УДК 632.3.38/632.914.2
Диагностика скрытой вирусной инфекции картофеля -важный этап семеноводства
Е.А. ПАВЛОВА, руководитель филиала ФГБУ «Россельхозцентр» по Ленинградской области e-mail: rsc47@mail.ru
Ленинградская область - благоприятная зона для выращивания семенного картофеля. В области производится более 35 тыс. т клубней, в том числе оригинальных - 3,8 тыс. т, элитных - 10,5 тыс. т. Посадочный материал поставляется в хозяйства Ленинградской области и других регионов России.
Важным этапом семеноводства является оценка качества семенного материала, которое в значительной мере определяется наличием или отсутствием вирусных патогенов. Сильное поражение растений вирусными болезнями изменяет его сортовые характеристики, приводит к значительному снижению урожая или полной его потере при дальнейшем воспроизводстве. Потери урожая происходят главным образом за счет уменьшения размера клубней и их числа с 1 растения и определяются комплексом факторов (процентом зараженных растений, штаммо-вым составом патогена и т.д.). У
1. Крапчатость листьев, вызванная поражением Х-вирусом картофеля
больных растений нарушается углеводный обмен, снижается содержание сахаров, крахмала, падает активность ферментов углеводного комплекса, в клубнях, полученных от таких растений, понижено содержание сухого вещества, крахмала и аскорбиновой кислоты.
Основные вирусные заболевания картофеля в Ленинградской области:
Х-вирус - крапчатая, или обыкновенная мозаика (фото 1). Вызывает симптомы от слабой мозаики до некротических пятен. На молодых листьях наблюдается светло-зеленая мозаика. Передается с клубнями и контактным способом. Потери урожая - 15-20 %. В комбинации с вирусами У и А вызывает сильную деформацию листьев, при этом потери урожая значительно возрастают;
Б-вирус - складчатая мозаика (фото 2). Симптомы заболевания чаще всего слабо выражены. Вирус может находиться в растениях в латентной форме. Иногда на зараженных растениях наблюдается волнистость краев и шероховатость листьев. Передается с клубнями, контактным способом, тлями, клопами. Потери урожая - 10-20 %;
2. Складчатая мозаика, вызванная поражением 5-вирусом картофеля
М-вирус - мозаичное закручивание листьев (фото 3). Характерной особенностью является мозаичное закручивание листьев. Закрученные листья по виду напоминают листья растений, пораженных ризоктонио-зом. Передается с клубнями, контактным способом, тлями, клопами. Потери урожая - 10-40 %;
У-вирус - полосчатая и морщинистая мозаики, крапчатость (фото 4). Проявляется в виде светло-зеленой мозаики или темно-бурых, похожих на брызги чернил некротических пятен, обламывания и усыхания листьев. Пораженные растения отстают в росте, имеют хлоротичную окраску. Передается с клубнями, контактным способом, тлями. Потери урожая -25-60 %;
1-вирус - скручивание листьев (фото 5). При первичной инфекции наблюдается слабое скручивание нижних листьев или заболевание протекает латентно. При вторичной инфекции в начале вегетации растений обнаруживается более интенсивное скручивание листьев вдоль средней жилки. Они становятся жесткими и шуршащими. Пораженные растения хлоротичные и отстают в росте. Передается с клубнями, тлями персистентным способом. Потери урожая - 20-60 %.
Для оздоровления картофеля от вирусной инфекции в семеноводческих хозяйствах области используют методы апикальной меристемы и клонового отбора (см. схему).
3. Мозаичное закручивание листьев, вызванное поражением М-вирусом картофеля
4 Защита и карантин растений № 2, 2014
4. Полосчатость, вызванная поражением Г-вирусом картофеля
5. Карликовость и скручивание листьев, вызванные поражением Х-вирусом картофеля
Сельхозпредприятия, занимающиеся первичным (оригинальным) семеноводством картофеля обязаны ежегодно проверять качество производимого ими материала на соответствие требованиям ГОСТ Р 53136-2008 «Картофель семенной. Технические условия». На латентную вирусную инфекцию проверяются
все классы оригинальных семян -микрорастения, мини-клубни, клоны, первое полевое поколение и супер-суперэлита.
Достоверно диагностировать вирусные заболевания можно лишь при использовании чувствительных лабораторных серологических методов, основанных на реакции между белковыми оболочками вирусной частицы и специфичного к данному вирусному белку антитела. Основным, наиболее точным и относительно простым в выполнении является метод иммуноферментного анализа (ИФА).
Филиал ФГБУ «Россельхозцентр» по Ленинградской области имеет аккредитованную лабораторию по диагностике картофеля на скрытую вирусную инфекцию. Материалы и методы в лаборатории используются в соответствии с требованиями нормативной документации.
Отбор проб клубней и листьев в хозяйствах проводят специалисты нашего филиала. Пробы снабжают этикеткой с указанием хозяйства, сорта, класса семян и доставляют в лабораторию.
Тестирование семенного картофеля проводят летом (листовая диагностика) и в зимне-весенний период (послеуборочный контроль -клубневая диагностика).
При клубневой диагностике дополнительно используют метод индексации клубней, индексирован-
Нормы отбора проб (листьев/клубней) для тестирования
Число
Микрорастения 1 % от партии
Клоновые Каждый клон,
питомники намеченный к отбору
Мини-клубни 1 % от партии
Первое полевое Не менее
поколение 100 клубней/50 проб с га
Супер- Не менее 200 клубней
суперэлита с поля
ные клубни высаживают в пластиковые ящики, заполненные торфяным грунтом. Число проб, необходимое для тестирования в летний период и зимне-весенний-зимний,представлены в таблице.
Диагностика вирусов X, Б, М, У, в нашей лаборатории проводится методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием реактивов фирмы «ВюгеЬа АО» (Швейцария). Процедура ИФА состоит из нескольких этапов: нанесение антител; внесение сока анализируемых образцов; внесение конъюгатов; внесение субстратного буфера. Лунки, где содержится сок больных растений, должны пожелтеть.
Учет результатов проводится визуально или фотометрическим методом, фиксируются номера инфицированных клонов в питомникахотбора или определяется процент инфицированных образцов в партии.
Ежегодно филиалом на соответствие требованиям ГОСТ Р 531362008 диагностируется 12-15 тыс. проб оригинальных семян картофеля. На основании результатов анализа в хозяйствах проводят выбраковку партий, не соответствующих требованиям стандарта, или их перевод в более низшую категорию.
Эффективность оздоровления семенных клубней картофеля подтверждена на практике. Сельхозпредприятия, использующие безвирусный посадочный материал (ЗАО «Племзавод «Агро-Балт», СПК «Детскосельский», ЗАО «Агротехника», ЗАО «Октябрьское», ЗАО «Лю-бань» и др.), получают более 350 ц/га картофеля.
ОЗДОРОВЛЕННЫЙ ИСХОДНЫЙ МАТЕРИАЛ
Микрорастения (культура «in vitro») I Базовые клоны (питомник отбора) 1
1 Мини-клубни п к Первое полевое поколение + Базовые клоны (питомник испытания)
Супер-суперэлита
Схема получения оригинального семенного картофеля на основе микроклонального размножения и (базовых клонов