CC BY
32
Лiфшиць е.Г. ЕФЕКТИВН1СТЬ ПРЕПАРАТУ ГЛУТОКС1М ПРИ Л1КУВАННЯ ПСОР1АТИЧНО1ХВОРОБИ
УДК 616.517
Ефектившсть препарату Глутоксим при лжування псорттично1 хвороби
Л1фшиць С.Г.
Днтропетровська державна медична академ1я
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТА ГЛУТОКСИМ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ПСОРИАТИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ Лифшиц Е.Г.
THE GLUTOKSIM MEDICINE EFFICIENCY IN PSORIASIS THERAPY Lifshits Ye.G.
На основании сравнительной оценки гистологических биоптатов кожи, показателей апоптической активности р53, маркера пролиферации К/-67 (с использованием иммуногистохимических методов исследования), а также оценки изменения индекса РАБ! до лечения и на 21 день лечения, подтверждена целесообразность применения препарата Глутоксим в схеме терапии вульгарной формы псориати-ческой болезни.
The expediency of Glutoksim medicine in the scheme of therapy of vulgar form of psoriasis decease has been proved on the basis of comparative estimation of histological biopsy skin materials and indexes of apoptotic activity p53 as well as proliferation marker (using immune-histological research methods) and estimation of index change - before the treatment and on the 21st day of treatment.
Псорiаз е одним з розповсюджених хрошчних дерматозiв, який становить вщ 12 до 15 % ушх шюрних захворювань; на нього хворiе до 3 % всього населення Земно! кулi [5].
В основi патогенезу псорiатично! хвороби ле-жить генетично детермшоване порушення голов-но! функцп шири - кератишзаци, яке обумовлене змшами динамiчно! рiвноваги структурних про-цеав у етдерма - пролiферащ!, диференцiювання та програмовано! кттинно! загибелi кератино-цитiв [3, 7, 9]. Як показали дослщження останшх рокiв, у хворих на псорiаз найбiльш суттевi порушення вiдмiчаються на клiтинному рiвнi. В останнi роки появилися дослщження, присвячеш вивченню апоптозу при псорiазi. Вiдомо, що у шкiрi хворих на цей дерматоз пщвищуеться про-лiферацiя епiдермальних клiтин, а рiвень !х апоптично! активностi знижуеться [10, 11]. Цi проце-си призводять до порушення диференщювання кератиноцш!в, накопиченню !х у верхнiх шарах епщермюу з формуванням епiдермо-дермальних папул, яю складають клiнiчну картину псорiазу [4, 6, 8].
У цей час не юнуе единого ушверсального пiдходу до лiкування псорiазу. Методи терапи вiдрiзняються значним рiзноманiттям та характеризуются рiзноманiтними за силою та спря-мованiстю впливiв на локальш прояви дерматозу та оргашзм у цiлому [3, 5, 7].
У зв'язку з цим залишаеться актуальним ви-
вчення показниюв апоптично! активностi керати-ноцитiв р53, а також маркера кттинно! пролiфе-раци Ki-67 у псорiатичнiй бляшщ, що сприяе по-шуку речовин, яю впливають на механiзми апоптозу, а отже розробщ нових патогенетично об-грунтованих методiв лшування псорiазу.
Мета дослщження - установити доцшьшсть використання препарату Глутоксим на пiдставi оцiнки клiнiко-морфологiчних змiн у шкiрi хворих на псорiаз.
Матер1али та методи. Пiд наглядом знахо-дилося 72 хворих на вульгарну форму псорiатич-но! хвороби (40 чоловшв та 32 жiнки) у стади прогресування - на момент включення !х в дослщження та у стацiонарнiй та регресуючш ста-дiях - впродовж дослщження. Для досягнення мети дослщження ощнювалися (до лшування та на 21 день лшування):
а) бiологiчно-значимi результати ^з застосу-ванням iмуногiстохiмiчних методiв дослiдження):
- гiстологiчнi бiоптати шюри з псорiатич-
но! бляшки;
- показник апоптично! активност р53 та
маркер пролiферацi! Ki-67;
б) клiнiчно-значимi результати - оцiнка по iндексу площi та важкостi псорiатичного проце-су, або PASI.
У дослщженш брали участь пацieнти у про-гресуючiй стадi! захворювання у вщ 18-65 рокiв, якi дали шформацшну згоду на участь у дослщ-
1-2 (9)' 2006 Дерматовенерология. Косметология. Сексопатология
жент.
У залежносп вщ метод1в л1кування, яю були використаш, yci пащенти були розподшеш на 2 групи:
- основну групу склали 37 хворих, комплекс -не лшування яких було доповнене фармако-логiчним препаратом Глутоксим (ЗАТ «ФАРМА ВАМ») - представником нового кла-су лiкарняних препарапв - тiопоетикiв; йому при-таманш iмyномоделюючi та цитопротективнi ефекти, вш здатен потенцiювати лiкyвальнi ефек-ти антибактерiально! терапп, виявляе диферен-цшований вплив на нормальнi (стимyляцiя про-лiферацil та диференцiювання) та трансформоват (iндyкцiя апоптозу) клiтини [2];
- у контрольну групу yвiйшли 35 пащенпв, л^-вання яких проводило ся з використанням тшьки стандартних методiв лiкyвання (дезинтоксика-цiйна, антигiстамiнна тератя, вiтамiнотерапiя, локальна терапiя з використанням кератолггичних, кератопластичних, гормональних засобiв).
На момент включення в дослщження в yсiх хворих дiагностовано прогресуючу стадiю за-хворювання.
Клiнiчна картина важкост захворювання та його динамiка ощнювалася по iндексy площi та важкост псорiатичного процесу, або PASI, який коливався вщ 13 до 30 одиниць (середне значен-ня - 20,05 ± 0,4), та тривалосп лiкyвання.
Для оцiнки ефективностi лшування у 36 пацiентiв, з !х дозволу, була проведена бiопсiя шюри з псорiатично! бляшки до та на 21 день тсля лшування. Iмyногiстохiмiчне дослiдження було проведено у 25 пащенпв (13 з основно! групи та 12 - з контрольно!):
- у прогресуючш стадп процесу, бюпсп пiдля-гала крайова зона бляшки, яка включала зону росту та шфшьтрацп;
- у стащонарнш стадп - робили бiопсiю пери-ферiйноl зони висипу, яка включала „псевдоатро-фiчний" ободок Воронова, зону незначно! шфшьтрацп;
- у регресуючш стадп - бюпсп тдлягала область пiгментованих плям на мющ розв'язуван-ня папульозних елеменпв висипу.
Перед забором бюпсп проводилася мiсцева анестезiя 10-вiдсотковим розчином лщока!ну -2-3 мл. Шматочки тканини фiксyвали у 10-вщсот-ковому нейтральному розчиш формалiнy на фосфатному бyферi (рН 7,2-7,4) протягом 12-24 годин. Проводку, заливку в парафш та приготуван-ня парафшових зрiзiв проводили за загальноприй-нятш методицi. Зрiзи фарбували гематоксилiном и еозином для встановлення загально! морфоло-пчно! картини. У реакцп використовували анти-тiла до р53, клон DO-7, («DACO», Данiя) та Ki-67, клон MIB-1 («DACO», Данiя). Для iмyн-ного пофарбування використовували стрептав> дин-бiотиновий пероксидазний метод («DACO», Дашя, набiр DACO, LSAB2 System, HRP).
Для кшькюно! оцiнки результатiв iмуногiсто-хiмiчних реакцiй в зрiзах при 400-кратному збшь-шеннi мiкроскопа пщраховували кiлькiсть клiтин, у яких виявлялася iмунопероксидазна мiтка (по-зитивне пофарбування) у 10 полях зору, як було обрат випадковим чином. Отримаш даннi пере-раховували на 1 мм2 [1].
При ощнюванш рiвня терапевтичного ефекту:
- за клшчне видужання приймалося очищен-ня шкiряного покрову вiд псорiатичного висипу; на мющ патолопчних вогнищ залишалися гшер-пiгментнi та гiпопiгментнi плями;
- значне полшшення регiструвалося у випад-ках, коли псорiатичнi вогнища значно зменшува-лися у розмiрах, розбивалися на дрiбнi плоскi папули, у тому чи^ - в обласп чергових бля-шок;
- за полшшення приймалися результати, коли удавалося лише зупинити прогресування псорiа-тичного процесу, досягти припинення патологiч-ного злущення та деякого зменшення вогнищ ураження;
- лшування враховувалося безрезультатним у тому випадку, коли хворi виписувалися в прогре-сивнiй або стацiонарнiй стадп псорiатичного про-цесу, причому площа ураження залишалася, як ранiше.
Для обробки отриманих результапв застосо-вували альтернативний аналiз, метод варiащйноi статистики.
Результати дослщження. У хворих на вульгарний псорiаз середнiй показник РА81 скла-дав:
- в основнш групi - 22,52 ± 0,6;
- у контрольнш групi - 23,08 ± 0,4.
У стащонарнш стадп РА 81 коливався вщ 3,4 до 16 одиниць (середнш показник РЛ81 -10,58 ± 1,50). У регресуючiй стадп захворювання, на мющ висипу вiдмiчалися ппершгментш та гiпопiгментнi плями.
В основнш груш хворих псорiазом (37 па-цieнтiв) на фош стандартно! терапii вводився препарат Глутоксим - 1 мл 1-вщсоткового розчину, внутришньом'язово, кожен день, на курс -10 ш'екцш. Вже на сьомий день тсля початку лшування у 22 (59,5 %) пащенпв зупинялося ви-никнення свiжих елементiв, свербiння; було вщ-сутне периферiйне зростання папул та бляшок, знизилася яскравiсть елементiв. 1дентична картина спостерналася на дев'ятий день лшування ще у 12 (25,53 %) пащенпв; у решти - 3 пащента (14,97 %) - першi клiнiчнi ознаки стабiлiзацii процесу вiдмiчалися на 12 день лшування. О^м того, у пащенпв основно! групи вiдмiчалося:
а) на 15 день вщ початку терапп:
- клiнiчне видужання - у 7 (18,93 %)
пащенпв;
- значне полшшення - у 16 (43,24 %);
- полшшення патолопчного процесу - у 14
(37,83 %);
Дерматовенерология. Косметология. Сексопатология 1-2 (9)' 2006
Лфшиць е. Г. ЕФЕКТИВНЮТЬ ПРЕПАРАТУ ГЛУТОКС1М ПРИ Л1КУВАННЯ ПСОР1АТИЧНО1ХВОРОБИ
б) на 18 день лшування:
- клжчне видужання - у 12 (32,4 %) пащенпв;
- значне полшшення - у 18 (48,65 %);
- полшшення патолопчного процесу -у 7 (18,92%);
в) на 21 день лшування:
- середнш показник РЛ81 - 10,12 ± 0,91 од.;
- клшчне видужання - у 17 (45,95 %) пащенпв;
- значне полшшення -у 16 (43,24 %);
- полшшення -у 4 (10,81 %).
У той же час у пащенпв контрольно! групи, яю отримували тшьки стандартну тератю:
а) позитивна динамша вiдмiчалася:
- на 9 день лшування - у 10 (28,57 %);
- на 11 день - ще у 9 (25,17 %);
б) кшшчне видужання було вiдмiчено:
- на 15 день - у 3 (8,57 %);
Таблиця 1 - Клшчна ефективнють л1
- на 18 день - у 6 (17,14 %);
в) значне полiпшення було вiдмiчено:
- на 15 день - у 12 (34,29 %);
- на 18 день - у 15 (42,86 %);
г) полiпшення було вiдмiчено:
- на 15 день - у 20 (57,14 %);
- на 18 день - у 14 (39,99 %).
На 21 день ткування у пацiентiв контрольно! групи вiдмiчалося:
- клiнiчне видужання -у 13 (37,14 %) пащенпв;
- значне полшшення -у 14 (40 %);
- полшшення -у 8 (22,86 %).
Головш результати дослщження (Табл. 1) по-казують, що ефект вiд лiкування iз застосуван-ням препарату Глутоксим в основнш групi вище, нiж в контрольнш: у пацiентiв з вульгарною формою псорiазу клiнiчне видужання та значне полшшення становить:
- для основно! групи - 88,48 %;
- для контрольно! групи - 77,14 %.
зання хворих на вульгарний псор1аз
Група Юльюсть Р1вень терапевтичного ефекту (на 100 хворих)
дослщження хворих Клшчне видужання Значне полшшення Полшшення
абс. % абс. % абс. %
Основная группа 37 17 45,95 16 43,24 4 10,81
Группа контролю 35 13 37,14 14 40,0 8 22,86
РАЗОМ 72 30 41,67 30 41,67 12 16,66
На пiдставi пстолопчних ознак бiоптати були роздшеш на 4 групи:
- 1 група - стащя прогресування (це пащенти до лiкування; кiлькiсть бюптапв п = 36);
- 2 група - у бляшщ рееструються мiнiмальнi ознаки прогресування (п = 10);
- 3 група - морфолопчш ознаки вiдповiдають стацiонарнiй стадп (п = 15);
- 4 група - морфолопчш ознаки регресивно! стадп (п = 11).
Бюптати пацiентiв 2 та 3 груп були взят у ктшчно стацiонарну стадiю псорiатичного процесу та 5 бюптапв - у регресуючу стадда (бюп-тати вщнесеш до 3 групи), бiоптати пащенпв 4 групи ктшчно вiдповiдають регресуючш стадi!. В результатi проведених дослщжень бiоптатiв шири була видiлена додаткова 2 группа у кiлькостi 10 спостережень, пстолопчна картина яких була розщнена, як стадiя з мшмальними ознаками прогресування псорiазу. При зютавленш гiстологi! з клiнiчними проявами на фот стандартно! те-рапi! (контрольна група) та с застосуванням Глу -токсиму (основна група) на 21 день вщ початку л^вання, було вiдмiчено, що iз 16 бiоптатiв, якi були взят у пацiентiв з картиною ктшчного видужання:
а) 11 (68,75 %) бюптапв за гiстологiчними прикметами вщповщають 4 групi (регресивна стащя), серед них:
- 4 (36.36 %) бюптати належать пащентам
1-2 (9)' 2006
контрольно! групи;
- 7 (63,64 %) - основно!;
б) iншi 5 (31,25 %) бюптапв вщнесеш до 3 групи, опис яко! вщповщае стацюнарнш стадi! псорiатично! хвороби, серед них:
- один (20 %) вщноситься до групи, яка от-римувала Глутоксим;
- 4 (80 %) - до групи, яка отримувала тшьки стандартну тератю.
Також треба вщзначити, що частка хворих з кшшчним видужанням вище в основнш грут, тж у грут, яка отримувала стандартну тератю: 17 (45,95 %) та 13 (37,14 %) вiдповiдно. У дослiд-жуваних з клiнiчною картиною полiпшення (два пащента (12,5 %) основно! групи та 4 (25 %) контрольно!) пстолопчш ознаки вщповщають 2 грут. Цшава особливють було вiдмiчена у пащенпв iз значним полiпшенням ктшчно! кар-тини - гiстологiчний опис бюптапв виявив як мiнiмальнi ознаки прогресування процесу, так i ознаки стащонарно! стадi!:
а) серед восьми (44,4 %) пащенпв основно! групи:
- в одному (12,5 %) биоптап описаш мшмальш ознаки прогресп;
- 7 (87,5 %) биоптапв вiдповiдають стацi-онарнiй стадi!;
б) серед восьми (44,4 %) пащенпв контрольно! групи:
- у 3 (37,5 %) дослщжених вiдмiчено
Дерматовенерология. Косметология. Сексопатология
мшмальш ознаки прогресування;
- у 5 (62,5 %) - ктшчну картину стацюнар-но! стадп.
У резyльтатi iмyногiстохiмiчних дослiджень виявлено, що при переходi в рiзнi стадп захворю-вання достовiрно змшюються параметри клiтин-ного поновлення.
При прогресyваннi запального процесу (1 група пацiентiв) посилюеться пролiферацiя клiтин ет-дермiсy (тдвищена експресiя Ki-67) та уповшь-нюються темпи апоптозу (знижений рiвень р53); при цьому вiдбyваеться не тшьки посилення про-цесiв дiлення клггин, але й розширення пролiфе-ративного компартменту. Ця картина спостерi-гаеться в псорiатичнiй бляшцi до початку лшу-вання. У стацiонарнiй та регресивнш стадiях си-тyацiя змшюеться, причому цi змiни значно ви-раженi у пацiентiв, комплексне л^вання яких доповнено препаратом Глутоксим; тут вщмь чаеться зниження рiвня експресп Ki-67 кл^ина-ми епiдермiсy, що супроводжуеться пiдвищенням рiвня р53. Експресiя р53 особливо виражена у регресивну стадiю
У пацiентiв 2 групи вщбуваеться бiльш упо-вiльнене розв'язування патологiчного процесу -поступове зменшення пролiферацil епiдермiсy; при цьому достовiрних показникiв, якi вщобра-
жають дiяльнiсть пролiферативного компартменту (експресiя кератиноцитами Ki-67), не виявлено. Цей факт свщчить про поступове зниження швидкосп пролiферацil при псорiазi й може бути розцшений, як показник, який вщображае стадiю течи дерматозу, а також вказувати на те, що не-обхщно продовжувати тератю на даному етапi до повно! стабшзацп процесу. З iншого боку, по мiрi переходу запального процесу в стацюнарну, а потiм - i в регресивну стадiю змшюеться апоп-тична активнiсть епiдермоцитiв (яка було оцше-на за рiвнем експресп р53). Стадiя з мшмаль-ним ознаками прогресування характеризуеться достовiрним збiльшенням цього параметру. Мож-на припустити, що посилення апоптотично! актив-ностi вiдiграе ведучу роль у процесах регресу-вання псорiатичноl бляшки та може бути розгля-нуто, як показник ефективностi лшування псорi-азу.
У пацiентiв 2, 3 та 4 груп було вiдмiчено до-стовiрне збiльшення параметру р53 (Табл. 2).
Наведенi вище результати порГвняльно! оцш-ки бiологiчно та клшчно-значимих показникiв свiдчать про доцшьнють включення препарату Глутоксим до схеми л^вання хворих на вуль-гарну форму псорiатичноl хвороби.
Таблиця 2 - Кшькютьо р53-позитивних та К/-67-позитивних клггин етдермюу в бюптатах шири хворих на псор1аз (на 1 мм2)
Маркери Бюптати (М ± m)
1 група 2 група 3 група 4 група
р53 Ki-67 24,95 ±12,95* 76,32 ± 25,85 33,47 ± 11,26* 67,67 ± 24,68** 35,79 ± 12,68* 62,02 ± 25,44 42,89 ± 14,76* 87,74 ± 27,45**
Примечание: * - змша показнишв достов1рна (р < 0,05) м1ж 1 та 2, 1 та 3 i м1ж 1 та 4 групами; ** - змша показнишв достов1рна (р < 0,05) м1ж 1 та 3 групами.
Л1ТЕРАТУРА
1. Автандилов Г.Г. Основы количественной патологической анатомии: Уч. пособие для слушателей последипломн. образов. - М.: Медицина, 2002. - 238 с..
2. Кетлинская О.С., Романова С.Ю., Кожемякин Л.А. Динамика показателей в результате исследования // Лечащий врач. - 2001. -№ 1.- С. 9-13.
3. Кунгуров Н.В., Филимоикова Н.Н., Тузан-кина И.А. Псориатическая болезнь. - Екатеринбург: Изд-во Уральськ. ун-та, 2002.-200 с.
4. Новиков А.И. , Кононов А.В., Охлопков В.А. Характеристика показателей апоптотической активности в псориатической бляшке как одно из звеньев патогенеза при псориазе // Актуальные вопросы дерматологии: Сб. науч. работ юбилейной научно-практической конференции. - Омск, 2001. - С. 98-101.
5. Скрипкин Ю.К. Кожные и венерические болезни: Учебн. пособ. - М.: Триада -Фарм, 2001. - 688 с.
6. ШевченкоТ.И., ШлоповГ.В. Патологическая
анатомия псориатической болезни. - К.: Укр -1НТЕК, 2001. - 358 с.
7. Шилов В.Н. Псориаз. - М.: Медицина, 2001. -303 с.
8. Castelions F.A., Gerristen M.J., van Erp P.E. et al. Cell-kinetic evidence for increased recruitment of cycling epidermal cells in psoriasis: the ratio of histone and Ki-67 antigen expression is constant // Dermatology. - 2000. - Vol. 201, No 2. - Р. 105-110.
9. Grousson J., Ffrench M., Concha M. CD40 Ligation Alters the Cell Cycle of Differentiating Keratinocytes // J. Invest. Dermatol. - 2000. -Vol. 114. - Р. 581-586.
10.Laporte M., Galand P., Fokan D. et al. Apoptosis in established and healing psoriasis // Dermatology. - 2000. - Vol. 200, No 4. - Р. 314316.
11. Wehrli P., ViardI., Bullani R., Tschopp J. Death Receptors in Cutaneous Biology and Disease // J. Invest. Dermatol.- 2000.- Vol. 115.-Р. 141-148.
Дерматовенерология. Косметология. Сексопатология 1-2 (9)' 2006
