CC BY
53
УДК 616.12+616.988.23-078
Жданюк Ю.И., Гомозова Е.А., Такташов Г.С.
ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СПЕЦИФИЧЕСКОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА А ПРИ ПОРАЖЕНИИ МИОКАРДА, ВЫЗВАННОМ ЭНТЕРОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ
Донецкий национальный медицинский университет им. М. Горького , г. Красный Лиман
Лабораторная верификация энтеровирусного поражения миокарда представляет большие трудности, так как требует проведения культуральных или вирусологических исследований с отсро-ченым результатом, а в ряде случаев - эндомиокардиальной биопсии. Эта проблема решена после создания отечественных тест-систем иммуноферментного анализа для определения специфических антител - иммуноглобулинов классов M, A, G к энтеровирусам. Целью работы было выяснение диагностических возможностей определения специфического иммуноглобулина А в диагностике энтеровирусного поражения миокарда. У 104 больных (68 мужчин и 36 женщин), находившихся на стационарном лечении в кардиологическом отделении, исследовали содержание специфических иммуноглобулинов классов G и А к кардиотропным энтеровирусам Коксаки и Экхо. Установлено, что у 51 больного (49 %) было достоверное повышение уровня иммуноглобулина G (Р <0,01), у 47 (45%) - достоверное повышение уровня иммуноглобулина А (Р <0,05). Повышение уровня иммуноглобулина А выявлено у 56,9 % больных с повышенным уровнем иммуноглобулина G и у 33,9% больных с нормальным уровнем иммуноглобулина G к вирусам Коксаки и Экхо. Корреляционная связь между повышением уровней антител - иммуноглобулинов G и А отсутствовала. Сделан вывод, что иммуноглобулин А является независимым маркером кардиотропной энтеровирусной инфекции, приводящей к поражению миокарда и развитию кардиальной патологии, поэтому целесообразно включение его в комплекс исследований у кардиологических больных для верификации диагноза.
Ключевые слова: энтеровирусная инфекция, поражение миокарда, специфический иммуноглобулин А.
Энтеровирусы (ЭВ) обладают способностью персистировать в клетках различных органов, вызывая их повреждение и развитие воспалительных реакций. Наиболее часто поражаются нервная система, органы дыхания, пищеварения, сердце [1]. Такое многообразие клинических проявлений энтеровирусной инфекции (ЭВИ) обусловлено тропностью различных видов ЭВ к определенным клеткам внутренних органов, в которых они могут находиться и вызывать тяжелые повреждения вплоть до некроза [2].
Кардиотропностью обладают ЭВ видов Коксаки и Экхо (ЭВКЭ), персистирующие в кардио-миоцитах [3]. Их повреждающее действие может приводить к развитию сердечной недостаточности, нарушениям ритма и проводимости [4, 5, 6].
С учетом этих обстоятельств актуальным является решение проблемы ранней и достоверной диагностики энтеровирусной инфекции (ЭВИ) с целью назначения своевременной этио-патогенетической терапии и предупреждения развития кардиальной патологии. До недавнего времени ранняя диагностика ЭВИ была затруднена в связи с отсутствием доступных тест-систем иммуноферментного анализа для определения специфических антител (АТ) к ЭВКЭ, а вирусологический и культуральный методы идентификации ЭВ были трудоемкими и давали отсроченный результат. Полимеразная цепная рекция (ПЦР) также не является достаточно корректным методом диагностики ЭВИ, так как низкая концентрация вируса в периферической крови может быть недостаточна для его детек-
ции, а прижизненное определение в кардиомио-цитах требует проведения эндомиокардиальной биопсии, что возможно только в специализированных кардиохирургических центрах [7, 8, 9].
Ситуация с диагностикой ЭВИ кардинально изменилась после создания отечественных тест-систем иммуноферментного анализа для определения АТ к ЭВКЭ. Стала возможной ранняя верификация и контроль течения ЭВИ, что существенно изменило тактику лечения и прогноз для больных.
В ранее проведенных исследованиях изучалось содержание специфических АТ к ЭВКЭ -иммуноглобулинов классов M и G (IgM и IgG) у больных кардиальной патологией, развившейся вследствие острой или ранее перенесенной ЭВИ [10, 11]. Изменение содержания сывороточного иммуноглобулина класса А (^А) и его значение в диагностике ЭВИ с помощью отечественных тест-систем еще не исследовалось, поэтому представленная работа посвящена решению этого вопроса.
Цель исследования
Изучить изменение уровня ^А АТ к ЭВКЭ у больных кардиальной патологией, вызванной ЭВИ и установить диагностические возможности определения специфического ^А при ЭВИ.
Материалы и методы исследования
Были обследованы 104 больных (68 мужчин и 36 женщин), находившихся на стационарном лечении в кардиологическом отделении, кото-
рых беспокоили симптомы, свидетельствовавшие о нарушении функции миокарда - аритмии постоянного или преходящего характера, явления сердечной недостаточности - одышка при обычной физической нагрузке, тахикардия, общая слабость. Давность заболевания составляла от 3 месяцев до 4 лет. Всем больным был проведен полный комплекс функциональных исследований, который включал следующие методы: электрокардиографию, эхокардиографию, холтеровский мониторинг, некоторым пациентам по показаниям - велоэргометрию.
Также больным были проведены общеклинические и биохимические лабораторные исследования для уточнения генеза патологии:
- общеклинические анализы крови и мочи,
- биохимические исследования крови, включая определение АЛТ и АСТ,
- исследования для диагностики ревматизма: определение циркулирующих иммунных ком-
плексов, содержание антистрептолизиновых антител, С-реактивный протеин, ревмофактор,
- исследования гормонов щитовидной железы и антител к тиреоглобулину и тиреоперокси-дазе для исключения патологии щитовидной железы,
- исследования для исключения острого коронарного синдрома: тропониновый тест, определение креатинфосфокиназы.
В результате проведенных исследований у пациентов были исключены аутоиммунные заболевания, кардиомиопатии, ревматизм, тиреотоксикоз, острое нарушение коронарного кровообращения и другие возможные причины повреждения миокарда и развития миокардиаль-ной дисфункции.
Клинические проявления кардиальной патологии у больных и их частота представлены в таблице 1.
Таблица 1
Клинические проявления кардиальной патологии у обследованных больных
Симптомы сердечной недостаточности, нарушения ритма и проводимости Количество пациентов Удельный вес, %
Постоянная форма мерцательной аритмии 23 22,1
Пароксизмальная форма мерцательной аритмии 16 15,4
Трепетание предсердий 6 5,8
Предсердная экстрасистолия 21 20,2
Левожелудочковая экстрасистолия 11 10,6
Политопная желудочковая экстрасистолия 3 2,9
Желудочковая бигеминия 2 1,9
Пароксизмальная наджелудочковая тахикардия 8 7,7
Пароксизмальная желудочковая тахикардия 4 3,8
Миграция водителя ритма 3 2,9
Парасистолия 2 1,9
Одышка, тахикардия 14 13,2
Учитывая, что возможной причиной поражения миокарда могли быть кардиотропные ЭВКЭ, для уточнения диагноза всем 104 больным было проведено исследование содержания в крови АТ IgG к ЭВКЭ. Для выяснения значимости специфического сывороточного IgA в диагностике ЭВИ, сопровождающейся поражением миокарда, тем же 104 пациентам проведено его определение. Исследование проводилось иммуно-ферментным методом с использованием тест-систем иммуноферментного анализа производства ООО "УкрмедДон", сертифицированных в Украине (свидетельство о государственной регистрации № 6113/2007 от 15.02.2007).
В качестве нормы использовались результаты исследования 40 здоровых доноров.
Проверка характера распределения полученных значений содержания АТ IgG и IgA к ЭВКЭ с помощью критерия W Шапиро-Уилка выявила нормальное распределение вариаци-
онного ряда. В связи с этим статистическая обработка результатов исследования проводилась с применением пакета прикладных программ "Med Stat" с использованием параметрических критериев [12].
Результаты исследования и обсуждение
При анализе результатов проведенного исследования установлено, что уровень IgG АТ к ЭВКЭ оказался повышенным в сравнении с показателями здоровых лиц у 51 пациента из 104, что составляло 49% (Таблица 2). Это свидетельствовало о ранее перенесенной ЭВИ, которая могла быть причиной повреждения миокарда и развития кардиальной патологии.
Уровень специфических ІдА АТ к ЭВКЭ был также повышен в сравнении со здоровыми у 47 пациентов из 104, что составило 45% от числа обследованных. Таблица 3.
Таблица 2
нь IgG АТ к ЭВКЭ у здоровых и больных исследуемой группы
Группы обследованных Количество обследованных Содержание IgG АТ к ЭВКЭ, МЕ/мл
Здоровые 40 4,4 ± 1,8
Больные 51 20,2 ± 1,4*
Примечание: * - Р < 0,01 при сравнении обследованных пациентов и здоровых лиц.
Таблица 3
Уровень IgA АТ к ЭВКЭ у здоровых и больных исследуемой группы
Группы обследованных Количество обследованных Содержание ^А АТ к ЭВКЭ, МЕ/мл
Здоровые 40 3,5 ± 0,4
Больные 47 5,9 ± 1,9*
Примечание: * - Р < 0,05 при сравнении обследованных пацие
При исследования соотношения пациентов с разницей уровней АТ к ЭВКЭ классов IgG и IgA выявлено, что повышение уровня АТ к ЭВКЭ класса ^А на фоне повышенного IgG к ЭВКЭ отмечалось у 29 пациентов, что составляло 56,9% лиц с повышенным IgG к ЭВКЭ. Повышенный уровень АТ к ЭВКЭ класса ^А при нормальном уровне IgG АТ к ЭВКЭ был у 18 пациентов, что составляло 33,9% группы пациентов с нормальным IgG к ЭВКЭ.
При проведении корреляционного анализа уровней IgG и ^А к ЭВКЭ значимой корреляционной связи не выявлено.
Таким образом, можно утверждать, что повышение ^А АТ к ЭВКЭ является независимым маркером активной ЭВИ, приводящей к поражению миокарда и развитию кардиальной патологии. С целью верификации диагноза у кардиологических больных целесообразно использовать определение ^А АТ к ЭВКЭ независимо от уровня других классов специфических Ig-АТ.
Выводы
1. У больных с симптомами кардиальной патологии уровень специфических IgG АТ к ЭВКЭ был достоверно повышен у 49% (Р <0,01).
2. У 45% больных с кардиальной патологией отмечено достоверное повышение уровня ^А АТ к ЭВКЭ (Р <0,05).
3. Повышение уровня ^А АТ к ЭВКЭ выявлено у 56,9 % больных с повышенным уровнем IgG АТ к ЭВКЭ и у 33,9% больных с нормальным уровнем IgG АТ к ЭВКЭ.
4. Отсутствовала корреляция между уровнями специфических ^А и IgG АТ к ЭВКЭ.
5. ^А АТ к ЭВКЭ является независимым маркером кардиотропной ЭВИ, приводящей к поражению миокарда и развитию кардиальной патологии.
6. Целесообразно включение определения специфического ^А к ЭВКЭ в комплекс исследований у больных с кардиальной патологией для верификации диагноза ЭВИ.
Литература
1. Бондарев Л.С. Энтеровирусные инфекции (клинические проявления, лабораторная диагностика, терапия) / Л.С. Бондарев // Лікування та діагностика. - 2001. - № 2. - С. 46-50.
2. Задорожна В.І. Сучасні проблеми ентеровірусних інфекцій / В.І. Задорожна, В.І. Бондаренко // Сучасні інфекції. - 2010. - № 2. - С. 47-51.
3. Klingel K. Ongoing enterovirus-induced myocarditis is associated with persistent heart muscle infection: quantitative analysis of virus replication, tissue damage and inflammation / K. Klingel, A. Hohendl, M. Carm [et al.] // Proc. Natl. Med. Sci. - 2012. - Vol. 89. - P. 314-318.
4. Tracy S. A molecular and serologic evaluation of enteroviral involvement in human myocarditis / S.Tracy, N. Chapman, B.M. McManus [et al.] // J. Mol. Cell. Cardiol. - 2010. - Vol. 22. - P. 403414.
i и здоровых лиц.
5. McManus B.M. Direct myocardial enjury by enterovirus: a central role in the evolution of murine myocarditis / B.M.McManus, L.N.Chow, J.E.Wilson [et al.] // Clin. Immunol. Immunopathol. -2003. - Vol. 68. - P. 159-169.
6. Huber S.A. Coxsackievirus-induced myocarditis is depend on distinct immunopathogenetic responses in different strains of mice / S.A. Huber // Lab. Invest. - 2007. - Vol. 76, № 5. - P. 691 - 701.
7. Амвросьева Т.В. Лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций сердца / Т.В. Амвросьева, Н.В. Поклонская, О.В. Дьяконова [и др.] // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2004. - № 3. - С. 58-62. 8. Weiss L.M. Detection of coxsackievirus B3 in myocardial tissues by the poly-merase chain reaction / L.M. Weiss, L.A. Movahed, M.E. Billing-ham [et al.] // Am. J. Pathol. - 2011. - Vol. 138. - P. 497-503.
8. Archard L.C. Characterization of coxsackie B virus RNA in myocardium from patients with dilated cardiomyopathy by nucleotide sequencing of reverse transcription-nested polymerase chain reaction products / L.C. Archard, M.A. Khan, B.A. Soteriou [et al.] // Hum. Pathol. - 2008. - Vol. 29. - P. 578-584.
9. Жданюк Ю.И. Значение определения иммуноглобулина М в диагностике острого энтеровирусного миокардита / Ю.И.Жданюк, А.С.Прилуцкий, Д.А. Лесниченко [и др.] // Актуальні проблеми акушерства і гінекології, клінічної імунології та медичної генетики. - Збірник наукових праць. Випуск 18. Київ-Луганськ, 2010. - С. 148-155.
10. Прилуцкий А.С. Значение определения иммуноглобулина G в диагностике поражений миокарда, вызванных энтеровирусной инфекцией / А.С. Прилуцкий, Ю.И.Жданюк, Д.А.Лесниченко [и др.] // Таврический медико-биологический вестник. - 2010. -Том 13. - № 3 (51). - С. 163-166.
11. Лях Ю.Е. Основы компьютерной биостатистики: анализ информации в биологии, медицине и фармации статистическим пакетом MedStat / Ю.Е. Лях, В.Г. Гурьянов, В.Н. Хоменко, О.А. Панченко - Донецк: ЧП Папакица Е.К., 2006. - 214 с.
References
1. Bondarev L.S. Jenterovirusnye infekcii (klinicheskie projavlenija, laboratornaja diagnostika, terapija) / L.S. Bondarev // Lіkuvannja ta dіagnostika. - 2001. - № 2. - S. 46-50.
2. Zadorozhna V.I. Suchasrn problemi enterovіrusnih mfekcj / V.I. Zadorozhna, V.I. Bondarenko // Suchasrn nekcM. - 2010. - № 2. -S. 47-51.
3. Klingel K. Ongoing enterovirus-induced myocarditis is associated with persistent heart muscle infection: quantitative analysis of virus replication, tissue damage and inflammation / K. Klingel, A. Hohendl, M. Carm [et al.] // Proc. Natl. Med. Sci. - 2012. - Vol. 89.
- P. 314-318.
4. Tracy S. A molecular and serologic evaluation of enteroviral involvement in human myocarditis / S.Tracy, N. Chapman, B.M. McManus [et al.] // J. Mol. Cell. Cardiol. - 2010. - Vol. 22. - P. 403414.
5. McManus B.M. Direct myocardial enjury by enterovirus: a central role in the evolution of murine myocarditis / B.M.McManus, L.N.Chow, J.E.Wilson [et al.] // Clin. Immunol. Immunopathol. -
2003. - Vol. 68. - P. 159-169.
6. Huber S.A. Coxsackievirus-induced myocarditis is depend on distinct immunopathogenetic responses in different strains of mice / S.A. Huber // Lab. Invest. - 2007. - Vol. 76, № 5. - P. 691 - 701.
7. Amvros'eva T.V. Laboratornaja diagnostika jenterovirusnyh infekcij serdca / T.V. Amvros'eva, N.V. Poklonskaja, O.V. D'jakonova [i dr.] // Zhurnal mikrobiologii, jepidemiologii i immunobiologii. -
2004. - № 3. - S. 58-62. 8. Weiss L.M. Detection of coxsackievirus B3 in myocardial tissues by the polymerase chain reaction / L.M. Weiss, L.A. Movahed, M.E. Billingham [et al.] // Am. J. Pathol. - 2011. - Vol. 138. - P. 497-503.
8. Archard L.C. Characterization of coxsackie B virus RNA in myocardium from patients with dilated cardiomyopathy by nucleotide sequencing of reverse transcription-nested polymerase chain reaction products / L.C. Archard, M.A. Khan, B.A. Soteriou [et al.] // Hum. Pathol. - 2008. - Vol. 29. - P. 578-584.
9. Zhdanjuk Ju.I. Znachenie opredelenija immunoglobulina M v diagnostike ostrogo jenterovirusnogo miokardita / Ju.I.Zhdanjuk, A.S.Priluckij, D.A. Lesnichenko [i dr.] // Aktual'n problemi akusherstva і g^eko^^, klm^noi' іmunologії ta medichnoi' genetiki. - ZbHTiik naukovih prac'. Vipusk 18. Knv-Lugans'k, 2010.
- S. 148-155.
10. Priluckij A.S. Znachenie opredelenija immunoglobulina G v diagnostike porazhenij miokarda, vyzvannyh jenterovirusnoj infekciej / A.S. Priluckij, Ju.I.Zhdanjuk, D.A.Lesnichenko [i dr.] // Tavricheskij mediko-biologicheskij vestnik. - 2010. - Tom 13. - № 3 (51). - S. 163-166.
11. Ljah Ju.E. Osnovy komp'juternoj biostatistiki: analiz informacii v Ju.E. Ljah, V.G. Gur'janov, V.N. Homenko, O.A. Panchenko -
biologii, medicine i farmacii statisticheskim paketom MedStat / Doneck: ChP Papakica E.K., 2006. - 214 s.
Реферат
ДІАГНОСТИЧНЕ ЗНАЧЕННЯ ВИЗНАЧЕННЯ СПЕЦИФІЧНОГО
ІМУНОГЛОБУЛІНУ А ПРИ УРАЖЕННІ МІОКАРДУ, СПРИЧИНЕНОМУ ЕНТЕРОВІРУСНОЮ ІНФЕКЦІЄЮ Жданюк Ю.І, Гомозова О.А., Такташов Г.С.
Ключові слова: ентеровірусна інфекція, ураження міокарду, специфічний імуноглобулін А.
Лабораторна верифікація ентеровірусного ураження міокарду являє великі труднощі, так як потребує проведення трудомістких культуральних або вірусологічних досліджень з відстроченим результатом, а в ряді випадків - ендоміокардіальної біопсії. Ця проблема вирішена посля створення вітчизняних тест-систем імуноферментного аналізу для визначення специфічних антитіл - імуноглобулінів класів M, A, G до ентеровірусів. Метою роботы було з'ясування діагностичних спроможностей дослідження специфічного імуноглобуліну А в діагностиці ентеровірусного ураження міокарду. У 104 хворих (68 чоловіків і 36 жінок), перебуваючих на стаціонарному лікуванні в кардіологічному відділенні, іму-ноферментним методом досліджували вміст специфічних антитіл - імуноглобулінів класів G і А до кардіотропних ентеровірусів Коксакі і Екхо. Встановлено, що у 51 хворого (49 %) було достовірне підвищення рівня імуноглобуліну G (Р <0,01), у 47 (45%) - достовірне підвищення рівня імуноглобуліну А (Р <0,05). Підвищення рівня імуноглобуліна А виявлено у 56,9 % хворих з підвищеним рівнем імуноглобуліну G та у 33,9% хворих з нормальним рівнем імуноглобуліну G до вірусів Коксакі і Екхо. Корре-ляційний зв'язок між підвищенням рівней антитіл - імуноглобулінів G і А був відсутнім. Зроблено висновок, що імуноглобулін А є незалежним маркером кардіотропної ентеровірусної інфекції, що призводить до ураження міокарду і розвитку кардіальної патології, отже доцільне включення його в комплекс досліджень у кардіологічних хворих для верифікації діагнозу.
Summary
DIAGNOSTIC VALUE OF ASSESSING SPECIFIC IMMUNOGLOBULIN A UNDER MYOCARDIAL DAMAGES CAUSED BY
ENTEROVIRAL INFECTION
Zhdanyuk Yu.I, Gomozov O.A., Taktashov G.S.
Key words: enterovirus infection, myocardial damage, specific immunoglobulin A.
Laboratory verification of enteroviral myocardial damage is associated with some difficulties, it requires effortful culture or virological studies with delayed results, and in some cases even end myocardial biopsy. This problem has been solved due to working out in-home ELISA test kits that helps to identify specific antibodies - immunoglobulins of classes M, A, G to enteroviruses. The aim of the research was to clear up the diagnostic work capacity in identifying specific immunoglobulin A in the diagnosis of myocardial damages caused by enterovirus. In 104 inpatients (68 men and 36 women), being hospitalized at the cardiology department, ELISA was used to assess the contents of specific antibodies - immunoglobulins G and A to cardiotropic enteroviruses Coxsackie and Ekho. We found that 51 patients (49%) had a significant increase in the level of immunoglobulin G (P <0.01) in 47 (45%) - a significant increase in the level of immunoglobulin A (P <0.05). Increased levels of immunoglobulin A was detected in 56.9% of patients with elevated levels of immunoglobulin G and in 33.9% of patients with normal levels of immunoglobulin G to Coxsackie virus and Ekho. There was no correlation between increased levels of antibodies - immunoglobulin G and A. We can conclude that immunoglobulin A is an independent marker of cardiotropic enterovirus infection that leads to the affection of myocardium and cardiac pathology. Therefore it is appropriate to include it in the set of investigations for cardiac patients to verify the diagnosis.
