CC BY
79
УДК 579.842.11:636-053.2(470.620)
UDC 579.842.11:636-053.2(470.620)
ДИНАМИКА АНТИТЕЛООБРАЗОВАНИЯ У ЖИВОТНЫХ В ОТВЕТ НА ВВЕДЕНИЕ ЭШЕРИХИОЗНОГО АНАТОКСИНА
Караев Ян Михайлович aспирант
Кубанский государственный аграрный университет, Краснодар, Россия
В статье описан опыт по изучению иммуногенных свойств эшерихиозного анатоксина. В результате которого выявлено, что новый комплекс инактивированных токсинов кишечной палочки способен стимулировать выработку антител в организме животных.
Ключевые слова: ЭШЕРИХИОЗНЫЙ АНАТОКСИН, КОЛИБАКТЕРИОЗ, ШИГАПОДОБНЫЙ ТОКСИН, ЭРИТРОЦИТАРНЫЙ ДИАГНОСТИКУМ.
DYNAMICS OF ANTIBODY FORMATION AT ANIMALS IN RESPONSE ON ANATOXIN INTRODUCTION
Karaev Yan Mikhailovich post-graduate student
Kuban State Agrarian University, Krasnodar, Russia
Experience on studying of immune genetic properties of esherechious anatoxin is described in the article. There was revealed that new complex of inactivated toxins of intestinal rod is able to stimulate antibodies forming in animal organisms.
Key words: ANATOXIN, COLIBACTERIOSIS, SHIGA-TYPE TOXIN, ERYTHROCYTE DIAGNOSTICUM.
Актуальность. Колибактериоз по сей день является актуальной проблемой для животноводства [1] и птицеводства страны [10]. Не зря во многих развитых странах (США, Канада, Великобритания и др.) эшерихиоз животных находится под пристальным вниманием ветеринарных и медицинских врачей, а также Всемирной организации здравоохранения, так как важную роль в инфекционной патологии человека стали играть эшерихии, вырабатывающие шигаподобный токсин, резервуаром которых являются сельскохозяйственные животные [2, 3, 4, 7, 8, 9]. Наличие у E. шН целого ряда факторов патогенности и, прежде всего, токсинообразования, адгезивной и инвазивной активности, обуславливает многообразие форм клинического и патологоанатомического проявления эшерихиоза у молодняка сельскохозяйственных животных, что затрудняет диагностику болезни, а, следовательно, проведение профилактики и адекватного и своевременного лечения. Отсутствие достаточно полных сведений о патогенных штаммах E. шН и механизмах развития эшерихиозной инфекции являются основной причиной низкой
эффективности коммерческих вакцин и традиционно осуществляемой этиотропной терапии.
Возбудитель данной инфекции обладает широким спектром антигенных детерминант, что заставляет проводить постоянный эпизоотологический мониторинг по присутствию у E. coli факторов патогенности. Однако, как считает целый ряд отечественных и зарубежных исследователей [1, 3, 5, 6, 11, 12, 13] наиболее стабильными факторами, которым принадлежит основополагающая роль в развитии эшерихиозной инфекции, являются экзотоксины. Инактивированные формы данных токсинов в настоящее время используются при конструировании компонентных средств специфической профилактики. Чаще всего используются два вида токсинов: термолабильный и термостабильный, хотя установлено, что превалирующую роль в развитии патологического процесса может играть шигаподобный токсин. В связи с этим нами был получен комплексный эшерихиозный анатоксин, включающий в себя три инактивированных токсина - термолабильный, термостабильный и шигаподобный токсин. Целью исследования было изучение иммуногенных свойств эшерихиозного анатоксина.
Методы проведения эксперимента. Для проведения опыта использовали белых крыс массой 180-200 г, из которых сформировали 7 групп по 5 животных в каждой. Анатоксин животным 1 и 3 групп вводили однократно внутримышечно в дозах 0,15, 0,3 и 0,6 мл соответственно. Крысам 4 группы - инъецировали по 0,15 мл анатоксина двукратно, с интервалом 7 дней, 5 группы - по 0,15 мл анатоксина и полиакриловую кислоту в дозе 0,2 мг/кг, которую использовали в качестве иммунномодулятора, 6 группы - первый раз иммунизировали дозой 0,15, а второй - 0,3 мл. Животных 7-й группы (контроль) иммунизировали вакциной «Коливак» в дозе 0,15 мл с ревакцинацией через 7 дней в дозе
0,3 мл. Сыворотку от животных всех групп получали через 7 дней после
второй инъекции. Через 7, 14 и 21 дней у животных брали кровь для исследования в РНГА на наличие специфических антитоксических антител. С этой целью использовали разработанный нами эритроцитарный диагностикум. Учет реакции проводили спустя 2 ч. За титр антител принимали наивысшее разведение сыворотки, при котором происходила агглютинация сенсибилизированных эритроцитов не менее чем на два креста.
Результаты. В опытах, проведенных ранее, по изучению первичного
иммунного ответа исследовались дозы анатоксина: 0,15, 0,3, 0,6 мл.
Поэтому эти же дозы исследовались и в данном опыте. Первоначально
рассмотрели накопление титров антител после однократной иммунизации
через 7, 14 и 21 день. Результаты данного опыта отражены в таблице 1, из
которой видно, что у животных всех групп после однократной инъекции
анатоксина происходит выработка специфических антител, однако
интенсивность их накопления различна. Наибольший титр антител
регистрируется у животных, которым инъецировали 0,15 мл анатоксина. В
Таблица 1 - Концентрация антитоксических антител в крови у крыс после днократного введения эшерихиозного анатоксина
Г руппа Титры антител
7 дней 14 дней 21день
1 1:8-1:32 1:2-1:8 -
2 1:2-1:4 - -
3 1:2-1:16 - -
сыворотке крови крыс 1 группы спустя 7 дней после введения анатоксина уровень титров антител находился в диапазоне 1:8-1:32. В меньшей степени специфические антитела образовывались у крыс из 2 и 3 групп. У них титры антител не превышали 1:4 и 1:16 соответственно. Следует отметить, что циркуляция антитоксических антител оказалась не
продолжительной. Спустя 14 дней они регистрировались в количестве 1:21:8. только у животных из 1 группы, тогда как у животных из 2 и 3 групп они к этому времени уже не выявлялись. Спустя 21 день антитоксические антитела не обнаруживались и у животных из 1 группы.
После этого нами проведены исследования с применением
двукратной иммунизации эшерихиозным анатоксином. В качестве
контроля была взята вакцина «Коливак», в состав которой входят
инактивированные термолабильный и термостабильный токсины.
Полученные результаты представлены в таблице 2, из данных которой
видно, что после двукратной иммунизации анатоксином в дозе 0,15 мл при
исследовании через 7 дней после последней инъекции, в сыворотке крови
Таблица 2 - Концентрация антитоксических антител в крови у крыс после двукратного введения эшерихиозного анатоксина
Показатель Г руппа
4 5 6 7
Титры антител 1:16-1:64 1:64-1:128 1:32-1:64 1:32-1:64
крыс 4 группы концентрация специфических антител увеличилась в 2 раза. Применение анатоксина совместно с полиакриловой кислотой (5 группа) способствовало более выраженному иммунному ответу, при этом специфические антитела обнаруживались в титрах 1:64-1:128, что является свидетельством адьювантного действия полимера. Иммунизация
возрастающей дозой анатоксина (6 группа) также способствовала двукратному нарастанию титров, однако величина этого роста не свидетельствовала о преимуществе данной схемы применения препарата. После двукратного применения вакцины «Коливак» в возрастающей дозе (7 группа) показатели титров антител у иммунизированных животных находились в пределах 1:32-1:64. Следовательно, полученный анатоксин
по своим иммуногенным свойствам не уступает известному препарату, а использование его с полиакриловой кислотой позволяет формировать у животных более напряженный антитоксический иммунитет
Выводы
1. Наиболее активное накопление титров антител происходит при введении более низких доз комплекса инактивированных токсинов Е.соН.
2. Продолжительность циркуляции антитоксических эшерихозных антител не превышает 14 дней.
3. Совместное применение анатоксина с полиакриловой кислотой обеспечивает усиление иммунного ответа.
Список литературы
1. Зароза В.Г. Эшерихиоз телят. М.: Агропромиздат, 1991. —239 с.
2. Куликовский А.В. Токсигенные эшерихии - актуальная проблема ветеринарии медицины / А.В. Куликовский, А.Н. Панин, В.В. Соснина // Ветеринария, 1997. - №3. -С. 25.
3. Ратинер Ю.А. Энтерогеморрагические кишечные палочки и вызываемые ими заболевания / Ю.А. Ратинер, В.М. Бондаренко, A. Sitonen // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунологии, 1998. - №5. - С. 87-96.
4. Степаншин Ю. Г. Бактерионосительство энтерогеморрагических эшерихий серовара О157:Н7 у животных / Ю.Г. Степаншин, Э.А. Светоч, Б.В. Ерусланов, В.А. Баннов, В.Н. Борзенков, Л.С. Каврук // Ветеринария, 2005. - №7. - С. 17-22.
5. Улиско И.Н. О необходимости пересмотра бактериологических критериев этиологической значимости диареегенных штаммов эшерихий при диагностике острых кишечных инфекций / И.Н. Улиско, А.П. Батуро, Э.Е. Романенко и др. // Жур. микриол., эпидемиол. и иммунол., 1996. - №6. - С. 7-10.
6. Урбан В. П. Болезни молодняка в промышленном животноводстве / В. П. Урбан, И. Л. Найманов // - М.: Колос, 1984. - 207 с.
7. Marks S. E. coli O157:H7 ranks as the fourth most costly food borne disease / S. Marks and T. Roberts // Food Saf., 1993. - P. 51-55.
8. Gray W.C. Experimental infection of calves and adult cattle with Escherichia coli O157:H7 / W.C. Gray, H.W. Moon // Appl. and Environ. Microbiol., 1995. - Vol.61. - N4. -P. 1586-1590.
9. Nataro J.P. Diarrheagenic E. coli / J.P. Nataro, J.B. Kaper // Clinical Microbiology Reviews, 1998. - №11. - P. 142-201.
10. Ngeleka M. Pathotypes of avian Escherichia coli as related to tsh-, pap-, pil- and iuc-DNA sequences, and antibiotic sensitivity of isolates from internal tissues and the cloacae of broilers / M. Ngeleka, L. Brereton, G. Brown, J. M. Fairbrother // Avian Dis., 2002.- Vol.46. - N1. - P. 143-152.
11. Acres S.D. Enterotoxigenec Escherichia coli infections in newborn calves / S.D. Acres // J. Dairy Sc., 1985. - Vol. 68. - N1. - P. 229-256.
12. Said A.M. Factours et marguens de virulence de souche Escherichia coli isoles de diarrhees chez des veaux ages de 4 a 45 jons en Algerie / A.M. Said, M. Contrepois, V.M. Per // Rev. evel. et med. vet. pays. troh., 1994. - Vol. 47. - N2. - P. 169-175.
13. Tzipori S. The actiology and diagnosis of calf diarrhoea / S. Tzipori // Veter. Rec., 1981. -Vol. 108. - № 13. - P. 510-514.
