Эффективность иммунодиагностических исследований при тканевых паразитозах свиней Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

ЗДОРОВЬЕ

УДК 619:576.89; 619:616.995.1

Эффективность иммунодиагностических исследований при тканевых паразитозах свиней

Гламаздин Игорь Геннадьевич

ФГБОУВО «Московский государственный университет пищевых производств»

Адрес: 125080, Москва, Волоколамское шоссе, дом 11 E-mail: glamazdin@mgupp.ru

Сысоева Наталья Юрьевна

ФГБОУ ВО «Московский государственный университет пищевых производств»

Адрес: 125080, Москва, Волоколамское шоссе, дом 11

E-mail: 864365@mail.ru

Крюковская Галина Михайловна

ФГБОУ ВО «Московский государственный университет пищевых производств»

Адрес: 125080, Москва, Волоколамское шоссе, дом 11 E-mail: doctor.galya@gmail.com

Ли Елена Вадимовна

ФГБОУ ВО «Московский государственный университет пищевых производств»

Адрес: 125080, Москва, Волоколамское шоссе, дом 11

E-mail: elena.li@mail.ru

Хорошо известно, что свиноводство является одной из самых рентабельных отраслей животноводства и способна в короткие сроки увеличить производство мяса при низких затратах кормов на производство единицы продукции. Именно поэтому создаются и функционируют промышленные комплексы и мелкие товарные хозяйства по выращиванию свиней. Однако наличие тканевых гельминтозов в организме живых животных и свинине существенно влияет на эффективность откорма, качество мяса и биологическую безопасность продукции. Примерно от 2 до 5% туш свиней регистрируются, как пораженные тканевыми паразитами. В Российской Федерации содержится около 25 млн. свиней, потому можно предположить, что свыше 1 млн. свиней являются больными, т.е они неэффективно откармливаются и являются источником возбудителей, опасных для здоровья человека. Вместе с тем существуют методы прижизненной диагностики паразитозов свиней и их применение могло бы существенно повысить экономическую эффективность свиноводческой отрасли улучшить эпидемическую ситуацию по гельминтозам во всех регионах страны. Целью исследования являлось разработка тест-системы на основе ELISA и оценка ее эффективности на убойных животных в некоторых регионах Центрального Федерального Округа. Параметры тест системы отрабатывали на 96 луночных планшетах, в качестве антигена использовали полные экстракты водно-солевых растворов паразитов - E.granulosus, T.spiralis, C.cellulosae, Sarcocystis spp. Сыворотки крови доставлялись с мясокомбинатов на которых производился убой свиней и сопровождались протоколом ветеринарно-санитарной экспертизы. Из 550 проверенных сывороток крови 43 имели антитела т.е. дали положительный ответ в мультиантигенном тесте. По протоколу экспертизы были зарегистрированы 25 туш, пораженных тканевыми паразитами.

Ключевые слова: эхинококкоз, саркоцистоз, трихинеллез, цистицеркоз, иммуноферментный метод, мультиантигенная тест-система, серодиагностика

У

Как цитировать

Материал опубликован в соответствии с международной лицензией Creative Commons Attribution 4.0.

11

Гламаздин, И. Г., Сысоева, Н. Ю., Крюковская, Г. М., & Ли, Е. В. (2019). Эффективность иммунодиагностических исследований при тканевых паразитозах свиней. Health, Food & Biotechnology, 1(4). https://doi. org/10.36107/hfb.2019.i4.s274

Введение

Хорошо известно, что свиноводство является одной из самых рентабельных отраслей животноводства и способна в короткие сроки увеличить производство мяса при низких затратах кормов на производство единицы продукции. Именно поэтому создаются и функционируют промышленные комплексы и мелкие товарные хозяйства по выращиванию свиней. Свиноводство является резервом обеспечения продовольственного рынка России качественной мясной продукцией и приобретает особую значимость для агропромышленного комплекса многих регионов страны. В настоящее время в России, отмечается устойчивый прирост производства свинины в хозяйствах всех форм собственности (Анищенко, 2017). Однако наличие тканевых1 гельминтозов в организме живых животных и свинине существенно влияет на эффективность откорма, качество мяса и биологическую безопасность продукции (Успеский & Горохов, 2012; Гламаздин, 2017; Гламаздин, 2019). Примерно от 2 до 5% туш свиней регистрируются, как пораженные тканевыми паразитами. В Российской Федерации содержится около 25 млн. свиней, потому можно предположить, что свыше 1 млн. свиней являются больными, т.е они неэффективно откармливаются и являются источником возбудителей, опасных для здоровья человека. К основным тканевым паразитам относятся одноклеточные простейшие Toxoplasma gondii и Sarcocystis spp., и личинки гельминтов Trichinella spp. и Taenia sрр. (Flisser, 2003; Klun, 2011). Вместе с тем существуют методы прижизненной диагностики паразитозов свиней и их применение могло бы существенно повысить экономическую эффективность свиноводческой отрасли улучшить эпидемическую ситуацию по гельминтозам в регионах страны (Зименков, 2016). Цистицеркоз (Cysticercus cellulosae) является одной из самых серьезных паразитарных инвазий у людей и свиней в регионах, где занимаются разведением свиней при наличии недостаточных санитарных условий содержания животных. Свиньи являются главными промежуточными хозяевами, участвующие в биоэкологии Sarcocystis spp., E.granulosus, C.cellulosae, T.spirallis, причем, каждый из этих паразитов опасен для человека (Klun, 2011; Gamble, 1997). Кроме того, эти болезни свиней вызывают существенные экономические потери у индивидуальных фермеров и на крупных промышленных предприятиях из-за снижения качества свинины, дополнительных затрат на ути-

лизацию и обеззараживания мяса, необходимости содержания штата экспертов на мясокомбинатах (Ndao, 2009). Стоит отметить, что случаи выявления тканевых паразитов на официальных скотобойнях часто сильно занижают число истинной распространенности этих болезней в эндемичных регионах (Ndao, 2009).

Материалы и методы

Исследования были проведены на убойных пунктах и в лаборатории кафедры «Ветеринарная медицина». Был осуществлен сравнительный ве-теринарно-санитарный анализ 550 туш свиней. Предварительно от свиней брали кровь для получения сывороток и поиска антител к антигенам возбудителей.

Паразиты были извлечены из мышечной ткани и паренхиматозных органов свиней: Cysticercus cellulosae, Trichinella spiralis, Sarcocystis spp., Echinococcus granulosus. Соматические экстракты (антигены) готовили из разных морфологических структур личинок гельминтов. Пузырьки C.cellulosae использовали полностью вместе с вну-трипузырной жидкостью, E.granulosus - герминативную оболочку и внутрипузырную жидкость, ткани с T.spirallis и Sarcocystis spp. предварительно переваривали в искусственном желудочном соке и выделенных паразитов разрушали механическим способами. Разрушение тканей гельминтов проводили в гомогенизаторе Поттера-Эвельгейма вручную в течение 3 минут и на автоматическом гомогенизаторе LHM-20 (5 минут со скоростью 4000 об/мин). После центрифугирования (20 минут при 1500 об/мин) в качестве антигена использовали надосадочную жидкость, которую хранили при -20 °С.

С целью определения эффективности иммунодиа-гностических исследований применяли мультиан-тигенную тест-систему для обнаружения тканевых паразитозов свиней. В качестве антигена использовали соматические экстракты личинок паразитов в карбонатном буфере (pH=9,6) с концентрацией белка 1 мкг/мл, в лунки вносили по 150 мкл раствора. Исследуемые сыворотки крови разводили 1:100 в фосфатном буфере (pH=7,2), в лунки вносили по 100 мкл. В качестве конъюгата в лунки вносили антитела кролика к иммуноглобулинам IgG свиньи, меченные пероксидазой в разведении 1:10000 и объеме 100 мкл. Таким образом, каждую

1 Доктрина продовольственной безопасности Российской Федерации. Указ Президента Российской Федерации от 30 января 2010 № 120. http://www.kremlin.ru/acts/bank/30563

сыворотку крови исследовали на наличие антител 4 раза на каждый антиген Cysticercus cellulosae, Trichinella spiralis, Sarcocystis spp., Echinococcus granulosus. Реакция останавливали 50% H2SO4, результаты измеряли на фотометре при Х=492 нм. Результаты считали положительными в лунках с наиболее интенсивной окраской субстрата.

Результаты исследований

По протоколам рутинной ветеринарно-санитар-ной экспертизы из 550 проверенных туш свиней 25 были поражены возбудителями тканевых па-разитозов. Что составляет 4,5% паразитарных туш из числа обследованных. Как видно из таблицы 1: C. cellulosae было обнаружено в поперечно-полосатой мускулатуре у 5 туш с интенсивностью ~ 7

- 10 цистицерков, T.spiralis у 2 туш с интенсивностью ~ 1 личинка на 05 кг мышц, Sarcocystis spp. у 4 туш с интенсивным поражением мышц языка и пищевода, E. granulosus у 3 туш, с поражением печени 2 туши и 1туша с поражением легких интенсивность инвазии составила 3 - 4 пузыря в органе. Остальные 11 туш свиней были поражены: 2

- Fasciola hepatica с интенсивностью 4 - 5 экземпляров в печени и Cysticercus tenuicollis 9 туш с интенсивностью от 1 до 5 пузырей на серозных покровах печени и легких.

Таблица 1

Распространение тканевых паразитозов свиней

Таким образом, по данным ветеринарно-санитар-ной экспертизы в тушах свиней мы обнаружили: личинки трех видов тений, личинки одного вида нематод, имаго одного вида трематод, тканевые цисты одного вида простейших.

Для оценки диагностической эффективности ELISA при паразитозах свиней использовали коллекцию сывороток крови от 100 животных, среди которых 25 сывороток от свиней, пораженных паразитами и 75 сывороток свиней в тушах, которых по данным ветеринарно-санитарной экспертизы не было выявлено инвазии.

При этом в ELISA сыворотка считалась положительной, если при учете результатов реакции им-муноферментный фотометр показывал коэффициент оптической плотности (Е) 0,2 и выше, соответственно, если ниже - отрицательной. Определение специфичности ELISA проводили на основании сопоставления результатов реакции с разными антигенами и данных ветеринарной экспертизы. (таблица 2). Эффективность мульти-антигенного теста оказалась достаточно высокой и при сравнительном учете результатов реакции достигала 100%. Максимальное значение экстинк-ции получено при диагностике эхинококкоза, E. granulosus - Е = 1,42±0,20. При принятой нами системы учета положительных ответов в ELISA были

№

возбудитель

количество пораженных туш

локализация

интенсивность

примечание

1 C. cellulosae

2 T. spiralis

3 Sarcocystis spp

4 E. granulosus

5 E. granulosus

5 F. hepatica

6 C. tenuicollis

7 C. tenuicollis

5

Поперечнополосатая мускулатура

Поперечнополосатая мускулатура

Поперечнополосатая мускулатура

Паренхима печени

Паренхима легких

Просвет желчных протоков

Серозные покровы печени

Серозные покровы легких

7 - 10

1л/500гр мышц

405 цист в 1 кг мышц

3 - 4 пузыря в органе

2 пузыря в органе

4 - 5 экземпляров в печени

3 - 5 пузырей на тонкой ножке на серозных покровах печени

1 -2 пузыря на тонкой ножке на серозных покровах легких

Соединительная ткань мышц языка, жевательные, лопаточно-плечевые

Внутри мышечного волокна диафрагмы, языка, мышц конечностей

Внутри мышечного волокна языка, мас-сетеров, пищевода

Пузыри 5,0 см в диаметре, большая часть погружены в паренхиму

Пузыри 2,0 см в диаметре, большая часть погружены в паренхиму

В одном случае отмечены отложение солей в желчных протоках

Пузыри от 2 до 5 см в диаметре

Пузыри до 2 см в диаметре

2

4

2

1

2

7

2

получены ложноположительные реакции при диагностике цистицеркоза (антигеном E. granulosus), и саркоцистоза (с антигенами T. spiralis, E. granulosus).

P < 0,05 - разница достоверна между значениями экстинкции в реакциях сыворотки крови от зараженных животных с гомологичными и гетероло-гичными антигенами.

Однако, сравнивая коэффициенты экстинкции гомологичных и гетерологичных реакций, установили большую разницу в цифрах, например: при сар-коцистозе -1,25±0,07 и 0,25±0,05 (в 5 раз).

Обсуждение

Как видно из табл. 2 положительная реакция при диагностике спонтанного цистицеркоза свиней с гетерологичными антигенами (E. granulosus) легко исключалась при сравнительном анализе в муль-тиантигенном ELISA тесте. Подобный результат нами был получен и при диагностике саркоцисто-за свиней. Таким образом в наших экспериментах мультиантигенный тест оказался эффективным для диагностики сразу четырех тканевых возбудителей паразитозов. Причем, не было отмечено ни одной ложноположительной реакции с сыворотками от животных страдающих фасциолезом и тонкошейным финнозом. Наши результаты согласуются с Svobodova Vlasta, которая использовала для диагностики сакроцистоза иммунофермент-ный метод. При диагностике саркоцистоза овец результаты ELISA в сравнении с результатами непрямой флуоресцентной реакции были идентичны в 94,7% случаев. Титры специфических антител были выше в 70,8% образцов при использовании ELISA (Popovic-Dragonjic, 2018). Саркоцистоз широко распространен среди многих видов животных и даже у дефинитивных хозяев могут быть обнаружены личиночные стадии развития, например: мышечный саркоцистоз у собак. В классиче-

ском представлении паразитологической науки саркоцисты поражают у плотоядных животных кишечник. Однако учеными (Chapman, Mense, & Dubey, 2005) был диагностирован миозит, связанный с неопознанным видом возбудителя саркоцистоза у взрослой собаки из Канады. При изучении саркоцистоза у свиней нами было обнаружено 4 туши, пораженные цистами Sarcocystis spp. из 550 обследованных туш.

Трихинеллез является одним из наиболее распространенных паразитарных зоонозов в мире и может быть смертельным для человека. Trichinella spp. гельминты, которые имеют большое экономическое значение. По исследованиям Mikkonen T., J. Valkama, H. Wihlman^ A. Sukura было установлено, что крысы играют важную роль в передаче трихинеллеза свиньям и фермерским хозяйствам, при их обследовании на наличие Trichinella spp^ различных регионах распространенность оказалась до 49% Trichinella spp (Mikkonen et al, 2005). В наших экспериментах при обследовании 550 туш свиней, мы обнаружили две положительные три-хинеллезные туши, что свидетельствует о необходимости контроля над этой инвазией у сельскохозяйственных и диких, промысловых животных, а также у грызунов.

Хорошо известно, что основным источником заражения ларвальным эхинококкозом являются плотоядные животные. По данным исследований Kurtesh Sherifi и др. изоляты E. granulosus были выделены бродячей собаки, охотничьей собаки, и домашней собаки. Полуколичественный анализ показал низкое или умеренное количество яиц (2-10 на 1 г фекалий) у собак, положительных на E. granulosus («овечий штамм», G1), в то время как образцы с высоким (11-20) или очень высоким высокое количество (>20) яиц тениидозов было отрицательным в ПЦР на E. granulosus. Используя специфические праймеры для обнаружения E. multilocularis, все образцы, содержащие яйца те-

Таблица 2

Эффективность мультиантигенного теста на основе ELISA при паразитозах свиней

Коэффициент экстинкции (Е) в ELISA с разными антигенами

инвазированных паразитозами АГ в ELISA C. cellulosae АГ в ELISA T. spiralis АГ в ELISA Sarcocystis spp АГ в ELISA E. granulosus

C. cellulosae 1,34±0,27 0,14±0,12 0,11±0,04 0,24±0,03

T. spiralis 0,10±0,02 1,35±0,24 0,12±0,02 0,14±0,04

Sarcocystis spp 0,15±0,02 0,25±0,05 1,25±0,07 0,22±0,05

E. granulosus 0,16±0,01 0,14±0,02 0,16±0,04 1,42±0,20

F. hepatica 0,08±0,01 0,09±0,01 0,10±0,01 0,12±0,01

C. tenuicollis 0,09±0,01 0,12±0,01 0,10±0,01 0,14±0,01

ниидозов оказались отрицательными. Таким образом было доказано распространение E. granulosus у собак из Косово, где кистозный эхинококкоз человека является значимой медицинской проблемой (Kurtesh, 20011). По нашим наблюдениям распространение эхинококкоза свиней в некоторых регионах страны достигает ~0,5%.

Для диагностики трихинеллезной инвазии свиней нами был использован мультиантигенный тест с соматическим экстрактом из возбудителя. В своих экспериментах мы получили 100% чувствительность теста. Наши данные согласуются с Marcia R.M. и др., которые в ELISA для поиска антител (Ab-ELISA) использовался рекомбинантный белок TS-14, а в поиске антигена (Ag-ELISA) - мо-ноклональное антитело против этого белка. Поиск циркулирующих антигенов (Ag-ELISA) был положительным у двух свиней через 28-91 день после заражения. Все естественно инфицированные свиньи были положительны на Ag-ELISA и Ab-ELISA. Поиск антител и антигенов методом ИФА в сыворотке крови 30 свиней местной фермы и без ци-стицеркоза в анамнезе был отрицательным. Таким образом, был сделан вывод о возможности использование антигена TS-14 в тесте Ab-ELISA для выявления цистицеркоза у свиней с низкой инвазией (Marcia, 2012).

Сероэпидемиология - это изучение антигенных свойств возбудителей и возникновение болезней, также выработки антител у особей популяции и появление устойчивости животных и человека к данному заболеванию. Основная задача - мониторинг болезней и мониторинг эффективности программ борьбы с болезнями.

Антигены паразитов распознаются иммунной системой и провоцируют развитие любой формы адаптивного ответа хозяина. Эти соединения принадлежат к различным классам: ими бывают чаще чужеродные клетки или молекулы белков, полисахаридов, иногда гаптены. Антигенность детерминанты может определить только иммунная система. Клетки и ткани иммунной системы воспринимают детерминанты аналогично рецепторам органов обоняния, улавливающим запахи любых химических соединений. Основное условие антигенности - наличие поверхностных структур, генетически отличных от тканей организма-хозяина (чужеродность). Особенностью паразитов является многоклеточность и высокая дифференциация тканей. Одной из существенных черт иммунитета при гельминтозах является наличие в ходе развития паразита стадий, различающихся по своей активности, что затрудняет выработку

иммунитета и формирует, как правило, нестерильный иммунитет (Бессонов, 1984; Бессонов, 2004; Ndao, 2009).

Таким образом, по результатам наших исследований при использовании в качестве антигенов полные экстракты водно-солевых растворов паразитов - E.granulosus, T.spiralis, C.cellulosae, Sarcocystis spp. в мультиантигенном тесте ELISA можно получить высокую диагностическую эффективность тканевых паразитозов свиней. Данный метод является недорогим и позволит проводить мониторинг болезней свиней, что в конечном итоге повысит экономическую эффективность свиноводства.

Литература

Анищенко, А. Н. (2017). Актуальные проблемы и перспективы развития подотрасли свиноводства. Проблемы развития территории, 4(90), 146-158.

Бессонов, А. С. (2004). Иммунитет и иммуносупрес-сия при паразитарных болезнях. Труды ВИГИС, 40, 44-51.

Бессонов, А. С. (1984). Иммунодепрессивные свойства трихинелл и способы их подавления. Биохимия и физиология гельминтов и иммунитет при гельминтозах. Наука, 32, 15-20. Гламаздин, И. Г., & Сысоева Н. Ю. (2017). Ветеринарно-санитарная оценка продуктов убоя при тканевых паразитозах животных. В Развитие пищевой и перерабатывающей промышленности России: кадры и наука (с.142-143). Гламаздин, И. Г., Сысоева Н. Ю., Сикоева П. К., Першина Т. А., & Крюковская Г. М. (2019). Поражение свинины тканевыми цистами, контроль сырья при саркоцистозе. Российский журнал Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии, 2 (30), 121-125. Зименков, В. А., Сивкова Т. Н., & Доронин-Доргелинский Е. А. (2016). Распространение трихинеллеза диких животных в Российской Федерации. Пермский аграрный вестник, 4(16), 98-101.

Успенский, А. В., & Горохов, В. В. (2012).

Паразитарные зоонозы. Россельхозакадемия. Bruzinskaite, R., Sarkunas, M., Torgerson, P. R., Mathis, A., & Deplazes, P. (2009): Echinococcosis in pigs and intestinal infection with Echinococcus spp. in dogs in south-western Lithuania. Veterinary Parasitology, 160, 237-241. https://pubmed.ncbi. nlm.nih.gov/19111990/ Chapman, J., Mense M., & Dubey J. P. (2005). Clinical Muscular Sarcocystosis in a Dog. Journal of

Parasitology 91(1), 187-190. https://pubmed.ncbi. nlm.nih.gov/15856899/ Flisser, A., Sarti E., Lightowlers M., & Schantz, P. (2003). Neurocysticercosis: regional status, epidemiology, impact and control measures in the Americas. Acta Tropica, 87, 43-51. https://doi. org/10.1016/S0001-706X%2803%2900054-8 Gamble, H. R, (1997). Parasites associated with pork and pork products. Scientific and Technical Review of the Office International des Epizooties, 16(2), 496-506.

Klun, I., Vujanic, M., Yera, H., Nikolic, A., Ivovic, V., Bobic, B., Bradonjic, S., Dupouy-Camet, J., & Djurkovic-Djakovic O. (2011). Toxoplasma gondii infection in slaughter pigs in Serbia: seroprevalence and demonstration of parasites in blood. Veterinary Research, 42, 17. http://www. veterinaryresearch.org/content/42/1/17 Sherifi, K., Rexhepi, A., Hamidi, A., Behluli, B., Zessin, K. H., Mathis, A., &Deplazes, P. (2011). Detection of patent infections of Echinococcus granulosus ("sheep-strain", G1) in naturally infected dogs in Kosovo. Berliner und Münchener Tierärztliche Wochenschrift, 11/12, 518-521. https://doi. org/10.5167/uzh-50941 Liu, G., Liang, P., Zhang, S., Guo, A., Wang, L., Zheng, Y., & Luo, X. (2017). TsPKA-r: a potential immunodiagnostic antigen for the detection of porcine cysticercosis. Acta Tropica, 171, 80-85. https://doi.org/10.5167/uzh-50941

Mikkonen T., Valkama, J., Wihlman, H., & Sukura, А. (2005). Spatial Variation of Trichinella Prevalence in Rats in Finnish Waste Disposal Sites. Journal of Parasitology, 91(1), 210-213. http://dx.doi. org/10.1645/GE-3230RN Silva, M. R. M. D., Uyhara, C. N. S., Silva, F. H., Espindola, N. M., Poleti, M. D., Vaz, A. J., Meirelles, F. V., & Maia, A. A. M. (2012). Cysticercosis in experimentally and naturally infected pigs: Parasitological and immunological diagnosis. Pesquisa Veterinaria Brasileira, 32(4), 297-302. https://www.researchgate.net/ publication/262619487 Ndao, M., (2009). Diagnosis of Parasitic Diseases: Old and New Approaches. Interdisciplinary Perspectives on Infectious Diseases, 15. https://doi. org/10.1155/2009/278246 Pawlowski, Z., Allan, J., & Sarti, E. (2005). Control of Taenia solium taeniasis/cysticercosis; from research towards implementation. International Journal for Parasitology, 35, 1221-1232. https://doi. org/10.1016/j.ijpara.2005.07.015 Popovic-Dragonjic L., &Kocic, I. (2018). An outbreak of human trichinellosis in the village of Subotinac near the Town of Aleksinac. Acta facultatis medicae Naissensis, 35(2),140-148. https://content. sciendo.com/downloadpdf/journals/afmnai/35/2/ article-p140.pdf Svobodova, V., (1991). Use of ELISA for the diagnostics of ovine sarcocystosis, Folia parasitologica, 38(4), 303-308.

HEALTH

/ \ The Effectiveness of Immunodiagnostic

Studies in Tissue Parasitoses of Pigs

Igor G. Glamazdin

Moscow State University of Food Production 11 Volokolamskoe highway, Moscow, 125080, Russian Federation

E-mail: glamazdin@mgupp.ru

Natalya Yu. Sysoeva

Moscow State University of Food Production 11 Volokolamskoe highway, Moscow, 125080, Russian Federation

E-mail: 864365@mail.ru

Galina M. Kryukovskaya

Moscow State University of Food Production 11 Volokolamskoe highway, Moscow, 125080, Russian Federation

E-mail: doctor.galya@gmail.com

Elena V. Li

Moscow State University of Food Production 11 Volokolamskoe highway, Moscow, 125080, Russian Federation

E-mail: elena.li@mail.ru

It is well known that pig farming is one of the most profitable branches of animal husbandry and is able to increase meat production in a short time with low feed costs per unit of production. That is why industrial complexes and small commodity farms for raising pigs are created and operate. However, the presence of tissue helminthiasis in the body of live animals and pork significantly affects the efficiency of fattening, the quality of meat and the biological safety of products. Approximately 2 to 5% of pig carcasses are registered as affected by tissue parasites. The Russian Federation contains about 25 million pigs, so we can assume that more than 1 million pigs are sick, i.e. they are ineffectively fattened and are a source of pathogens that are dangerous to human health. At the same time, there are methods of lifetime diagnostics of swine parasitosis and their application could significantly increase the economic efficiency of the pig industry and improve the epidemic situation for helminthiasis in all regions of the country. The purpose of the study was to develop a test system based on ELISA and evaluate its effectiveness on slaughtered animals in some regions of the Central Federal District. The parameters of the test system were tested on 96 well plates, and full extracts of water-salt solutions of parasites - E. granulosus, T. spiralis, C. cellulosae, Sarcocystis spp-were used as the antigen. Blood serums were delivered from meat processing plants where pigs were slaughtered and were accompanied by a Protocol of veterinary and sanitary examination. Of the 550 serums tested 43 had antibodies i.e. they gave a positive response in a multi-antigen test. According to the examination report, 25 carcasses infected with tissue parasites were registered.

Keywords: echinococcosis, sarcocystosis, trichinellosis, cysticercosis, enzyme immunoassay, multiantigenic test system, serodiagnostics

References

Anishchenko, A. N. (2017). Current problems and prospects of development of the pig farming sub-sector. Problemy razvitiya territorii [Problems of territory development], 4(90), 146-158.

Bessonov, A. S. (2004). Immunity and immunosuppression in parasitic diseases. Trudy VIGIS [Scientific works of VIGIS], 40, 44-51.

Bessonov, A. S. (1984). Immunodepressivnye svojstva trihinell i sposoby ih podavleniya. Biohimiya i fiziologiya gel'mintov i immunitet pri gel'mintozah. [Immunosuppressive properties of Trichinella and ways to suppress them. Biochemistry and

This article is published under the Creative Commons Attribution 4.0 International License.

_ How to Cite _

17 Glamazdin, I. G., Sysoeva, N. Y., Kryukovskaya, G. M., & Li, E. V. (2019). The Effectiveness of Immunodiagnostic Studies in Tissue Parasitoses of Pigs. Health, Food & Biotechnology, 1(4). https://doi.org/10.36107/hfb.2019. i4.s274

physiology of helminths and immunity in helminthiasis], 32, 15-20.

Glamazdin, I. G., & Sy'soeva, N. Yu. (2017). Veterinary and sanitary assessment of slaughter products in animal tissue parasitosis. In Razvitie pishhevoj i pererabaty'vayushhej promy'shlennosti Rossii: kadry' i nauka [Development of the Russian food and processing industry: personnel and science] (p.142-143).

Glamazdin, I. G., Sy'soeva, N. Yu., Sikoeva, P. K., Pershina, T. A., & Kryukovskaya, G. M. (2019). Defeat of pork tissue cysts, control of raw materials in sarcocystosis. Rossijskij zhurnal Problemy' veterinarnoj sanitarii, gigieny' i e'kologii [Russian journal Of problems of veterinary sanitation, hygiene and ecology], 2(30), 121-125.

Zimenkov, V. A., Sivkova, T. N., & Doronin-Dorgelinskij, E. A. (2016). Distribution of trichinellosis of wild animals in the Russian Federation. Permskij agrarny'j vestnik [Perm agricultural Bulletin], 4(16), 98-101.

Uspenskiy, A. V., & Gorohov, V. V. (2012). Parazitarnye zoonozy [Parasitic zoonoses]. Rossel'hozakademiya.

Bruzinskaite, R., Sarkunas, M., Torgerson, P. R., Mathis, A., & Deplazes, P. (2009): Echinococcosis in pigs and intestinal infection with Echinococcus spp. in dogs in south-western Lithuania. Veterinary Parasitology, 160, 237-241. https://pubmed.ncbi. nlm.nih.gov/19111990/

Chapman, J., Mense M., & Dubey J. P. (2005). Clinical Muscular Sarcocystosis in a Dog. Journal of Parasitology 91(1), 187-190. https://pubmed.ncbi. nlm.nih.gov/15856899/

Flisser, A., Sarti E., Lightowlers M., & Schantz, P. (2003). Neurocysticercosis: regional status, epidemiology, impact and control measures in the Americas. Acta Tropica, 87, 43-51. https://doi. org/10.1016/S0001-706X%2803%2900054-8

Gamble, H. R, (1997). Parasites associated with pork and pork products. Scientific and Technical Review of the Office International des Epizooties, 16(2), 496-506.

Klun, I., Vujanic, M., Yera, H., Nikolic, A., Ivovic, V., Bobic, B., Bradonjic, S., Dupouy-Camet, J., & Djurkovic-Djakovic O. (2011). Toxoplasma gondii infection in slaughter pigs in Serbia:

seroprevalence and demonstration of parasites in blood. Veterinary Research, 42, 17. http://www. veterinaryresearch.org/content/42/1/17 Sherifi, K., Rexhepi, A., Hamidi, A., Behluli, B., Zessin, K. H., Mathis, A., &Deplazes, P. (2011). Detection of patent infections of Echinococcus granulosus ("sheep-strain", G1) in naturally infected dogs in Kosovo. Berliner und Münchener Tierärztliche Wochenschrift, 11/12, 518-521. https://doi. org/10.5167/uzh-50941 Liu, G., Liang, P., Zhang, S., Guo, A., Wang, L., Zheng, Y., & Luo, X. (2017). TsPKA-r: a potential immunodiagnostic antigen for the detection of porcine cysticercosis. Acta Tropica, 171, 80-85. https://doi.org/10.5167/uzh-50941 Mikkonen T., Valkama, J., Wihlman, H., & Sukura, А. (2005). Spatial Variation of Trichinella Prevalence in Rats in Finnish Waste Disposal Sites. Journal of Parasitology, 91(1), 210-213. http://dx.doi. org/10.1645/GE-3230RN Silva, M. R. M. D., Uyhara, C. N. S., Silva, F. H., Espindola, N. M., Poleti, M. D., Vaz, A. J., Meirelles, F. V., & Maia, A. A. M. (2012). Cysticercosis in experimentally and naturally infected pigs: Parasitological and immunological diagnosis. Pesquisa Veterinaria Brasileira, 32(4), 297-302. https://www.researchgate.net/ publication/262619487 Ndao, M., (2009). Diagnosis of Parasitic Diseases: Old and New Approaches. Interdisciplinary Perspectives on Infectious Diseases, 15. https://doi. org/10.1155/2009/278246 Pawlowski, Z., Allan, J., & Sarti, E. (2005). Control of Taenia solium taeniasis/cysticercosis; from research towards implementation. International Journal for Parasitology, 35, 1221-1232. https://doi. org/10.1016/j.ijpara.2005.07.015 Popovic-Dragonjic L., &Kocic, I. (2018). An outbreak of human trichinellosis in the village of Subotinac near the Town of Aleksinac. Acta facultatis medicae Naissensis, 35(2),140-148. https://content. sciendo.com/downloadpdf/journals/afmnai/35/2/ article-p140.pdf Svobodova, V., (1991). Use of ELISA for the diagnostics of ovine sarcocystosis, Folia parasitologica, 38(4), 303-308.