CC BY
32
_________________Ветеринария "И*
ДИНАМИКА БЕЛКОВ СЫВОРОТКИ КРОВИ ТЕЛЯТ ПРИ АССОЦИАТИВНЫХ ПАРАЗИТОЗАХ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА
В. П. ОЛЕНИЧ,
аспирант, Институт экспериментальной ветеринарии им. С. Н. Вышелесского
220003, Республика Беларусь, г. Минск, ул. Брикета, д. 28;
тел: +37529210-80-67, +37529325-92-07;
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: телята, ассоциативные паразитозы, желудочно-кишечный тракт, фракции белков (альбумин, а1- и а2-глобулины, в- глобулины и Y-глобулины), циркулирующие иммунные комплексы. Keywords: calves, associative parasitic diseases, gastrointestinal tract, protein fractions (albumin, a1- and a2-globulins, в-globulins, y-globulins), circulating immune complexes.
Анализ результатов многих исследователей показывает, что для гельминтозов характерна многофакторность иммунного ответа хозяина, включающего одновременное воздействие на возбудителя инвазии гуморальных антител, реагинов, аллергических реакций немедленного и замедленного типов. Иммунологическая перестройка организма при гельминтозах является фактором защиты и в то же время выступает основным патогенетическим фактором.
Одним из механизмов вывода антигена из организма является образование иммунного комплекса антиген-антитело. Однако в некоторых случаях этот механизм нарушается, и иммунные комплексы длительно присутствуют в циркуляции. Биологическое действие иммунных комплексов имеет множество проявлений, начиная от нейтрализации антигена до изменения функциональной активности клеток крови, активации комплемента и развития воспалительных реакций [5, 6].
Увеличение иммунных комплексов происходит за счет накопления «малых» иммунных комплексов, образующихся при недостатке иммуноглобулинов. Эти комплексы способны инактивировать эффекторные клетки через Fc-рецепторы и стимулировать выработку имму-носупрессивного фактора [3].
При гельминтозах в крови животных наблюдается изменение содержания белка и его фракций, концентрации иммуноглобулинов и циркулирующих иммунных комплексов [4].
Цель и методики исследований.
Целью наших исследований было изучение влияния комплексного препарата «Гельминтовет» на некоторые показатели белкового обмена телят при ассоциативных паразитозах желудочно-кишечного тракта.
Было подобрано 3 группы телят в одном из хозяйств Республики Беларусь по 8 голов (2 опытных и 1 контрольная) в возрасте 2-2,5 мес., спонтанно инвазиро-ванных стронгилоидами, криптоспоридиями, балан-тидиями, эймериями. Телятам первой группы вводили «Гельминтовет» в дозе 50 мг/кг живой массы, телятам второй группы — в дозе 25 мг/кг живой массы, внутрь, однократно. Телята третьей группы служили контролем и им препарат не давали.
Для изучения показателей белкового обмена у телят всех групп проводили взятия проб крови до дачи препарата и на 7, 14, 29 и 61 дни после дегельминтизации.
В те же сроки проводили исследования фекалий по методу Г. А. Котельникова и В. М. Хренова — для обнаружения яиц гельминтов и ооцист эйме-рий. Культивирование личинок нематод проводили по шшш.т-эуи. пэгоб. ги
методу А. М. Петрова и В. Г. Гагарина (1953) и выделение их по Берману-Орлову — для определения родового и количественного состава личинок. По методу А. Ф. Манжоса определяли число балантидий в 1 мл фекалий, выявление криптоспоридий приводили путем окрашивания мазков фекалий по Циль-Нильсону с последующей микроскопией. Для определения циркулирующих иммунных комплексов использовали метод Ю. А. Гриневич и Н. И. Алферова. С помощью электрофоретической системы SEBIA определяли белковые фракции.
Статистический анализ полученных данных проводили с помощью прикладных программ Microsoft Excel.
Результаты исследований.
Белки входят в состав всех живых существ и составляют основу структурной организации каждой клетки, органа и всего организма. Изучение процентного соотношения фракций белка сыворотки крови позволяет в определенной мере судить об иммунореактивности организма и помогает контролировать характер и степень воздействия того или иного антигена на организм животного.
Полученные данные по белковым фракциям представлены в табл. 1. Воспалительные процессы как острые, так и хронические, являются самой частой причиной снижения концентрации альбумина в сыворотке крови [8].
У телят первой группы уровень альбумина повысился на 29 день наблюдений на 12,30 % (Р < 0,05), что говорит об затухании воспалительных процессов в организме.
Уровень а1-глобулинов (а1-антитрипсин, а1-кислый гликопротеин) понизился на 14 день исследований у телят второй группы на 10,32 % (Р < 0,05) и на 29-61 дни опыта у телят первой группы — на 17,60-21,19 % (Р < 0,05 - Р < 0,001), по отношению к показателям контрольной группы телят. Белок плазмы крови
а,-антитрипсин может инактивировать некоторые про-теазы, освобождающиеся в острой фазе воспаления. Снижение уровня а1-антитрипсин свидетельствует о восстановительных процессах организма телят.
Уровень а2-глобулинов (церулоплазмин, гаптоглобин, альфа-2-макроглобулин, церулоплазмин и аполипопро-теин) к 29 дню исследований понизился у телят первой группы на 19,30 %. Церулоплазмин, голубой белок а2-глобулиновой фракции сыворотки крови, обладает антиоксидантными свойствами, является одним из факторов естественной защиты организма при стрессовых состояниях, воспалительных процессах и др. При этом
Ветеринария
ей
Таблица 1
Концентрация альбумина, а- и а .-глобулинов, в- глобулинов и у-глобулинов в сыворотке крови телят
при применении «Гельминтовета», %
Период исследований Первая группа Вторая группа Контроль
Альбумин
до дачи препарата 45,00 ± 2,77 45,04 ± 1,69 42,12 ± 3,49
через 7 дней 43,27 ± 3,24 51,15 ± 3,12 47,36 ± 1,53
через 14 дней 46,65 ± 3,44 43,65 ± 1,11 45,84 ± 0,88
через 29 дней 50,18 ± 2,79* 43,19 ± 1,13 44,68 ± 1,87
через 61 день 46,76 ± 1,03 45,39 ± 0,93 43,75 ± 2,37
а1-глобулины (а1-антитрипсин, а1-кислый гликопротеин)
до дачи препарата 7,31 ± 0,29 7,78 ± 0,40 7,38 ± 0,45
через 7 дней 8,00 ± 0,80 7,07 ± 0,37 6,37 ± 0,69
через 14 дней 6,49 ± 0,57 6,69 ± 0,29* 7,46 ± 0,25
через 29 дней 5,99 ± 0,55* 8,03 ± 0,80 7,27 ± 0,43
через 61 день 6,84 ± 0,38*** 7,19 ± 0,66 8,68 ± 0,45
а2 -глобулины (церулоплазмин, гаптоглобин, альфа-2-макроглобулин, церулоплазмин и аполипопротеин)
до дачи препарата 10,27 ± 0,71 10,90 ± 0,44 10,71 ± 0,58
через 7 дней 13,02 ± 1,02** 10,87 ± 0,88 10,17 ± 0,28
через 14 дней 10,48 ± 0,55 10,77 ± 0,24 10,91 ± 0,28
через 29 дней 9,11 ± 0,71** 12,11 ± 0,93 11,29 ± 0,67
через 61 день 9,97 ± 0,32 10,72 ± 0,71 9,37 ± 0,56
в-глобулины (трансферрин, комплемент С3, гемопексин, бета-липопротеиды)
до дачи препарата 14,95 ± 0,81 16,57 ± 0,65 18,83 ± 1,45
через 7 дней 14,17 ± 1,37 14,83 ± 1,06 14,81 ± 0,77
через 14 дней 15,68 ± 0,66 17,42 ± 0,70* 15,52 ± 0,54
через 29 дней 14,95 ± 1,33 16,37 ± 1,89 17,54 ± 1,05
через 61 день 16,17 ± 0,60* 17,03 ± 0,98** 13,44 ± 1,23
Y-глобулины (иммуноглобулины G, А, М, Е)
до дачи препарата 21,96 ± 3,83 19,68 ± 1,19 20,94 ± 3,73
через 7 дней 21,53 ± 4,68 16,07 ± 1,96* 21,26 ± 1,33
через 14 дней 20,68 ± 3,20 20,07 ± 1,69 21,54 ± 1,17
через 29 дней 19,77 ± 1,27 18,26 ± 1,78 19,42 ± 2,41
через 61 день 20,24 ± 1,36* 26,80 ± 1,65 24,74 ± 2,07
Примечание: * Р < 0,05; ** Р < 0,01; *** Р< 0,001.
Первая группа - - ■ Вторая группа — - -Третья Группа
до дачи препарата
через
7дней
через14
дней
через 29 дней
через 61 день
Период исследований
Рисунок 1
Содержание циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови телят
при применении «Гельминтовета»
42
№№№. т-Э¥и. пагоб. ги
Ветеринария
он инактивирует свободные радикалы, образованные фагоцитирующими лейкоцитами, принимает участие в нейроэндокринной регуляции путем изменения уровня биогенных аминов в крови. Повышенное содержание его говорит о патологических состояниях, сопровождающихся воспалением и некрозом тканей.
Церулоплазмин называют еще и «реактантом острой фазы» и содержание его в крови повышается при острых и хронических воспалительных заболеваниях, протекающих с повреждением тканей. Полученные нами данные указывает на восстановительные процессы и улучшение общего состояния организма телят после применения «Гельминтовета».
Уровень р-глобулинов (трансферрин, комплемент С3, гемопексин, бета-липопротеиды) к 61 дню исследований повысился у первой — на 20,31 % и на 26,71 % у второй группы, по отношению к контролю. Снижение уровня белка системы комплемента говорит о патологических состояниях, сопровождающихся повреждением гепатоцитов и макрофагов [5]. Низкий уровень С3 комплемента приводит к нарушению продукции антител, которая обеспечивается кооперативным взаимодействием В-лимфоцитов при непосредственном участии С3 комплемента [1, 7]. Повышение содержания р-глобулинов (комплемент С3 и трансферрин) после лечения «Гельминтоветом» является важным показателем стимулирования защитных сил организма, т. к. белки системы комплемента, действуя в сочетании с иммуноглобулинами, опсонируют и лизируют чужеродные агенты.
Уровень Y-глобулинов (иммуноглобулины G, A, M, E) у телят второй группы через 7 дней понизился на 24,41 % и достиг физиологической нормы (Р < 0,05), а на 61 день наблюдений — на 18,18 % (Р < 0,05). Эти данные указывают на ослабление воспаления и нормализацию гуморального иммунитета.
Уровень циркулирующих иммунных комплексов дает определенное представление об активности иммунного статуса, воспалительных процессов и об эффективности проводимого лечения.
На рис. 1 отображены результаты исследований циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови телят при применении «Гельминтовета» против ассоциативных паразитозов желудочно-кишечного тракта.
Циркулирующие иммунные комплексы на 7 день после применения «Гельминтовета» у телят первой группы понизились на 20,11 %, у второй — на 16,61 %. При последующих исследованиях их уровень оставался достоверно низким в отличие от телят контрольной группы, что обусловлено затуханием воспалительных процессов и нормализацией иммунного статуса телят.
Повышенный уровень циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови в группе контроля свидетельствует о наличии специфического взаимодействия антиген-антитело и снижении активности гуморального звена иммунной системы.
Выводы.
Применение «Гельминтовета» у телят, спонтанно инвазированных ассоциацией паразитов желудочнокишечного тракта, способствует нормализации уровня белкового обмена.
При применении «Гельминтовета» в сыворотке крови телят происходит увеличение содержания альбумина и р-глобулинов (трансферрин, комплемент С3, гемопексин, бета-липопротеиды), уменьшение содержания а1-глобулинов (а1-антитрипсин, а1-кислый гликопротеин), а2-лобулинов (церулоплазмин, гаптоглобин, альфа-2-макроглобулин, церулоплазмин и аполипопро-теин) и Yглобулинов (иммуноглобулины G, A, M, E).
Лечение телят «Гельминтоветом» приводит к уменьшению циркулирующих иммунных комплексов.
Литература
1. Пешков Р. А. Современная эпизоотическая ситуация по основным гельминтозам в Российской Федерации (2005 г.) // Матер. докл. науч. конфер. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями», 23-25 мая. М. : ВИГИС, 2007. С. 78-82.
2. Хаитов Р. М., Норимов А. Ш., Завгородный С. Г. Отмена иммунологической толерантности и эффекта Т-супрессоров синтетическими полиэлектролитами // Иммунология. 1980. № 2. С. 47-50.
3. Шихобалова Н. П. Вопросы иммунитета при гельминтозах. М. : Изд-во АН СССР, 1950. 184 с.
4. Якубовский М. В. Иммунитет при гельминтозах животных // Известия Академии аграрных наук Республики Беларусь. 1997. № 4.
5. Marusic-Galesic, S. et al. Cellular immune response to the antigen administered as an immune complex in vivo // Immunology. 1992. № 2. Vol. 75 (2). P. 325-329.
6. Deboer D. J. Immunomodulatory effects of staphylococcal antigen and antigen-antibody complexes on canine MN and PMN leukocytes // American Journal of Veterinary Research. 1994. Vol. 55 (12). P. 1690-1696.
7. Barriga O. O. Immunomodulation by ematodes // Vet. Immunol. Immunopath. 1984. Vol. 3. № 4. P. 293-320.
8. Методы определения альбумина. URL: http://www.terramedica.spb.ru (дата обращения: 11.11.11).
www.m-avu. narod. ru
43
