ДИНАМИКА ИЗМЕНЕНИЙ МОЛЕКУЛЯРНОГЕНЕТИЧЕСКОГО ПРОФИЛЯ МЕЗЕНХИМНЫХ СТВОЛОВЫХ/СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК ЭНДОМЕТРИЯ ЧЕЛОВЕКА В ПРОЦЕССЕ ФОРМИРОВАНИЯ СФЕРОИДОВ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

12

МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ

Данная работа выполнялась с целью оценить взаимосвязь между пролиферативным потенциалом NK-клеток CD57— и экспрессией рецепторов KIR2DL2/ DL3 и NKG2C при экспансии in vitro, а также вклад в экспансию культур низкодифференцированных клеток CD56bright.

NK-клетки выделяли методом негативной магнитной сепарации из мононуклеаров периферической крови. Посредством клеточной сортировки были получены клональные культуры и культуры из 100 клеток субпопуляций, различающихся экспрессией KIR2DL2/ DL3 и NKG2C. NK-клетки стимулировали IL-2 и фидерными клетками K562-mbIL21 [3,4].

Спустя 10 дней культивирования культур из 100 клеток наблюдалась тенденция к более интенсивной пролиферации в субпопуляции CD57—KIR—NKG2C+. Культуры различались эффективностью клонообразования. Больше клонов возникало в субпопуляциях CD57—KIR—, но клоны субпопуляции CD57—KIR+NKG2C+ отличались большим числом клеток. Также было выявлено, что на более поздних стадиях культивирования в пролиферацию более зрелых культур CD57—KIR+ вносят вклад клетки CD56bright.

Таким образом, пролиферация предшественников адаптивных NK-клеток CD57—KIR+NKG2C+ становится более выраженной на поздних этапах культивирования за счет наращивания клеточной массы редких клонов и вклада в пролиферацию клеток CD56bright. Данная работа поддержана грантом РНФ № 22-75-00135.

Литература:

1. Kobyzeva P.A., Streltsova M.A., Erokhina S.A. et al. J. Leukoc.

Biol. 2020. Т. 108. № 4. С. 1379-1395.

2. Fernandez N.C., Treiner E., Vance R.E. et al. Blood. 2005. Т.

105. № 11. С. 4416-4423.

3. Denman C.J., Senyukov V.V., Somanchi S.S. et al. PLoS One.

2012. Т. 7. № 1.

4. Streltsova M.A., Erokhina S.A., Kanevsky L.M. et al. Int. J. Mol.

Sci. Artic. 2019. Т. 20. С. 443.

ДИНАМИКА ИЗМЕНЕНИЙ МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОГО ПРОФИЛЯ МЕЗЕНХИМНЫХ СТВОЛОВЫХ/СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК ЭНДОМЕТРИЯ ЧЕЛОВЕКА В ПРОЦЕССЕ ФОРМИРОВАНИЯ СФЕРОИДОВ

Л.Л. Алексеенко, А.П. Домнина, И.В. Кожухарова, Ю.С. Иванова, Н.А. Пуговкина, О.Г. Люблинская

Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, Россия

e-mail: al.l.l@mail.ru

Ключевые слова: мезенхиманые стволовые/стромальные клетки эндометрия, сфероиды, апоптоз, аутофагия, стресс.

Одним из подходов усиления стрессоустойчивости и терапевтического потенциала трансплантированных мезенхимных стволовых/стромальных клеток (2D-MCK) является формирование трехмерных клеточных сфероидов (3D-MCK). Цель настоящего исследования — масштабный мониторинг изменения профиля экспрессии генов в процессе формирования 3D-MCK из мезенхимных стволовых/стромальных клеток эндометрия человека PD-эМСК) с использованием количественного ПЦР-анализа. Анализировались группы генов, вовлеченных в процессы мезенхимально-эпителиального перехода (МЭП), ткане-специфической дифференцировки эндоме-триальных клеток, противовоспалительных процессов,

ответа на стрессовые воздействия, эпигенетических перестроек. При формировании 3й-эМСК обнаружены признаки МЭП-перестройки клеточного фенотипа, активация генов, служащих маркерами децидуальной дифференцировки IGFBP1 и пролактина, а также индукция противовоспалительных генов HGF, TSG, EP2. Исследование 3й-эМСК при помощи проточной цитоме-трии выявило постепенное снижение жизнеспособности клеток. В подтверждение этого, ПЦР-анализ выявил при формировании сфероидов активацию группы генов, связанных с интегрированным ответом на стресс — адаптивного пути, нацеленного на восстановление клеточного гомеостаза. Интегрированная реакция на стресс при формировании сфероидов может запускаться в клетке под влиянием гипоксии, недостатка аминокислот, глюкозы и т. д. В 3й-эМСК были обнаружены несколько маркеров интегрированного ответа на стресс — усиление ответа на оксидативные повреждения (ERp44, Peroxiredoxin, GPX1, PRDX4, GRx8, TXN2 и SOD1), стресса эндоплаз-матического ретикулума (DNAJB9, DNAJC10, CNX и HERPUD1), активацию групп генов, связанных с гипоксией (HIF1, VEGF), аутофагией и апоптозом (BECN1, BAX). В поисках молекулярных драйверов наблюдаемых перестроек, мы проанализировали возможность эпигенетических изменений, происходящие при переводе клеток из 2D в 3D-систему культивирования. В процессе формирования 3D^MCK обнаружено последовательное нарастание экспрессии метилтрансфераз КМТ2В, КМТ2Е и КМТ6В, метилирующих гистон Н3 по остаткам лизина, что является важной эпигенетической модификацией, вовлеченной в активацию гена НАД-зависимой гистоновой деацетилазы SIRT1 и гена SMARCA1, кодирующего глобальный активатор транскрипции SNF2L1. Уровень экспрессии SIRT1 и SMARCA1 также был увеличен при формировании 3D^MCK. Полученные данные позволяют нам рассматривать эпигенетическую регуляцию как один из основных молекулярных механизмов, вызывающих резкое изменение профиля экспрессии генов в 3D^MCK и запускающих программы апоптоза и аутофагии, а также активирующих стресс ответ для восстановления клеточного гомеостаза. Исследование было поддержано грантом РНФ № 22-74-10126.

ДОЛГОВРЕМЕННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ТРАНСКРИПТОМЕ СЕРДЦА КРЫС ПОСЛЕ НЕОНАТАЛЬНОЙ НЕПЕРЕНОСИМОСТИ ЛАКТОЗЫ

О.В. Анацкая1, А.Л. Рунов2, С.В. Пономарцев1, М.С. Вонский2, А.У. Елмуратов3, М.В. Харченко1, А.Е. Виноградов1

1 Институт Цитологии РАН, Санкт-Петербург, Россия

2 Всероссийский НИИ Метрологии

им. Д.И. Менделеева, Санкт-Петербург, Россия

e-mail: olga.anatskava@gmail.com

Ключевые слова: ремоделировани кардиомиоцитов, транскриптомны анализ, полиплоидия, сети межбелковы взаимодействий.

Сердечно-сосудистны заболевания могу возникат результате воспаленя задержки рост неонатальном пу-бертантном периодах [1]. Наиболее частой причиной воспалений задержки рост являютя гастроэнтериты разной этиологи, которы, ка правил, снижаю усвоение лактоз [1, 2]. Мы предположили, чт неонатальня непере-носимост лактоз (НЛ) сама по себе може провоцироват

Гены & Клетки XVII, №3, 2022