CC BY
20
УДК 615.28 [616.155.34-092.4:537.81
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПЕРОРАЛЬНОГО ПРИМЕНЕНИЯ ТОМИЦИДА ДЛЯ КОРРЕКЦИИ НАРУШЕНИЙ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛОВ У КРЫС С ИНФИЦИРОВАННОЙ РАНОЙ, РАЗВИВАВШИХСЯ В УСЛОВИЯХ ВОЗДЕЙСТВИЯ ИСКУССТВЕННОГО ПОСТОЯННОГО МАГНИТНОГО ПОЛЯ
© Разинькова Н. С., Лазарев А.И., Калуцкий П.В., Беседин А.В.
Кафедра детских болезней, кафедра микробиологии Курского государственного медицинского университета
Пероральное использование томицида в терапии инфицированной раны оказывает положительное действие на функциональную активность нейтрофилов периферической крови. Стимуляция активности фагоцитирующих клеток в условиях воздействия искусственного магнитного поля приводит к ускорению репа-ративных процессов и элиминации патогенной микробной флоры, что сопровождается нормализацией большей части показателей функциональной активности нейтрофилов.
Ключевые слова: функциональная активность нейтрофилов, раневая инфекция, магнитное поле, томи-цид.
THE EFFICIENCY OF TOMICID ORAL USE FOR CORRECTING DISTURBANCES OF THE NEUTROPHIL FUNCTIONAL ACTIVITY IN RATS WITH THE INFECTED WOUND HAVING DEVELOPED IN TERMS OF AN ARTIFICIAL CONSTANT MAGNETIC FIELD IMPACT
Razinkova N.S., Lazarev A.I., Kalutsky P. V., Besedin A. V.
Pediatric Department, Microbiology Department of the Kursk State Medical University The oral use of Tomicid in therapy of an infected wound renders the positive effect on the functional activity of peripheral blood neutrophils. The stimulations of phagocytizing cells in terms of artificial magnetic field impact results in accelerating the reparative processes and eliminating the pathogenic microbial flora, that is accompanied by normalizing the most part of neutrophil functional activity indices.
Key words: neutrophil functional activity, wound infection, magnetic field, Tomicid.
С развитием научно-технического прогресса всё более широким становится применение магнитных установок и приборов в повседневной жизни человека. Исследования, посвящённые изучению возможных последствий действия электромагнитных полей на репродуктивные процессы и постнатальный период у человека, стали появляться начиная с конца 50-х гг. В большинстве из них рассматривались лишь узкопрофессиональные аспекты проблемы, связанные с влиянием электромагнитного поля радио- и микроволнового диапазонов на здоровье лиц, занятых в радиовещательной и радиопередающей службах, обслуживающего персонала радиолокационных станций и физиотерапевтов [10, 12, 13, 14]. По мере расширения и уточнения результатов подобного рода исследований были опубликованы первые свидетельства нарушения здоровья женщин, подвергающихся воздействию электромагнитного поля
в повседневном быту [11]. Это привлекло внимание к проблеме возможного влияния электромагнитных полей на репродуктивную функцию и постнатальный период развития человека, в связи с чем количество исследований по данной теме со временем стало возрастать. В опубликованных к настоящему времени работах в основном содержатся данные о влиянии искусственно созданных магнитных полей техногенного происхождения. Данные о влиянии слабых магнитных полей разноречивы. До настоящего времени малоизученным остается вопрос о воздействии аномальных геомагнитных полей, возникающих в регионах с крупными подземными залежами железосодержащих руд. Одним из таких районов является Курская магнитная аномалия (КМА), где значения магнитного поля превышают фоновые в других регионах в 4-5 раз. С точки зрения медицины и магни-тобиологии в настоящее время уже не вызы-
вает сомнений тот факт, что магнитные поля естественного происхождения (естественный электромагнитный фон Земли) следует рассматривать как один из важнейших экологических факторов. Наличие естественных магнитных полей в окружающей среде является совершенно необходимым для нормальной жизнедеятельности, а их напряжение или дефицит - приводит к серьезным негативным, порой даже необратимым последствиям для живого организма.
Наиболее восприимчивым к действию аномальных абиотических факторов в силу физиологической незрелости адаптационных систем является растущий организм. Большинство исследователей уделяют особое внимание проблеме возможного влияния электромагнитного поля на течение и исходы беременности, не оценивая при этом изменения, которым подвергается организм ребёнка в особых условиях электромагнитного фона. Этот вопрос особенно актуален в последнее десятилетие, т.к. происходит нивелирование влияния естественного электромагнитного поля за счёт воздействия полихроматического излучения различной частоты и интенсивности. Необходимо учитывать то обстоятельство, что ввиду незрелости иммунной системы детей в препубертатном и пубертатном периодах основную роль в защите от неблагоприятных воздействий внешней среды осуществляет фагоцитарное звено иммунной системы. Если по причине каких-либо влияний наблюдаются нарушения функциональной активности нейтрофильного звена иммунитета, то можно ожидать неблагоприятного развития патологического процесса у детей. Поэтому разработка методов фармакологической коррекции нарушений активности ней-трофилов при воздействии различных факторов абиотической и биотической природы является актуальной.
Целью нашего исследования явилось изучение эффективности использования препарата томицид для коррекции нарушений ней-трофильного звена иммунитета при развитии инфицированной раны у крыс, подвергавшихся с рождения влиянию аномальных магнитных полей.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Для достижения поставленной цели двум группам крыс линии Вистар в возрасте 8
недель, которые с момента рождения постоянно находились в условиях воздействия искусственного постоянного магнитного поля с индукцией 3 х 10-4 Тл, имитировавшего геомагнитное поле КМА, в области холки наносились кожные раны площадью 1 см2. Инфекцию кожной раны воспроизводили путем нанесения на раневую поверхность раны смеси взвесей суточных агаровых культур Staphylococcus aureus № 606 и Escherichia coli № 195.
Томицид вводили животным
внутрижелудочно с помощью зонда в объёме 0,5 мл на крысу ежедневно в одно и то же время начиная с 3 суток после создания раны. Контрольной группой служили крысы, находившиеся в аналогичных по характеристикам магнитного поля условиях, но не получавшие какого-либо лечения.
Спустя 3, 5, 10 и 15 суток после нанесения раны у всех животных производили изучение показателей функциональной активности нейтрофилов и морфологические
исследования тканей раны. На этих же сроках проводилось изучение обсеменённости раны. Фагоцитарный процесс изучали в соответствии с общепринятой методикой [8] с расчетом относительного содержания активных фагоцитов (фагоцитарный индекс) и количества фагоцитированных микроорганизмов в пересчете на 1 фагоцит (фагоцитарное число). Завершенность фагоцитоза оценивалась по методике З.Е. Матусис и С.И. Пылаевой [1] в модификации кафедры микробиологии КГМУ. Оценку резервной функции кислородзависимых бактерицидных систем фагоцитов проводили по реакции восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест) [7]. Активность кислороднеза-висимых бактерицидных систем фагоцитов изучали путем учета лизосомальных катионных белков в цитоплазме лейкоцитов
[3, 9].
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Морфологическое исследование раны у животных, развивавшихся в условиях воздействие искусственного магнитного поля, вы-
явило, что до 5-10 суток наблюдались гнойные выделения. К 12-13 суткам рана постепенно очищалась от этих выделений, её дно покрывалось грануляционной тканью, а по краям начинал интенсивно нарастать эпителий. В итоге к 15-м суткам рана уменьшалась в размерах, края и дно её начинали покрываться грануляционной тканью.
Значения фагоцитарного индекса у этих животных снижались на протяжении всего времени эксперимента (рис. 1). Компенсаторно к 3-м суткам наблюдалось увеличение фагоцитарного числа, которое оставалось на этом уровне до конца опыта. Необходимо отметить, что создание раны не оказало к 3-м суткам никакого влияния на показатели спонтанного НСТ-теста, но вызвало увеличение значений стимулированного зимозаном НСТ-теста. Однако в дальнейшем они снизились до 32,2+4,2. Такая динамика изменений спонтанного и стимулированного вариантов НСТ-теста привела к тому, что функциональный резерв нейтрофилов после роста практически в 2 раза на 3-и сутки раневого процесса, к концу эксперимента снизился. Активность же кислороднезависимых бактерицидных систем нейтрофилов на протяжении практически всего опыта не претерпевала изменений, за исключением 3-х и 15-х суток наблюдения.
ФИ, %
На этих сроках активность лизосомальных катионных белков была ниже остальных значений. Что же касается завершённости фагоцитоза, то она, начиная с 5-х суток, постепенно нарастала.
Касаясь характеристики эффективности перорального использования томицида, прежде всего, необходимо отметить, что по сравнению с контрольной группой при таком способе применения препарата отмечалось ускорение заживления раны, характеризовавшееся выраженным уменьшением размеров дефекта и более быстрым появлением грануляций (на 10-е сутки). Параллельно с развитием репаративных процессов отмечалось и очищение раны от возбудителей уже к 10 дню.
Терапия томицидом привела к более высоким на протяжении всего периода эксперимента по сравнению с контролем значениям фагоцитарного индекса и фагоцитарного числа. Хотя к 15-м суткам и было отмечено некоторое снижение функционального резерва нейтрофилов, однако его значения по-прежнему превышали контрольные. Также выше контрольных был к концу срока наблюдения и уровень лизосомальных катион-ных белков.
Сопоставляя данные, полученные в срав-
ФРН,%
ЗФ,%
ф — исходное
- - 3 суток
-А— — 5 суток
— 10 суток
- - 15 суток
Рис. 1. Функциональная активность нейтрофилов крыс, находившихся в искусственном магнитном поле, до и после моделирования раны.
ФИ, %
ФРН,%
ЗФ,%
♦ исходные ■■ - ■ 3 суток без лечения -А— 15 суток без лечения -X— 15 суток терапия томицидом
НСТ-ст
НСТ-сп
Рис. 2. Функциональная активность нейтрофилов леченых томицидом и нелеченых крыс, находившихся в искусственном магнитном поле, до и после моделирования раны.
ниваемых группах на 3 и 15 сутки (рис. 2), можно отметить, что применение препарата привело к повышению показателей фагоцитарного индекса, фагоцитарного числа, уровня лизосомальных катионных белков и функционального резерва нейтрофилов при недостоверных различиях по НСТ-тесту.
Таким образом, высокая восприимчивость растущего организма к различным факторам антропогенного и неантропогенного происхождения позволяет предполагать, что длительное воздействие такого значимого фактора окружающей среды, как аномальное геомагнитное поле, может привести к изменениям реактивности систем, обеспечивающих поддержание гомеостаза. Это предположение получило подтверждение в проведённых нами исследованиях [4, 5, 6], показавших, что под влиянием аномальных магнитных полей фагоцитарная система организма животных приходит в состояние напряжения. Развитие на этом фоне какого-либо патологического процесса может вызвать срыв адаптационных систем и привести к менее благоприятному течению заболевания. Приведённые в работе данные свидетельствуют о развивающемся в организме крыс дисбалансе функциональной
активности нейтрофильного звена иммунитета при формировании инфицированной раны на фоне воздействия искусственного магнитного поля. Для иммунофармакологической коррекции выявленных нарушений нами был использован препарат томицид, который представляет собой продукт метаболизма En-terococcus sp. ТОМ-1606 и обладает выраженным ранозаживляющим действием при его местном применении. Однако в последнее время в литературе появились сведения о том, что при пероральном применении препарата отмечается его иммуностимулирующая активность, в первую очередь на систему фагоцитов [2]. Поэтому мы попытались использовать его per os для коррекции выявленных нарушений функциональной активности крыс с инфицированной раной, с рождения находившихся в искусственном магнитном поле.
Полученные результаты свидетельствуют, что пероральное использование томицида в терапии инфицированной раны оказывает положительное действие на функциональную активность нейтрофилов периферической крови. Что особенно важно - в эксперименте удалось добиться стимуляции активности фа-
гоцитирующих клеток в условиях воздействия искусственным магнитным полем. Это привело к ускорению репаративных процессов и элиминации патогенной микробной флоры, что сопровождалась нормализацией части показателей функциональной активности нейтрофилов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Матусис З.Е. К методике определения индекса завершенности фагоцитоза / З.Е. Матусис, С.И. Пылаева // Лаб. дело. - 1972. - № 4. - С. 237-240.
2. Оценка эффективности энтерального применения томицида при экспериментальной инфекции / Блинкова Л.П., Бутова Л.Г., Сергеев В.В. и др. // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2003. -№ 1. - С. 74-77.
3. Пигаревский В.Е. Лизосомально-катионный тест: Метод. рекомендации / НИИЭМ АМН СССР. - М., 1979. - 57 с.
4. Разинькова Н.С., Калуцкий П.В., Конопля А.И. Состояние показателей неспецифической резистентности организма животных в условиях воздействия естественного геомагнитного поля Курской магнитной аномалии // Сборник работ 69-й итоговой научной сессии КГМУ и отделения медико-биологических наук Центрально-Черноземного научного центра РАМН. - Курск, 2004. - Ч. 1. - С. 106-107.
5. Разинькова Н.С., Беседин А.В., Калуцкий П.В. Влияние постоянного магнитного поля на развитие новорожденных крыс // Университетская наука: взгляд в будущее. Сборник трудов юбилейной научной конференции КГМУ и сессии Центрально-Черноземного научного центра РАМН, посвященный 70-
летию КГМУ. В 2-х томах. - Курск: КГМУ, 2005. - Т. 1. - С. 67-68.
6. Разинькова Н.С., Калуцкий П.В., Беседин А.В. Влияние магнитного поля на фагоцитарную активность новорожденных крыс // Успехи современного естествознания. - 2005. - № 5. -С. 89-90.
7. Способ оценки функциональной активности нейтрофилов человека по реакции восстановления нитросинего тетразолия. - Метод. рек. / Сост. М.Е. Виксман, А.Н. Маянский. - Казань, 1979. - 14 с.
8. Теплова С.Н. Оценка факторов неспецифической защиты организма от инфекции в клинической практике (Метод. рек.) / С.Н. Теплова. - Челябинск, 1978. - 57 с.
9. Шубич М.Г. Выявление катионных белков в цитоплазме лейкоцитов с помощью бромфе-нолового синего / М.Г. Шубич // Цитология. -
1974. - Т. 16, № 10. - С. 13-21.
10. Barron C.I., Baraff A.A. Medical considerations of exposure to microwaves(radar) // JAMA. -1958. - Vol. 168. - P. 1194 - 1199.
11. Eckert E.E. Sudden unexpected death of infants and electromagnetic fields // German. Med. Clin. - 1976. - Vol. 71. - P. 1500 - 1505.
12. Gonadic function in workmen with long-term exposure to microwaves / I.Lancranjan, M. Mai-canescu, E. Rafaila et al. // Health Physics. -
1975. - Vol. 29. - P. 381 - 383.
13. Screening for occupational exposures and congenital malformations: preliminary results from a nationwide case-referent study / K. Kurppa, P.C. Holmberg, S. Herhberg et al. // Scand. J. Work. Environ. Health. - 1983. - Vol. 9. -P. 89 - 93.
14. Wilson J., Frazer F.C. Handbook on Teratology. Vol. 1: General principle and ethiology - N.Y.: Plenum Press, 1977.
