CC BY
17
HayKOBMM BiCHMK ^tBiBCtKoro Ha^OHa^tHoro yHiBepcMTeTy
BeTepMHapHoi Megw^HM Ta öioTexHO^oriw iMem C.3. I^M^Koro
Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies
ISSN 2518-7554 print ISSN 2518-1327 online
doi: 10.15421/nvlvet8352 http://nvlvet.com.ua/
UDC 591.13316
The dynamics of humoral protection factors in broilers under the conditions of probiotic preparations application
M.M. Romanovych
Stepan Gzhytskyi National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies Lviv, Ukraine
Article info
Received 31.01.2018 Received in revised form 28.02.2018 Accepted 05.03.2018
Stepan Gzhytskyi National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies Lviv, Pekarska str., 50, Lviv, Ukraine. Tel.: +38-067-859-05-07 E-mail: [email protected]
Romanovych, M.M. (2018). The dynamics of humoral protection factors in broilers under the conditions of probiotic preparations application. Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies. 20(83), 264-267. doi: 10.15421/nvlvet8352
The health of farm poultry depends on the balance between normal and potentially pathogenic intestinal microflora. Any changes in this equilibrium are accompanied by functional impairments, which, in turn, lead to a decrease in productivity. The use of probiotics helps to avoid imbalance of intestinal microflora and death of young animals. In this connection, it is relevant to study the effects of probiotic drugs to improve the vitality and immune function of the poultry. The purpose of the research was to clarify the effect of BPS-44 and different amounts of yeast Saccharomyces cerevisiae on the activity of the humoral level of natural resistance in chicken broilers. Experiments were carried out on broiler chicks-308 grown in the Fedyuk M farm in the Zolochiv district of Lviv oblast. The maintenance of the chickens was cellular with free access to feed and water. Technological parameters of broiler cultivation (temperature and light regime) were in accordance with the norms of ONTP-2005. Experiments were conducted in 4 groups of broiler chickens of 100 chicks in each according to the scheme: the control group was fed with the standardfeed (SC) according to the existing norms recommended for the R0SS-308 cross; the experimental group I in addition to the SC received a probiotic BPS-44 (registration certificate No. 2154-04-0254-06 dated November 24, 2006), based on the production strain of bacteria Bacillus subtilis ssp. subtilis 44-p, dose 0.21 g/kg, the experimental group II - 1% yeast Saccharomyces cerevisiae; the experimental group III of chickens - 2% yeast Saccharomyces cerevisiae. Blood was taken from chickens in order to carry out immunological research at different age intervals: 11, 27, 34 and 41 days of age. Blood serum was determined by bactericidal and lysozyme activity and the content of circulating immune complexes. The stimulatory effect of BPS-44 and yeast Saccharomyces cerevisiae in the composition of mixed fodder for broiler chickens on the dynamics of the formation of humoral protection factors in the bird organism was established. At the same time, in the conditions of use of yeast Saccharomyces ce^visiae in the composition of mixed fodder, a higher level of indices of the humoral level of non-specific resistance was recorded, than the preparation BPS-44.
Key words: chicken broilers, blood, yeast Saccharomyces cerevisiae, probiotics, preparation BPS-44, non-specific resistance.
Динамша гуморальних фактор1в захисту у курчат-бройлерiв за умов застосування пробттичних препара^в
М.М. Романович
Львiвський нацюналъний унiверситет ветеринарног медицини та бютехнологт iменi С.З. Гжицького, м. Львiв, Украгна
Здоров 'я стъсъкогосподарсъког птиц залежитъ вiд балансу мiж нормальною i потенцйно патогенною мтрофлорою кишечнику. Будъ-яш змти в щй рiвновазi супроводжуютъся функцюналъними порушеннями ят своею чергою, призводятъ до зниження продуктивностi. Використання пробютитв дае змогу уникнути дисбалансу мтрофлори кишечнику та загибелi молодняку. У зв 'язку з цим актуалъним е вивчення впливу пробютичних препаратiв для тдвищення життездатностi та тунног функцпу птищ. Мета до^дженъ полягала у з 'ясувант впливу препарату БПС-44 та рiзноi кiлъкостi дрiжджiв Saccharomyces cerevisiae на акти-втстъ гуморалъног ланки природногрезистентностi у курчат-бройлерiв. До^ди проводили на курчатах-бройлерах-308, що виро-щувалися у фермерсъкому господарствi «Федюк М» Золочiвсъкого району Лъвiвсъкоi областi. Утримання курчат було клтковим з
втьним доступом до корму I води. Технолоачт параметры вирощування бройлер1в (температурный та св1тловий режим) були в1дпов1дно до норм ОНТП-2005. Досл1д проводили на 4 групах курчат-бройлергв по 100 курчат у кожнш за схемою: контрольнш груш згодовували стандартний комбжорм (СК) зг1дно з Iснуючими нормами, рекомендованими для кросу Р0СС-308; 1 дослгдна група додатково до СК отримувала пробютик БПС-44 (реестрацшне посв1дчення № 2154-04-0254-06 в1д 24.11.2006 р.), виготов-лений на основ1 виробничого штаму бактерш БаеШш яиЪиИз яяр. .уиЬИНу 44-р, дозою 0,21 г/кг, 2 дослгдна група - 1% др1ждж1в ЗассИаготусвя свгеугягав; 3 дослгдна група курчат - 2% др1ждж1в ЗассИаготусвя сеге\1у1ае. Для проведення гмунологгчних дослг-джень в курчат брали кров у р1зн1 втов! перюди: 11-, 27-, 34- I 41-добовому вщ. В сироватщ кров! визначали бактерицидну та лгзоцимну активтсть I вмгст циркулюючих мунних комплексгв. Констатовано стимулювальний вплив препарату БПС-44 I дргж-дж1в ЗассИаготусвя сегеугягае у склад1 комбторму для курчат-бройлергв на динам1ку формування гуморальних факторгв захисту в оргатзмг птищ. При цьому за умов застосування др1ждж1в ЗассИаготусвя сегеу1з1ае у склад1 комбторму зафжсовано вищий р1вень показнимв гуморальног ланки неспецифгчног резистентности нгж препарату БПС-44.
Ключоы слова: кури-бройлери, кров, дргжджг ЗассИаготусвя сггеугигае, пробютики, препарат БПС-44.
Вступ
Кишкова мшрофлора та 1мунна система оргашв травления - единий потужний периферичний комплекс 1мунного захисту, який безпосередньо чи опо-середковано впливае на 1мунну функцш цшого орга-шзму (Dyshlyuk and Orlova, 2017). Здоров'я сшьсько-господарсько! птищ залежить ввд балансу м1ж нормальною i потенцшно патогенною мшрофлорою кишечнику. Будь-яш змши в цш рiвновазi супроводжуються функцюнальними порушеннями, яш своею чергою призводять до зниження продуктивность Викори-стання пробютишв дае змогу уникнути дисбалансу кишечнику та загибелi молодняку (Maliar et al., 2013; Lyzogub, 2017; Kotsyumbas et al., 2017).
Мехашзм ди пробютишв полягае в 1хнш здатносп активно заселяти шлунково-кишковий тракт, вироб-ляти бюлопчно активш метаболiти, що забезпечують 1хнш потенцiал життездатностi. За сво!ми пробютич-ними властивостями найбшьш характерними i широко вщомими е так1 види мiкроорганiзмiв: Bifidobacterium, Lactobacillus, Enterococcus, Bacillus, Streptococcus, Saccharomyces (Melnychenko et al., 2014; Avdieieva et al., 2015).
Пробютики представляють собою корисш мшроо-ргашзми, якi в нормi входять до складу кишкового бiоценозу, але в недостатнш кiлькостi. Потрапляючи у шлунково-кишковий тракт, пробiотичний мжроор-гашзм заселяе кишечник, тим самим «витискуе» пато-геннi органiзми з кишкового ештелш та створюе антимiкробнi умови (Kaminska et al., 2009; Maliar et al., 2013; Melnychenko et al., 2014; Avdieieva et al., 2015).
Др1ждж1 Saccharomyces cerevisiae мютять низку бюлопчно-активних речовин, що стимулюють проце-си засвоення поживних речовин корму завдяки нор-малiзацil мiкрофлори, яка своею чергою е джерелом ад'ювантно-активних речовин; останш проникають у кров, проявляючи стимулювальний вплив на iмунну та антиоксидантну систему (Vlizlo et al., 2010). Таблиця 1 Схема дослду
В останш роки держави Свропейського Союзу, а також Сполученi Штати Америки посилили контроль та ютотно скоротили обсяги використання у тварин-ництвi та птахiвництвi кормових антибютишв, низка препаратiв цiлком заборонена з метою запобйання !х потрапляння у продукта харчування. У зв'язку з цим пробютичш добавки можуть становити вагому альтернативу кормовим антибютикам. Адже на вiдмiну ввд них пробютики не шкiдливi для оргашзму тварин, бiобезпечнi для тваринницько! продукци, вони спри-яють нормалiзацil мжрофлори кишкiвника за рахунок антагошстичнох дп на патогеннi мiкроорганiзми.
З огляду на це пробiотики е необхщним компонентом новiтнiх технологiй вирощування птищ, тому розробка сучасних еколопчно чистих пробютичних кормових добавок, яш е фiзiологiчними i безпечними для птищ, !х застосування для профшактики та лшу-вання захворювань сшьськогосподарських тварин i птицi е актуальним завданням сьогодення.
Матерiал та методи дослщжень
Досл1ди проводили на курчатах-бройлерах-308, що вирощувалися у фермерському господарствi «Федюк М» Золочiвського району Львiвськоl областi. Утри-мання курчат було клггковим з вiльним доступом до корму i води. Технологiчнi параметри вирощування бройлерiв (температурний та свпловий режим) були у вiдповiдностi до норм 0НТП-2005. Дослiд проводили на 4 групах курчат-бройлерiв по 100 курчат у кожнш за схемою: контрольнш груш згодовували стандартний комбжорм (СК) зпдно з юнуючими нормами рекомендованими для кросу Р0СС-308; 1 дослвдна група додатково до СК отримувала пробютик БПС-44 (реестрацшне посввдчення № 2154-04-0254-06 вщ 24. 11. 2006 р.), виготовлений на основi виробничого штаму бактерш Bacillus subtilis ssp. subtilis 44-p, дозою 0,21 г/кг, 2 дослвдна група - 1% др1ждж1в Saccharomyces cerevisiae; 3 дослщна група курчат -2% др1ждж1в Saccharomyces cerevisiae (табл. 1).
Групи_Назва препарату_Схема застосування препарату_Вж птищ (доби)
Контрольна Не задавали препарати 5-11 21-27 36-42
Дослдаа 1 БПС-44 Трьома курсами по 7 дтв пос-тль з 7-добовими перервами
Дослдаа 2 Дослдаа 3 Saccharomyces cerevisiae 1% Saccharomyces cerevisiae 2% постшно постшно 4-43 4-43
Для проведення 1мунолог1чних дослвджень у курчат брали кров у р1зш в1ков1 перюди: 11-, 27-, 34- i 41-добовому вщ. Зразки кровi брали у 5 особин кожного вжового перiоду шляхом декаттаци.
В сироватцi кровi визначали: бактерицидну актив-нiсть за модифшованим методом (Марков Ю.М., 1968), лiзоцимну активнiсть фотонефелометричним методом (Дорофейчук В.Г., 1968), циркулюючi iмуннi комплекси (Чернушенко Е., Когосовой П., 1981). Одержат цифров1 дат опрацьовували статистич-но з використанням програмного пакету Microsoft Excel.
Результати та ix обговорення
З наведених у таблищ 2 даних бачимо, що застосу-вання у складi добавок до комбжорму дослвджуваних пробiотичних препаратiв спричинило вплив на показ-ники неспецифiчно! резистентносл органiзму курчат-бройлерiв. Так, лiзоцимна активнiсть сироватки кровi у курчат дослвдних груп у всi перюди дослвджень бiльша (Р < 0,05-0,001), нж у контрольнiй. При цьо-му рiзницi дослвджуваного показники були виражет бiльшою мiрою (P < 0,001) у курчат 27-добового вшу. Разом з цим необхвдно зауважити, що згодовування у складi добавки до комбжорму 2% дрiжджiв Saccharomyces cerevisiae зумовлювало бiльший сти-мулювальний вплив на лiзоцимну активнiсть сироватки кровi порiвняно з шшими дослвджуваними препаратами. Результати цих дослщжень свiдчать про акти-вуючий вплив про бютичних препаратiв на iмунну функцш у курчат i е позитивними з огляду на те, що лiзоцим е важливим фактором природно! резистент-ностi, який мае властивiсть пiддавати лiзису клггини мiкроорганiзмiв, як1 потрапляють в оргашзм. Ведомо, що лiзоцим входить до складу такого штегрального
показника, як бактерицидшсть кровi, е одним iз при-родних факторiв антибактерiального захисту оргашз-му птицi, що стимулюе синтез антитiл i нейтралiзуе токсини окремих мiкроорганiзмiв.
Стан природно! резистентносп органiзму повною мiрою характеризуе бактерицидна актившсть сироватки кровi (БАСК), яка полягае у здатносп пригтчува-ти рiст мiкроорганiзмiв. Як показали результати про-ведених дослвджень, застосування у складi добавок до комбшорму пробiотичних препаратiв викликало тд-вищення БАСК у курчат дослвдних груп порiвняно з контролем. Зокрема, у кровi курей, яким до основного рацюну додатково згодовували пробiотик БПС-44 та 2% дрiжджiв Saccharomyces cerevisiae БАСК в ус перiоди дослвджень була вищою (Р < 0,05-0,001), нж у курчат контрольно! групи. Водночас змiни напру-женостi бактерицидно! активносп сироватки кровi у курчат, яш отримували 1% дрiжджiв Saccharomyces cerevisiae були виражеш меншою мiрою. Цi данi сввд-чать про дозозалежний вплив дрiжджiв Saccharomyces cerevisiae на вказаний показник неспецифiчно! резис-тентностi органiзму курчат-бройлерiв.
Утворення циркулюючих iмунних комплексiв е одним з еташв ефекторно! iмунно! вiдповiдi, спрямо-вано! на видалення антигенiв iз органiзму. З даних, наведених у таблищ 2, бачимо, що вмют циркулюючих iмунних комплексiв у сироватщ кровi у курчат першо! i друго! дослiдних груп був на рiвнi контрольно!. Водночас в 11- i 27-добовому вщ у сироватцi кровi курчат друго! дослщно! групи зафiксовано бь льший (P < 0,001) вмiст Ц1К щодо контрольно! групи. Вищий вмют Ц1К у сироватцi кровi курей дослвдних груп, порiвняно з контрольною можна пояснити сти-мулювальним впливом на iмунну функцiю, зокрема процеси антитiлогенезу.
Таблиця 2
Динамiка гуморальних факторiв природно! резистентностi у кровi курчат-бройлерiв (М ± m; n = 5)
Показники Вж птищ, Група курей
доби К Д1 Д2 Д3
11 35,4 ± 1,60 35,2 ± 1,71 39,2 ± 1,28 40,8 ± 1,50*
Ц1К, 27 36,4 ± 1,12 40,0 ± 1,14 38,8 ± 1,02 40,2 ± 0,86*
Ммоль/л 34 38,6 ± 1,36 38,4 ± 1,50 41,6 ± 1,21 40,8 ± 1,11
41 38,4 ± 1,44 39,4 ± 0,92 35,5 ± 1,65 39,4 ± 1,03
11 27,20 ± 0,45 29,08 ± 0,28** 33,09 ± 1,51** 33,38 ± 1,09***
БАСК, % 27 25,35 ± 1,04 37,82 ± 0,75*** 33,96 ± 1,10*** 37,42 ± 1,21***
34 23,24 ± 1,12 34,09 ± 0,88*** 34,74 ± 1,13*** 39,24 ± 0,98***
41 30,08 ± 1,15 35,68 ± 1,65* 30,47 ± 0,94 40,46 ± 1,08***
11 27,20 ± 0,80 31,00 ± 0,55** 30,00 ± 1,55 35,60 ± 0,68***
ЛАСК, % 27 30,60 ± 0,51 37,80 ± 0,86*** 37,8 ± 0,66*** 41,00 ± 0,32***
34 28,2 ± 0,91 32,2 ± 0,66** 30,6 ± 1,96 36,2 ± 0,58***
41 29,60 ± 0,51 33,20 ± 1,46* 40,80 ± 0,37*** 38,20 ± 0,37***
Примтка: у цш таблищ рiзницi статистично вiрогiднi порiвняно з контролем: * - P < 0,05; ** - - Р < 0,01;*** - P < 0,001
Вiдомо, що утворюються Ц1К при взаемоди антигену з антитшом та компонентами комплементу (Khariv et al., 2017). Зростання вмiсту Ц1К у сироватцi кровi курчат, якi отримувала 2% дрiжджiв Saccharomyces cerevisiae, було короткотривалим, що е позитивним для оргашзму. Довготривала ж циркуля-
цiя у кровi Ц1К може спричинити деструктивний вплив на оргашзм.
Загалом отриманi результати дослщжень св1дчать про позитивний вплив дослщжуваних пробiотикiв на показники гуморально! ланки природних механiзмiв захисту в органiзмi курчат-бройлерiв.
Висновки
1. Додаткове введения до комбИкорму пробютика БПС-44 та 1 i 2% дрИжджИв Saccharomyces cerevisiae спричиняе стимулювальний вплив на показники гу-морально1 ланки природно1 резистентностi в органiзмi курчат-бройлерiв. Про що свИдчить вища (Р < 0,050,001) лiзоцимна та бактерицидна активнiсть сироват-ки кровi у курчат дослИдних груп порiвняно до контрольно! упродовж усього перiоду вирощування.
2. Констатовано дозозалежний вплив дрiжджiв Saccharomyces cerevisiae на дослИджуваш показники неспецифiчноï резистентностi у курчат-бройлерiв. Зокрема зафИксовано бiльший (P < 0,05) вмИст Ц1К у сироватцi кровИ курчат, якИ отримувала 2% дрИжджИв Saccharomyces cerevisiae.
Перспективи подальших до^джень. У подаль-ших дослИдженнях доцшьно визначити взаемозв'язок мИж Имунною функцИею й антиоксидантним захистом в органИзмИ курчат-бройлерИв за дiï пробиотика БПС-44 та 1 i 2% бюмаси дрИжджИв Saccharomyces cerevisiae.
References
Avdieieva, L.V., Lazarenko, L.M., & Melnychenko, Yu.O. (2015). Imunomoduliuvalni vlastyvosti synbiotychnykh kompozytsii probiotychnykh shtamiv Bacillus subtilis, laktytu abo laktulozy. Mikrobiol. zhurn. 77(1), 20-25 (in Ukrainian). Dyshlyuk, N.V., & Orlova, A.V. (2017). Structure's features of esophagus and it's immune formations of quails. Scientific Messenger LNUVMBT named after S.Z. Gzhytskyj. 19(77), 3-6. doi:10.15421/nvlvet7701. Khariv, I., Gutyj, B., Hunchak, V., Slobodyuk, N., Vynyarska, A., Sobolta, A., Todoriuk, V., & Seniv, R. (2017). The influence of brovitatoxide in conjunction with milk thistle fruits on the immune system of turkeys for eimeriozic invasion. Scientific Messenger LNUVMBT named after S.Z. Gzhytskyj. 19(73), 163168. doi:10.15421/nvlvet7334. Khariv, M., Gutyj, B., Ohorodnyk, N., Vishchur, O., Khariv, I., Solovodzinska, I., Mudrak, D., Grymak, C.,
& Bodnar, P. (2017). Activity of the T- and B-system of the cell immunity of animals under conditions of oxidation stress and effects of the liposomal drug. Ukrainian Journal of Ecology. 7(4), 536-541. doi: 10.15421/2017_157.
Kotsyumbas, G., Kostynjuk, A., Mysiv, O., & Fedyk, Yu. (2017). Histological, histochemical characteristics of duodenal intestine of hen-broilers for feed feeding with high content of probiotic supplements. Scientific Messenger LNUVMBT named after S.Z. Gzhytskyj. 19(77), 71-75. doi:10.15421/nvlvet7717.
Lyzogub, L.Y. (2017). Morphological changes of the thymus of chickens with different scheme of antibiotic therapy. Scientific Messenger LNUVMBT named after S.Z. Gzhytskyj. 19(73), 11-18. doi:10.15421/nvlvet7303.
Maliar, D.D., Melnychenko, Yu.O., Solomoniuk, Ya.V., & Bitiutskyi, V.S. (2013). Vyvchennia efektyvnosti zastosuvannia probiotykiv ta prebiotykiv na imunolohichni ta mikrobiolohichni pokaznyky perepeliv. Tekhnolohiia vyrobnytstva i pererobky produktsii tvarynnytstva: zb. nauk. prats. Bila Tserkva. 10(105), 53-56 (in Ukrainian).
Melnychenko, Iu.O., Maliar, D.D., & Lazarenko, L.M. (2014). Doslidzhennia imunomoduliuvalnoi dii novykh probiotychnykh preparativ. Nauk.-tekhn. biul. In-tu biolohii tvaryn; DNDKI vetpreparativ ta kormovykh dobavok. 15(1), 201-208 (in Ukrainian).
Kaminska, M.V., Kolysnyk, H.V., Kulai, Yu.V., & Boretska, N.I. (2009). Zminy v skladi kyshkovoi mikroflory yaponskoho perepela pry vykorystanni probiotychnoi dobavky. Naukovo-tekhnichnyi biuleten. 10(2), 270-274 (in Ukrainian).
Melnychenko, Yu.O., Maliar, D.D., & Lazarenko, L.M. (2014). Doslidzhennia imunomoduliuvalnoi dii novykh probiotychnykh preparativ. Nauk.-tekhn. biul. In-tu biolohii tvaryn; DNDKI vetpreparativ ta kormovykh dobavok. 15(1), 201-208 (in Ukrainian).
Vlizlo, V.V., Kovalchuk, Ya.Ia., Vishchur, O.I., Kovalchuk, I.I. (2010). Pokaznyky krovi ta intensyvnist rostu porosiat pry dii drizhdzhiv Saccharomyces cerevisiae. Naukovyi visnyk. 1, 4953 (in Ukrainian).
