуцируемых озоном низких концентраций активных форм кислорода: регуляция вазодилатации и вазоконстрикции, активация энергетического обмена, модуляция окислительно-восстановительного гомеостаза, иммуномодуляция. Разнообразие системных эффектов ОТ позволяет с успехом применять этот метод в гнойной хирургии, кардиологии, акушерстве и гинекологии, онкологии, пульмонологии, гастроэнтерологии, неврологии [11].
Активация основного процесса свободнорадикального окисления и его ключевого звена - перекисного окисления липидов (ПОЛ) - является признаком многих заболеваний [5]. Изменения активность ПОЛ наблюдаются и при нарушении функции ЩЖ. При гипотиреозе наблюдаются высокие цифры МДА [4], ДК [8].
Чем сильнее выражено отклонение от нормы уровней тиреоидных гормонов, тем значительнее возрастает интенсивность ПОЛ [9]. При гипотиреозе выявлено и снижение активности системы антиоксидантной защиты - АОЗ [12], в частности активности каталазы и пероксидазы [4], глютатионпероксидазы [13], СОД [4]. Наряду с этим есть данные о повышении содержания растворимых антиоксидантов при гипотиреозе по данным биохемилюминесценции [7].
Есть сведения об усилении процессов ПОЛ и снижении антиоксидантной активности (АОА) при тиреотоксикозе [15]. У больных диффузно-токсическим зобом отмечено значительное повышение уровня малонового диальдегида (МДА) [1]. Есть свидетельства об угнетении АОА при тиреотоксикозе, причем одновременно может выявляться дефицит в нескольких звеньях АОЗ: снижение активности СОД, каталазы, глютатиона [14].
Применение ОТ за счет разнообразных метаболических эффектов может быть полезно и у пациентов с нарушенной функцией ЩЖ. Однако исходные нарушения в системе АОЗ-ПОЛ у этих пациентов требуют обязательного лабораторного контроля за ПОЛ как показателей активности заболевания, а также для исключения побочных действий ОТ.
Есть отдельные работы о применении данного метода у пациентов с патологией ЩЖ. ОТ у больных с тиреотоксикозом способствует более быстрой нормализации уровней тиреоидных гормонов и сопровождается снижением содержания МДА [1, 2] и восстановлением антиоксидантного статуса крови (повышение активности каталазы) [2]. У больных с гипотиреозом и ожирением ОТ способствует снижению активности ПОЛ и росту содержания в крови тиреоидных гормонов [10].
Таким образом, данные литературы свидетельствуют об увеличении содержания продуктов ПОЛ и снижении АОЗ при нарушении функции ЩЖ. Эффекты озонотерапии при лечении патологии ЩЖ изучались в единичных работах.
Цель работы - изучить состояние перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты у больных с гипо- и гипертиреозом и оценить влияние на них инфузионной озонотерапии.
Материалы и методы исследования. Обследовано 23 больных с гипотиреозом и 43 с тиреотоксикозом, проходивших лечение в эндокринологическом отделении Республиканской клинической больницы Минздрава Чувашии. Группу контроля составили 29 лиц случайной выборки популяции.
Проводилось исследование состояния перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы сыворотки крови (АОС). Для предварительной оценки интенсивности свободнорадикального окисления использовался метод индуцированной хемилюминесценции (ХЛ) сыворотки крови [6]. В качестве активаторов использовали 0,05 М раствор сульфата железа и 2%-ный раствор перекиси водорода. Измерение интенсивности свечения осуществляли в течение 30 с на приборе биохемилюминометре БХЛ-06 (Россия, Нижний Новгород). Брались следующие показатели: 1) Imax (mV) - максимальная интенсивность свечения, которая отражает потенциальную способность биологического объекта к ПОЛ; значение этой величины зависит от концентрации общих липидов (ОЛ) в плазме крови, поэтому дополнительно вычисляется отношение ^ж/ОЛ; 2) S - свето-сумма (за 30 с) - отражает содержание радикалов, соответствующих обрыву цепи свободнорадикального окисления, обратно пропорциональна активности ан-тиоксидантной системы, для определения антиоксидантной активности вычисляется отношение S/ОЛ; 3) отношение Imax/S, характеризующее общую антиоксидантную активность плазмы крови; 4) tga - показатель, характеризующий
скорость спада процессов свободнорадикального окисления в плазме и коррелирует с индексом /max/S.
Измеряли уровни первичных (диеновых конъюгатов - ДК и триеновых конъюгатов - ТК) и вторичных продуктов ПОЛ (малонового диальдегида - МДА). Измерение оптической плотности МДА, ДК, ТК проводили на спектрофотометре СФ-46 фирмы «ЛОМО» (Ленинград, СССР). Содержание ДК определяли в мета-нол-гексановой липидной фракции (5:1) при длине волны поглощения 233 нм, ТК - в той же фракции при длине волны 275 нм, МДА - при длине волны 532 нм. Активность СОД в мембране эритроцитов определяли по методике M. Nishicimi et al. (1972). Для определения активности СОД использовали диагностические наборы фирмы «RANDOX». Экстракцию липидов из сыворотки крови проводили по методике J. Folch (1957). Полученные результаты представляли в единицах оптической плотности (единицах экстинции - е.э.) на 1 мг общих липидов (ОЛ).
Изучали содержание тиреотропного гормона (ТТГ), общего и свободного трийодтиронина (Т3, свТ3), общего и свободного тироксина (Т4, свТ4), антител к тиреоглобулину (Ат к ТГ). Уровни гормонов определяли на аппарате «Мультискан» при помощи иммуноферментных наборов, произведенных фирмой «Хема-Медика» (Россия) и фирмой Labodia S.A. (Швейцария).
Основными показаниями к назначению озонотерапии служили низкая эффективность комплексного консервативного лечения, обусловленная резистентностью к терапии, непереносимостью медикаментозных средств вследствие сенсибилизации к лекарственным препаратам, наличие сопутствующих заболеваний.
Озонированный изотонический раствор хлорида натрия в объеме 200400 мл с концентрацией озона 1-2 мкг/л вливали внутривенно капельно, ежедневно; курс озонотерапии составлял 3-5 сеансов. Осложнений в процессе озонотерапии и после нее не было.
Статистический анализ проводили в программе Statistica 6.0 в среде Windows. Вычисляли среднее арифметическое и стандартную ошибку (M±m), коэффициент линейной корреляции (а). О различиях между несвязанными выборками судили по (V-критерию Манна-Уитни (pm.u), между связанными выборками - по критерию Вилкоксона. О силе связи между данными судили по коэффициенту корреляции Спирмана (а) Различия считали статистически значимыми при вероятности ошибки (р) менее 0,05.
Для более адекватного суждения о степени изменения изучаемых показателей в процессе физической нагрузки использовали интегральный показатель их динамики (ИПД), который определялся по формуле:
ИПД = ln (N/ M) (N + M), где M и N - значения исходного и конечного результатов, соответственно [3].
Результаты исследования и их обсуждение. У больных с гипотиреозом и тиреотоксикозом регистрировалась более высокая активность свободнорадикального окисления по сравнению с таковой в контрольной группе, регистрируемая по интегральной оценке - результатам ХЛ, а также по высокому содержанию продуктов ПОЛ (табл. 1). У больных тиреотоксикозом оказалась значительно снижена и активность сОд.
Соответственно, у больных с гипотиреозом наблюдалась и высокая частота сверхнормативных значений ПОЛ: S - в 52,2% случаев, /max - в 43,5%, /т£1Х/ОЛ - в 37,5%, МДА - в 28%, ДК - в 60%, ТК - в 66,7% случаев. У больных с тиреотоксикозом частота сверхнормативных значений ПОЛ регистрировалась: для S - в 74,4%, /max - в 69,8%, /max/ОЛ - в 80%, МДА - в 45%, ДК - в 65%, ТК - в 81% случаев.
Нормализация содержа-
ния тиреоидных гормонов в ходе стационарного лечения сопровождается улучшением показателей свободнорадикального окисления, хотя последнее в большинстве случаев не имело статистической значимости. У больных гипотиреозом при сопоставимой динамике роста тиреоидных гормонов ОТ способствует активации процессов ПОЛ (табл. 2).
Из табл. 2 видно, что происходит достоверный рост ДК, МДА, /max у пациентов с гипотиреозом, получающих озоно-терапию. В группе стандартной терапии, напротив, отмечено статистически значимое снижение первичных продуктов ПОЛ: ДК и ТК.
В отличие от больных гипотиреозом у больных с тиреотоксикозом практически не происходит активации ПОЛ под действием озонотерапии (табл. 3).
В группе больных тиреотоксикозом при ОТ отмечен рост МДА, но есть достоверное снижение ТК. Результаты по уровням тиреоидных гормонов и продуктам ПОЛ сопоставимы в группах с ОТ и без нее, однако изначально группа пациентов, получавших ОТ, была более тяжелой, были значительно повышены уровни общих Т3 и Т4. Обращает на себя внимание, что при использовании ОТ у больных тиреотоксикозом удалось снизить концентрацию свободной фракции Т4 - основного гормона ЩЖ, что говорит об ускорении компенсации тиреотоксикоза при использовании данного вида лечения.
Есть основания считать, что динамика продуктов ПОЛ тесно связана с динамикой свободных фракций тиреоидных гормонов. При оценке корреляций между ИПД этих показателей при гипотиреозе выявлены корреляции между ИПд /max/S и ИПд свТ4 (г = +0,94, p < 0,01), при тиреотоксикозе - между Ипд /max/S и ипд Т4 (г = -0,54, р < 0,05), между ипд S и ипд свТз (г = -0,74, р < 0,05), ипд /max и иПд свТ3 (г = -0,76, р < 0,05).
Таким образом, нами отмечено повышение активности ПОЛ у больных с гипотиреозом и тиреотоксикозом. Связь ПОЛ и функционального состояния щитовидной железы подтверждается снижением содержания продуктов ПОЛ у больных в ходе лечения и улучшения тиреоидного статуса как при гипотиреозе, так и тиреотоксикозе, причем есть параллелизм между темпами нормализации тиреоидного метаболизма и содержанием продуктов ПОЛ.
ОТ способна оказывать прооксидантное действие, что проявляется у больных гипотиреозом в росте /max, ДК, ТК. Это свидетельствует о необходимости лабораторного контроля за ОТ, а также о целесообразности применения антиоксидантов при проведении ОТ.
У больных тиреотоксикозом существенных изменений активности ПОЛ нами не выявлено, хотя такие сведения в литературе имеются [1, 2]. Анализ показал, что в этих работах ОТ использовалась в основном у впервые выявленных больных и снижение активности ПОЛ происходило у пациентов параллельно с падением концентрации тиреоидных гормонов.
Таблица 1
Состояние ПОЛ и АОС в норме и при гипотиреозе
Показатель Группа сравнения (п = 29) Гипотиреоз (п = 23) Тиреотоксикоз (п = 43)
S, ^іУхс 24,62±1 31,6±1,6*** 37,08±1,59***
/max, mV 2,47±0,17 3,88±0,29*** 4,40±0,21 ***
/max/S, с-' 0,098±0,004 0,122±0,004*** 0,120±0,003***
tg a, mV/с 0,66±0,06 1,09±0,11* 1,17±0,08*
МДА, е.э. 1,05±0,29 2,19±0,45* 1,47±0,24*
ДК, е.э. 0,17±0,02 0,39±0,06** 0,35±0,04**
ТК, е.э. 0,037±0,001 0,061±0,007** 0,106±0,031*
ОЛ, г/л 4,73±0,3 5,27±0,45 4,35±0,36
/max/ОЛ, отн. ед. 0,49±0,06 0,89±0,14* 1,40±0,14***
СОД, ед./г Hb 1454±75 1648±68 1089±336
S/ОЛ, отн. ед. 10,41±0,47 7,00±0,93 11,9±1,35
Примечание. Различия с группой сравнения: * - р < 0,05; ** - р < 0,01; *** - р < 0,001.
Таблица 2
Динамика гормонов тиреоидного статуса и системы ПОЛ-АОЗ у пациентов с гипотиреозом
Таблица 3
Динамика гормонов тиреоидного статуса и продуктов ПОЛ у пациентов с тиреотоксикозом
Показатель Группа без ОТ (n = 10) Г руппа с ОТ (n = 12)
ТТГ, мМЕд/л 17,79±4,08 10,11±3,31
12,07±5,23 15,43±5,25
Т3, нмоль/л 1,48±0,11 1,50±0,21
1,57±0,19 1,68±0,45
Т4, нмоль/л 94,5±24,5 120,3±31,6
136,22±36,54 120,96±20,39
свТ3, пмоль/л 4,82±0,49 4,72±0,30
6,85±0,35 6,20±0,48
свТ4, пмоль/л 12,1±2,88 12,65±1,91
17,4±2,36 18,63±4,54
S, ^^хс 32,46±2,52 30,81±2,11
30,18±3,68 36,97±2,98
mV 4,31±0,53 3,48±0,24
3,59±0,43* 4,14±0,34*
с 0,131±0,007 0,114±0,005
0,119±0,006 0,112±0,003
tga, mV/с 1,26±0,19 0,94±0,09
0,94±0,13 1,11±0,13
МДА, е.э. 2,34±0,66 2,04±0,65
2,34±0,85 2,52±0,63*
ДК, е.э. 0,34±0,07 0,42±0,10
0,26±0,16* 0,53±0,11*
ТК, е.э. 0,068±0,013 0,057±0,009
0,056±0,024* 0,059±0,009
Imax/ОЛ, отн. ед. 1,07±0,26 0,70±0,07
0,78±0,17 0,68±0,09
СОД, ед./г Hb 1642±142 1652±85
2307±90 2410±98
S/ОЛ, отн. ед. 7,795±1,78 6,197±0,576
6,217±1,167 6,126±0,826
Показатель Г руппа без ОТ (n = 8) Г руппа с ОТ (n = 35)
ТТГ, мМЕд/л 0,19±0,08 0,23±0,07
0,21 ±0,1 0,40±0,12
Т3, нмоль/л 2,98±0,88 3,91±0,32
2,44±0,52* 3,70±0,52*
Т4, нмоль/л 142,13±31,42 215,74±20,43
111,55±22,83 179,42±20,36
свТ3, пмоль/л 8,95±3,53 8,75±1,83
9,08±2,92 8,06±2,13*
свТ4, пмоль/л 40,89±4,9 36,42±4,7
36,29±2,0* 17,16±1,8*
S, ^Мхс 39,83±6,03 36,72±1,64
30,54±7,57 34,17±2,05
Imax , mV 5,12±0,95 4,27±0,19
3,58±0,99 3,93±0,25
Imax/S , с-1 0,13±0,01 0,12±0,01
0,11±0,01 0,11±0,01
tga, mV/с 1,41±0,36 1,13±0,07
0,95±0,26 1,03±0,08
МДА, е.э. 1,52±0,66 1,49±0,28
2,05±1,50 2,22±0,43*
ДК, е.э. 0,231±0,134 0,368±0,046
0,344±0,120 0,260±0,042
ТК, е.э. 0,05±0,02 0,11±0,03
0,06±0,02 0,06±0,01*
Imax /ОЛ, отн. ед. 1,28±0,18 1,45±0,18
1,21 ±0,63 1,49±0,57
СОД , ед./г Hb 987±312 1224±762
1706±811 856±250
S/ОЛ , отн.ед. 9,95±1,13 12,54±1,65
10,5±5,79 12,71±5,02
Примечание. * - достоверность дина- Примечание. * - достоверность динами-
мических различий по Вилкоксону с р < 0,05. ческих различий по Вилкоксону с р < 0,05.
Можно полагать, что активация ПОЛ у пациентов с патологией ЩЖ в большей степени обусловлена нарушением ее функционального состояния. Системные эффекты ОТ (регуляция вазодилатации и вазоконстрикции, активация энергетического обмена, модуляция окислительно-восстановительного гомеостаза, иммуномодуляция) способствуют повышению эффективности проводимой медикаментозной терапии различных заболеваний. В связи с этим проведение ОТ целесообразно и у больных с гипотиреозом и тиреотоксикозом, несмотря на потенциальную активацию процессов ПОЛ.
Выводы: 1. У пациентов с гипотиреозом и тиреотоксикозом наблюдается активация перекисного окисления липидов по данным биохемилюминес-ценции: /тах, 5, 1да и увеличение содержания в крови продуктов перекисного окисления липидов: диеновых конъюгатов, триеновых конъюгатов, малонового диальдегида.
2. Нормализация функционального состояния щитовидной железы у больных способствует снижению активности перекисного окисления липидов при гипотиреозе.
3. Озонотерапия потенциально способна активировать ПОЛ, особенно при гипотиреозе, что требует лабораторного контроля при использовании данного метода и, возможно, превентивного назначения антиоксидантов.
Литература
1. Арсютов Г.П. Анализ эффектов инфузионной терапии в комплексном лечении диффузно-токсического зоба: автореф. дис. ... канд. мед. наук. Чебоксары, 1999. 23 с.
2. Водякова А.В. Патогенетическое обоснование применения озонотерапии при токсическом зобе: автореферат дис. канд. ... мед. наук. Саранск, 2009.
3. Интегральный показатель для оценки динамики клинико-лабораторных показателей в медицине / И.В. Мадянов, В.Н. Саперов, В.Л. Григорьев и др. // Вестник Чувашского университета. 1995. № 2. С. 81-86.
4. Каплиева М.П. Влияние L-тироксина на процессы перекисного окисления липидов и антиоксидантную систему у детей и подростков, подвергшихся хроническому радиационному воздействию // Морфофункциональные системы действия радионуклеотидов на процессы антенатального и постнатального развития: сб. науч. тр. / Гомельск. гос. мед. ин-т. Гомель, 1996. С. 67-69.
5. Конторщикова К.Н. Перекисное окисление липидов в норме и патологии: учеб. пособие. Н. Новогород: НижГМА, 2000. 24 с.
6. Кузьмина Е.И., Нелюбин А.С., Щенникова М.К. Применение индуцированной биохемилю-минесценции для оценок свободнорадикальных реакций в биологических субстратах // Биохимия и биофизика микроорганизмов: межвуз. сб. Горький: гГу, 1983. С. 41-48.
7. Марзоев А.И., Клебанов Г.И., Шерстнев М.П., Андрющенко А.П. Перекисное окисление липидов сыворотки крови кроликов с различным тиреоидным состоянием // Вопросы медицинской химии. 1985. № 2. С. 14-16.
8. Марчюлените ДЮ. Значение продуктов перекисного окисления липидов и антиокси-дантных витаминов Е и А в патогенезе заболеваний щитовидной железы: автореф. дис. .. канд. биол. наук. Каунас, 1992. 25 с.
9. Павловский М.П., Тимочко М.Ф., Лукавецкий А.В., Ткаченко О.Р. Процессы перекисного окисления липидов в крови и ткани печени при гипо- и гиперфункции щитовидной железы в эксперименте // Проблемы патологии в эксперименте и клинике: сб. науч. тр. Харьковского мед. инта. 1986. № 8. С. 114-115.
10. Уфимцева Е.А. Патофизиологическое обоснование применения озонотерапии при эндемическом зобе с пониженной функцией щитовидной железы на фоне ожирения: автореф. дис. . канд. мед. наук. Саранск, 2005.
13. Щербатюк Т.Г. Современное состояние озонотерапии в медицине. Перспективы применения в онкологии // Современные технологии в медицине. 2010. № 1. С. 99-106.
14. Eyquem A. Immunopatologie de la thyroidite de Hachimoto // Eurobiologiste. 1998. Vol. 32, № 235. P. 9-15.
15. Influence of hyper- and hypothyroidism on lipid peroxidation, unsaturation of phospholipids, glutathione system and oxidative damage to nuclear and mitochondrial DNA in mice skeletal muscle / R. Gredillal, M. López Torresl, M. Portero-Otín et al. // Molecular and Cellular Biochemistry. 2001. Vol. 221, № 1-2. P. 41-48.
16. Peripheral parameters of oxidative stress in Graves' disease. The effects of methimazole and 131-lodine treatments / M. Abalovich, M. Repetto, M. Loto et al. // Clinical Endocrinology. 2003. Vol. 59. P. 321.
17. The effect of hypothyroidism, hyperthyroidism, and their treatment on parameters of oxidative stress and antioxidant status / H. Erdamar, H. Demirci, H. Yaman et al. // Clin. Chem. Lab. Med. 2008. Vol. 46(7). P. 1004-1010.
ТУКТАНОВ НИКОЛАЙ ВАЛЕРИАНОВИЧ - заведующий лабораторией, Республиканский Центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями, Россия, Чебоксары (ntukt@mail.ru).
TUKTANOV NIKHOLAY VALERIANOVICH - head of laboratory, Republican Center for Prevention and Control of AIDS and Infectious Diseases, Russia, Cheboksary.
