CC BY
76
ЗДОРОВЬЕ, ОБРАЗ ЖИЗНИ, ЭКОЛОГИЯ
© БАКШЕЕВА С.С., АНИСИМОВА Е.Н.
ДОНОЗОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА НАРУШЕНИЙ ЭНДОЭКОЛОГИЧЕСКОГО СТАТУСА У ДЕТЕЙ, ПРОЖИВАЮЩИХ В РАЙОНАХ С РАЗНОЙ ТЕХНОГЕННОЙ НАГРУЗКОЙ
С.С. Бакшеева, Е.Н. Анисимова Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф.
Войно-Ясенецкого, ректор - д.м.н., проф. И.П. Артюхов.
Резюме. Изучен эндоэкологический статус и состояние системы местного иммунитета слизистых оболочек верхних дыхательных путей и ротовой полости у детей, проживающих в экологически неравнозначных районах города Красноярска.
Ключевые слова: бактерионосительство, донозологические нарушения,
окружающая среда.
Бакшеева Светлана Сергеевна - к.б.н., доц. каф. микробиологии КрасГМУ; тел 8(931)2201361.
Анисимова Елена Николаевна - к.м.н., зав. каф. клинико-лабораторной диагностики ИПО КрасГМУ; тел 8 (391)2201580.
В условиях резкого ухудшения во всем мире экологической ситуации весьма актуальным для современной медицинской и гигиенической науки представляется поиск адекватных подходов, позволяющих выявлять воздействие неблагоприятных факторов окружающей среды на здоровье населения [7]. Прежде всего, качество окружающей среды оказывает выраженное влияние на формирование детского организма. Большое число
антропогенных факторов окружающей среды, действуя на низких уровнях и не являясь прямой причиной тех или иных заболеваний, может изменить сопротивляемость организма [10]. В ряде исследований приводятся данные о сниженном индексе здоровья детей, проживающих в промышленных районах [5,7,8]. Неспецифический характер влияния факторов окружающей среды на организм проявляется снижением естественной сопротивляемости организма, а также ранними неблагоприятными функциональными изменениями в различных физиологических системах [9].
Как известно, факторы окружающей среды, воздействующие на организм человека, могут приводить к изменениям эндоэкологического статуса, включая состав и активность микрофлоры [6,7,8,12].
Слизистые оболочки человека играют важную барьерную роль в защите организма от воздействия неблагоприятных факторов окружающей среды. Дыхательный тракт и полость рта являются «входными воротами» для загрязнителей окружающей среды, и от состояния иммунной защиты со стороны слизистых оболочек зависит степень контакта, мера вхождения неблагоприятного фактора, вдыхаемого человеком.
Показатели функции иммунной системы слизистых оболочек (активность лизоцима, секреторного sIgА и некоторых других) являются весьма информативными в оценке уровня защиты слизистых от вредных факторов окружающей среды.
Целью данной работы явилось изучение эндоэкологического статуса и состояние системы местного иммунитета слизистых оболочек верхних дыхательных путей и ротовой полости, как одного из показателей степени адаптации детского организма к условиям проживания при различной техногенной нагрузке.
Материалы и методы
Для решения поставленных задач проведено обследование 358 детей в возрасте 7-11 лет, проживающих в районах с различной антропогенной нагрузкой г. Красноярска. Наблюдаемые дети относились к 1 и 2 группам
здоровья и проживали в исследуемых районах города с момента рождения. Обследованные дети были разделены на 2 группы. В первую группу вошли дети, проживающие в экологически «чистом» районе (n=202), а во вторую в экологически неблагополучном (n=183). Главным критерием данного разделения явились коэффициенты суммарного загрязнения воздуха, по которым зоны наблюдения различались.
В каждой группе оценивали биохимические показатели слюны и содержание секреторного иммуноглобулина (sIgA) в смывах со слизистой полости носа, а также проводили бактериологическое исследование на носительство золотистого стафилококка.
Забор нестимулированной смешанной слюны проводили через 1,5 - 2 часа после еды, после предварительного прополаскивания полости рта кипяченной водопроводной водой, в стерильную пробирку в количестве 2-3 мл. Материал доставляли в лабораторию в течение 3 часов с момента сбора анализа. Образцы слюны перед исследованием центрифугировали в течение 20 минут при 3000 об/мин. Исследование проводили в день сбора материала.
В смешанной слюне определяли концентрацию общего белка, лизоцима, активность а-амилазы и общей щелочной фосфатазы.
Концентрацию общего белка определяли унифицированным биуретовым методом по конечной точке, реактивами фирмы «Vital Diagnostics» (Россия), на полуавтоматическом биохимическом анализаторе «Photometer 5010» (Германия, Берингер Манхейм). Измерение активности а-амилазы проводили на полуавтоматическом биохимическом анализаторе «Photometer 5010» (Г ермания, Берингер Манхейм) унифицированным амилокластическим методом по Каравею, реактивами фирмы «Vital Diagnostics» (Россия). Активность щелочной фосфатазы оценивалась кинетическим методом, на биохимическом анализаторе “Hitachi-912” (фирма Hoffman-La Rosh) с встроенным набором программ качества лабораторных исследований, по унифицированным методикам, реактивами фирмы ''Rosh” (Швейцария). Концентрацию лизоцима определяли по стандартной методике.
Состояние местного иммунитета слизистых оболочек верхних дыхательных путей изучали посредством определения концентрации секреторного иммуноглобулина (sIgA) в смывах со слизистой передних отделов полости носа. Количественное определение sIgA проводили с помощью набора «IgA секреторный-ИФА-БЕСТ» ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск) на комплекте оборудования для ИФА (Bio-Rad, США -Франция).
Выделение и идентификацию стафилококков проводили общепринятыми методами [14]. Для определения видовой принадлежности штаммов использовали микротесты фирмы «Lachema» (Чехия»).
При обследовании школьников на стафилококковый биоценоз исследуемый материал (клетки эпителия слизистой носа) засевали на чашки с желточно -солевым агаром. После инкубировали при 37оС в течение 24-48 часов производили количественную и качественную оценку выросших колоний, расчет показателя микробной обсемененности (ПМО).
Число микробных клеток 10 и более на тампон является показателем высокой обсемененности и свидетельствует о бактерионосительстве, представляющем эпидемическую опасность.
Тип стафилококкового бактерионосительства определяли по антилизоцимной активности (АЛА) штамма. При наличии у золотистых стафилококков АЛА-признака бактерионосителей относили к резидентным [1].
Статистическую обработку результатов проводили с помощью пакета прикладных программ Statistica 6.0. Поскольку по критерию Шапиро-Уилкса распределение носило нормальный характер, для описания учетных признаков представлено среднее арифметическое и стандартная ошибка. Основываясь на равенстве дисперсий достоверность различий, определяли по критерию Стьюдента. Наличие и силу связи признаков определяли с применением критерия корреляции Спирмена.
Результаты и обсуждение
При обследовании детей, проживающих в районах г. Красноярска с различной антропогенной нагрузкой, установлено, что уровень активности а-амилазы и активности общей щелочной фосфатазы в слюне детей из района с неблагоприятными экологическими условиями был достоверно ниже, чем у детей, проживающих в районе с меньшей антропогенной нагрузкой (табл. 1).
Таблица 1
Содержание а-амилазы, щелочной фосфатазы и общего белка в слюне детей, проживающих в районах с разной антропогенной нагрузкой
Это может быть связанно с влиянием неблагоприятных факторов внешней среды на деятельность слюнных желез [4]
В то же время, содержание общего белка в слюне детей из районов с неблагоприятными экологическими условиями было статистически значимо выше, чем в слюне детей из экологически благополучного района (табл.1). В норме в слюне содержатся белки, синтезируемые в слюнных железах. Вместе с тем, часть белков слюны имеет сывороточное происхождение. Повышение концентрации белка в слюне у детей из экологически неблагополучного района может быть обусловлено местным повышением сосудистой проницаемости, и увеличением концентрации белков плазмы крови в слюне, связанное с началом развития воспаления слизистых оболочек ротовой полости у этих детей [11,13].
Известно что, защитные факторы слюны зависят от концентрации лизоцима, который лизирует оболочку некоторых микроорганизмов, в первую очередь грамположительных. Кроме того, лизоцим стимулирует фагоцитарную активность лейкоцитов и участвует в регенерации биологических тканей. В нашем исследовании обнаружено снижение активности лизоцима у детей, проживающих в экологически неблагополучном районе, по сравнению с показателями у детей из экологически благополучного района (табл.2).
Таблица 2
Концентрация лизоцима и sIgA у детей проживающих в районах с разной антропогенной нагрузкой
Одним из важных факторов антибактериальной защиты является sIgA, который препятствует адгезии бактерий к поверхности клеток слизистых оболочек. Исследование концентрации sIgA в смывах из носовой полости выявило достоверное снижение его уровня у детей из экологически неблагополучного района (табл.2), что возможно связанно с местной иммуносупрессией за счет воздействия неблагоприятных факторов окружающей среды.
Снижение уровня sIgA и лизоцима приводит к снижению местного иммунитета слизистых оболочек и способствует колонизации патогенными микроорганизмами данных биотопов - развитию носительства золотистого стафилококка (табл.3).
Таблица 3
Бактерионосительство S. aureus у детей проживающих в районах с
разной антропогенной нагрузкой
Стафилококки обладают способностью к деградации иммуноглобулинов различных классов, истощают систему комплемента, приводят к нарушениям функционирования и кооперации иммунного ответа, в частности основных регуляторных субпопуляций Т-лимфоцитов, подавляют активность факторов неспецифической резистентности - лизоцима, способствуют развитию гиперчувствительности замедленного типа, нарушают процессы фагоцитоза и др.[2,3,8].
Проведенный корреляционный анализ показал обратную связь средней силы (-0,40; -0,36 соответственно, p<0,05) между sIg «А», лизоцимом и резидентным носительством золотистого стафилококка у наблюдаемых нами детей.
Таким образом, диагностика эндоэкологического статуса на основе определения бактериального носительства стафилококка и состояние системы местного иммунитета слизистых оболочек имеет важное значение в донозологической диагностике. Полученные результаты подтвердили необходимость использования комплекса неинвазивных тестов, характеризующих функциональное состояние той или иной системы организма, для более точного определение лиц с разными уровнями адаптации, выделения групп риска с целью проведения своевременной коррекции состояния здоровья детей.
PRENOSOLOGICAL DIAGNOSTICS DISTURBANCES IN ENDOECOLOGICAL STATUS IN CHILDREN FROM REGIONS WITH DIFFERENT TECHNOGENIC LOAD S.S. Baksheev, E.N. Anisimova Krasnoyarsk State Medical University named after prof. Voino-Yasenetsky Abstract. We studied endoecological status and immunity system of mucous of upper respiratory tract and oral cavity in children from ecologically uneven Krasnoyarsk city districts.
Key words: carrier bacteria, prenosological disturbances, environment.
Литература
1. Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я., Малышкин А.П. и др. Метод определения антилизоцимной активности микроорганизмов // ЖМЭИ. -1984. - №2. - С.27-29.
2. Бухарин О.В., Усвяцов Б.Я. Бактерионосительство. - Екатеринбург: УроРАН, 1996. - 72 с.
3. Вершигора А.Е. Общая иммунология. - Киев: Выша школа, 1989. -364 с.
4. Воронина Е.П. Стоматологический статус детей, родившихся и постоянно проживающих в районе расположения алюминиевого завода: автореф. дис. ... канд. мед.наук - М., 1995. - 27с.
5. Дерябин А.Г. Стафилококки: экология и патогенность.
Екатеринбург, УроРАН, 2000. - 86 с.
6. Даутов Ф.Ф. Прогноз уровня заболеваемости детей 3-7 лет в зависимости от изменения степени загрязнения атмосферного воздуха // Гиг. и сан. - 1990. - №3. - С.12-15.
7. Захарченко М.П. Социально-гигиенический мониторинг: методология, региональные особенности, управленческие решения. - М., 2003. - С.130-133.
8. Захарченко М.П., Гриневич В.Б., Добрынин В.М. Проблемы диагностики дисбиоза под влиянием факторов окружающей среды
// Гиг. и сан. - 2003. - № 6. - С.74-76.
9. Захарченко М.П., Добрынин В.М., и др. Проблемы гигиенической диагностики эндоэкологического статуса на основе дисбиотических явлений // Гиг. и сан. - 2004. - № 6. - С.50-53.
10. Кутепов Е.Н. Проблемы диагностики донозологических и преморбидных состояний в связи с воздействие факторов окружающей среды // Гиг. и сан. - 1993. - №1. - С.6-9.
11. Леонтьев В.К., Пахомов Г.Н. Профилактика стоматологических заболеваний. - М., 2006. - 416 с.
12. Сидоренко Г.И., Кутепов Е.Е. К методологии диагностики распространенности преморбидных состояний среди населения // Гиг. и сан. - 1994. - №1. - С.13-16
13. Супиева Э.Т. Роль слюны в гомеостазе минеральных компонентов полости рта // Проблемы стоматологии. - 2002. - №3. - С.17.
14. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования // Под ред. М.О. Биргера. - М., 1982. - 317 с.
