CC BY
2197
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ТЕРАПИИ МИГРАЦИОННОГО АСКАРИДОЗА И ЕЕ ВЛИЯНИЕ НА ТИРЕОИДНЫЙ СТАТУС ХОЗЯИНА
ЛОГИШИНЕЦ И.А., БЕКИШ О.-Я.Л.
УО «Витебский государственный медицинскийуниверситет»
Резюме. Терапия миграционного аскаридоза мебендазолом, а также мебендазолом в сочетании с индометацином обеспечивает полную дегельминтизацию животных. Лечение ларвального аскаридоза альбендазолом или альбендазолом в сочетании его с индометацином приводит к снижению интенсивности инвазии на 97% и 96% соответственно. Введение животным левамизола, а также левамизола с индометацином обеспечивает 98% гибели личинок аскарид. Миграция личинок аскарид сопровождается снижением уровней тиреотропного гормона гипофиза, трийодтиронина и тироксина. Специфическая и патогенетическая терапия, проведенная на миграционной стадии аскаридоза, обеспечивает развитие менее выраженных сдвигов в гипофизарно-тиреоидной системе по сравнению с изменениями, вызванными только миграцией личинок аскарид.
Ключевые слова: аскаридоз, мебендазол, альбендазол, левамизол, трийодтиронин,тироксин.
Abstract. Abstract. Treatment of migratory ascariasis with mebendazole or mebendazole combined with indometacin results in complete, dehelminthization of the infected animals. Therapy of larval ascariasis with albendazole or albendazole plus indometacin leads to decrease of invasion intensity by 97% and 96% respectively. Introduction of levamizole in experimental animals, or levamizole plus indometacin provides destruction of 98% of ascarides larvae. Migration of ascarides larvae is accompanied by decrease of thyrotropic hormone, triiodothyronine and thyroxin levels. The specific and pathogenetic therapy performed during migratory stage of ascariasis, provides the development of less expressed shifts in pituitary-thyroid system in comparison with the changes caused only by migration of ascarides larvae.
Адрес для корреспонденции: Республика
Беларусь, 210023, г. Витебск, пр. Фрунзе, 27, УО «Витебский государственный
медицинский университет» кафедра медицинской биологии и общей генетики, тел. 37-00-30. - Логишинец И. А.
Для лечения нематодозов применяется целый ряд антигельминтиков, которые высоко эффективны не только в отношении взрослых паразитов, но и их личиночных стадий. К таким препаратам можно отнести мебендазол, альбендазол и левамизол. Действие мебендазола и альбендазола основано на способности связываться с белком тубулином и тем самым предотвращать образование микротубул, что в свою очередь ингибирует поступление и транспорт глюкозы, снижает синтез АТФ и нарушает энергетический обмен гельминта [1, 2]. Левамизол блокирует холинэргические рецепторы гельминта и нарушает его подвижность, вызывая спастический паралич мускулатуры [1]. Препараты действуют как на миграционные, так и на кишечные стадии паразитов [1, 3, 4].
Кроме нематоцидного эффекта, альбендазол и левамизол обладают иммуномодулирующим действием, что имеет немаловажное значение при проведении противогельминтной терапии [2, 5, 6]. При гельминтозах
развиваются нарушения функционирования иммунной системы, осложняющие течение и исход патологических процессов. Применение иммуномодуляторов стимулирует в организме биологически активные компоненты иммунитета и нормализует физиологические функции инвазированного организма.
Личинки нематод способствуют развитию в организме хозяина аллергических и воспалительных реакций, которые усиливаются при специфической терапии из-за гибели паразитов.
Для снижения этих эффектов в ряде случаев используются противовоспалительные нестероидные препараты, такие как индометацин и вольтарен [7].
Мигрирующие личинки аскарид являются причиной возникновения серьезных патологических процессов в организме хозяина, сопровождающихся поражениями кишечника, печени, легких, почек и других органов. В связи с этим проблема терапии как ларвального, так и кишечного аскаридоза привлекает к себе пристальное внимание. Установлено, что аскаридоз сопровождается нарушением функциональной активности гипофизарно-тиреоидной системы [8].
Учитывая важную роль тиреоидных гормонов в регуляции физиологических процессов в организме хозяина, представляет интерес изучение эффективности специфической и патогенетической терапии миграционного аскаридоза и ее влияние на секрецию гормонов гипофизарно-тиреоидной системы.
Методы
Специфическая терапия миграционного аскаридоза осуществлялась с использованием мебендазола, альбендазола или левамизола, а патогенетическая с применением нестероидного противовоспалительного препарата индометацина в сочетании с каждым из указанных выше антигельминтиков.
Материалом для исследования служили крысы-самцы линии Wistar, полученные из питомника РАМН «Рапполово» массой 150-200 г, которые были разделены на 12 групп по 10 животных в каждой.
Животные первой группы служили интактным контролем, второй - пятой групп - контролем на введение мебендазола, альбендазола, левамизола и индометацина соответственно. Препараты вводились в течение трех дней. У крыс шестой - двенадцатой групп моделировали миграционный аскаридоз путем введения животным per os инвазионных яиц Ascaris suum в дозе 50 яиц/г массы тела.
Культуру инвазионных яиц аскарид получали по методике, предложенной Вл.Я. Бекишем. Крысы шестой группы не получали лекарственных препаратов и служили контролем на инвазию. Животным седьмой группы вводили per os
мебендазол в дозе 75 мг/кг, восьмой - альбендазол в дозе 15 мг/кг, девятой -левамизол в дозе 10 мг/кг. Животные десятой, одиннадцатой и двенадцатой групп получали те же препараты в вышеуказанных дозировках в сочетании с индометацином (доза 2,14 мг/кг).
Препараты разводили в 2% крахмальном геле до нужной концентрации и вводили туберкулиновым шприцом с железной оливой на конце иглы в желудок подопытных животных. Перед забоем крысы не получали пищи в течение 12 часов. Препараты вводились в течение трех дней с 4-го по 6-й дни от начала инвазии.
Забор крови для определения концентрации гормонов осуществлялся на следующий день после последнего введения препаратов, а у инвазированных животных, не получавших препараты, - на 7-е сутки после заражения их яйцами Ascaris suum.
Для оценки эффективности терапии миграционного аскаридоза проводился подсчет количества личинок паразита, выделенных из легких крыс методом Бермана, на 7-й день после заражения.
Концентрацию тиреотропного гормона гипофиза, трийодтиронина и тироксина определяли радиоиммунным методом, используя наборы реактивов «РИА-ТТГ», «РИО-Т3-ИПР» и «РИО-Т4-ИПР» предприятия «Хозрасчетное опытное производство Института биоорганической химии Национальной академии наук Беларуси».
При проведении терапии аскаридоза были использованы следующие препараты: мебендазол (Вермокс) в таблетках по 100 мг фирмы «Gedeon Richter» (Венгрия), альбендазол в таблетках по 200 мг (Россия), левамизол (Декарис) в таблетках по 150 мг фирмы «Gedeon Richter» (Венгрия), индометацин в таблетках по 25 мг фирмы «Pharmachim» (Болгария).
Результаты
Среднее число личинок Ascaris suum в легких зараженных крыс, не получавших лекарственных препаратов, на 7-е сутки инвазии составило
129±19,4 штук. У животных, пролеченных мебендазолом, а также мебендазолом в сочетании с индометацином, на 7-й день инвазии личинки аскарид в легких не обнаруживались. При терапии с использованием альбендазола, число паразитов снизилось до 3,9±2,8, что было ниже на 97%, чем у крыс, не получавших антигельминтик.
После проведения сочетанной терапии альбендазолом с индометацином количество паразитов уменьшилось на 96% по сравнению с нелеченными животными и составило 5,1 ±3,1. Число личинок аскарид у животных, получавших левамизол, составило 2,6±2,7, то есть было на 98% ниже, чем у нелеченных крыс. В легких животных, пролеченных левамизолом с индометацином отмечалось снижение количества аскарид (2,7±2,7) на 98%, по сравнению с животными, не получавшими препаратов.
Концентрация тиреотропного гормона гипофиза у интактных животных составляла 1,40±0,23 мМЕ/л, трийодтиронина - 1,21±0,11 нмоль/л и тироксина
- 36,24±4,23 нмоль/л соответственно.
У незараженных животных, получавших мебендазол, альбендазол, левамизол или индометацин, уровни изучаемых гормонов претерпевали незначительные колебания по отношению к интактному контролю (Р>0,05).
Миграция личинок Ascaris suum у животных, не получавших препараты, вызывала достоверное снижение концентрации тиреотропного гормона гипофиза в 2,5 раза, трийодтиронина - в 1,7 раза и тироксина - в 2,3 раза соответственно.
Вместе с тем, специфическая и патогенетическая терапия аскаридоза, проведенная на начальных этапах миграции личинок Ascaris suum, оказала позитивное влияние на функциональное состояние гипофизарно-тиреоидной системы. У инвазированных крыс, получавших препараты, на 7-й день инвазии наблюдалось снижение уровней гормонов гипофизарно-тиреоидной системы по сравнению с интактным контролем (таблица 1).
Таблица 1
Уровни тиреотропного гормона гипофиза, трийодтиронина и тироксина в сыворотке крови крыс после проведения терапии экспериментального
аскаридоза на 7-й день инвазии
Группа животных Тиреотропный гормон гипофиза, мМЕ/л Т рийодтиронин, нмоль/л Тироксин, нмоль/л
Интактный контроль 1,40±0,23 1,21±0,11 36,24±4,23
Инвазия 0,55±0,11* 0,70±0,09* 15,58±1,25*
Инвазия + мебендазол 0,81±0,14*@ 0,74±0,10* 20,57±2,34*@
Инвазия + мебендазол + индометацин 0,75±0,12*@ 0,78±0,08*@ 19,94±2,53*@
Инвазия + альбендазол 0,84±0,17*@ 0,83±0,10*@ 21,50±3,14*@
Инвазия + альбендазол + индометацин 0,83±0,15*@ 0,83±0,12*@ 19,63±2,71*@
Инвазия + левамизол 0,86±0,11*@ 0,81±0,12*@ 22,28±1,63*@
Инвазия + левамизол + индометацин 0,79±0,16*@ 0,75±0,11* 21,50±3,02*@
Примечание: * - Р< 0,05 по сравнению с показателями интактного контроля, @ - Р< 0,05 по сравнению с показателями инвазированных нелеченных животных.
В группе, где использовался мебендазол, концентрации тиреотропного гормона гипофиза и тироксина были в 1,5 раза и 1,3 раза достоверно выше, чем у инвазированных животных, не получавших препарат. У животных, которым вводили альбендазол, уровень тиреотропного гормона гипофиза оказался выше в 1,5 раза, трийодтиронина - в 1,2 раза и тироксина - в 1,4 раза (Р<0,05) по сравнению с нелеченными зараженными животными. У животных, пролеченных левамизолом, уровень тиреотропного гормона гипофиза был выше в 1,6 раза, трийодтиронина - в 1,2 раза и тироксина - в 1,4 раза (Р<0,05) соответственно по сравнению с нелеченными инвазированными животными.
Сходные результаты были получены в группах животных, зараженных личинками аскарид, где проводилась сочетанная терапия с использованием нестероидного противовоспалительного препарата индометацина. Терапия, включающая сочетанное введение антигельминтика с индометацином, обеспечивала более высокие концентрации гормонов по сравнению с инвазированным контролем.
Так, уровень тиреотропного гормона гипофиза, у зараженных животных, пролеченных мебендазолом с индометацином, оказался достоверно выше, чем у
инвазированных нелеченных животных в 1,4 раза, трийодтиронина - в 1,1 раза и тироксина - в 1,3 раза. У зараженных крыс, которым вводили альбендазол с индометацином, концентрации указанных гормонов были выше в 1,5 раза, 1,2 раза и 1,3 раза (Р<0,05) соответственно. У инвазированных животных, которым вводили левамизол с индометацином, отмечалось достоверное повышение концентрации тиреотропного гормона гипофиза и тироксина в 1,4 раза соответственно.
Вместе с тем концентрации гормонов у крыс, получавших антигельминтик с индометацином, оказались ниже аналогичных показателей у животных, получавших только антигельминтик. Так, у животных, пролеченных мебендазолом, уровень тиреотропного гормона гипофиза был на 11% выше, чем у крыс, получавших мебендазол с индометацином.
Сочетанная терапия альбендазолом с индометацином обеспечивала снижение уровня тироксина на 12% по сравнению с аналогичным показателем у животных, пролеченных только альбендазолом. Концентрации тиреотропного гормона гипофиза и трийодтиронина у крыс, получавших левамизол с индометацином, были ниже на 12% и 9% соответственно по сравнению с животными, которым вводили только левамизол.
Обсуждение
Как показали проведенные исследования, миграционный аскаридоз сопровождается угнетением функциональной активности гипофизарно-тиреоидной системы, о чем свидетельствует снижение в крови уровней тиреотропного гормона гипофиза, трийодтиронина и тироксина. Наблюдаемые нами изменения являются следствием реакции гипоталамо-гипофизарной системы на антигенный стимул и обусловлены, в первую очередь, сенсибилизацией и аллергизацией организма хозяина антигенами аскарид. Гипофиз, как центральная часть эндокринной системы, первым реагирует на развитие паразитарного процесса, что проявляется в уменьшении уровня тиреотропного гормона гипофиза.
Еще одной причиной снижения секреторной активности щитовидной железы могло стать изменение уровня биогенных аминов в микроокружении фолликулов, вызванное образованием метаболитов при взаимодействии антигена паразита с иммунокомпитентными клетками [9]. Кроме того, изменение концентрации тиреоидных гормонов в крови было связано с изменением их метаболизма в периферических тканях хозяина. Уменьшение концентрации тиреоидных гормонов в сыворотке крови людей, больных аскаридозом, наблюдали Л.В. Мурзагалеева с соавт. [8].
Введение мебендазола, альбендазола, левамизола и индометацина неинвазированным крысам не приводило к достоверным изменениям уровней тиреотропного гормона гипофиза, трийодтиронина и тироксина, что указывает на отсутствие тиреотоксического эффекта у используемых препаратов.
Специфическая и патогенетическая терапия аскаридоза, проведенная на начальных этапах миграции личинок Ascaris suum, оказала позитивное влияние на функциональное состояние гипофизарно-тиреоидной системы. Уровни тиреотропного гормона гипофиза, трийодтиронина и тироксина у пролеченных животных оказались выше, чем у инвазированных крыс, не получавших препараты, хотя и оставались ниже величин интактного контроля. Введение антигельминтиков зараженным животным с 4 по 6-е сутки инвазии обеспечивало массовую гибель личинок аскарид, не обладающих высокой антигенной активностью [10].
Развитие наиболее острых аллергических реакций связано с выделением функциональных антигенов личинками третьей стадии во время их линьки в легких (7-10-е сутки инвазии) [10].
Таким образом, терапия аскаридоза, проведенная в указанные сроки, способствует развитию менее выраженных аллергических реакций и сдвигов в гипофизарно-тиреоидной системе, предотвращая частично или полностью образование антигенов личинок третьей стадии, метаболиты которых обладают выраженным сенсибилизирующим действием.
Наши данные согласуются с результатами клинических исследований других авторов [8], изучавших концентрации тиреоидных гормонов в сыворотке крови больных аскаридозом, подвергнувшихся антигельминтной терапии.
У животных, которым вводили альбендазол или левамизол, уровень гормонов был несколько выше по сравнению с животными, получавшими мебендазол. Возможно, это было связано с их иммуномодулирующим действием. Известно, что тиреотропный гормон гипофиза, а также тиреоидные гормоны активно участвуют в регуляции иммунных процессов, причем их взаимоотношения с иммунной системой являются обратимыми. Иммунные сдвиги могут, в свою очередь, изменять секрецию тиреоидных гормонов щитовидной железы [11].
Экспериментальные исследования свидетельствуют о том, что мебендазол угнетает Т- и В-лимфоциты у спонтанно зараженных трихинеллезом мышей [12], что опосредовано влияет на функцию гипофиза и щитовидной железы. Кроме того, имеются данные о том, что лечебные дозы мебендазола вызывают уменьшение объема ядер гепатоцитов, снижая их метаболическую активность [13].
Изменение функциональной активности гепатоцитов может быть причиной нарушения метаболизма тиреоидных гормонов. Вышеизложенное позволяет объяснить более низкие концентрации тиреоидных гормонов у животных, пролеченных мебендазолом, по сравнению с группами, где использовались альбендазол и левамизол.
Индометацин снижает остроту аллергических реакций [7], однако применение его в сочетании с антигельминтиками не обеспечивает роста показателей тиреотропного гормона гипофиза, трийодтиронина и тироксина по сравнению с введением только одного антигельминтика. Этот факт можно объяснить специфическим действием индометацина на секрецию тиреотропного гормона гипофиза и гормонов щитовидной железы [14].
Применение мебендазола вызывало у крыс побочные эффекты в виде вздутия живота и диареи. Сходные симптомы наблюдали и другие авторы при использовании мебендазола для терапии экспериментального трихинеллеза [15]. Тем не менее, введение мебендазола способствовало полной дегельминтизации животных. Эффективность альбендазола и левамизола в отношении ларвального аскаридоза составила 96-98%.
Заключение
1. Терапия мебендазолом, а также мебендазолом в сочетании с индометацином, проведенная на миграционной стадии аскаридоза, обеспечивает полную дегельминтизацию животных. Лечение аскаридоза альбендазолом, а также в сочетании его с индометацином приводит к снижению интенсивности инвазии на 97% и 96% соответственно. Введение левамизола, а также левамизола с индометацином обеспечивает 98%-ю гибель личинок аскарид.
2. Специфическая и патогенетическая терапия миграционного аскаридоза, проведенная на начальных этапах миграции личинок аскарид, обеспечивает более высокие показатели тиреотропного гормона гипофиза, трийодтиронина и тироксина у животных, получавших препараты, по сравнению с инвазированным контролем. Однако уровень гормонов остается ниже величин интактного контроля.
3. Сочетанное введение мебендазола, альбендазола или левамизола с индометацином при миграционном аскаридозе не обеспечивает роста уровней тиреотропного гормона гипофиза, трийодтиронина и тироксина по сравнению с введением только одного антигельминтика.
Литература
1. Дэвис, А. Лекарственная терапия кишечных гельминтозов: пер. с англ. /
А. Дэвис; ВОЗ. - М.: Медицина, 1975. - 144 с.
2. Клиническая паразитология: руководство / А. Я. Лысенко [и др.]; под общ. ред. А. Я. Лысенко. - Женева, ВОЗ, 2002. - 752 с.
3. Чистенко, Г. Н. Гельминты и гельминтозы человека / Г. Н. Чистенко // Белорусский мед. журн. - 2004. - № 3. - С. 9-14.
4. Шедивцова, А. Эффективность ряда противонематодных препаратов при ларвальном аскаридозе у белых мышей / А. Шедивцова // Мед. паразитол. и паразитар. болезни. - 1976. - № 6. - С. 728-730.
5. Озерецковская, Н. Н. Клиника и лечение гельминтозов / Н. Н. Озерецковская, И. С. Зальнова, Н. И. Тумольская. - Л.: Медицина, 1985. -С. 52-75.
6. Effect of free and liposomized albendazole on the immune responses in healthy and Toxocara canis-infected mice / Z. Boroskova [et al.] // Vet.med. - 1998.
- Vol. 43, N 10. - P. 293-300.
7. Бекиш, О.-Я. Л. Влияние противовоспалительных нестероидных средств на течение экспериментального трихинеллеза у белых крыс / О.-Я. Л. Бекиш, Н. Н. Озерецковская // IV Всесоюз. конф. по проблеме трихинеллеза человека и животных, Ереван, 15-17 мая 1985 г.: материалы докл. - Ереван, 1985. - С. 6668.
8. Современные особенности клиники и патогенеза аскаридоза /
Л. В. Мурзагалеева [и др.] // Актуальные вопросы инфекционной патологии:
мат. междунар. Евро-Азиатского конгр. по инфекционным болезням, Витебск, 5-6 июня 2008 г.; под ред. В. М. Семенова. - Витебск, 2008. - С. 158-159.
9. Gershon, M. D. Biochemical, histochemical and ultrastructural studies of thyroid serotonin, parafollicular and follicular cells during development in the dog / M. D. Gershon, B. E. Blshaw, E. A. Nunez // American J. of Anatomy. - 2005. - Vol. 132, № 1. - P. 5-19.
10. Лейкина, E. С. Антигены гельминтов и их применение для
диагностики и профилактики гельминтозов / Е. С. Лейкина // Мед. паразитол. и паразитар. болезни. - 1968. - № 2. - С. 233-240.
11. Быков, В.Л. Реактивные изменения щитовидной железы при
воздействии иммунодепрессанта / В. Л. Быков, Г. Ю. Юкина // Функциональная
нейроморфология. Фундаментальные и прикладные исследования: сб. ст. -Минск: Бизнесофсет, 2001. - С. 247-249.
12. Мамыкова, О. И. Оценка иммунобиологического статуса животных после дегельминтизации и пути его коррекции: автореф. дис. ... канд. вет. наук / О. И. Мамыкова. - М., 1990. - 21 с.
13. Рачковская, И. В. Анализ ответной реакции гепатоцитов белых крыс
при экспериментальном трихинеллезе и лечении его вермоксом и циклоспорином А (по данным кариометрии) / И. В. Рачковская,
Л. А. Известнова // Тканевые гельминтозы: диагностика, патогенез, клиника, лечение и эпидемиология: тр. науч.-практ. конф., Витебск, 2000 г. / ВГМУ; под ред. О.-Я. Л.Бекиша. - Витебск, 2000. - С. 112-113.
14. Inhibition of TSH-stimulated thyroid hormone release and potentiation of TRH-stimulated TSH release by indomethacin in perifusion systems of rat thyroids and pituitaries / K. Mashita [et al.] // Experientia. -1984. - P. 1429-1431.
15. Толстой, В. А. Эозинофилия крови крыс при лечении
экспериментального трихинеллеза мебендазолом и антиоксидантным комплексом витаминов «АКР» / В. А. Толстой, В. Э. Бутвиловский,
В. В. Давыдов // Тканевые гельминтозы: диагностика, патогенез, клиника, лечение и эпидемиология: тр. науч.-практ. конф. - Витебск, 2000. - С. 131-137.
