CC BY
0ДИНАМ1КА ПАТОМОРФОЛОГ1ЧНИХ ЗМ1Н В ШАРАХ С1ТК1ВКИ ЧЕРЕЗ ДВОХТИЖНЕВИЙ ОПIОÏДНИЙ ВПЛИВ З ПОДАЛЬШОЮ В1ДМ1НОЮ ОПIОÏДУ ТА ЧОТИРЬОХТИЖНЕВОЮ КОРЕКЩеЮ В ЕКСПЕРИМЕНТ1
Пальтов Е. В., Ковалишин О. А., Фш В. Б., Подолюк М. В., Голейко М. В., Кривко Ю. Я.
Львгвський нацгональний медичний утверситет ¡мет Данила Галицького, кафедра нормальноХ анатомп, м. Льв1в, Украгна
DOI: https://doi.org/10.31435/rsglobal_ws/30112019/6774
ABSTRACT
Our article aims to study the pathomorphological manifestations of angio-and neuroretinopathies as a result of chronic exposure to therapeutic doses of opioid analgesics and the possibility of correction of these changes with the help of pentoxifylline at early stages of destructive changes in the layers of the retina. This goal was achieved by using a histological retinal imaging technique. Histological preparations were prepared according to the conventional method using the dyes hematoxylin, eosin, and (azan) in compliance with the method of Heidenhain.
The results of the study in the future will allow us to form a pathomorphological base, which can be used for comparative characterization of the dynamics of the growth of pathomorphological changes in the retinal layers during the short and long term exposure to low doses of opioids and the correction of these changes with pentoxifylline at the early and late stages of opioid exposure. The above will further enable us to establish the most optimal time framework for which there is a characteristic set of pathomorphological manifestations of the initial phenomena of angioneuroretinopathy in the layers of the retina, which is best exposed to corrective effects.
Citation: Paltov E. V., Kovalyshyn O. A., Fik V. B., Podoliuk M. V., Holeiko M. V., Kryvko Yu. Ya. (2019) Dynamics of Pathomorphological Changes in the Retinal Layers Due to a Two-Week Opioid Effect Followed by Opioid Withdrawal and a Four-Week Correction in the Experiment. World Science. 11(51), Vol.2. doi: 10.31435/rsglobal_ws/30112019/6774
Copyright: © 2019 Paltov E. V., Kovalyshyn O. A., Fik V. B., Podoliuk M. V., Holeiko M. V., Kryvko Yu. Ya. This is an open-access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License (CC BY). The use, distribution or reproduction in other forums is permitted, provided the original author(s) or licensor are credited and that the original publication in this journal is cited, in accordance with accepted academic practice. No use, distribution or reproduction is permitted which does not comply with these terms.
Резyльтaти стаи вщповщають плану наукових дослщжень Львiвcького нащонального медичного yнiвеpcитетy iMem Данила Галицького i e частиною науково-дослщно1' теми кафедои ноpмaльноï анатомп «Стpyктypнa оpгaнiзaцiя, aнгiоapхiтeктонiки та aнтpопомeтpичнi особливосп оpгaнiв y внyтpiшньо та позayтpобномy rap^ax pозвиткy, за умов екзо- та ендопатогених фaктоpiв» (номep дepжpeecтpaцiï 0115U000041), яка виконуеться в^одовж 2015 - 2019 pp.
Вступ. За даними втизняно1' та зapyбiжноï статистики ^аш eвpопи та aмepики i нaдaлi лишаеться актуальним питання нeконтpольовaного вживання пcиxотpопниx, сильноддачих та отощних пpeпapaтiв без медичного ^изначення [1 - 4].
Зо^ема у наукових ^оф^ьних публшащях висв^люються даш щодо пaтомоpфологiчниx змш ^исвячеш cтpyктypaм оpгaнy зоpy, що стосуеться paйдyжно -pогiвкового кута та елементам судинно1' оболонки [5 - 1G].
Дос залишаеться в^д^нтим pяд питань, що стосуються пpоявiв опiоïдноï aнгiо- та нeйpоpeтинопaтiï ^и коpeкцiï eкcпepимeнтaльниx опiоïдниx впливiв. Зо^ема до кiнця нез'ясованим е питання плавносп нapоcтaння i глибини ангю- та нeйpоpeтинопaтiй та пpояви у
ARTICLE INFO
Received: 24 September 2019 Accepted: 09 November 2019 Published: 30 November 2019
KEYWORDS
opioid,
retina,
rat,
early term, correction.
шарах сишвки на раншх термшах при повнш вiдмiнi двотижневого ошощного впливу з подальшим проведенням медикаментoзнoi корекцп.
Враховуючи вищезазначене, вважаемо, що дане дослщження е актуальним як з точки зору експериментальнoi морфологи, так i з точки зору практичнoi офтальмологи.
Матерiали та методи дослщження. Мат^алом дослщження слугували статево зрiлi, щури-самцi лши 'Wistar", в кшькосп 15-ти тварин, масою 160 г, вшом 4,5 мiсяцiв. Тваринам проводили ш'екци препарату налбуфiн дом'язово, щоденно 1 раз на добу в одному пром1жку часу (10-11 година ранку) впродовж 14 дiб. Початкова доза налбуфiну впродовж перших 2-х тижшв становила 0,212 мг/кг. Таким чином, створювали умови хрои1чного ошощного впливу [11]. В подальшому наприюнщ 14 доби вiдмiняли налбуфiн i впродовж 4 тижшв вводили пентоксифшн, щоденно 1 раз на добу в одному пром1жку часу (10-11 година ранку) впродовж 28 дiб. Доза пентоксифшну становила 2,857 мг/кг. Наприкшщ 6-го тижня забирали мат^ал для проведення мiкрoскoпiчнoгo дослщження сптавки.
Тварини пoдiленi на 3 групи. 1-а група тварин отримувала налбуфш протягом 14 дiб з наступним забором матерiалу дoслiдження (кшець 2 тижня експериментального ошощного впливу); 2-а група тварин отримувала налбуфiн протягом 14 дiб з подальшою вщмшою. А з кiндя 14 доби пентоксифшн з наступним забором матерiалу дослщження (кiнець 6 тижня експериментального коригуючого впливу). 3-я група контрольна, яка протягом 42 дiб отримувала ш'екци фiзioлoгiчнoгo розчину дом'язево в одному прoмiжку часу (10-11 година ранку) з наступним забором матерiалу дослщження (кшець 6 тижня). Yti тварини знаходились в умовах вiварiю i робота, що стосувалася питань утримання, догляду, маркування та ва iншi машпуляци проводилися iз дотриманням положень "€врoпейськoi конвенци про захист хребетних тварин, яю використовуються для експериментальних та iнших наукових цшей" [Стразбург, 1985], "Загальних етичних принцишв експериментiв на тваринах", ухвалених Першим Нацюнальним конгресом з бioетики [Кшв, 2001], Закону Украши №3447-IV «Про захист тварин вщ жорстокого поводження». Кoмiсiею з бioетики Львiвськoгo нацюнального медичного унiверситету iменi Данила Галицького встановлено, що прoведенi наукoвi дослщження вiдпoвiдають етичним вимогам згiднo наказу МОЗ Украши №231 вiд 01.11.2000 року (протокол №10 вщ 26.12.2011року), (протокол №2 вiд 20 лютого 2012 року). Перед проведенням забору прижиттевого матерiалу тварин присипляли внутршньоочеревинним введенням тioпенталу натрiю (з розрахунку 25 мг/1кг). Як матерiал для м^оструктурного дoслiдження використали oчнi яблука щурiв отриман1 методом пoсмертнoi енуклеаци з подальшим врахуванням збереження тoпoграфiчнoгo спiввiднoшення оболонок ока. Виготовляли пстолопчш зрiзи товщиною 5-7 мкм. Пстолопчш препарати готували за загальноприйнятою методикою з використанням барвника гема-тoксилiну, еозину та азану за методом Гайденгайна [12]. Мiкрoскoпiчнi дoслiдження та фотографування препаратiв здiйснювали за допомогою м^оскопа МБ1-1 i цифровим фотоапаратом Nicon D 3100.
Результати дослiдження. Через шють тижнiв експерименту в щурiв, яким впродовж двох тижнiв вводили ошощ, а згодом впродовж чотирьох тижн1в введення ошощу було вщмшено та була проведена щоденна корекщя пентоксифштом, структура пiгментнoгo епiтелiю (I) збережена. Лише мюцями клiтини шгментного епiтелiю рoзмiщуються нещiльнo. Ядра кштин у таких дiлянках дещо просвплет, цитоплазма нерiвнoмiрнo набрякла, прoсвiтлена, вакуoлiзoвана. Базальна мембрана на окремих дшянках нео, ¡идно на рис. 1.
Рис. 1. Сгтювка щура за умов двотижневого введення отогду з подальшою чотиритижневою його в1дмтою та корекц1ею пентоксифштом. Заб. гематоксил1ном та еозином. Зб. х 1000. 1- незначна деструктуризащя зовтштх дыянок фоторецептор1в; 2- просв1тлення цитоплазми та набряк ядра тгментного еттелюцита; 3- неоднор1дтсть тарозр1дження базальног мембрани.
\
I
У фотосенсорному шарi (II) зовшшш дшянки поодиноких фото сенсорних кл^ин розрiдженi, вкорочеш, спостерiгаeться незначне руйнування зовнiшнiх дшянок фоторецепторiв, як це показано на рис. 2. На окремих дшянках у фотосенсорний шар перемщуються ядра фотосенсорних клiтин.
Рис. 2. Сгткгвка щура за умов двотижневого введения отогду з подальшою чотиритижневою його в1дмтою та корекц1ею пентоксифтном. Заб. гематоксил1ном та еозином. Зб. х 1000. 1 - вакуол1зац1я цитоплазми б1полярних кл1тин.
Структура зовшшнього пограничного шару (III) збережена. У зовшшньому ядерному шарi (IV) мюцями спостер^аються ядра неправильно! форми, iнодi - шкнотичш, промiжки мiж ними розширеш, як це видно на рис. 3 та рис. 4.
Рис. 3. Сгткгвка щура за умов двотижневого введення отогду з подальшою чотиритижневою його в1дмтою та корекц1ею пентоксифтном. Заб. Гематоксилином та еозином. Зб. х 1000. 1- збыьшення в^дсташ м1ж ядрами зовшшнього та внутр1шнього ядерного шар1в; 2- вакуол1зац1я цитоплазми клтин внутр1шнього ядерного шару.
Рис. 4. Сгткгвка щура за умов двотижневого введення отогду з подальшою чотиритижневою його в1дмтою та корекц1ею пентоксифтном. Заб. гематоксилином та еозином. Зб. х 1000. 1- незначм пром1жки м1ж ядрами зовшшнього та внутр1шнього ядерних шар1в; 2-вакуол1зац1я цитоплазми поодиноких б1полярних та амакринових кл1тин.
У зовншньому штчастому шарi (V) виявлено поодиною транспозици ядер клiтин внутрiшнього ядерного шару, а також ядер фосенсорних нянин. Мiсцями зовнiшнiй сiтчастий шар мютить звуженi дiлянки, у яких внаслiдок змiщення ядер нервових клнин, ядра фотосенсорних клiтин розмiщуються поблизу ядер клгшн внутрiшнього ядерного шар. У внутршньому ядерному шарi (VI) структура збережена, проте ядра деяких горизонтальних клнин не формують суцшьного ряду i розмiщенi на межi з зовнiшнiм сiтчастим шаром. Дещо глибше розмiщенi ядра бiполярних клнин, як це показано на рис. 5.
Рис. 5. Сткгвка щура за умов двотижневого введения отогду з подальшою чотиритижневою його в1дмтою та корекц1ею пентоксифтном. Заб. гематоксилином та еозином. Зб. х 400.
1- збыьшення в1дсташ м1ж ядрами внутр1шнього ядерного шару; 2- вакуолгзацгя цитоплазми б1полярних та амакринових кл1тин з ознаками кар1откнозу; 3- ваколгзацгя цитоплазми ганглгонарних клгтин.
Виявлено також поодиною шкнотиш ядра бшолярних та амакринових клггин неправильно! форми, як це видно на рис. 6.
^^»ЗМ^ИЖЖШ' * i -ж
1>
5 1
4
vi--
3t. т&*
Рис. 6. Сткгвка щура за умов двотижневого введення отогду з подальшою чотиритижневою його в1дмтою та корекц1ею пентоксифтном. Заб. азаном. Зб. х 1000.
1- значм пром1жки м1ж ядрами внутр1шнього ядерного шару; 2- просв1тлення цитоплазми
амакринових кл1тин; 3- ткнотичм ядра кл1тин внутр1шнього ядерного шару; 4- пом1рне просв1тлення основног речовини внутршнього атчастого шару; 5- перемщення ядер кл1тин внутр1шнього ядерного шару у внутршнт атчастий шар.
Спостерпаеться збшьшення вщстаней мiж ядрами у клнинах внутршнього ядерного шару, вакуолiзацiя цитоплазми поодиноких бшолярних та амакринових клнин. Помнш шкнотичш ядра у внутршньому ядерному шарг Основна речовина внутршнього снчастого шару також мюцями просвнлена, набрякла. Мiж ядрами клггин внутршнього ядерного шару унаслщок цього в окремих дшянках снювки з'являються значш промiжки. Структура внутрiшнього сiтчастого шару (VII) збережена, проте в окремих дшянках зус^чаються зони просвнлення, особливо поруч з ганглiонарним шаром, як це показано на рис. 6. У внутршнш снчастий шар перемщуються ядра радiальних глiоцитiв, iнодi амакринових та ганглюнарних клiтин. У ганглюнарному шарi (VIII) теж виявлено окремi ядра неправильно! форми, пiкнотичнi, цитоплазма !х вузька, нерiвномiрно зафарбована, мюцями просвнлена, як це видно на рис. 7. На окремих дшянках снтавки ганглюнарш клiтини не формують суцшьного шару. В деяких ганглюнарних клнинах центр ядер просвнлений, хроматин розмщений по периферi! ядра. Вени, розмщеш на меж мiж ганглюнарним та нервоволокнистим шарами, розширенi, дещо
переповнеш кров'ю. Стшка артерiй незначно потовщена, набрякла, просвп звужений. У нервоволокнистому шарi (IX) виявлено невеликi мiкрокiстознi порожнини, деяю судини цього шару розширеш, переповненi кров'ю, як це показано на рис. 7 та рис. 8.
Рис. 7. Сгткгвка щура за умов двотижневого введення опгогду з подальшою чотиритижневою його в1дмтою та корекц1ею пентоксифтном. Заб. азаном. Зб. х 400. 1-розширена та переповнена кров 'ю судина, розмщена на меж гангл1онарного та нервоволокнистого шар1в; 2- вакуол1зац1я основног речовини нервоволокнистого шару; 3- вакуол1зац1я основног речовини гангл1онарного шару; 4- збыьшення в1дстаней м1ж ядрами внутршнього ядерного шару.
Присутш дшянки де спостертаеться набряк колагенових волокон внутршнього пограничного шару (X), особливо поруч з розширеними та переповненими венозними судинами, що розмщеш у нервоволокнистому шар^ як це видно на рис. 8.
Рис. 8. Сгткгвка щура за умов двотижневого введення отогду з подальшою чотиритижневою його вгдмшою та корекц1ею пентоксифтном. Заб. азаном. Зб. х 1000. 1- значне набухання (вакуол1зац1я) основног речовини нервоволокнистого та гангл1онарного шар1в; 2- збыьшення в1дстаней м1ж клгтинами ганглюнарного шару; 3- збыьшення ядер окремих ганглгонарних клгтин.
Перспективи подальших розробок. Патоморфолопчт прояви в шарах сптавки через двохтижневий вплив ото1дного анальгетику з подальшою його вщмшою та корекщею препаратом пентоксифшн впродовж чотирьох тижшв створять морфолопчне тдгрунтя для подальшого розумшня можливостей проведення корекци початкових явищ анпонейроретинопатп у шарах сптавки на раншх термшах.
Отриманi нами результати в подальшому можуть бути використаш з метою проведення порiвняльноl характеристики, що стосуеться динашки наростання патоморфолопчних змiн у шарах сiткiвки при короткотривалш та довготривалiй ди малих доз ошо1дов, що в подальшому дасть можливють розробити та порiвняти змiни пiд час проведення корегуючого впливу на раннiх та шзшх термiнах виникаючо! отощно! ангюнейроретинопати.
Висновки. Таким чином, у сптавщ щура за умов двотижневого введення ошощу з подальшою чотиритижневою його вщмшою та корекщею пентоксифшном структура шарiв сптавки збережена, лише незначно виражена вакуольна дистрофiя пiгментного епiтелiю, виявлено некротичш змiни поодиноких фотосенсорних клпин, ознаки залишкових проявiв периваскулярного набряку, незначне звуження зовнiшнього сiтчастого шару, залишковi явища транспозицл ядер фотосенсорних кштин та клiтин внутрiшнього ядерного шару у зовшшнш сiтчастий шар.
Л1ТЕРАТУРА
1. Раецька Л.В. Тенденци поширення наркоманп в Украш /Л.В. Раецька // Боротьба з оргашзованою злочиннiстю i корупцieю.- 2008.- С. 318.
2. Адрашкин А.П. Роль сердечно - сосудистой системы в танатогенезе у опийных наркоманов второй стадии /А.П. Адрашкин, И. В. Саломатин, Б.Ф. Мурашов [и др.] // - М.,- 2003.- С18.
3. Логаш М.В. Деяю аспекти ютори отапв в контексп сучасних проблем наркозалежносп / М.В. Логаш, П. Б. Покотило // Вiсник проблем бюлоги та медицини. - 2013. - Вип. 4, Т. 1.(42) - С. 129 - 131.
4. Трещинский И.С. Некоторые вопросы наркомании и токсикомании на Украине [Текст] / И.С. Трещинский, Л.А. Харченко, В.А. Усенко // Провизор. - 1998. - № 4 . - С. 15 - 17.
5. Якимiв Н.Я. Токсичне ураження зорових нервiв внаслщок тривалого прийому левомщетину на rai наркотично! залежносп вiд кодтерпiну / I. Я. Новицький, Н. Я. Якимiв, О. М. Срохова [та iн.] // Офтальмол. журнал. - 2012. - № 3. - С. 43-45.
6. Якишв Н. Я. Мшроструктурна характеристика райдужно-ропвкового кута очного яблука щурiв при ото!дному впливi / Н. Я. Якимiв, Ю. Я. Кривко // Свгт медицини та бюлоги. - 2013. - № 4. - С. 120-124.
7. Якимш Н. Я. Ультраструктурна характеристика структур райдужно-ропвкового кута очного яблука шурш на 35-у та 42-у добу ошовдного впливу / Н. Я. Якимш // Свгт медицини та бюлоги. - 2014. - № 2. - С. 185-188.
8. Якимiв Н. Я. Ультраструктурна характеристика структур райдужно-ропвкового кута очного яблука шурiв на 7-у, 14-у, 21-у, 28-у добу ото!дного впливу / Н. Я. Якимiв // Украшський морфолопчнй альманах. - 2014. - № 2. - С. 28-31.
9. Якимив Н. Я. Морфологическая характеристика структур радужно-роговичного угла крыс на разных сроках действия и на ранних сроках после отмены экспериментального опиоидного влияния / Н. Я. Якимив // Офтальмология. Восточная Европа. - 2014. - № 2. - С. 89-97.
10. Шдвальна У.С. Морфометрична характеристика перебудови судинно! оболонки очного яблука шд впливом налбуф^ / У.С. Пвдвальна // Украшський журнал Клшчно! та лабораторно! медицини. -м. Луганськ, 2013. - Т.8, №3. - С. 94-97.
11. Патент №76565 Укра!на. Споаб моделювання хротчного ото!дного впливу / С.В. Пальтов, В.Б. Фк, I.B. Вшьхова, Р.М. Онисько, О.С. Фiтькало, Ю. Я. Кривко; заявник i патентовласник Львiвський нацюнальний медичний унiверситет iменi Данила Галицького . - опубл. 10. 01. 2013, Бюл. №1.
12. Б.Ромейс Микроскопическая техника. - М.: Медицина, 1953.-с. 71 - 72.
