УДК 598.2
Бычкова Екатерина Игоревна
Ивановский государственный университет corvus37@yandex.ru
Якименко Нина Николаевна
кандидат ветеринарных наук, доцент Ивановская государственная сельскохозяйственная академия имени академика Д.К. Беляева
plus78@rambler.ru
Пономарев Всеволод Алексеевич
доктор биологических наук, профессор Ивановская государственная сельскохозяйственная академия имени академика Д.К. Беляева
corvus37@yandex.ru
Пронин Валерий Васильевич
доктор биологических наук, профессор Ивановская государственная сельскохозяйственная академия имени академика Д.К. Беляева
proninvv63@mail.ru
Клетикова Людмила Владимировна
доктор биологических наук, профессор Ивановская государственная сельскохозяйственная академия имени академика Д.К. Беляева
doktor_xxi@mail.ru
ДИНАМИКА ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ У СИНАНТРОПНОГО СИЗОГО ГОЛУБЯ, ОБИТАЮЩЕГО В ИВАНОВСКОЙ ОБЛАСТИ
В статье представлены результаты исследования крови, полученной от сизых синантропных голубей, обитающих в городах Иванове и Шуе. После получения крови птиц сразу же отпускали на волю. Целью работы является исследование влияния окружающей среды на гематологические показатели Columba livia. Исследования проведены на кафедре акушерства, хирургии и незаразных болезней животных Ивановской ГСХА имени академика Д.К. Беляева в 2013-2014 гг. Кровь голубей подвергли исследованию на содержание в ней форменных элементов в различные месяцы года. Была проведена сравнительная оценка полученных результатов исследования. В статье приводятся особенности гемограммы, гематокрита, цветного показателя, видовой специфичности лейкоцитов у изучаемых птиц. При изучении особенностей окраски оперения и половой структуры Columba livia не обнаружено достоверных отличий в содержании эритроцитов и лейкоцитов, лейкоцитарном профиле и расчетных коэффициентах. В заключении представлены выводы, полностью отражающие суть проведенного исследования. У синантропного сизого голубя впервые выявлены сезонные и территориальные изменения в содержании гемоглобина и форменных элементов крови, выяснены морфологические особенности отдельных видов лейкоцитов.
Ключевые слова: синантропный сизый голубь, кровь, гематологические показатели.
Актуальность исследования. Синантропный сизый голубь (Columba livia) является комменсалом, естественным компонентом среды обитания городов и поселков [2], и служит уникальным объектом не только для оценки состояния окружающей среды, но и степени влияния среды обитания на живые организмы [7].
Антропогенные выбросы различного происхождения (химические, физические, биологические), эдафические, климатические и сезонные факторы порой приводят к нарушению гомеоста-за, что в первую очередь отражается на клеточном составе крови птиц [3; 4; 9] поскольку обновление форменных элементов крови происходит весьма интенсивно [6].
Целью работы является исследование влияния окружающей среды на гематологические показатели Columba livia.
Условия, материалы и методы. Для достижения цели проведены серии исследований с отловом и взятием проб крови у синантропных сизых голубей, обитающих в городах Иванове и Шуе. Исследования выполнены на кафедре акушер-
ства, хирургии и незаразных болезней животных Ивановской ГСХА имени академика Д.К. Беляева в 2013-2014 гг. Кровь получали в вакуумные пробирки с К2+ЭДТА из подкрыльцовой вены птицы непосредственно после ее отлова (рис. 1). После получения крови птиц сразу же отпускали на волю.
Определение гематокрита осуществляли с помощью прибора гематокрит, гемоглобина методом Сали. Подсчет эритроцитов и лейкоцитов - по методу К.С. Фоминой и В.И. Шмельковой, приготовление мазков крови на тщательно обезжиренном предметном стекле стандартным методом, окрашивание их по Diff-Quick и дифференцированный подсчет лейкоцитов (увеличение - х1500).
Всего проведено исследование 66-ти проб крови от 6-13 особей из каждого биотопа четырехкратно в течение года.
Результаты и их обсуждение. В результате изучения гемограммы синантропного сизого голубя установлено, что среднегодовой показатель содержания гемоглобина в крови у птиц, обитающих в Ивановской области, составил 183,47±13,55 г/л. Однако в декабре 2013 г. у отдельных особей, обитающих в городе Шуе, установлено минимальное
Вестник КГУ им. H.A. Некрасова jij- № 7, 2014
© Бычкова Е.И., Якименко Н.Н., Пономарев В.А., Пронин В.В., Клетикова Л.В., 2014
32
Рис. 1. Взятие крови из подкрыльцовой вены у Columba livia
Содержание гемоглобина у голубей обитающих в го Шуя Содержание гемоглобина обитающих в г Иваново Рис. 2. Содержание гемоглобина в крови у Columba livia, обитающих в городах Шуе и Иванове
количество гемоглобина в крови (110,0-120,0 г/л), а максимальная его концентрация у птиц в Шуе отмечена в июле и октябре (220,0-228,0 и 222,0224,0 г/л соответственно) и в Иванове - в июле (211,0-213,0 г/л). Изменение содержания гемоглобина у голубей в течение года представлено на рисунке 2.
Из гистограммы следует, что у синантропного сизого голубя, обитающего в городе Иваново, содержание гемоглобина менее подвержено колебаниям в зависимости от сезона года, нежели у птиц, обитающих в Шуе.
У голубей, как и у всех птиц, эритроциты овальной формы имеют ядро, диаметр клеток достигает 14,7^6,5 микрон (рис. 3).
Рис. 3. Эритроциты Columba livia (увеличение 15*100)
При окрашивании по Diff-Quick протоплазма клеток окрашивается в серо-голубой цвет, более интенсивно по периферии, ядро - в темно-синий. Ядро большое, имеет вытянутую форму, располагается в центре, вдоль продольной оси клетки. Хроматин ядра состоит из отдельных ярко окрашенных в синий цвет ядрышек, плотно прилежащих друг к другу.
Гемопоэз у птиц, как у других видов животных, непрерывно поддерживается благодаря пулу стволовых кроветворных клеток. А клетки стро-мы, наряду с гемопоэтическими и некоторыми соматическими клетками, а также молекулами экстрацеллюлярного матрикса продуцируют факторы регулирующие гемопоэз - цитокины. Особая роль в этом процессе принадлежит классу мембраносвязанных глюкозаминогликанов [5]. Общей закономерностью является обратная пропорциональность между размерами и количеством эритроцитов в мм3 крови [8]. Тем не менее, содержание эритроцитов в периферической крови птиц подвержено значительным изменениям в зависимости от сезона года и места обитания (табл. 1).
У голубей, обитающих в городе Шуе, концентрация эритроцитов в периферической крови в летний период больше, чем в зимний на 51,97 %. Наименьший уровень эритроцитов зарегистрирован в апреле у Columba livia, обитающих в городе Иваново. По сравнению с птицами из Шуи у них этот показатель меньше на 60,11%.
Гематокрит, отражающий объемную фракцию эритроцитов в цельной крови [1], изменяется от
Вестник КГУ им. Н.А. Некрасова jtó- № 7, 2014
33
Таблица 1
Динамика содержания эритроцитов в крови и гематокрита у синантропного сизого голубя
Показатель г.о. Шуя г. Иваново
январь апрель июль октябрь январь апрель июль октябрь
Эритроциты, х1012/л 2,54 ±0,08 2,85 ±0,48 3,86 ±0,43 3,49 ±0,21 2,93 ±0,35 1,78 ±0,16 3,64 ±0,66 2,78 ±0,34
Гематокрит, % 41,0 ±2,0 44,6 ±8,3 49,6 ±1,5 48,2 ±1,5 48,4 ±2,0 49,7 ±5,2 46,0 ±2,3 44.3 ±2.3
Цветной показатель 1,78 1,83 1,58 1,72 2,03 3,00 1,64 1,76
41,0 до 49,7%. Гематокрит у голубей, видимо, отражает не только содержание эритроцитов в периферической крови, но обусловлен их величиной. Так у птиц, обитающих в городе Иваново, в апреле количество эритроцитов составило 1,78*1012/л, а гематокрит равен 49,7%. Установленные показатели гематокрита свидетельствуют о компенсаторных реакциях, направленных на снабжение тканей кислородом, и являются для синантропных сизых голубей нормой.
При изучении цветового показателя установлено, что степень нагруженности эритроцитов гемоглобином очень высокая, особенно в январе и апреле у птиц, обитающих в городе Иваново, что вероятно обусловлено не только интенсивным метаболизмом, действием низких температур, но и недостатком в питании, особенно дефицитом витамина В12.
Концентрация лейкоцитов в крови у Columba livia подвержена не только сезонным колебаниям [3], она определяется запасами кормовых ресурсов, наличием ночевок и частотой вспугивания птиц (табл. 2). Наиболее высокое содержание лейкоцитов отмечено в зимний период, наименьшее -в летний. Следует отметить, что у голубей, обитающих в городе Шуе, лейкоцитов больше, чем у того же вида, обитающего в Иванове, в январе, июле и октябре на 5,94; 8,05 и 29,55 % соответственно.
Соотношение гранулоцитов и агранулоцитов (коэффициент Г/А) дает представление о реактив-
ности организма. Этот коэффициент имеет особое значение для птиц, проводящих часть жизни в полете. Вероятно, для синантропного сизого голубя его величина находится в диапазоне от 0,13 до 0,45, и в случае его увеличения возможно нарушение функции дыхания и развитие отека легких. У си-нантропного сизого голубя тип крови лимфоцитар-ный, но процентное содержание этих клеток изменяется в широком диапазоне - от 58,87 до 83 [9]. Установлено уменьшение количества эозинофилов и моноцитов у Columba livia, обитающего в городе Шуе, с января по октябрь, а у птиц, обитающих в Иванове, в весенне-летний период отмечается снижение процентной концентрации гетерофилов и повышение лимфоцитов.
Микроскопией установлена видовая специфичность лейкоцитов Columba livia. Гранулоци-ты представлены гетерофилами и эозинофилами. Клетки неоднородны по составу. Ядро гетерофи-лов окрашивается в темно-фиолетово-синий цвет, по форме напоминающее подкову, имеются перехваты и утончения, хроматин ядра расположен компактно в виде глыбок и участков просветления (рис. 4). Цитоплазма широкая, дымчато-розовая, содержит рыхлую зернистость.
Эозинофилы крупные, цитоплазма занимает значительную часть клетки, розоватая, вуалевид-ная, с выраженной розово-фиолетовой зернистостью. Ядро хорошо окрашено в сине-фиолетовый цвет, состоит из нескольких сегментов (2-4), ха-
Показатель г.о. Шуя г. Иваново
январь апрель июль октябрь январь апрель июль октябрь
Лейкоциты, х109/л 12,80 ±1,73 8,01 ±0,20 4,10 ±0,55 6,43 ±0.24 12,04 ±0,64 9,40 ±0,22 3,77 ±0,33 4,53 ±0,22
Лейкоцита рный профиль, 0%:
Базофилы - - - - - - - -
Эозинофилы 5,39 ±1,05 4,40 ±0,77 4,14 ±1,77 3,00 ±1,00 2,88 ±0,56 7,30 ±1,85 4,57 ±1,24 7,00 ±1,00
Гетерофилы 25,30 ±2,23 6,70 ±2,70 18,00 ±9,10 16,50 ±2,83 29,17 ±1,91 10,10 ±3,58 11,57 ±3,48 19,83 ±2,55
Лимфоциты 61,72 ±2,37 83,00 ±4,86 72,00 ±14,29 78,33 ±3,22 58,87 ±2,04 74,90 ±5,01 78,86 ±3,59 66,83 ±2,22
Моноциты 7,52 ±0,89 5,90 ±2,11 5,43 ±2,08 2,00 ±0,67 8,84 ±0,72 7,70 ±1,47 5,43 ±1,06 6,17 ±2,17
Коэффициент Г/А 0,45 0,13 0,29 0,24 0,49 0,21 0,19 0,37
Таблица 2
Изменение белой крови в зависимости от сезона года у Columba livia
34
Вестник КГУ им. Н.А. Некрасова № 7, 2014
Рис. 4. Гетерофилы
Рис. 6. Лимфоциты
рактерно резкое чередование темных и светлых участков (рис. 5).
У синантропного сизого голубя от 70 до 90% лимфоцитов представлены малыми формами. Малый лимфоцит имеет круглую форму, структура его ядра очень компактная с плотной хроматино-вой сетью. Глыбки хроматина плотные и окрашиваются в темно-синий цвет, участки просветлений почти незаметны. Цитоплазма окружает ядро узким поясом, как правило, с одной стороны, окрашена в светло-голубой цвет. Больших лимфоцитов насчитывается от 2 до 8%. У больших лимфоцитов в цитоплазме обнаружена крупная азурофильная зернистость и вакуоли (рис. 6).
Моноциты - большие клетки со своеобразной формой ядра, различной причудливой конфигурации, имеют множество выступов и углублений, как по контурам, так и по поверхности. Ядро бобовидной или неправильно-изогнутой формы. Хроматин ядра имеет вид складчатости и окрашивается неравномерно в бледно-фиолетовый цвет. Цитоплазма, окружающая ядро, имеет дымчато-розоватый цвет, едва различимую пылевидную зернистость (рис. 7).
При изучении особенностей окраски оперения и половой структуры Columba livia не обнаружено достоверных отличий в содержании эритроцитов и лейкоцитов, лейкоцитарном профиле и расчетных коэффициентах.
Выводы
1. В ходе проведенного исследования у синан-тропного сизого голубя впервые установлены следующие показатели:
- гематокрит - 41,0-49,7 %;
- цветовой показатель - 1,58-3,0;
- коэффициент соотношения гранулоцитов и агранулоцитов (А/Г) - 0,13-0,45.
2. Выявлены сезонные и территориальные изменения в содержании гемоглобина и форменных элементов крови:
- содержание гемоглобина в зимний период снижается до 110,0 г/л, в весенне-осенний повышается до 228,0 г/л;
Рис. 5. Эозинофилы
Рис. 7. Моноциты
- у птиц, обитающих в городе Иваново, уровень гемоглобина выше в зимне-весенний период, в городе Шуе - в летне-осенний;
- наиболее высокая концентрация эритроцитов в периферической крови установлена в летний период;
- у голубей, обитающих в городах Шуе и Иваново, количество эритроцитов снижается до 2,54*1012/л и 1,78*1012/л в зимний и весенний период соответственно;
- в зимний период количество лейкоцитов, обеспечивающих защиту организма, достигает (12,04-12,80)*109/л, постепенно снижается в весенний и повышается в осенний период с минимальным их содержанием в летнее время ((3,77—4,10)*109/л);
- значительные изменения клеток эозинофиль-ного ряда отмечены у голубей, обитающих в городе Иваново, с минимальным процентным содержанием в январе (2,33) и максимальным (7,80) - в апреле;
- более высокое содержание гетерофилов в обоих биотопах установлено в зимний период (25,30-29,17 %), минимальное - в весенний - 6,7010,10 %;
- наиболее высокий процент лимфоцитов у птиц из городов Шуя и Иваново отмечен в весенний (83,00) и летний (78,86) периоды;
- минимальное содержание моноцитов выявлено в летний период в городе Шуе - 2 %, максимальное - в городе Иваново в январе - 8,84 %.
3. Выяснены морфологические особенности отдельных видов лейкоцитов:
- подковообразное ядро гетерофилов с компактно расположенным хроматином имеет перехваты, окружено широкой сетью цитоплазмы;
- сегментированное ядро эозинофилов с хорошо заметными темными и светлыми участками окружено вуалевидной цитоплазмой с выраженной ярко окрашенной зернистостью;
- преобладают малые лимфоциты округлой формы с темно окрашенным ядром и односторонне окружающей его цитоплазмой, большие лимфоциты содержат в цитоплазме вакуоли;
Вестник КГУ им. H.A. Некрасова № 7, 2014
35
- ядро моноцитов чаще бобовидной формы со множеством выступов и углублений неравномерно окрашенное в розовый цвет, окруженное цитоплазмой имеющей пылевидную зернистость.
Библиографический список
1. Бажибина Е. Методологические основы оценки клинико-морфологических показателей крови домашних животных / Е. Бажибина, А. Коробов, С. Середа, В. Сапрыкин. - М.: Аквариум-Принт, 2005. - 128 с.
2. Басыйров А.М. Особенности микроядерного анализа эритроцитов крови в популяции сизого голубя в г. Казани / А.М. Басыйров, И.И. Рахимов // Филология и культура. - 2014. - № 7. - С. 219-225.
3. Бычкова Е.И. Изменение лейкограммы у си-нантропного сизого голубя в зависимости от сезона и места обитания / Е.И. Бычкова, Н.Н. Якименко, Л.В. Клетикова // Современные достижения ветеринарной медицины и биологии - в сельскохозяйственное производство: II Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием (21-22 февраля, 2014). - Уфа, 2014. -С. 216-218.
4. Бычкова Е.И. Биоэкологические особенности синантропного сизого голубя антропогенных ландшафтов / Е.И. Бычкова, В.А. Пономарев,
В.В. Пронин, Л.В. Клетикова, Н.Н. Якименко, О.С. Архангельская // Инновационные процессы в АПК: VI Международная научно-практическая конференция преподавателей, молодых ученых, аспирантов и студентов (16-18 апреля, 2014). - М.: РУДН, 2014. - С. 114-116.
5. Гематология: Новейший справочник / под общ. ред. К.М. Абдулкадырова. - М.: Эксмо; СПб.: Сова, 2004. - 928 с.
6. Девяткин А.А. Изменение состава липидов эритроцитов голубя при индуцированном апоп-тозе: автореф. ... канд. биолог. наук / А.А. Девяткин. - Саранск, 2005. - 19 с.
7. Клетикова Л.В. Особенности лейкограммы у птиц антропогенных ландшафтов при травмах / Л.В. Клетикова, Н.Н. Якименко // Современные тенденции в образовании и науке: Международная научно-практическая конференция (31 октября 2013). - Тамбов, 2013. - С. 79-80.
8. Никитин В.Н. Атлас клеток крови сельскохозяйственных и лабораторных животных / В.Н. Никитин. - М.: Сельскохозяйственная литература, 1947. - 48 с.
9. Пономарев В.А. Клинические и биохимические показатели крови птиц / В.А. Пономарев, В.В. Пронин, Л.В. Клетикова, Л.В. Маловичко, Н.Н. Якименко. - Иваново: ПресСто, 2014. - 288 с.
36
Вестник КГУ им. H.A. Некрасова № 7, 2014