Динамика ультраструктурных изменений в тканях шейки матки крыс в раннем послеродовом периоде Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

УДК 618.7:618.714:611.018.61

ДИНАМИКА УЛЬТРАСТРУКТУРНЫХ ИЗМЕНЕНИЙ В ТКАНЯХ ШЕЙКИ МАТКИ КРЫС В РАННЕМ ПОСЛЕРОДОВОМ ПЕРИОДЕ

© 2016 Ю.В. Григорьева1

1 Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения

Российской Федерации

На ультраструктурном уровне прослежена динамика структурных изменений в шейке матки крыс в послеродовом периоде. Установлено, что основными процессами послеродовой инволюции в шейке матки являются: пересокращение мышечных клеток, с последующими признаками гидропической и мелковакуольной жировой дистрофии; клазмацитоз, который заключается в отделении участков цитоплазмы клеток после родов и через сутки после родов; аутофагоцитоз и апоптоз; количественные и качественные изменения строения межклеточного вещества. Отмечено, что пролиферации клеток в течение всего раннего послеродового периода не происходит. Восстановление структур клеток наблюдается со 2,5 суток после родов.

Ключевые слова: шейка матки, послеродовая инволюция, миометрий, гладкий миоцит, крысы.

Введение. Послеродовая инволюция - процесс обратного развития матки после родов, заключающийся в частичной или полной редукции ее морфологических и физиологических характеристик, сформировавшихся во время беременности и родов. Нарушение процессов инволюции матки представляет собой важную медико-социальную проблему, может служить одним из механизмов развития ряда осложнений (послеродовых гнойно-воспалительных (септических) заболеваний, кровотечений и др.), приводящих к материнской заболеваемости и даже смерти [3, 4, 10]. Анализируя данные литературы, можно сказать, что в настоящее время изучены в основном все диагностические характеристики течения пуэрперального периода, касающиеся макроскопических изменений матки, и встречаются лишь немногочисленные работы, оценивающие ее гистоструктурные изменения [1, 2, 5, 9]. Еще меньше морфологических исследований посвящено пуэрперальным изменениям в шейке матки [2, 7, 8]. Интерес к изучению данной части органа вполне обоснован, так как существует значительная функциональная разница между структурными элементами тела беременной матки и нижнего ее сегмента, включая шейку. Известно, что структурные элементы шейки матки - мышечные клетки, сосуды, компоненты соединительной ткани подвергаются распаду и жировому перерождению, но ее восстановление происходит медленнее [2].

Цель исследования: на ультраструктурном уровне изучить морфологические проявления и проследить динамику структурных изменений в шейке матки крыс в послеродовом периоде. Учитывая длительность периода послеродовой инволюции у человека, составляющую 6-8 недель, мы сочли допустимым соотнести продолжительность беременности и послеродового периода человека и крысы. Исходя из сказанного, срок послеродовой инволюции у крысы составляет 4-5 дней.

Материал и методы. Материалом для исследования служила шейка матки крыс сразу после родов, через 1, 2, 5 и 4 суток пуэрперального периода. В работе было использовано 20 крыс. Экспериментальные исследования проводились в соответствии с «Руководством по содержанию и использованию лабораторных животных». В работе использован метод трансмиссионной электронной микроскопии. Для этого материал подвергали фиксации

в 2,5 % растворе глутарового альдегида на 0,1М фосфатном буфере с рН 7,4. Затем материал помещали в 1 % раствор тетраокиси осмия. Материал промывали раствором фосфатного буфера, затем обезвоживали в спиртах возрастающей концентрации и заливали в эпон-аралдитовую смесь. Контрастирование осуществляли уранилацетатом и цитратом свинца. Для установления прицельного участка исследования сначала готовили полутонкие срезы толщиной 1-2 мкм и далее ультратонкие срезы толщиной 200-500 нм. Срезы просматривали на электронном микроскопе JEOL JEM-1400 PLUS.

Результаты исследований и обсуждение. В результате исследования установлено, что сразу после родов уменьшению размеров матки и частично шейки способствует пересокращение мышц миометрия и наружного мышечного слоя цервикса (рис. 1). Этот процесс запускается в момент родовой схватки и активно продолжается еще в течение первых суток после родов. На ультраструктурном уровне этому соответствует увеличение кавеолярного аппарата клетки, множественные инвагинации в кариолемме клетки. Пересокращение приводит к разрушению компонентов сократительного аппарата на периферии клеток, последние сохраняются в центре клетки. Обращает на себя внимание набухание митохондрий с разрушением их крист. Активному функциональному состоянию миоцитов соответствует структура ядер - в них преобладает эухроматин, а гетерохроматин располагается в виде отдельных глыбок. Кроме того, клетки наружного мышечного слоя остаются в составе функционального синцития.

Рис. 1. Миоцит шейки матки крысы в составе наружного слоя мышечной оболочки через одни сутки после родов. ТЭМ. Увел. 10000Х. 1. Ядро. 2. Разрушенные митохондрии. 3. Миофиламенты

В клетках внутреннего слоя мышечной оболочки шейки матки отмечается нарушение межклеточных контактов и выраженное разобщение клеток. Здесь преобладают процессы клазмоцитоза, запустившиеся еще в момент родов. От клеток отшнуровываются округлые участки цитоплазмы, содержащие однородный мелкодисперсный гранулярный материал (рис. 2). Содержимое последних поступает в межклеточное вещество, изменяя его количественный состав в пользу последнего. Плазмолемма клеток сохраняет целостность даже в участках отделения цитоплазматических пластинок.

Рис. 2. Миоцит шейки матки крысы сразу после родов. ТЭМ. Увел. 15000Х

Через сутки после родов становятся заметными признаки гидропической дистрофии клеток, разрушаются компоненты миофибриллярного аппарата, в ядрах отмечается конденсация хроматина. Сохранившиеся миофиламенты располагаются группами в перинуклеарной части клетки. Продолжают разрушаться межклеточные контакты. Целостность плазмолеммы клеток нарушается (рис. 3). В это время между клетками наружного и внутреннего слоев мышечной оболочки цервикса существует морфологическая разница. В составе наружного слоя преобладают клетки, в которых ядра имеют резко конденсированный хроматин. В цитоплазме заметны расширенные цистерны саркоплазматического ретикулума, что приводит к образованию вакуолей, клетки сохраняют свое расположение в непосредственной близости друг к другу. В составе внутреннего слоя клетки содержат светлые ядра, конденсация хроматина в них заметна только на периферии ядра. В цитоплазме отдельных клеток встречаются одиночные липидные капли. Необходимо отметить, что клазмацитоз сохраняется и даже нарастает, однако содержимое в отшнуровавшихся цитоплазматических пластинках представлено компонентами миофибриллярного аппарата клетки, разрушенными митохондриями, нередко в них содержатся ранее фагоцитированные клеткой частицы. Кроме того, эти пластинки отличаются от ранее описанных формой и размерами, они неправильной формы и крупнее.

Рис. 3. Клетка шейки матки крысы через 1 сутки после родов. ТЭМ. Увел. 10000Х

На 2,5 сутки резко увеличивается относительный объем межклеточного вещества, особенно за счет волокон (рис. 4). Формируются грубые разнонаправленные пучки коллагеновых фибрилл. В межклеточном веществе происходит разрушение оторвавшихся в результате клаз-мацитоза участков цитоплазмы. В это же время в саркоплазме отдельных сохранившихся клеток появляются аутофаголизосомы. Заметна множественная гибель клеток путем апоптоза.

Рис. 4. Миоциты шейки матки крысы через 2,5 сутки после родов. ТЭМ. Увел. 5000Х

На 4 сутки послеродового периода четко определяются 4 типа клеток: 1 тип - клетки, сохраняющие веретеновидную форму с палочковидным ядром и диффузно расположенными миофиламентами; 2 тип - мелкие клетки, характеризующиеся высоким ядерно-цитоплазматическим отношением; 3 тип клеток - клетки, с которой связаны множественные тонкие фибриллы межклеточного матрикса; 4 тип - гибнущие клетки с конденсированными и фрагментированными ядрами. Также в клеточном составе мышечного слоя шейки матки встречаются макрофаги, имеющие в цитоплазме фагоцитарные вакуоли (рис. 5).

Рис. 5. Миоциты и фагоцит шейки матки крысы на 4 сутки после родов. ТЭМ. Увел. 5000Х

Таким образом, в результате исследования установлено, что основными процессами послеродовой инволюции в шейке матки являются: пересокращение мышечных клеток, с последующими признаками гидропической и мелковакуольной жировой дистрофии; клазмаци-тоз, который заключается в отделении участков цитоплазмы клеток после родов и через су-

тки; аутофагоцитоз и апоптоз; количественные и качественные изменения строения межклеточного вещества.

При этом пролиферации клеток в течение всего раннего послеродового периода не обнаружено, дистрофия клеток, наблюдаемая в первые дни, носит обратимый характер, и восстановление структур клеток происходит со 2,5 суток пуэрперии и не заканчивается к концу 4 суток.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1 Бородашкин В.В. Морфологическое исследование миометрия в послеродовом периоде / В.В. Бородашкин, П.М. Самчук, Л.В. Зайцева // Сибирский медицинский журнал. - 2006. - № 7. - С. 78-80.

2 Долгих О.В. Гладкая мышечная ткань матки в период раннего пуэрперия: механизмы инволюции / О.В. Долгих, Ю.В. Агафонов, А.Л. Зашихин // Экология человека. - 2012. - № 12. - С. 31-35.

3 Маслякова Г.Н. Морфологические изменения миометрия при различных видах акушерской патологии / Г.Н. Маслякова, Е.Р. Малыбаева // Саратовский научно-медицинский журнал. - 2014. - № 10 (4). - С. 603-607.

4 Самчук П.М. Аспекты профилактики и лечения послеродовой субинволюции матки в зависимости от мор-фометрии миометрия / П.М. Самчук, В.В. Бородашкин, Л.В. Зайцева // Актуальные вопросы акушерства и гинекологии: Материалы межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 65-летию кафедры перинатологии, акушерства и гинекологии лечебного факультета КрасГМА. - Красноярск, 2007. -С. 242-244.

5 Шкурупий В. А. Исследование структурных проявлений механизмов инволюции миометрия после многократных беременностей у мышей / В. А. Шкурупий, К. С. Обединская, А.П. Надеев // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2010. - Т. 149. - № 5. - С. 487-491.

6 Шкурупий В. А. Структурные преобразования миоцитов в периоды беременности и ранней послеродовой инволюции матки / В.А. Шкурупий, Е.В. Дубинин, Н.Н. Дубинина // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2008. - № 1 (прил). - С. 97-100.

7 Allaire AD, D'Andrea N, Truong P, McMahon MJ, Lessey BA. Cervical stroma apoptosis in pregnancy. Obstet Gynecol. 2001 Mar;97(3):399-403. PubMed PMID: 11239645.

8 Owiny JR, Gilbert RO, Wahl CH, Nathanielsz PW. Leukocytic invasion of the ovine cervix at parturition. J Soc Gynecol Investig. 1995 Jul-Aug;2(4):593-6. PubMed PMID: 9420862.

9 Sagsoz H, Liman N, Alan E. Expression of vascular endothelial growth factor receptors and their ligands in rat uterus during the postpartum involution period. Biotech Histochem. 2015 Jul;90(5):361-74. doi: 10.3109/10520295.2015.1007482. Epub 2015 Mar 24. PubMed PMID: 25801298.

10 Wehrend A, Bostedt H. [The incidence of cervical dystocia and disorders of cervical involution in the post partum cow]. Dtsch Tierarztl Wochenschr. 2003 Dec;110(12):483-6. German. PubMed PMID: 14746054.

Рукопись получена: 9 июля 2016 г. Принята к публикации: 17 июля 2016 г.