Доклиническая оценка функциональных пищевых ингредиентов полифенольной природы Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

Материалы XVII Всероссийского конгресса с международным участием «Фундаментальные и прикладные аспекты нутрициологии и диетологии. Лечебное, профилактическое и спортивное питание» (Москва, 29-31 октября 2018 г.)

Семин М.О.

ПОИСК И ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ МАРКЕРОВ КАЧЕСТВА И БЕЗОПАСНОСТИ ПИЩИ С ПОМОЩЬЮ МЕТОДОВ КОНФОКАЛЬНОЙ ЛАЗЕРНОЙ ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ МИКРОСКОПИИ И ИММУНОГИСТОХИМИИ

ФГБУН «ФИЦ питания и биотехнологии», Москва

Актуальность. Актуальной задачей является поиск, выявление и оценка информативности новых биологических маркеров, позволяющих на ранних этапах идентифицировать и прогнозировать течение алиментарно-зависимых заболеваний, а также оценивать эффективность диетических лечебных и профилактических пищевых продуктов.

Цель исследования - поиск новых чувствительных биологических маркеров для разработки и оценки эффективности специализированных пищевых продуктов в системе алиментарно-зависимых заболеваний при помощи методов конфокальной микроскопии и иммуногистохимии.

Материал и методы. Материалом исследования являлись линейные лабораторные животные - in vivo модели алиментарно-зависимых заболеваний, в частности ожирения и метаболического синдрома. В качестве методов были использованы методы имуногистохимии и конфокальной микроскопии.

Результаты. Проведено исследование степени накопления липофусцина в ткани печени крыс и мышей разных линий на in vivo на высокофруктозной диет-индуцированной модели метаболического синдрома. Показан разный ответ в зависимости от пола, линии и вида животных. Крысы аутбредной линии Wistar в контрольной и опытной (30% раствор фруктозы вместо воды) группах не имели визуально определяемых количеств липофусцина в гистологических препаратах ткани печени. Крысы инбредной линии Dark Agouti, напротив, на фоне высокого уровня липофусцина в ткани печени не показали изменения между контрольной и опытной группами после 2 мес кормления рационами с избыточной квотой фруктозы. На инбредной линии мышей BALB/c показано резкое накопление липофусцина в ткани печени в группе и избыточной квотой фруктозы после 2 мес кормления.

На тех же линях мышей и крыс было изучено влияние и локализация маркера JNK1 в клетках печени. Накопление JNK1 происходило преимущественно у самок животных линии Dark Agouti в группе с избыточной квотой фруктозы.

Обсуждение. Самки инбредной линии мышей BALB/c, и Dark Agouti могут быть использованы для воспроизведения высокофруктозной диет-индуцированной in vivo модели метаболического синдрома в отношении исследования патологических изменений в печени на примере накопления липофусцина и маркера JNK1.

Заключение. В настоящей работе при помощи методов конфокальной микроскопии и иммуногистохимии было показано, какие изменения происходили в клеточной и тканевой локализации ключевых биомаркеров, включая маркеры JNK 1 и накопления липофусцина в клетках печени животных, страдающих алиментарно-зависимыми заболеваниями, и как на данные изменения влияют активные компоненты специализированных диетических пищевых продуктов.

Сидорова Ю.С., Шипелин В.А.

ДОКЛИНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ПИЩЕВЫХ ИНГРЕДИЕНТОВ ПОЛИФЕНОЛЬНОЙ ПРИРОДЫ

ФГБУН «ФИЦ питания и биотехнологии», Москва

Актуальность. Нарушение пищевого статуса оказывает значимое влияние на показатели состояния здоровья человека, является серьезным фактором повышенного риска возникновения, развития и протекания многих неинфекционных заболеваний, в том числе сахарного диабета 2 типа (СД). Разработка специализированных пищевых продуктов (СПП) с оптимизированным химическим составом за счет обогащения, элиминации, модификации или замещения отдельных макро- и микронутриентов, позволяющих корригировать хроническую гипергликемию и метаболические нарушения, лежащие в основе СД 2 типа, является важным направлением диетологии и нутри-циологии. В качестве природного пищевого ингредиента особый интерес вызывает черника, вследствие широкого спектра полифенолов, содержащихся как в ягодах, так и листьях. На первом этапе создания таких СПП должны быть учтены результаты сравнительных экспериментальных исследований in vivo по оценке влияния входящих в их состав БАВ на биомаркеры патофизиологической картины заболевания. Линия тучных диабетических крыс-самцов ZuckerRatCrl: ZUC-Leprfa (ZDF) является традиционной тест-системой в экспериментальных исследованиях при изучении СД, поскольку у взрослых особей развиваются характерные для данного заболевания признаки (инсулиннезависимая гипергликемия, ожирение, гиперхолестеринемия). Медикаментозной альтернативой является модель стрептозотоцинового (СТЦ) СД на грызунах, потребляющих рационы с высоким содержанием фруктозы.

Цель данной работы - сравнительные доклинические исследования in vivo гипогликемического влияния потребления экстракта листьев черники (ЭЛЧ) на крыс-самцов линии Wistar, потреблявших высокофруктозный рацион и подвергнутых воздействию СТЦ, и диабетических тучных крыс-самцов ZDF.

Физиология и биохимия питания

Материал и методы. В первом эксперименте продолжительностью 88 дней использовали 40 крыс-самцов линии Wistar: контрольная группа (n=10) и опытная группа (n=30). Сахарный диабет у опытной группы моделировали путем однократного внутрибрюшинного (в/б) введения СТЦ на фоне употребления 10% раствора фруктозы ad libitum вместо воды. Опытную группу делили на диабетический контроль и диабетический опыт. Крысы диабетической опытной группы получали питье в виде водного раствора ЭЛЧ. Во втором эксперименте использовали 12 крыс-самцов ZDF. Животные были разделены на 2 группы: контрольная (n=6) и опытная (n=6). Животным опытной группы ежедневно внутрижелудочно вводили ЭЛЧ в дозе 2 г/кг массы тела, животным контрольной группы внутрижелудочно вводили дистиллированную воду.

По окончании экспериментов в крови животных определяли интегральные показатели, показатели липидного обмена (общее содержание гликированного гемоглобина, триглицеридов, холестерина, ЛПВП и ЛПНП), а также уровни С-пептида, инсулина и ряда других биохимических показателей.

Результаты и обсуждение. В первом эксперименте было показано, что потребление в течение 30 сут 10% раствора фруктозы и однократное в/б введение СТЦ в дозе 50 мг/кг массы тела крысам линии Вистар приводило к развитию на 38-е сутки устойчивой гипергликемии. На 60-е сутки эксперимента у животных, потреблявших ЭЛЧ, гипергликемия снизилась до нормальных значений у 50% крыс. Снижение гипергликемии не наблюдалось ни у одного животного контрольной диабетической группы. Уровень триглицеридов в сыворотке крови был достоверно понижен у крыс, потреблявших ЭЛЧ, по сравнению с крысами контрольной группы. Содержание ЛПНП и ЛПВП в сыворотке крови крыс, потреблявших ЭЛЧ, и у интактных животных не отличались.

На втором этапе работы были протестированы гипогликемические и гиполипидемические свойства раствора ЭЛЧ, при его внутрижелудочном введении в течение 28 сут генетической линии тучных крыс ZDF в дозе 2 г/кг массы тела животного. Уже после 15 сут кормления в группе животных, получавших ЭЛЧ, наблюдался достоверно меньший прирост массы тела по сравнению с контрольной группой, вместе с тем по окончании эксперимента также было установлено достоверное снижение массы печени и увеличение массы мозга. Уровень глюкозы в крови животных опытной группы в течение всего исследования значимо не повышался и на 29-е сутки был достоверно ниже, чем у животных контрольной группы. В сыворотке крови опытных крыс было обнаружено значительное снижение щелочной фосфатазы, АСТ, общего холестерина и ЛПВП по сравнению с контрольными животными. Выраженная тенденция к структурной нормализации в органах-мишенях (почки, печень и поджелудочная железа) на фоне употребления ЭЛЧ также была подтверждена результатами гистологического анализа.

Заключение. У крыс-самцов линии Вистар с гипергликемией, индуцированной введением СТЦ и диетой с высоким содержанием фруктозы, потребление экстракта листьев черники в течение 7 нед приводило к снижению уровня глюкозы и гликированного гемоглобина в крови и оказывало положительное влияние на прирост массы тела. У тучных крыс-самцов линии ZDF, в/ж введение в течение 4 нед экстракта листьев черники ингибировало развитие гипергликемии, приводило к снижению чувствительности к глюкозе и улучшало реакцию инсулинчувствительных тканей на экзогенное введение глюкозы и инсулина. Представляется перспективным включение ЭЛЧ в качестве функционального пищевого ингредиента в состав СПП антидиабетического действия.

Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда (проект № 14-36-00041). Супрун С.В., Кудерова Н.И., Евсеева Г.П., Лебедько О.А.

КОМПЛЕКСНАЯ ОЦЕНКА ФАКТИЧЕСКОГО ПИТАНИЯ БЕРЕМЕННЫХ ЖЕНЩИН ПРИАМУРЬЯ

Хабаровский филиал ФГБНУ «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания» - НИИ охраны материнства и детства

Актуальность. Питание как источник основных жизненно необходимых ингредиентов определяет качество жизни и состояние здоровья населения в разные возрастные периоды. На этапе гестации в организме женщин наблюдается ряд морфофункциональных изменений, которые носят адаптационный характер, направлены на обеспечение и удовлетворение потребности в системе «мать-плацента-плод». Физиологическое течение беременности обеспечивается координированной работой ряда органов и систем: формированием определенного соотношения белкового, углеводного, липидного и других обменов, в том числе функционированием иммунокомпетентных клеток крови (ИКК), их энергообеспеченностью. Дисбаланс компонентов в рационе питания женщины и, как результат, нарушения в биохимических показателях крови, может явиться важным патогенетическим звеном формирования ряда патологических состояний, в том числе осложнений течения и исходов беременности. Комплексная оценка фактического питания беременных женщин на примере Приамурья с целью обоснования коррекции нарушений пищевого статуса является важной задачей акушерства и педиатрии.

Материал и методы. Оценка нутриентного статуса у женщин (n=181) беременных и вне беременности проводилась в городской женской консультации в 3 этапа: 1 - регистрация суточного рациона питания по меню-раскладкам; 2 - определение белков, жиров, углеводов биохимическим методом в суточных порциях; 3 - ранжирование продуктов фактического питания по значимости дефицита, расчета интегральных показателей функционального отклика организма (ИПФО), оценка пищевой адекватности по корреляционным связям биохимических показателей крови белкового, липидного, углеводного обменов и энергетической обеспеченности на основе исследования мембранного потенциала митохондрий (МПМ) ИКК на проточном цитометре (BD FACSCalibur, USA).