CC BY
10
УДК 619:615.9:599.323.4
ДОКЛИНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА КОМПЛЕКСНОГО СРЕДСТВА «N-98» НА БЕЛЫХ
МЫШАХ
Новоселов О.Н. - аспирант, Медетханов Ф.А. - д.б.н., доцент, Конакова И.С. - к.вет.н., ассистент
ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины
имени Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: комплексное средство, сырье, природное происхождение, лабораторные животные, белые мыши, токсикологическая безопасность
Keywords: complex agent, raw materials, natural origin, laboratory animals, white mice, toxicological safety
В условиях современного животноводства химиотерапевтические препараты при лечении животных, страдающих различными патологиями, оказывают помимо терапевтического действия ряд нежелательных побочных эффектов на состояние и
функциональность многих органов животных. Также в последнее время идет тенденция к ограничению использования и антибактериальных препаратов. По этим двум причинам возникает потребность в поиске альтернативных средств лечения животных в условиях современного животноводства.
Альтернативой могут быть представлены комплексные средства на основе сырья природного происхождения, которые обладают противовоспалительной, антибактериальной,
иммуномодулирующей и другой активностью. Группы органических веществ (алкалоиды, сапонины, эфирные масла, карбоновые кислоты, фенолы и др.) и биологически активные вещества, входящие в состав комплексных средств, приближены к составным веществам клеток различных тканей животного организма. Ввиду этого, средства на основе природного сырья способны оказать терапевтический эффект с наименьшими побочными действиями.
Но прежде, чем применять данные средства, требуется определение их токсикологической безопасности на лабораторных животных. Поэтому целью
настоящих исследований является определение параметров острой токсичности комплексного средства под лабораторным шифром «N-98» при интрагастральном и внутримышечном введении белым мышам.
Материал и методы исследований. Экспериментальная часть работы по определению параметров острой токсичности проходила в пределах вивария ФГБОУ ВО КГАВМ имени Н.Э. Баумана. Параметры острой токсичности определяли в соответствии с руководством по «Надлежащей лабораторной практике» ТКП 125 - 2008 (02040) и «Руководству по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» [1; 3 с. 45]. Эксперименты на животных проводили в соответствии с правилами, принятыми Европейской Конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для
экспериментальных и иных научных целей [4], и Приказом МЗ СССР № 755 от 12.08.1977 [2].
Теоретическая и аналитическая часть работы выполнена в условиях кафедры фармакологии, токсикологии и радиобиологии Казанской ГАВМ имени Н.Э. Баумана.
Объектом исследования являлось средство на основе сырья природного происхождения под лабораторным шифром «N-98».
Параметры острой токсичности комплексного средства «N-98» определяли
на 32 лабораторных мышах с исходной массой тела 19-24 г., выдержанные в условиях карантина на протяжении 14 суток. Комплексное средство вводили интрагастрально и внутримышечно в максимально допустимых дозах для данного вида животных.
При интрагастральном введении были сформированы 1 опытная и 1 контрольная группы, в каждой из которых содержались по 4 самца и 4 самки белых мышей. При этом внутрижелудочное введение комплексного средства осуществляли после предварительной 12-часовой голодной диеты лабораторных животных. Мышам опытной группы комплексное средство «N-98» вводили с
помощью атравматического зонда однократно в объеме 0,5 мл, что соответствует максимальной дозе для данного вида животных. Лабораторным мышам контрольной группы вводился физиологический раствор в
соответствующей дозировке.
При внутримышечной инокуляции также были сформированы опытная и контрольная группы, в каждой из которых содержались по 4 самца и 4 самки белых мышей. Комплексное средство «N-98» вводилось внутримышечно в каудальную часть бедра в дозе 0,5 мл однократно. Мышам контрольной группы
инъецировался физиологический раствор в соответствующей дозировке (Таблица 1).
Группа Количество животных в группе/ использованное средство Гендерная принадлежность Способ введения Доза, мл Кратность введения
самец самка
1 - опытная 8/ «N-98» 4 4 рег об 0,5 1
2 - опытная 8/ «N-98» 4 4 в/м 0,5 1
3-контрольная 8/физраствор 4 4 рег об 0,5 1
4-контрольная 8/физраствор 4 4 в/м 0,5 1
Таблица 1 - Схема использования средства «N-98» белым мышам при определении параметров острой токсичности
Результат исследований. В ходе проводимого эксперимента установлено, что отклонения в физиологических показателях лабораторных животных опытной и контрольной групп до включения в опыт не имели существенных различий. Но после интрагастрального введения и внутримышечной инокуляции были отмечены особенности в их поведении.
В частности, белые мыши опытной группы при пероральном введении были угнетены, отмечались болевые реакции в виде корчей, при этом мыши перемещались из стороны в сторону, сбивались в кучу. Наравне с этим отмечалось угнетение дыхательных движений вплоть до их кратковременного прекращения (5...7 сек). Восстановление дыхания произошло к концу первого часа наблюдения.
По истечению первых суток проводимого эксперимента наблюдались
восстановление поведения, потребление корма и груминг лабораторных животных. Изменения со стороны слизистых оболочек и волосяного покрова не установлены.
При внутримышечной инокуляции объекта исследования животные были встревожены, забивались в угол, дыхание при этом становилось поверхностным и учащенным. Нормализация
физиологических процессов происходила в течение первых 30 минут после инокуляции, а спустя первые 4.6 часов животные становились активными, осуществляли груминг и потребляли корм.
Помимо оценки поведенческих реакций было изучено влияние комплексного средства «N-98» на показатели массы тела. В ходе эксперимента установлено, что средство на основе сырья природного происхождения не ингибирует массу тела белых мышей как при внутреннем, так и при
внутримышечном введении. Результаты взвешивания представлены в таблице 2, из которой видно, что разница между группами по абсолютному приросту массы
тела была достоверно не различимой.
При анализе сохранности животных гибель мышей не наблюдалась ни в одной из групп (Таблица 3).
Таблица 2 - Динамика массы тела белых мышей после однократного введения «N-98» (М±т; п=8)
Группа Вводимый компонент Масса тела, г
пероральное введение внутримышечное введение
До 14 сутки До 14 сутки
1 Физиологический раствор 21,1±0,6 21,9±0,8 23,3±1,0 23,9±0,8
2 «N-98» 22,4±0,5 23,1±0,4 23,0±1,1 23,4±0,9
Таблица 3 - Определение острой токсичности средства «N-98» на белых мышах
й п Вводимый Способ Объем Количество Пало Выжило
с компонент введе- вводимой животных в животных животных
р ния жидкости, мл группе
1 Физиологическ ий раствор в/ж 0,5 8 0 8
в/м 0,5 8 0 8
2 «N-98» в/ж 0,5 8 0 8
в/м 0,5 8 0 8
На 14 сутки проводимого эксперимента произведено вскрытие лабораторных животных с
патологоанатомической оценкой
внутренних органов. Визуально отмечено отсутствие характерных патологических изменений в макроструктуре органов.
Заключение. Комплексное средство под лабораторным шифром «N-98» является безопасным в токсикологическом отношении при внутрижелудочном и внутримышечном введении, поскольку не вызывает гибели белых мышей, при этом нормализация физиологических процессов наступает в течение первого дня проводимого эксперимента и отмечается отсутствие ингибирующего влияния объекта исследования на прирост массы тела лабораторных животных. Также отсутствуют изменения в макроструктуре внутренних органов на момент вскрытия. Согласно классификации Л.И. Медведь, Ю.С. Кагана, Е.И. Спыну (1964) средство может быть отнесено к IV классу опасности (вещества малоопасные),
ЛИТЕРАТУРА:
1. Надлежащая лабораторная практика: Технический кодекс
установившейся практики (ТКП) 125 - 2008 (02040). Утвержден постановлением Министерства здравоохранения
Республики Беларусь от 28.03.2008 г. №56. - 39 с.
2. Приказ МЗ СССР № 755 от 12.08.1977 «Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных». - http://primatologia.ru/images /NII/GLP/3_2_prikaz_minzdrawa_o_merah_z hiwotnyh.pdf.
3. Хабриев, Р. У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией Р. У. Хабриева. - 2 изд., перераб. и доп. -Москва: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - 832 с.
4. Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes (Text with EEA relevance) / European Commission: Brussels, Belgium, 2010. -https://www.researchgate.net/publication/233 428185_DIRECTIVE_201063EU_on_the_pr otection_of_animals_used_for_scientific_pur poses.
ДОКЛИНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА КОМПЛЕКСНОГО СРЕДСТВА «N-98» НА БЕЛЫХ
МЫШАХ
Новоселов О.Н., Медетханов Ф.А., Конакова И.А.
Резюме
В данной статье приведены результаты исследования острой токсичности комплексного средства под лабораторным шифром «N-98» на белых мышах. Дана оценка их общего состояния на момент интрагастрального и внутримышечного введения средства на основе сырья природного происхождения и в течение 14 суток после его использования, а также показатели массы тела и результаты вскрытия с последующим описанием состояния внутренних органов.
На основе полученных данных сделано заключение, что комплексное средство под лабораторным шифром «N-98» в токсикологическом отношении безопасно для белых мышей, так как не вызывает их гибели и характерных патологических изменений их органов на момент вскрытия.
PRECLINICAL EVALUATION OF THE COMPLEX DRUG "N-98" ON WHITE MICE
Novoselov O.N., Medetkhanov F.A., Konakova I. А. Summary
This article defines the parameters of acute toxicity of a complex agent under the laboratory code "N-98" on white mice. An assessment of their general condition is carried out at the time of intragastric and intramuscular injections of the drug based on raw materials of natural origin and within 14 days after administration, as well as body weight indicators are measured and an autopsy of white mice is performed with a further description of the state of internal organs.
Based on the data obtained, the author concludes that this complex agent is toxicologically safe when used on mice, since it does not cause their death and characteristic pathological changes in their organs during autopsy.
