CC BY
30
Динамика уровней интерлейкинов ИЛ- 1р и ИЛ- 2 в слюне у больных катаральным гингивитом терминальной стадии хронической болезни почек и сахарным диабетом второго типа при локальной иммунокоррекции полости рта
Д.А.Бабаев, С.З.Алиев, Л.М.Ахмедова, Г.К.Гаджиева, Ш.М.Рагимова
Азербайджанский Государственный Институт Усовершенствования Врачей имени А.Алиева, г.Баку, Кафедра стоматологии и челюстно - лицевой хирургии,
Центральная научно - исследовательская лаборатория
В настоящее время сотни тысяч больных страдающих хронической болезнью почек (ХБП) находятся на лечении программным гемодиализом (четырех часовые процедуры 3-4 раза в неделю). Программный гемодиализ остается основным видом заместительной почечной терапии во всем мире и в Азербайджане [1,2].
У пациентов терминальной стадией хронической болезнью почек наблюдается иммунологическое состояние, приводящее к нарушению иммунорезистентности и дисбалансу цитокиновой регуляции [3,4].
У больных на программном гемодиализе возникает цитокинемия, связанная с уремией, вследствие болезни почек 5 стадии (тХБП). Процедура заместительной почечной терапии выступает мощным провоспа-лительным стимулом, способствующим дальнейшему увеличению секреции цитоки-нов [2,3]. Средние концентрации большинства провоспалительных цитокинов у пациентов находящихся на программном гемодиализе в 7 раза выше, чем у здоровых лиц [5].
Цитокины являются основными медиаторами иммунного ответа и первыми реагируют на воспалительный процесс, их уровень в динамике лечения позволяет оценить эффективность проведенного лечения. Провоспа-лительные цитокины ИЛ - 1р и ИЛ - 2 первыми реагируют на воздействие микробного фактора и защищают реакцию воспалитель-но-регуляторного распада, играя главную роль в развитии местного воспаления [6,7].
Гемодиализ инициирует воспалительную реакцию за счет влияния на клетки крови и модификации белков диализными мембранами. Это приводит к поддержанию хронического воспаления, что на фоне изменения
состояния иммунной системы может привести к выраженному дисбалансу состояния цитокиновой сети [3,8].
У больных тХБП на фоне гемодиализного лечения и иммунодефицитного состояния основного заболевания отмечается плохая гигиена полости рта, что является фактором риска развития кариеса и воспалительных заболеваний пародонта. При гингивите и па-родонтите в полости рта происходят выраженные изменения, связанные с нарушением местных защитных механизмов, что приводит к развитию воспалительных процессов [9]. Под влиянием зубного налета и микробной пленки происходит активация иммунных клеток, что отражается в повышении их способности синтезировать и секретировать ИЛ - 1р и ИЛ - 2 [9,10].
ЦЕЛЬ исследования - определить уровни ИЛ - 1р и ИЛ - 2 в слюне при катаральном гингивите у больных тХБП и СД-2 типа и исследовать их динамику в результате локальной иммунокоррекции.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Проведено обследование и лечение 24 больных тХБП и СД-2 типа, находящихся на программном гемодиализе в Республиканской клинической урологической больнице имени Академика М.Д.Джавад-заде. Гемодиализ осуществлялся на аппарате "искусственная почка" фирмы Рге7ешш (Германия) с использованием бикарбонатного диализирующего раствора. Гипокоагуляция на диализе осуществлялась введением гепарина.
Проведен анализ медицинских докумен-таций больных тХБП и СД-2 типа - 36 историй болезни, по которым определено общее состояние здоровья. При осмотре у 12 пациентов в полости рта было более 10 удален-
ных зубов, в результате заболеваний паро-донта. Эти больные были исключены из наших исследований.
Для изучения стадии компенсации углеводного обмена проведено исследование определения гликированного гемоглобина (HbAlc). В состоянии компенсации и суб-компенсации(НЬЛ1с до 7.0%) находились 41.7% больных и в стадии декомпенсации (HbAlc более 7.0%)-58.3% больных.
Всем пациентам проведена базисная терапия с включением профессиональной гигиены полости рта и назначено полоскание растворами Трахисан- (Alpen Pharma- Germany) в течение 15 дней и Стомангинол (HerbaFlora- Азербайджан) в течение следующих 15 дней). Оба ополаскивателя использовались в виде ротовых ванночек 3-4 раза в день, а в некоторых случаях Трахисан назначался в виде рассасывающих 5-6 таблеток в сутки в течение этого же периода. В состав Трахисана входят- Хлоргексидин биглюко-нат и Лидокаин, а в состав Стомангинола-мятный экстракт, экстракт календулы, экстракт шалфея. Оба препарата рекомендовали использовать после приема пищи.
Трахисан представляет собой комбинацию в одном препарате противовоспалительных и обезболивающих компонентов -лидокаина и противомикробный компонент - хлоргексидин биглюконат. Хлоргексидин биглюконат - антисептик широкого спектра действия активен в отношении вегетативной грамположительных и грамотрицательных микробов, дрожжей, дерматофитов.
Стомангинол- природный антисептик полости рта. В его состав входят: мятный экстракт, экстракт календулы, экстракт шалфея, глицерин и очищенная вода. Препарат обладает антибактериальным, противовоспалительным и обезболивающим эффектами в полости рта, устраняет неприятный запах изо рта, препятствует образованию зубного налета и зубного камня на зубах.
Пациенты тХБП и СД-2 типа распределены на две группы в зависимости от проводимой терапии. Первую группу (контрольную) составили 10 пациентов, которым проводилась базисная терапия. Во 2 группу (n=14) вошли пациенты, которым кроме базисной-терапии проводилась локальнаяиммунокор-
рекция в виде аппликаций стимулированными аутолейкоцитами. По разработанной методике аппликат на тонкой марлевой салфетке апплицировали на поверхность десен на 1 час за 1 час до приема пищи.
Средний возраст больных в 1-ой группе составил 62.5%±2.5 года (минимальный - 48, максимальный-75 лет). В 1-ой группе мужчин было 5 (50%), женщин 5 (50%). Давность гемодиализного лечения в 1 -ой группе в среднем составила 6.0± 1.0 лет (минимальный - 1, максимальный- 13). В 1-ой группе давность гемодиализного лечения до 3 лет составили 1 (10%), от 3 до 5 лет- 3 (30%) и более 5 лет- 6 (60%) больных. Во 2-ой группе (n=14) возраст больных в среднем составил 62.6±2.5 лет (минимальный - 46, максимальный- 79). Из них женщин было 9 (64.2%) и мужчин 5 (35.8%). Давность заболевания 2.9±0,4 лет (минимальный- 1 год, максимальный-5 лет). Во 2-ой группе давность гемодиализного лечения до 3 лет составила 6 (42.9%) больных, от 3 до 5 лет - 5 (35.7%) и больше 5 лет -3 (21.4%) больных.
Всем пациентам, включенным в исследование были определены состояние твердых тканей зубов по индексу КПУ (кариес, пломба, удаленные), тканей пародонта по индексу РМА (папиллярно- маргинально- альвеолярный- Parma, 1960) и индексэффективности гигиены полости рта по индексу PHP-(Podshadley A.G., Haley P., 1968).
Забор нестимулированной слюны проводили до и через 1 месяц после проведения профессиональной гигиены, использования антибактериальных ополаскивателей (1 группа), и локальной иммунокоррекции (2 группа). Образцы слюны собирали в первой половине дня до начала сеанса гемодиализа. Непосредственно перед сбором слюны пациентам рекомендовали прополоскать полость рта теплой водой. Образцы слюны были профильтрованы через 3 слоя марли, затем слюну центрифугировали и надосадочный слой немедленно замораживали при t = -20°C в микропробирках типа "Эппендорф". Размораживание производили в день проведения анализа. Измерение цитокинов ИЛ- 1ß и ИЛ- 2 в слюне проводили иммунофермент-ным анализом (ИФА) набором реагентов
Вектор-Бест (Новосибирск) на анализаторе Бю8сгеепМ8-500.
Статистическая обработка данных выполнялась с применением медицинских программных средств MicrosoftExcel 2007 г. Полученный цифровой материал представлен в виде средней арифметической величины (М), ошибки средней величины (т). На основании критерия и (Вилкоксона-Манна-Уитни) между группами рассчитывали вероятность различий (Р). Различия считали достоверными при Р<0,05, высокодостоверными при Р<0,01 и недостоверными при Р>0,05 [11].
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ. Анализ жалоб пациентов
при расспросе и клинические симптомы, выявленные при осмотре позволили получить данные, представленные на рисунке 1. Большинство больных жаловались на сухость в полости рта, ксеростомия (75%), на неприятный запах изо рта, галитоз (66.7%), на кровоточивость десен при чистке зубов (70.8%),. Жалобы на боли от различных раздражителей предъявляли (58.3%) больных. При осмотре отечность слизистой оболочки полости рта выявлена в 100% случаев, гиперемия десен в 62.5%, неудовлетворительный уровень гигиены в 79.2% больных.
%
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
I Сухость в полости рта (75%)
I Неприятный запах изо рта(66,7%)
I Боли от различных раздражителей (58,3%)
I Кровоточивость дёсен(70,8%)
I Отечность слизистой оболочки (100%)
I Гиперемия десны(62,5%)
I Неудовлетворительный уровень гигиены(79,2%)
Рис. 1 Комплексные жалобы симптомов поражения полости рта у больных катаральным гингивитом
Проведенные исследования твердых тканей зубов, гигиенического состояния полости рта, тканей пародонта и уровня интер-лейкинов ИЛ-1Р и ИЛ-2 в слюне у больных тХБП и СД-2 типа выявили наличие значимых изменений. В результате комплексного стоматологического обследования установлена поражаемость зубов кариесом. В 1 -ой группе индекс КПУ в среднем составил 14.3±1.7, во 2-ой группе-12.4±1.3. В 60% случаев кариозные полости в 1 -ой группе локализовались в пришеечной области, во 2-ой группе в 35.7% случаев. У обследуемых больных отмечалась неудовлетворительная
гигиена полости рта, в 1-ой группе индекс РНР составил 32.3±4.1, во 2-ой группе -2.62±3.1.
Составляющие индексы гигиены свидетельствовали о значительном количестве зубного налета и зубного камня. Уровень гигиены полости рта оценен как удовлетворительный у 40% больных в 1-ой группе и у 85.7% во 2-ой группе. Неудовлетворительная гигиена выявлена у 50% больных в 1-ой группе и у 34.2% во 2-ой группе. Уровень гигиены в обследуемых группах был плохой, поэтому увеличивается и показатель РМА,
свидетельствующий о хроническом воспали- тельном процессе (таблица 1).
Таблица 1. Индексная оценка состояния полости рта у больных катаральным гингиви-
Показатели Контрольная группа Основная группа
До лечения Через 1 месяц после лечения До лечения Через 1 месяц после лечения
КПУ 13.7±1.8 14.3±1.7 12.4±1.3 12.2±1.1
Компонент "К" 2.4±0.5 1.5±0.3 2.9±0.4 1.0±0.3*
Компонент"П" 3.4±0.3 4.8±0.4* 2.9±0.5 4.1±0.8
Компонент"У" 7.9±1.8 8.5±1.7 5.9±1.4 6.6±1.4
PHP 1.8±0.3 1.6±0.2 1.6±0.2 1.3±0.1
PMA (%) 32.3±4.1 30.8±1.4 26.2±3.1 25.2±2.7**
Примечание: * - статистическая достоверность различий данных до и после лечения; ** статистическая достоверность различий между группами после лечения
Результаты исследований уровней изучаемых цитокинов слюны представлены на рисунке 2. Анализ уровня ИЛ-1Р в ротовой жидкости до лечения выявил достоверное его повышение в обеих группах больных с катаральным гингивитом по сравнению со здоровыми. Содержание ИЛ-1Р в ротовой жидкости у больных контрольной группы (60.5±3.8 пг/мл) и основной группе (61.2±2.7 пг/мл), что было в 1.4 и 1.5 раз выше, чем у лиц со здоровым пародонтом (42.2±5.6 пг/мл), что согласуется с данными литературы о характерном для ИЛ-1Р росте при раз-
витии воспалительного процесса в пародонте [12].
Содержание провоспалительного цитоки-на ИЛ - 2 в ротовой жидкости больных контрольной и основной групп было также достоверно выше содержания ИЛ-2 относительно практически здоровых. Уровень ИЛ-2 в ротовой жидкости до лечения у больных контрольной группы (24.8±1.4) был в 1.6 раз выше уровня ИЛ-2 относительно данных у здоровых лиц (13.6±2.9). Уровень ИЛ-2 у больных основной группы (24.6±1.1) был в 1.5 раза выше, чем у здоровых.
= норма Ш до лечения У/, после лечения
пг/мл
Контрольная Основная Контрольная Основная группа группа группа группа
ИЛ 1р ИЛ 2
Рис. 2 Содержания ИЛ - 1р и ИЛ - 2 (пг/мл) в слюне у больных катаральным гингивитом с тХБП и СД-2 типа в динамике лечения
После лечения у 30% больных в 1-ой группе и у 14.2% во 2-ой группе отмечалось незначительное воспаление, характеризующееся легкой гиперемией, отеком маргинального края десен и межзубных сосочков, кровоточивость. Индекс РМА в 1-ой группе составил 30.8±1.4%, во 2-ой группе 25.2± 2.7% (p<0.05), индекс РНР 1.6±0.2 и 1.3±0,1 соответственно, что свидетельствовало об улучшении гигиенического состояния и снижения воспаления в тканях пародонта.
Улучшение клинических проявлений воспалительных изменений в пародонте, сопровождалось достоверным снижением выраженности цитокинов. На фоне различных методов лечения в контрольной и основных группах было достигнуто снижение в ротовой жидкости уровней ИЛ-1Р и ИЛ-2. Однако, степень достигнутых изменений цитоки-нов в исследуемых группах была неодинаковой.
Анализ полученных результатов показал, что снижение ИЛ -1р в контрольной и основной группах не достиг уровня данного показателя у здоровых лиц с интактным па-родонтом. Исследования показали, что уровень провоспалительного цитокина ИЛ-1Р в ротовой жидкости больных, достоверно различавшийся до лечения, после проведенного лечения наиболее выраженно снижался в основной группе. После профессиональной гигиены и полосканий полости рта в контрольной группе наблюдалось снижение ИЛ-1р. Уровень ИЛ-1Р снизился в 1.2 раз относительно данных до лечения и составил 51.5±1.4 пг/мл. В основной группе после базисного лечения и локальной иммунокор-рекции уровень ИЛ-1Р снизился в 1.3 раз относительно данных до лечения и в среднем составил 46.5±1.3 пг/мл. Достигнутый уровень ИЛ - 1р в основной группе был достоверно ниже, чем в контрольной группе (p<0.05) и приближался к данным у лиц с интактным пародонтом, ввиду чего статистически устойчивой достоверности различий выявлено не было.
Аналогичные изменения нами были прослежены и при анализе содержания ИЛ-2 в ротовой жидкости у пациентов с катаральным гингивитом после различных подходов
в лечении. Наиболее выраженно снизился уровень ИЛ-2 у больных, которым в комплексном лечении катарального гингивита были использованы аппликации стимулированными аутолейкоцитами. Достигнутый уровень ИЛ-2 у пациентов основной группы, статистически недостоверно отличался от показателей у пациентов с интактным паро-донтом. Уровень ИЛ-2 был достоверно снижен также и по отношению данных в контрольной группе, но это снижение было статистически не значимо (p>0.05).
Таким образом, результаты исследования подтвердили эффективность комплексного лечения катарального гингивита методом локальной иммунокоррекции. Предлагаемое комплексное лечение позволило снизить воспаление в тканях пародонта и можно предположить, что использование методов локальной иммунокоррекции станет основой для предупреждения прогрессирования воспалительных изменений в тканях пародонта.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бабаев Ф.Г., Гусейнов Х.М. Служба гемодиализа в Азербаджанской республике // Казанский медицинский журнал 2015, N4, с.578-580.
2. Гумелевская О.П., Вахания К.П., Рати-нина Н.С. Особенности цитокинового профиля пациентов с рецидивирующими тромбозами артериовенозных фистул, получающих программный гемодиализ. // Вестник ВолгГМУ, 2014, N1, с.56-58
3. Вахания К.П. Комплексная лабораторная оценка факторов риска тромбозов сосудистого доступа у пациентов на гемодиализе: Автореф. дисс. ... канд. мед. наук. М., 2014, 23 с.
4. Осиков М.В., Телешева Л.Ф, Агеев Ю.И. Патофизиологические аспекты изменения и коррекции врожденного им-та при хронической почечной недостаточности // Современные проблемы науки и образования, 2013, N5, с.24-27
5. Рагимова Р.Р., Азизова Г.И., Эфендиева А.М. Изучение некоторых цитокинов и иммунных параметров при хронической почечной недостаточности // Цитокины и воспаление, 2009, N4, с.25-28
6. Зверев В.В. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. М. ГЭОТАР- Медиа, 2014. Т.1, 448 с.
7. Клиническая лабораторная диагностика: Национальное руководство / Под ред. проф.
B.В.Долгова, проф. В.В.Меньшикова. М.: ГЭОТАР- Медиа. 2013, 808 с.
8. Крышень К.Л., Гусева С.И., Тесакова
C.В. Оценка противовоспалительного действия лекарственных препаратов на основе шалфея // Цитокины и воспаление, 2009, N4, с.21-24
9. Самойлов К.О. Особенности биоцидно-сти нейтрофилов периферической крови и ротовой жидкости у больных хроническим пародонтитом // Институт стоматологии, 2009, Т.2, N43, с.23-26
10. Струк В.И., Ватаманюк Н.В. Показатели цитокиновой системы как маркеры доклинической стадии генерализованного па-родонтита у больных катаральным гингивитом. // Вестник стоматологии, 2014, N3, с.35-38
11. Трухачева Н.В. Математическая статистика в медико-биологических исследованиях с применением пакета statistica. М.: ГЭОТАР- Медиа, 2012, 384с.
12. Грудянов А.И., Киченко С.М., Максе-ва. Динамика концентрации цитокинов в раневом инфильтрате пародонтального кармана при лечении эндодонто-пародонтальных
поражений // Фарматека. Стоматология, 2014, N3, с.24-26.
SUMMARY
Dynamic of IL-ip and IL-2 interleykynes in saliva among the patients with cattarhal gingivitis of chronic renal disease and second type dyabetes during local immunocorrection of oral cavity
J.A.Babayev, S.Z.Aliyev, L.M.Ahmedova, G.K.Haciyeva, Sh.M.Rahimova
Azerbayjan State Advanced Training Institute for Doctors' named after A.Aliyev, Baku
By the purpose of evaluation of local immunocorrection efficiency during the treatment of cattarhal gingivitis clinical research with participation of 24 patients with tXRD and 2-nd type dyabetes was conducted. In control group after professional hygiene patients used conditioners Trachisan and Stomanginol. In basic group along with this was used local im-munocorrection. In both groups 1 month later after treatment was indicated decrease of PMA and PHP indexes and levels of IL-1P and IL-2. Along with this, statically significant difference received according to data of dental index PMA and IL-1P between groups, that points about efficiency of conducted complex therapy.
Поступила: 05.11.2016
Эффективность интерферонотерапии у новорожденных с задержкой внутриутробного развития
Гараева С.З., Гулиев Н.Д.
Азербайджанский Медицинский Университет, Азербайджанский медицинский университет, Кафедра детских болезней II лечебно-
профилактического факультета, г.Баку
ственно, у плода и новорожденного [1,5,6]. Одним из основных компонентов врожденного иммунитета является продукция интер-феронов, которая определяет важнейшую роль иммунной системы в противовоспалительной и противоинфекционной последовательности цитокинов. Выявляемые изменения системы интерферона помогают в выбо-
Задержка внутриутробного развития (ЗВУР) представляет собой актуальную проблему для современной перинатологии и педиатрии в целом. Плацентарная недостаточность, будучи причиной задержки внутриутробного развития, является фактором риска развития иммунодефицитных состояний в фетоплацентарном комплексе и, соответ-
