CC BY
52
на XII международном съезде врачей в Москве о широком и успешном применении препаратов серебра в гнойной хирургии и при лечении септических болезней. Им совместно с химиками были предложены препараты серебра в неиононизированном состоянии. Это были препараты колларгол и золь окиси серебра - проторгол, которые используются в настоящее время в определенных модификациях.
В течении длительного времени серебро было использовано при внутривенном, наружном применении при многих болезнях и внутривенном при лечении гастритов и т.д.
Однако с открытием и широким применением антибиотиков и интерес к препаратам серебра снизился. Появление антибиотиков устойчивых микроорганизмов к аллергическим и токсическим реакциям вновь возник повышенный интерес к серебру. При этом было выявлено его действие в организме как микроэлемента, необходимого для нормального функционирования органов и систем обладающих имунно-коррелирующими, антибактериальных и противовирусных свойствами.
Особый научный интерес и всеобщее признание получил метод обеззараживания воды электролитическим серебром, который впервые был получен в России в 1930 г., а затем получил признание во многих странах.
В последующем было установлено, что ионы серебра намного активнее хлора и их действие распространено более чем на 650 видов бактерий, а действие любого антибиотика ограничено 5-10 бактериями. При этом ионы серебра биоцидно действуют на вирусы, патогенные грибы при сохранении жизнедеятельности полезных микроорганизмов - пробиотиков (эубиоти-ков), т.е. не развивается дизбактериоз, который являет-
ся постоянным спутником при применении антибиотиков. Сравнительный анализ противомикробных свойств ионизированного серебра выявил, что его бактерицидный эффект в 1750 раз сильнее карбоновой кислоты (фенола) и в 3,5 раза сулемы и хлорной извести.
Кроме того установлено, что ионы серебра при концентрации 100-200МКГ/л3 обезвреживают и инак-тивируют вирусы, кишечную палочку, сальмонеллы.
Одной из причин широкого противомикробного действия ионов серебра является ингибиция трансмембранного транспорта № и Ca,вызываемые серебром, выведением из строя ферментов, нарушения стабильности ДНК.
Вышеизложенное создает основу повышенной био-цидной и лечебной эффективности антибиотиков и ряда лекарственных средств с ионами серебра.
Информация об авторах
Айдиев Айдий Юсупович, кандидат сельскохозяйственных наук, директор Курского НИИ АПП, тел. 59-54-68.
Евглевский Анатолий Алексеевич, доктор ветеринарных наук, профессор кафедры эпизоотологии, радиобиологии и фармакологии ФГБОУ ВО Курская ГСХА.
Евглевский Дмитрий Анатольевич, кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник Курского НИИ АПП.
Кретова Стелла Николаевна, кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры ветеринарно-санитарной экспертизы и биотехнологии ФГБОУ ВО Курская ГСХА.
Суворова Вера Николаевна, кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры эпизоотологии, радиобиологии и фармакологии ФГБОУ ВО Курская ГСХА, тел. 53-15-05.
Чеботков Андрей Викторович, соискатель ФГБОУ ВО Курская ГСХА.
BIOTECHNOLOGICAL BASES AND STAGES OF APPLICATION SILVER IONS A.Y. Aydiev, An.A. Yevglevsky, D.A. Yevglevsky, S.N. Kretova, V.N. Suvorovа, A.V. Chebotkov
Abstract. The results of biocidal and the rapeutik action of the existing and experimentae drags on the carnivores with skin diseases have been presented in the article.
Key words: antioxidants, colloid and ion silver solutions, dermatitis and injuries of carnivoves.
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЛЕЧЕНИЯ КОРОВ, БОЛЬНЫХ МАСТИТОМ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ КОЛЛОИДНЫХ ИОНОВ СЕРЕБРА И АНТИОКСИДАНТОВ
Д.А. Евглевский, С.И. Соколовский, И.И. Смирнов
Аннотация. Представлена лечебная эффективность препаратов-эмульсий с ионами серебра при лечении коров, больных маститом по сравнению с антибиотиками.
Ключевые слова: мастит, ионы серебра, микроорганизмы, антибиотики.
Доказано, что молоко состоит из 13% сухого вещества, содержащего белок, углеводы (лактоза), жиры, минеральные соли, витамины, 250 химических компонентов, в т.ч. 140 различных жирных кислот.
Вымя или молочная железа состоит из двух половин, которые делятся на две четверти (доли) переднюю и заднюю с самостоятельной системой молочновыво-дящих каналов заканчивающимися сосками. Паренхима железы состоит из отдельных долек, трубочек и сокового отдела (20 - 50 мл) и железистого - 80 - 500 мл.
Сосок состоит из 3-х слоев: внутреннего, среднего и наружного. Сосковый канал в норме закрыт продольными слизистыми складками.
Вымя содержит промежуточную артерию и разветвленную венозную систему. Отток крови от вымени
происходит по венам а подкожная брюшная или молочная вена впадает в молочный колодец. У основания задних долей вымени лимфа впадает в надвыменные узлы.
С наступлением беременности в вымени образуются молочные ходы, дольки, альвеолы. Происходящее молокообразование называется лактацией, осуществляется образованием молока в молочной железе и его выведение.
Сразу после родов начинается секреция молозива в течение 3 - 5 суток под влиянием гормона пролактона, выделяемого передней долей гипофиза. Молозиво в отличии от молока содержит много белков, минеральных веществ, иммунных тел, лизоцин, ферменты, гормоны.
По воспалению молочной железы различают серозный, катаральный, фибринозный, гнойный гнойно-катаральный, скрытые, а также осложненные маститы.
Изучено, что мастит у коров возникает во все физиологические периоды при нарушении правил машинного доения, кормления, содержания воздействия низких и высоких температур, сквозняков.
Из биологических факторов в развитии маститов ведущая роль принадлежит стафилококкам, кишечной и синегнойной палочкам, сальмонеллам, кандидамико-зам, микобактериям туберкулеза, ящуру, актиномикозу, оспе. В возникновении инфекционного мастита важную роль играет неполноценное кормление, промывание вымени грязной и холодной водой, снижение защитных функций организма и бактериологических свойств молока, травмы тканей вымени.
Материалы и методы исследований. В исследовании использованы 470 коров в сухостойный и лактационный периоды молочных комплексов Калужской области с характерными признаками разных видов мастита.
Для лечения поврежденных поверхностей вымени сосков использовали экспериментальные амоксицил-лин, энрофлоксацин, эритролицин, линкоспектин с ан-тиоксидантами, а также мази, крем-эмульсии с коллоидными ионами серебра.
Для определения терапевтической эффективности при лечении коров, больных маститом использовали крем-эмульсии мази, растворы 5 - 10 мг/л коллоидными ионами серебра 0,1 - 0,2% глутарового альдегида с 0,3 - 0,5% этония, или Биопага-Д и алкилдиметилбен-зиламмония хлорида и крем-эмульсии, мази с экспериментальными антибиотиками с 0,2% глутарового альдегида. 0,3 - 0,5% этония или Биопага-Д без коллоидных ионов серебра. В качестве контроля использовали мостисан.
Лечение коров, больных маститом указанными препаратами проводили 1 - 2 раза в сутки после доения в течение 3 - 5 - 7 суток путем интрацистернального введения в объеме 4 - 5 мл. Обработку поверхностей вымени проводили путем смазывания с помощью мази, крем-эмульсии.
Получение коллоидных ионов серебра проводили путем пропускания постоянного тока через объемный серебряный электрод, погруженный в 1 - 2 л дистиллированной воды.
Определение содержания коллоидных растворов серебра в растворе определяли по разработанному нами способу без использования ионометра.
Следует указать, что существующие ионометры позволяют определить содержание ионов серебра или других металлов в объеме 50 - 100 мл при концентрации ионов 3 - 5 мг/л.
Из-за указанного недостатка при получении «мертвой» и «живой» воды ионометры вообще не используются. При этом названия «живой» и «мертвой» воды имеют ограниченный срок применения, в течение 12 -24 часов, а трактовка не соответствует характеристике.
Результаты исследований. Выделенные гистоммы стафилококков, синегнойной палочки, Е.соИ, сальмонеллы, плесневых грибов практически проявляли рези-
стентность к тетрациклину, эритромицину, амоксицил-лину, энрофлоксацину и комбинациям между собой и другими биоцидными средствами, ингибирующие бактериальные ферменты, обеспечивающие адаптивные процессы микроорганизмов. При этом комбинация антибиотиков с другими увеличивает токсичность препаратов. Впервые повышение биоцидных и лечебных свойств антибиотиков было достигнуто детоксикацией и полимеризацией препаратов 0,2% формальдегида по технологии изготовления анатоксин-вакцин. Из-за канцерогенных свойств альдегида с успехом было достигнуто повышение эффективности антибиотиков с помощью 0,1% глутарового альдегида с рядом четвертичных соединений амиака. Это позволило расширить спектр действия экспериментальных антибиотиков в отношении не только бактерий, но и для патогенных плесневых грибов и вирусов, а в последующем изготавливать и успешно опробовать крем-эмульсии, мази без антибиотиков.
Существенным прорывом в повышении биоцидных и лечебных свойств крем-эмульсии, мази без антибиотиков явилась разработка способа получения коллоидных ионов серебра и определения концентрации ионов серебра без ионометра и применение антиоксидантов.
Предложенный способ получения коллоидных ионов серебра до 200 литров с содержанием 5 - 10 мг ионов серебра за 30 - 40 мин позволил получить препараты в виде растворов и крем-эмульсий с ионами серебра отдельно и с 0,1 - 0,2% глутарового альдегида с четвертичными соединениями аммиака.
Первоначально экспериментальные препараты были изучены в отношении биоцидных свойств форм-мази, крем эмульсии.
При этом концентрацию микробных клеток увеличивалось до 10000/мл вместо нормативных 1000/мл, а коксвирусов и чумы собак до 106/мл.
Результаты исследований показали, что производственные антибиотики практически не проявляли био-цидного действия в отношении указанных крнцентра-ций стафилококков Е.соИ, синегнойной палочки, плесневых грибов и вирусов, а в сочетании с глутаровым альдегидом, этонием, Биопага-Д и особенно с коллоидными ионами серебра происходило проявление био-цидного действия в минимальных концентрациях. В последующем. В последующем установлено биоцидное действие на указанные концентрации микроорганизмов глутарового альдегида с этонием, Биопага-Д отдельно и с ионами серебра в концентрации 5 - 10 мг/л. Полученные результаты были использованы при изготовлении мази, крем-эмульсии для лечения коров больных маститом.
Получение результатов представлены в таблице
№1.
Таблица 1 - Сравнительная эффективность крем-эмульсий при лечении коров, больных маститом
№ п/п Кол-во животных Характеристика препарата и способ лечения Сроки лечения Количество выздоровевших животных
1 45 Мастисон-А ежедневно по 15 мл 7 27
2 45 Энтрофлоксоцин (мазь) ежедневно интрацисте-рально 2 раза в сутки по 10мл после доения (100г/л) 7 29
3 45 Крем-эмульсия с 0,2% глутарового альдеги-дом,0,3% Биопага-Д и 0,2% этония 5 36
4 45 Крем-эмульсия с 0,2% глутарового альдегида 100г/л метронидазол по 10 мл и 0,2% этония 5 34
5 45 Крем-эмульсия с 0,2% глутарового альдегида со 0,3% этония и 0,1 мл в 10 мл коллоидных ионов серебра 3 42
Из данных, представленных в таблице, следует, что крем-эмульсии, мази с коллоидными ионами серебра превышают лечебную эффективность Мастисон-А, Эн-трофлоксоцина на 17 - 18%, а крем-эмульсия с 0,2% глутарового альдегидом, Биопагом-Д, этонием на 3% при этом следует учитывать, что крем-эмульсии с коллоидными ионами серебра с глутаровым альдегидом и этонием обладают ранозаживляющим действием в отношении поврежденной поверхности вымени.
Информация об авторах Евглевский Дмитрий Анатольевич, кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник Курского НИИ АПП.
Соколовский Сергей Игоревич, начальник управления ветеринарии Калужской области.
Смирнов Игорь Иванович, кандидат ветеринарных наук, гл. врач Жуковского района Калужской области.
THE EFFICIENCY OF COWS INFECTED WITH MASTITIS BY USING ARGENTUM COLLOIDAL IONS AND ANTIOXIDANTS D.A. Yevglevsky, S.I Sokolovsky, I.I Smirnov
Abstract. The efficiency of cream end emulsion containing argentum ions in the therapy of cows infected with Mastitis compared to antibiotic therapy has been presented.
Key words: Mastitis, argentum ions, microorganisms, antibiotics.
СЭНДВИЧ-ВАРИАНТ ИФА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ВИРУСА БЕШЕНСТВА В ГОЛОВНОМ МОЗГЕ ЖИВОТНЫХ И ПТИЦЫ
С.А. Дяченко, И.Н. Матвеева, В.М. Попова, Д.П.Кузнецов, Ан.А. Евглевский
Аннотация. Разработан твёрдофазный сэндвич-вариант иммуноферментного анализа для диагностики бешенства животных на основе моноклональных антител к гликопротеину вируса бешенства и проведены его сравнительные испытания с реакцией иммунофлуорес-ценции. Испытание обоих методов показало сходство результатов в 100% случаев.
Ключевые слова: бешенство, гликопротеин вируса, диагностика, ИФА, головной мозг.
Основными методами диагностики бешенства являются реакция иммунофлуоресценции (РИФ) и биологическая проба на мышах, а также выделение вируса на культуре клеток, постепенно заменяющее биологическую пробу на мышах. Несмотря на высокую надёжность и чувствительность этих методов, они имеют ряд недостатков. Основным недостатком биологической пробы на мышах и выделения вируса в культуре клеток является то, что для получения результатов исследования может потребоваться длительное время. Точность постановки диагноза методом РИФ во многом зависит от наличия у персонала диагностических лабораторий необходимой квалификации. Кроме этого, для проведения диагностики с использованием этих методов, как правило, не годятся пробы с признаками частичного разложения мозговой ткани, в силу возможного получения ложноотрицательных результатов. Эти диагностические системы также малопригодны для широкомасштабного мониторинга бешенства. Перечисленных выше недостатков метод иммуноферментного анализа (ИФА) не имеет. Этот метод в числе других рекомендован для диагностики бешенства Всемирной Организацией Здравоохранения (ВОЗ) и Всемирной Организацией Охраны Здоровья Животных (OIE). Иммунофер-ментный анализ отличается простотой и быстротой выполнения, может обходиться без применения дорогостоящего оборудования в случае визуальной оценки результатов исследований. Он отлично подходит для проведения мониторинга бешенства, при этом позволяя интерпретировать полученные результаты с высокой степенью достоверности.
Разработан твёрдофазный сэндвич-вариант иммуноферментного анализа для диагностики бешенства животных, с использованием моноклональных антител,
полученных на разные эпитопы гликопротеина вируса бешенства.
Целью данной работы являлась разработка сэндвич-варианта ИФА для диагностики бешенства в головном мозге животных и птицы.
Результаты реакции учитывали с помощью спектрофотометра "Биотек" при длине волны 450 нм. Определяли среднюю оптическую плотность (ОП) положительного и отрицательного контролей, а также среднюю ОП тестируемых образцов. Рассчитывали ОП тестируемых образцов, положительного и отрицательного контролей. Согласно рекомендациям ВОЗ, расчётная ОП отрицательного и положительного контролей должна быть не выше 0,1 и не ниже 1,5 единиц, соответственно. Исследуемые образцы считали положительными, если их ОП превышала ОП отрицательного контроля на 0,2 единицы.
Для оценки диагностической специфичности сэндвич-варианта ИФА исследовали 100 проб головного мозга от разных животных, отрицательных и положительных по бешенству в РИФ. Расчётная оптическая плотность отрицательных проб составила 0,0530±0,041, что свидетельствует о высокой специфичности ИФА, которая в данном исследовании составила 100%.
С целью измерения предела чувствительности разработанного метода провели анализ с использованием гликопротеина известной концентрации. Проведённые исследования показали, что предел чувствительности метода находится в диапазоне 10-20 нг/мл.
Результаты сравнительных исследований мозговой ткани животных и птицы в ИФА и РИФ представлены в таблице 1.
Таблица 1 - Результаты исследований мозговой ткани животных и птицы в ИФА и РИФ
Диагноз Вид животного РИФ ИФА
(головы) Положит. Отрицат.
Положи- мышата 24 24 0
тельные крольчата 2 2 0
морская свинка 10 10 0
крысята 22 22 0
перепелята 6 6 0
Отрица- крысята 16 0 16
тельные мышата 20 0 20
Всего 100 100
