CC BY
0взаимодействий при генетико-эпидемиологических исследованиях : обзор / И. В. Пономаренко // Научные результаты биомедицинских исследований. -2019. - Т. 5. - № 1. - С. 4-21.
17.04.2024
УДК [582.736.3:581.19:577.164.39]:[599.323.45.084:591.1.044]
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ КОМПЛЕКСА ФЛАВОНОИДОВ СОИ, ЛЮЦЕРНЫ И КЛЕВЕРА ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ РАБОТОСПОСОБНОСТИ КРЫС ПРИ ЭКСТРЕМАЛЬНЫХ ФИЗИЧЕСКИХ НАГРУЗКАХ
О. Л. Канделинская, канд. биол. наук, доцент, Е. Р. Грищенко, Д. В. Горецкий,
Институт экспериментальной ботаники Национальной академии наук Беларуси;
A. В. Янцевич, канд. хим. наук, доцент, С. Э. Огурцова, канд. биол. наук,
Е. М. Тумар,
Е. В. Шафрановская, канд. биол. наук, Я. В. Диченко, канд. хим. наук, доцент,
Институт биоорганической химии Национальной академии наук Беларуси;
С. Василевич (Dr. Sanja Vasiljevic), д-р биол. наук,
B. Джукич (Dr. Vojin Dukic), д-р биол. наук,
Институт полеводства и овощеводства, г. Нови Сад, Сербия
Аннотация
В статье рассматривается феномен повышения под влиянием комплекса флавоноидов сои, люцерныс и клевера работоспособности крыс до 47 % при экстремальных физических нагрузках.
EFFECTIVENESS OF USING A COMPLEX OF FLAVONOIDS SOY, ALFALFAL AND CLOVER TO INCREASE THE PERFORMANCE OF RATS DURING EXTREME PHYSICAL ACTIVITY
O. L. Kandelinskaya, E. R. Grischenko, D. V. Goretsky,
Institute of Experimental Botany of Belarus Academy of Sciences;
A. V. Yantsevich, S. E. Ogurtsova, T. M. Tumar, E. V. Shafranovskaya,
Y. U. Dzichenka,
Institute of Bioorganic Chemistry of Belarus Academy of Sciences; Sanja Vasiljevic, Vojin Dukic,
Institute of field and vegetable crops, Novi Sad, Serbia Abstract
The article describes the phenomenon of an increase in the performance of rats by up to 47 % under the influence of a complex of flavonoids from soy, alfalfa and clover, under extreme physical exertion.
Введение
Спорт высоких достижений слагается из многих составляющих, среди которых важное значение имеют различные аспекты медико-биологического сопровождения тренировочного и соревновательного процессов. Комплекс мероприятий, призванных обеспечить спортивный успех, включает обеспечение спортсменов специализированными продуктами, которые способствуют повышению эффективности спортивной подготовки и стрессоустойчивости, уменьшению негативных последствий интенсивных физических нагрузок [1-10].
На современном этапе разработка для спортсменов подобных продуктов с четким правовым регулированием, качественных и безопасных и, одновременно, обладающих антидопинговой чистотой, является одной из стремительно развивающихся областей фармакологии спорта высоких достижений [1, 5]. И здесь особое место занимают адаптогены — средства растительного или животного происхождения, содержащие сложный набор биологически активных веществ, способные стимулировать защитные силы организма, ускорять процессы адаптации, повышать умственную и физическую работоспособность [1-7].
Механизм действия адаптогенов до конца не изучен. Анализ данных литературы показывает, что адаптогены обладают специфическим иммуностимулирующим и анаболическим действием на состояние ЦНС, эндокринной системы и органов кроветворения [7, 9]. Особый интерес представляют адаптогены растительного происхождения, которые в небольших дозах предупреждают истощение гипофиз-адреналовой системы при экстремальных воздействиях; активируют защитные и компенсаторные механизмы; способствуют нормализации обменных процессов в тканях [4].
На сегодняшний день установлены адаптогенные свойства у более сотни растений. Актуальным является создание новых фитокорректоров адаптационного процесса. Согласно данным литературы, адаптогенное действие растений определяют в значительной степени фенольные соединения [7-10], среди которых флавоноиды, которые обладают широким спектром биологических свойств, в том числе, адаптогенным эффектом, представляют наибольший интерес [11-13].
Известно, что такие лекарственные растения, как соя, клевер, люцерна, обладают антиоксидантной, антипролиферативной активностью, адаптогенными, актопротекторными, гепатопротекторными свойствами, обеспечивающими быстрое восстановление организма после перенесенной нагрузки. Немаловажными характеристиками являются также антигипоксические, антистрессорные, антитоксические и антиоксидантные свойства [14-22]. Существует мнение, что изофлавоны сои, клевера и люцерны не только увеличивают физическую работоспособность, но и препятствуют отрицательному воздействию предельных мышечных нагрузок на функции органов, нормализуют поведенческие реакции у женщин в менопаузе, снижая уровень тревожности [15-19].
Однако, несмотря на длительное использование сои, клевера и люцерны в различных областях медицины, их возможные свойства как адаптогенов не изучались.
Цель исследования
Оценить влияние комплекса флавоноидов сои, люцерны и клевера на работоспособность крыс при экстремальной физической нагрузке.
Материалы и методы исследований
Получение комплекса флавоноидов клевера, люцерны и сои (КФ) осуществляли, руководствуясь методами [23-25] в собственной модификации. Сырьем для получения флавоноидов служили надземные части растений клевера лугового (сорт Ятвяг) и люцерны посевной (сорт Будучыня) в период цветения, а также семена сои (сорт Вера). Указанные сорта были белорусской селекции и получены: клевер и люцерна - из НПЦ НАН Беларуси по земледелию; соя - из ООО «Соя-Север Ко». Для выделения флавоноидов проводили экстракцию измельченного воздушно-сухого растительного сырья каждого вида растений 70 % этиловым спиртом в соотношении 1:10 на ультразвуковой бане при температуре 60°С в течение 1 ч. Затем экстракт центрифугировали, фильтровали через бумажный фильтр, спирт выпаривали, к водному остатку добавляли равное количество горячей воды, тщательно перемешивали и после охлаждения удаляли неполярные соединения (хлорофилл, каротиноиды, эфирное масло, смолы, жиры, стерины и другие липофильные вещества) с помощью хлороформа. Для количественного определения флавоноидов использовали метод, основанный на реакции комплексообразования флавоноидов с раствором хлорида алюминия. Для дальнейших исследований использовали комплекс флавоноидов (КФ) из трех видов растений путем объединения полученных экстрактов в соотношении 1:1:1 по объему (в стадии патентования).
Работа по исследованию адаптогенного действия полученного комплекса флавоноидов сои, люцерны и клевера выполнялась на крысах-самках Wistar в возрасте 3,5 месяцев средней массой 220-240 г. на базе вивария Института биоорганической химии НАН Беларуси.
Животные содержались в контролируемых условиях окружающей среды (18-22 °C и относительной влажности воздуха 50-70 %). Световой режим составлял 12 часов света и 12 часов темноты. Устанавливался режим проветривания, обеспечивающий около 15 объемов помещения в час.
Общее количество животных составляло 36 особей. Исследуемый КФ вводили однократно внутрижелудочно (в/ж) в объеме 1 мл/250 г массы тела в течение 15 дней. Дозы выбраны на основании литературных данных: 1,0 мг/кг и 2,0 мг/кг.
В исследование были включены группы:
Вариант 1 - контрольные (интактные) животные (n=8).
Вариант 2 - контрольные животные (в/ж введение дистиллированной воды) (n=8).
Вариант 3 - экспериментальные животные (в/ж введение КФ в дозе 1,0 мг/кг) (n=10).
Вариант 4 - экспериментальные животные (в/ж введение КФ в дозе 2,0 мг/кг). (n=10).
Проводился мониторинг массы тела животных на 1, 3, 7, 15 сутки эксперимента.
Поведенческие показатели оценивались в тестах: «Экстраполяционное избегание» и «Открытое поле», работоспособность изучалась с применением теста Parsolt (плавание до отказа с отягощением).
Тест «Экстраполяционное избегание» (ТЭИ) используется в качестве одного из методов оценки новых лекарственных препаратов. Он рассматривается как действие, направленное на поиск способов выбраться из аверсивной ситуации неочевидным с точки зрения пространственного расположения объектов, составляющих стимульную ситуацию. В использованном варианте методики животное должно было поднырнуть под
край опущенного в воду цилиндра вместо того, чтобы пытаться подняться по нему вверх. Применение указанной методики позволяет осуществлять поиск фармакологических средств, повышающих способность к решению новых задач при первом их предъявлении (в отсутствие предварительного обучения и соответствующей наследственной программы, на основе активного овладения закономерностями окружающей среды). Тест помогает оценить влияние препаратов на когнитивные функции лабораторных животных [26]. Методика является чувствительной к фармакологическим, генетическим и токсическим факторам [27].
Экспериментальная установка состоит из внутреннего цилиндра и металлического бака с закрепленной на стенке лестницей. Перед началом эксперимента бак заполняется водой при температуре 25 °С. Цилиндр погружается в воду в середине бака на 2 см. Крысу помещают в цилиндр и наблюдают за ее поведением в течение 2 мин, регистрируя количество попыток подняться по стенкам цилиндра, латентное время до подныривания под край цилиндра и время плавания до обнаружения лестницы и выхода на ее верхнюю часть всеми 4 лапками.
Тест «Экстраполяционное избегание» проводится через 40 минут после введения плацебо или исследуемого экстракта сои, люцерны и клевера в исследуемом диапазоне доз.
Тест «Открытое поле» (ОП) является самым распространенным при изучении поведенческих реакций и заключается в исследовании двигательного компонента, локомоторной стереотипии, поисково-ориентировочных действий и эмоциональной реактивности животных в новых условиях [28]. Установка для проведения теста «Открытое поле» представляет собой белую камеру (1,0 м х 1,0 м) с высокими бортами. Пол установки расчерчен черными линиями на равные сектора (25 штук), предназначенные для визуальной регистрации горизонтальной двигательной активности экспериментальных животных. В местах пересечения секторов в полу имеются отверстия (16 штук), предназначенные для регистрации исследовательской активности. После высаживания животного в центр камеры в течение 3 минут производится регистрация показателей: латентное время выхода из центра, количество пересеченных квадратов (всеми 4 лапками), количество вертикальных стоек, количество актов груминга, количество мочеиспусканий и количество болюсов при дефекации. Тест «Открытое поле» проводится через 40 минут после введения плацебо или исследуемого экстракта сои, люцерны и клевера в диапазоне доз.
Тест по Ра^о11. Для определения психостимулирующей активности и работоспособности использовался плавательный тест по Ра^о11 [29, 30]. Метод применяется в модификации - тесте предельного плавания. Критерием является гибель животного (пребывание на дне бассейна без плавательных движений 1 минуту, появление пузырьков вытесняемого из легких воздуха). Исследование проводилось в стандартных условиях (утренние часы, обычный уровень освещения), в бассейне с температурой воды (28±2)° С. Тест предельного плавания проводили на крысах с нагрузкой 10 % от массы тела в виде набора металлических колец, которые прикрепляли к хвосту животного с помощью эластичного резинового кольца.
Животных рандомизировали по группам по исходным значениям выносливости, а также адаптировали к условиям эксперимента, что позволило создать выборки данных в корректных условиях и устранить возможное
влияние индивидуальных особенностей отдельных животных на результаты эксперимента.
Исследования выполнялись в соответствии с общепринятыми этическими нормами обращения с экспериментальными животными, на основе стандартных операционных процедур, принятых в Институте биоорганической химии НАН Беларуси, которые соответствуют правилам, принятым Европейской Конвенцией по защите позвоночных животных [31].
Статистическую обработку проводили с использованием: пакета анализа данных Excel. Достоверность оценивали по критерию t-Стьюдента с учетом дисперсии (F-тест), параметрического статистического метода при помощи программы Statistica 6,0. Критический уровень статистической значимости при проверке статистических гипотез принимали равным 0,05. Данные представляли в виде X±Sx.
Результаты исследования и их обсуждение
Внешний вид животных экспериментальных групп не отличался от контрольных. Все животные нормального телосложения, удовлетворительной упитанности. Как следует из данных, представленных в таблице 1, самки опытных и контрольных групп в начале эксперимента достоверно не отличались между собой по исходной массе тела. На 3, 7 и 15-е сутки эксперимента у животных 3 и 4 экспериментальных групп, получавших экстракты клевера, сои, люцерны, не наблюдалось уменьшение или увеличение массы тела по сравнению с контрольными животными (варианты 1 и 2).
Таблица 1 - Влияние комплекса флавоноидов клевера, люцерны и сои на массу
тела крыс-самок Wisl :ar
Группа животных Масса тела, г, (Х + Бх), n
0 сутки 1 сутки 3 сутки 7 сутки 15 сутки
Вариант 1 Контроль (интактные животные) n = 8 233,75±2,63 233,13±2,82 235,00±2,31 240,63±3,05 246,25±5,15
Вариант 2 Контроль (дистил. вода) n = 8 234,38±2,90 236,25±2,95 240,63±1,75 249,38±2,90 252,50±3,41
Вариант 3 КФ (1 мг/кг), n = 10 234,50±3,37 234,50±3,76 236,50±4,48 241,50±3,58 249,00±4,00
Вариант 4 КФ (2 мг/кг), n = 10 234,50±2,63 235,50±2,63 238,00±2,71 244,00±2,87 246,00±4,14
Наблюдение за изменением массы лабораторных животных в ходе эксперимента показало, что масса тела у животных всех групп увеличилась к 15-му дню исследования, что объясняется свободным доступом к пище.
Исследование адаптивного поведения крыс в тесте экстраполяционного избавления.
Исследование адаптивного поведения крыс в условиях введения комплекса флавоноидов сои, люцерны и клевера в дозах 1,0 мг/кг и 2,0 мг/кг крысам Wistar проводили в тесте «экстраполяционного избавления». Исходные показатели теста «ТЭИ» приведены таблице 2.
Таблица 2 - Влияние комплекса флавоноидов сои, люцерны и клевера на показатели в тесте «Экстраполяционное избавление» у крыс-самок ^ _
Группа животных Время начала попыток избавления, сек. Число безуспешных попыток, (N) ЛПподн? с ЛПвых? с
Вариант 1 Контроль (интактный), п = 8 1,75±0,36 3,25±0,56 19,25±4,35 36,38±5,27
Вариант 2 Контроль (вода), п = 8 1,00±0,00* 3,71±0,81 16,57±5,83 33,14±6,98
Вариант 3 КФ (1,0 мг/кг), п = 10 1,00±0,00 3,70±0,75 15,30±4,67 33,30±4,27
Вариант 4 КФ (2,0 мг/кг), п = 10 1,10±0,10 4,20±0,53 17,90±3,14 37,78±4,19
Примечание: * P < 0,05 по отношению к контрольной группе (вариант 1).
Назначение КФ клевера, люцерны и сои в дозировках 1,0 мг/кг и 2 мг/кг животным групп № 3 и №4 в тех же условиях не вызывало статистически значимого улучшения в осуществлении адаптивной реакции по всем исследованным показателям.
Таким образом, изучаемая фармацевтическая композиция (экстракт сои, люцерны и клевера) не изменила адаптивное поведение крыс в тесте экстраполяционного избавления.
Влияние фармацевтической композиции на основе экстрактов сои, люцерны и клевера крыс на поведение крыс в тесте «открытое поле».
Поведенческая адаптация служит одним из важных механизмов предохранения организма от действия различных неблагоприятных факторов [32]. Системная реакция на стресс, направленная на устранение или ослабление стресса, сопровождается изменениями поведенческих, вегетативных, двигательных, сенсорных, когнитивных и других функций организма [33].
Тест «открытое поле» позволяет выявлять значительные нарушения в нервно-мышечной, сенсорной и вегетативной системах организма и оценивать функциональные изменения, связанные с индивидуальным и социальным поведением животных [34]. Тест позволяет в новых условиях оценить ориентировочно-исследовательские и защитно-оборонительные поведенческие реакции. Результаты исследования в тесте «открытое поле» приведены в таблице 3.
Показатель «выход в центр» по методике «открытое поле» является одной из характеристик ориентировочно-исследовательского поведения. Попав в незнакомую обстановку, животное испытывает страх: при этом оно старается находиться и передвигаться вдоль стенки или сидит на периферии площадки. После оценки безопасности обстановки крыса может выйти к центральным секторам.
Таблица 3 - Влияние комплекса флавоноидов сои, люцерны и клевера на показатели в тесте «Открытое поле» у крыс-самок Wistar___
Опытный вариант ЛВЦ, сек. Горизонтальная активность Вертикальная активность Груминг, сек Количество заглядываний в отверстия Количество мочеиспусканий Болюсы, шт
Вариант 1 Контроль (интактный), п = 8 3,13±0,69 27,33±1,23 13,00±2,87 2,50±0,67 2,50±0,50 1,25±0,25 1,33±0,33
Вариант 2 Контроль, п = 8 4,88±0,48 24,25±1,35 10,00±2,37 2,83±0,48 2,17±0,60 1,33±0,21 1,75±0,25
Вариант 3 КФ (1 мг/кг), п = 10 4,44±0,94 24,89±2,19 9,89±1,22 1,78±0,32 2,75±0,70 1,50±0,34 1,60±0,24
Вариант 4 КФ (2, мг/кг), п = 8 3,70±0,30а 21,40±0,85* 7,80±1,23* 2,43±0,61 2,13±0,35 1,13±0,13 1,40±0,24
Примечание: а Р < 0,05 по отношению к контрольной группе (вариант 2);
* Р < 0,05 по отношению к контрольной группе (вариант 1).
По мнению О.Ю. Майорова [35], латентный период выхода в центр является показателем, характеризующим скорость адаптации к новой обстановке. Введение КФ в дозе 1 мг/кг не изменило величины характеристики поведения. Увеличение дозы КФ до 2 мг/кг усилило ориентировочно-исследовательское поведение крыс и соответственно привело к сокращению времени выхода животных в центральные квадраты, время выхода в центральные квадраты сократилось на 25 %.
Горизонтальная и вертикальная двигательная активность и исследовательское поведение могут быть показателем общей возбудимости. У животных, которым вводили исследуемый КФ в дозе 2 мг/кг, наблюдалось достоверное отличие от интактных животных по снижению горизонтальной и вертикальной двигательной активности. Введение КФ клевера, люцерны и сои как в дозе 1 мг/кг, так и в дозе 2 мг/кг не способствовало достоверному изменению горизонтальной и вертикальной двигательной активности крыс в тесте «открытое поле» по сравнению с контролем (растворитель).
Для более полной характеристики ответной реакции крыс на стрессовые условия использовали показатель груминга, который является особенно важной частью поведения грызунов. В условиях стресса активность груминга возрастает, но купируется при введении анксиолитиков, что позволяет рассматривать груминг как маркер тревожного состояния животного. В нашем исследовании изменения продолжительности груминга во всех подопытных группах не имели различия в сравнении с показателями контрольной группы.
Известно, что важным компонентом поведенческой реакции, отражающим эмоциональность, является изменение количества фекальных болюсов и мочеиспусканий. Применение КФ как в дозе 1 мг/кг, так и в дозе
2 мг/кг привело к уменьшению количества фекальных болюсов. Однако данные изменения не имели статистически значимых различий с показателями контрольной группы (вариант 2). Не было установлено достоверных различий с контрольной группой по уровню эмоциональности, которую оценивали по реакциям мочеиспусканий. На основании полученных данных в тесте «открытое поле» можно сделать вывод о том, что введение КФ клевера, люцерны и сои оказывает адаптационно-стимулирующее влияние на поведение крыс, что выражается в сокращении времени выхода животных в центр поля.
Нами проведены исследования по оценке влияния КФ клевера, люцерны и сои на работоспособность экспериментальных животных в тесте вынужденного плавания, в тесте предельного плавания (нагрузка 10 % от массы тела). Результаты исследования представлены на рисунке 2.
Контроль (интэктные Контроль Экстракт 1,0 мг/кг экстракт 2,0 мг/кг
животные)
* Р < 0,01 по отношению к контрольным группам
Рисунок 2 - Длительность плавания крыс с грузом 10 % от веса тела после введения КФ клевера, люцерны и сои в течение 15 дней
В соответствии с данными рисунка 2, в контрольных группах и опытных группах крысы плавали с одинаковой интенсивностью. Анализ полученных данных свидетельствует о повышении продолжительности плавания крыс вариантов № 3 и № 4, которым внутрижелудочно вводили КФ клевера, люцерны и сои в дозах 1,0 мг/кг и 2,0 мг/кг.
Работоспособность крыс опытной группы 3, получавших исследуемую фармацевтическую композицию в дозе 1,0 мг/кг, составила 400,50+22,55 с, статистически достоверно (Р > 0,01) увеличилась на 40 % относительно исходного значения контрольной группы 2. При увеличении дозировки фармацевтической композиции в 2 раза (2 мг/кг), продолжительность плавания крыс увеличилась на 47 %.
Таким образом, на модели физиологической нагрузки были продемонстрированы свойства КФ клевера, люцерны и сои увеличивать физическую выносливость и работоспособность экспериментальных животных.
Заключение
Получен КФ клевера, люцерны и сои, который характеризуется адаптогенным действием и способствует у лабораторных животных в экспериментах in vivo уменьшению до 25 % времени латентного периода, предшествующего адаптации к стрессовым условиям, а также повышает физическую работоспособность и выносливость до 47 %.
Выявленные адаптогенные свойства КФ клевера, люцерны и сои аргументируют целесообразность проведения дальнейших углубленных исследований возможных механизмов адаптогенного действия КФ клевера, люцерны и сои для разработки на этой основе специализированного продукта для спортсменов.
Работа выполнена при финаншвой поддержке международного бел^ору^^к^о-^ерб^к^ого проекта Го^удар^^вен^н^о^о комитета по науке и технологиям Режублики Беларуж и Бел^ору^^к^ого ре^п^убликан^^к^ого фонда фундаментальных ж^едований № Б22СРБГ-011.
Спиык жпользованных ucточников
1. Гаврилова, E. Биологически активные добавки в системе фармакологической поддержки тренировочного процесса хоккеистов высокой квалификации / E. Гаврилова, Л. Гунина // Наука в олимпийском спорте. -2014. - № 3. - С. S2-61.
2. Ростовцев, В. Л. Применение комплекса адаптогенов для повышения адаптации к физическим нагрузкам в лыжных гонках / В. Л. Ростовцев, Л. В. Сафонов / / Ученые записки университета имени П. Ф. Лесгафта. - 2013. -№ 8 (102). - С. 146-1S2.
3. Некраса, И. А. Адаптогены: современные реалии и перспективы поиска новых эффективных и безопасных лекарственных средств (обзор литературы и собственных исследований) / E. Ю. Бибик, К. А. Фролов, В. В. Доценко, С. Г. Кривоколыско // Вестник Северо-Западного государственного медицинского университета им. И.И. Мечникова. - 2020. -Т. 12, № 2. - С. 17-26.
4. Кохан, С. Т. Влияние растительных адаптогенов на общую физическую выносливость и энергетический обмен в эксперименте / С. Т. Кохан, А. В. Патеюк // Научные ведомости. Сер. Медицина. Фармация. - 201S. -№ 16 (213). - Вып. 31. - С. 127-131.
5. Nutritional ergogenic aids I ed. by I. Wolinsky, J. A. Driskell. - Boca Raton, London; N.-Y.; Washington : CRC Press, 2004. - S36 p.
6. Брехман, И. И. Адаптогены растительного происхождения -фармакологические средства повышения работоспособности и сопротивляемости организма / И. И. Брехман. - Минск , 1996. - С. 40 -41.
7. Адаптогены и родственные группы лекарственных препаратов -S0 лет поисков / E. П. Студенцов [и др.] // Обзоры по клинической фармакологии и лекарственной терапии. - 2013. - Т.11. - № 4. - С. 3-43.
В. A preliminary review of studies on adaptogens: comparison of their bioactivity in TCM with that of ginseng-like herbs used worldwide I Lian-ying Liao [et al.] II Chin Med. - 201В. - Р. 3-1S.
9. Кривошеева E. М. Спектр фармакологической активности растительных адаптогенов / E. М. Кривошеева, E. В. Фефелова, С. Т. Кохан // Фундаментальные исследования. - 2011. - № 6. - С. 85-88.
10. Wagner, H. Plant adaptogens I H. Wagner, H. Nörr, H. Winterhoff II Phytomedicine. - 1994. - Vol. 1. - Р. 63-76.
11. Барабой, В. А. Изофлавоны сои: биологическая активность и применение / В. А. Барабой // Бютехнолоия. - 2009. - Т. 2. - № 3. - С. 44-54.
12. Тарумов, Р. А. Биологические свойства фитоэстрогена генистеина / Р. А. Тарумов // Медицина экстремальных ситуаций. - 2014. - № 2. - С. 55-68.
13. Кузнецова, И. В. Эффективность и безопасность генистеина в лечении вазомоторных симптомов у женщин в постменопаузе / И. В. Кузнецова // Гинекология. - 2013. - Т. 15, № 3. - С. 4-9.
14. Безопасность применения лекарственных растительных препаратов: лекарственные растения с гормональной активностью / Е. В. Ших [и др.] // Ведомости НЦЭСМП. - 2013. - № 3. - С. 49-52.
15. Red clover (Trifolium pratense L.) isoflavones: root phenolic compounds affected by biotic and abiotic stress factors / Niina Mm Saviranta [et al.] // J Sci Food Agric. - 2010. - Vol. 90, № 3. - Р. 418-423.
16. Soy isoflavones, body composition, and physical performance / L. Kok [et al.] // Maturitas. - 2005. - Vol. 52. - № 2. - Р. 102-110.
17. Еремеева, Н. Б. Исследование потенциальных антиканцерогенных и антиоксидантных эффектов экстрактов из растительного сырья / Н. Б. Еремеева // Известия вузов. Прикладная химия и биотехнология. -2020. - Т. 10. - № 4. - С. 613-626.
18. Изучение флавоноидного состава сырья травы люцерны хмелевидной / Т. В. Простодушева [и др.] // Фармация. - 1998. - Т. 47. - № 3. -С. 30-31.
19. Дикке, Г. Б. Фитоэстрогены экстракта красного клевера: механизм действия и клиническая эффективность / Г. Б. Дикке // Consilium Medicum. -2020. - № 22. - Р. 19-24.
20. Goodman-Gruen, D. Usual dietary isoflavone intake and body composition in postmenopausal women / D. Goodman-Gruen, D. Kritz-Silverstein // Menopause. - 2003. - № 10. - Р. 427-432.
21. Chen, M-N. Efficacy of phytoestrogens for menopausal symptoms: a meta-analysis and systematic review / M-N. Chen, C-C. Lin, C-F. Liu // Climacteric. - 2015. - № 18. - Р. 260-269.
22. Isoflavones decrease insomnia in postmenopause / H. Hachul [et al.] // Menopause. - 2011. - № 18. - Р. 178-184.
23. Identification and Characterization of Regulatory Pathways Controlling Dormancy Under Lower Temperature in Alfalfa (Medicago sativa L.) / J. Liu [et al.] // Front Plant Sci. 2022.
24. Phytochemical analysis of plant materials containing flavonoids. Methodological manual on pharmacognosy for students of the Faculty of Pharmacy / G.M. Fedoseeva, V.M. Mirovich, E.G. Goryachkina, M.V. Perelomova. - Irkutsk : State Educational Institution of Higher Professional Education Irkutsk State Medical University of the Ministry of Social Development of the Russian Federation, 2009. - P.19-20 (in Russ).
25. Shah, M. D. Total flavonoids content and biochemical screening of the leaves of tropical endemic medicinal plant Merremia borneensis / M. D. Shah, M. A.Hossain // Arab. J. Chem. - 2014. - N 7. - P. 1034-1038.
26. Bondarenko, N. A. Anxiety and the Problem of «Inattentive» Animals in Water Maze Tests / N. A. Bondarenko // Russian Journal of Cognitive Science. -2017. - Vol. 4. - № 4. - Р. 45-51.
27. Калуев, А. В. Изучение тревожности у животных - вчера, сегодня, завтра / А. В. Калуев / / Стресс и поведение : материалы 7-й междисциплинарной конф. по биологической психиатрии. - Минск, 2003. - С. 145-148.
28. Буреш, Я. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения / Я. Буреш, О. Бурешова, Д.П. Хьюстон. - М. : Высшая школа. -С. 119-122.
29. Радько, С. В. Модель силовых нагрузок у мышей / С. В. Радько, М. В. Краснова, С. В. Оковитый // Биомедицина. - 2017. - № 1. - С. 24-27.
30. Фармакологическая коррекция утомления / Ю. Г. Бобков [и др.]. -М. : Медицина, 1984. - 208 с.
31. European Convention for the Protection of Vertebrate Animais Used for Expérimental and other Scientific Purposes (ETS 123). - Strasbourg, 1986.
32. Пшенникова, М. Г. Феномен стресса. Эмоциональный стресс и его роль в патологии / М. Г. Пшенникова // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 2000. - № 2. - С. 24-31.
33. Судаков К. В. Системные основы эмоционального стресса / К. В. Судаков, П. Е. Умрюхин. - М. : ГЭОТАР - Медиа, 2010. - 112 с.
34. Амикшеева А. В. Поведенческое фенотипирование: современные методы и оборудование/ А. В. Амикшеева // Вестн. ВОГиС. - 2009. - Т. 13. -№ 3. - С. 529-541.
35. Майоров, О. Ю. Оценка индивидуально-типологических особенностей поведения и устойчивости интактных белых крыс самцов на основе факторной модели нормального этологического спектра показателей в тесте «открытое поле» / О. Ю. Майоров / / Клиническая информатика и телемедицина. - 2011. -Т. 7. - № 8. - С. 21-32.
03.05.2024
