CC BY
46
ДИНАМИКА ИЗМЕНЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА ЛИПОПРОТЕИДОВ
Г.В. Криушинская, Н.А. Ильина
Кафедра зоологии ГОУ ВПО «Ульяновский государственный педагогический университет имени И.Н. Ульянова» пл. 100-летия со дня рождения В.И. Ленина, д. 4, Ульяновск, Россия, 432700
В статье представлены результаты липидного обмена макроорганизма (на примере крыс), которые были инфицированы лямблиями. При экспериментальном лямблиозе у крыс были определены следующие показатели: хиломикроны, липопротеиды высокой плотности, липопротеиды низкой плотности, липоротеиды очень низкой плотности, общий холестерин и триглицериды. Выяснилось, что изменения липопротеидов оказались незначительными.
Ключевые слова: лямблиоз, липоротеиды, печень.
Lamblia intestinalis вызывает гиардиоз (лямблиоз) — паразитарную инвазию, протекающую в виде латентного паразитоносительства и манифестных форм, проявляющихмя дисфункцией кишечника. В статье представлены результаты липидного обмена. Сыворотку крови заражали лямблиями экспериментальным путем и определяли такие показатели: хиломикронов, липопротеидов высокой плотности, липопротеидов низкой плотности, липоротеидов очень низкой плотности, общего холестерина и триглицеридов. Далее прослеживались изменения количества липопротеидов в сыворотке крови крыс при экспериментальном лямблиозе.
Материалы и методы. Для роста лямблий используют питательную среду, состоящую из 60% раствора Хэнкса, 25% инактивированной сыворотки, 10% основного бульона Хоттингера и 5% куриного эмбрионального экстракта. Исследования проведены на 80 белых беспородных крысах массой 120—150 г. Результаты исследования сравнивали с показателями, полученными у 40 ин-тактных животных, которые составили контрольную группу. Заражали животных взвесью, содержащей вегетативные формы лямблий и их цисты, которых должно быть не менее 5—12 вегетативных форм лямблий в поле зрения (увеличение х100). Крыс заражали этой взвесью в объеме 0,3—0,5 мл через рот. Уже с 3-го дня после заражения лямблии обнаруживаются у всех крыс. Проводили электрофоретическое разделение липопротеидов сыворотки крови на гелях агарозы на аппарате «Paragon» фирмы «Beckman» (США) [7].
Результаты обсуждения. Введение лямблий существенно не влияет на общее состояние крыс. В первые 10 дней (пик инфекции) у них наблюдался жидкий кал, количество лямблий колеблется до 50—70 в поле зрения при увеличении
в 100 раз, а с 20-го дня количество лямблий в кишечнике уменьшается, у большинства животных обнаруживаются лишь единичные паразиты. Печень — орган-мишень, является одним из основных органов, регулирующих обмен липидов. Печень играет важную роль в регуляции содержания липопротеинов в плазме крови. При всех патологических состояниях развиваются структурные изменения ткани и появляется энергетический дефицит, липидам при этом отводится особая роль [2]. В исследованиях при изучении липидного обмена установили, что изменения содержания общего холестерина в сыворотке крови у крыс при экспериментальном заражении лямблиями отмечалась тенденция к увеличению общего холестерина, при этом предел колебания был равным 1,7—2,24 ммоль/л (это были больные с большой площадью поражения тканей). Так как 80% холестерина синтезируется в печень, то можно полагать о нарушении функции гепатоцитов.
Если холестерин рассматривать как низкомолекулярный антиоксидант, то сохранения его уровня в крови у большей части больных будет свидетельствовать о том, что преобладают в эту стадию процессы антиоксидантной защиты. Это же подтверждается увеличением уровня концентрации триглицеридов в крови у крыс, зараженных лямблиями.
Что касается триглицеридов, то их уровень остался неизменным и составил 1,65%. Снижение концентрации триглицеридов говорит о том, что на уровне клеток уменьшается энергетический дефицит или за счет инфузионно-трансфузи-онной терапии или же за счет подключения процессов глюконеогенеза.
Изменения содержания липидных компонентов в транспортной форме (ХЛ, ТГ) при лямблиозной инвазии были следующими: ХЛ составил 4,84 ммоль/л а ТГ — 1,65 ммоль/л, отсюда следует вывод, что изменения их были незначительными (табл. 1).
Таблица 1
Изменение показателей общего триглицерида и холестерина сыворотки крови у крыс, зараженных лямблиями (Lamblia intestinalis)
Показатели Интактные М± m, P Инфицированные М± m, P Предел колебания
Общий холестерин 3,14 ммоль/л 4,84 ммоль/л 1,7—2,24 ммоль/л
Общие триглицериды 1,3 4 ммоль/л 1,65 ммоль/л 0,31—0,5 ммоль/л
Увеличился уровень ТГ на 0,3 ммоль/л, показатель у контрольных, интакт-ных крыс составил 1,34 ммоль/л, а у зараженных — 1, 65 ммоль/л.
Так как ТГ являются запасным метаболическим топливом, то резкое увеличение его уровня в крови свидетельствует об энергетическом дефиците, развившемся в результате термического воздействия на организм, что согласуется с данными по липидному обмену при неотложных состояниях [2].
Выявлено, что отмечается увеличение ЛПОНП, но не наблюдается увеличение холестерина, а наоборот прослеживается тенденция к его уменьшению. Показано, что липиды в ЛПОНП находятся в жидком изотропном состоянии и, будучи экстрагированными из этих частиц, имеют такую же микровязкость, как и натив-
ные ЛП. Эти данные свидетельствуют о слабом влиянии белка на липиды в указанных ЛП, иными словами, липиды поверхностного слоя не связаны жестко с белками и имеют достаточную подвижность, характеризующуюся постоянным латеральным перемещением как в пределах одной частицы, так и между частицами.
Рис. 1. Изменение холестерина, триглицеридов в сыворотке крови у крыс при экспериментальном лямблиозе
О нарушениях липидного обмена при экстремальных состояниях можно судить на основании изменения содержания холестерина (ХЛ) и его эфиров, триглицеридов (ТГ), свободных жирных кислот (НЭЖК) и липопротеидов (ЛП) сыворотки крови [2].
Рис. 2. Шпирен-профиль липопротеидов при электрофорезе сыворотки крови интактной крысы
Рис. 3. Шпирен-профиль при электрофорезе липопротеидов крыс, зараженных лямблиями
По результатам исследований видно, что происходит увеличение содержание ЛПОНП-пре-Р, которое в среднем составило 64,66% по сравнению с ин-тактными животными. Разница между ними составила 2,4%. Разница оказалась незначительной.
Рис. 4. Изменение соотношения ЛПОНП и холестерина в сыворотке крови крыс, зараженных лямблиями
Нарушение липидного обмена при стрессе может быть обусловлено ансамблем гормонов, главным компонентом которого является глюкокортикоиды [3]. В сыворотке крови больных неосложненными формами гепатита содержание продуктов ПОЛ закономерно снижается, а уровень общих липидов и фосфолипидов, а также антиокислительной активности липидов (АОА), напротив, возрастают, с нарастанием степени тяжести заболевания.
Работами многих авторов показано, что при хронической абдоминальной патологии (гепатиты, желчекаменная болезнь, хронические ангиохолиты опистро-хозной этиологии, лямблиозной и непаразитарной) в период обострения в крови достоверно повышались общие липиды за счет Р-липопротеидов, холестерина и триглицеридов, а ЛПВП снижались. В период ремиссии отмечали снижение общих липидов [2].
Рис.5. Шпирен-профиль при электрофорезе липопротеидов крыс, зараженных лямблиями
Таблица 2
Изменение липидного обмена в сыворотке крови у интактных крыс, инфицированных лямблиями
Показатели (моль/л) Контроль Инфицированные
М ± m, P М ± m, Р
Хиломикроны 0,24% 0,5%
ЛПВП-р-липопротеиды 17,8% 19,08%
ЛПНП-р-липопротеиды 15,99% 17,1%
ЛПОНП-пре-бетта-липоротеиды 59,5% 64,66%
Примечание: Р < 0, 05 достоверность против контроля.
Низким содержанием (даже ниже нормы) оказалось количество ЛПНП-Р-ЛП. У интактных крыс количество ЛПНП составило 17,1%, а у зараженных крыс — 21,7%.
Рис. 6. Шпирен-профиль при электрофорезе липопротеидов сыворотки крови интактной крысы
Таким образом, анализируя результаты полученных данных следует сделать вывод, что у зараженных крыс при лямблиозе наблюдаются изменения липидного обмена. По результатам наших исследований видно, что происходит увеличение содержание ЛПОНП-пре-ß, в среднем составило 64,66% по сравнению с ин-тактными животными. Разница между ними составила 2,4%. Разница оказалась незначительной. Отмечается увеличение общего триглицерида и общего холестерина, хотя достоверных колебаний этого показателя не выявили.
Выяснилось, что в сыворотке крови зараженных крыс Lamblia intestinalis произошло увеличение содержания липопротеидов очень низкой плотности на 5,16%, а количество липопротеидов низкой плотности увеличилось, по сравнению с интактными животными на 1,11%. Количество хиломикронов изменилось с 0,24% до 0,5%, а липопротеидов высокой плотности увеличилось на 1,28%.
ЛИТЕРАТУРА
[1] Климов А.Н., Никульчева Н.Г. Обмен липидов и липопротеидов и его нарушения.— СПб.: Питер Ком, 1999. — 512 с.
[2] Курашвили Л.В., Васильков В.Г. Липидный обмен при неотложных состояниях. — Пенза, 2003. — С. 175.
[3] Меерсон Ф.З., Пшенникова М.Г. Адаптация к стрессовым ситуациям и физическим нагрузкам. — М., 1988. — С. 103.
[4] Мартынов А.И., Гороховская Г.Н., Соболева В.В. и др. Гиполипидемическая терапия статинами // Международный мед. журн.— 1999. — Т. 5. — № 1. — С. 20—24.
[5] Методы санитарно-паразитологических исследований. Методические указания. МУК 4.2.796-99 (утв. главным государственным санитарным врачем РФ. Под ред. Онищен-ко Г.Г. 22.12.1999).
[6] Ольбинская Л.И., Захарова В.А. Современные аспекты применения статинов и фибратов у больных с нарушениями липидного обмена // Международный мед. журн. — 2004. — Т. 10. — № 1. — С. 139—143.
[7] Copyright Beckman Instruments, Inc. Diagnostic Systems Group, Brea, CA 92621-6209, Paragon, Lipo electrophoresis system, 1990. — P. 28.
CHANGING IN QUANTITY OF LIPOPROTEIDS DINAMICS
G.V. Kriushinskaya, N.A. Ilyina
Zoology Departament Ulyanovsk State Teachers Training University named after Ilya Ulyanov 100 Let So Dnya Rozhdeniya Square, 4, Ulyanovsk, Russia, 432700
The particular article presents the results of lipid interchange of macroorganism (rats were tested) which were infected with lamblia. In the course of the experiment the following indices weregot: chylomi-crones, beta-lipoproteids, pre-beta-lipoproteids, alpha-lipoproteids, total cholesterol and triglycerides. Lipoproteids changes proved to be insignificant. Keywords: lambliasis, lipoproteids, liver.
