ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ИММУНОРЕГУЛЯТОРНЫХ МЕДИАТОРОВ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ СТЕПЕНИ РАСПРОСТРАНЕННОСТИ ОПУХОЛЕВОГО РОСТА ПРИ ПОЧЕЧНО-КЛЕТОЧНОМ РАКЕ Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

https://doi.org/10.29188/2222-8543-2022-15-1-20-25

Диагностическое значение иммунорегуляторныых медиаторов

в зависимости от степени при почечно-клеточном ра

КЛИНИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

аспространенности опухолевого роста

ке

Н.Б. Захарова, А.Н. Понукалин, М.Л. Чехонацкая, Ю.М. Комягина, А.Б. Бучарская

ФГБОУ ВО «Саратовский Государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского»; д. 112, ул. Большая Казачья, Саратов, 410012, Россия

Контакт: Захарова Наталия Борисовна, lipidgormon@mail.ru Аннотация:

Введение. В последние годы установлено, что исследование уровня молекулярно- генетических биомаркеров в сыворотке крови и тканях, характеризующих активность инфильтрирующих опухоль иммунных клеток или опухолевое микроокружение, дает возможность провести оценку эффективности им-муногенных эффектов противоопухолевой терапии, а также прогнозировать развитие ее осложнений. Диагностическое значение иммунорегуляторных медиаторов в периферической крови в качестве прогностических биомаркеров иммунотерапии у больных почечно-клеточным раком (ПКР) подтверждено небольшим числом исследований. Это ограничивает дальнейшее развитие эффективных стратегий лечения больных ПКР. Необходимы дополнительные исследования по поиску молекулярных маркеров.

Цель исследования. Установить диагностическое значение изменений уровня медиаторов опухолевого микроокружения в сыворотке крови у больных ПКР в зависимости от стадии заболевания.

Материал и методы. В исследование включено 66 больных ПКР и 30 практически здоровых лиц, составивших группу контроля. Методом твердофазного иммуноферментного анализа проведено определение в сыворотке крови уровня вырабатываемых клетками опухолевого микроокружения семи иммунорегуляторных медиаторов: провоспалительные цитокины - TNFa, INFy; хемокин-МСР1; колониестимулирующие факторы - G- CSF, GM- CSF; факторы роста - VEGF, TGF-ß1.

Результаты. Установлено, что на 1 и 2 стадиях ПКР в сыворотке крови по сравнению с группой условно здоровых лиц нарастает уровень цитокинов/хе-мокинов и колониестимулирующих факторов, за исключением содержания INFy. При прогрессии опухолевого роста у больных с 3 и 4 стадиями заболевания в сыворотке крови сохраняется статистически значимое высокое содержания цитокинов/хемокинов и колониестимулирующих факторов, снижается уровень INFy и нарастает концентрация факторов роста (VEGF,TGF-ß1). Расчетные данные AUC показали хорошее качество модели прогнозирования, что дает основание считать нарастание в сыворотке крови содержания медиаторов опухолевого микроокружения ПКР показателем стадии заболевания и распространенности опухолевого роста, а также отнести к перспективным лабораторным маркерам прогноза эффективности иммунотерапевтиче-ских технологий лечения.

Выводы. Рост опухолевых клеток на начальных стадиях ПКР сопровождается значимым увеличением содержания провоспалительных цитокинов/хемокинов и колониестимулирующих факторов в сыворотке крови. При прогрессии опухолевого роста у больных почечно-клеточным раком имеет место активация выброса в кровоток таких факторов роста как TGF-ß1 и VEGF. Попадающие в периферический кровоток медиаторы опухолевого микроокружения (цитокины/хемокины, колониестимулирующие и факторы роста) относятся к прогностическим показателям для оценки эффективности иммуноте-рапевтических технологий лечения опухолевых заболеваний.

Ключевые слова: иммуноонкологические биомаркеры; микроокружение опухоли; почечно-клеточный рак.

Для цитирования: Захарова Н.Б., Понукалин А.Н., Чехонацкая М.Л., Комягина Ю.М., Бучарская А.Б. Диагностическое значение иммунорегуляторных медиаторов в зависимости от степени распространенности опухолевого роста при почечно-клеточном раке. Экспериментальная и клиническая урология 2022;15(1):20-25; https://doi.org/10.29188/2222-8543-2022-15-1-20-25

https://doi.org/10.29188/2222-8543-2022-15-l-20-25

Diagnostic value of immunoregulatory mediators in depending on the extent of tumor growth in renal cell carcinoma

CLINICAL STUDY

N.B. Zakharova, A.N. Ponukalin, M.L. Chekhonatskaya, Yu.M. Komyagina, A.B. Bucharskaya

Saratov State Medical University n.a. V.I. Razumovsky; 112, Bolshaya Kazachya, 410012, Saratov, Russia

Contacts: Natalja B. Zakharova; lipidgormon@mail.ru Summary:

Introduction. In recent years, it has been established that the study of the content of molecular genetic biomarkers in blood serum, tissues characterizing the activity of tumor-infiltrating immune cells or tumor microenvironment makes it possible to evaluate the effectiveness of immunogenic effects of antitumor therapy, as well as to predict the development of its complications. The diagnostic value of immunoregulatory mediators in peripheral blood as prognostic biomarkers of immunotherapy in patients with renal cell carcinoma (RCC) has been confirmed by a small number of studies. This limits the further development of effective strategies for the treatment of patients with renal cell carcinoma. Additional research is needed to find molecular markers.

The purpose of the study - to establish the diagnostic value of changes in the serum content of tumor microenvironment mediators from the stage of the disease in patients with RCC.

Material and methods. The study included 66 patients with RCC and 30 practically healthy individuals who made up the control group. Additionally, by the method of solid-phase enzyme immunoassay, the serum content of seven mediators produced by tumor microenvironment cells was determined: proinflammatory cytokines -TNFa, INFy; chemokine - MCP1; colony-stimulating factors - G- CSF GM- CSF; growth factors - VEGF, TGF-01.

Results. It was found that at the 1st and 2nd stages of the disease, the level of cytokines/chemokines and colony-stimulating factors in the blood serum increases in comparison with the group of conditionally healthy individuals, with the exception of the content of INFy. With the progression of tumor growth in patients with stages 3 and 4 of the disease, a statistically significant high content of cytokines/chemokines and colony-stimulating factors remains in the blood serum, the level of INFy decreases and the concentration of growth factors (VEGF, TGF-01) increases. The calculated AUC data showed a good quality of the prediction model, which gives reason to consider the increase in the serum content of mediators of the tumor microenvironment of RCC as an indicator of the stage of the disease and the prevalence of tumor growth, as well as a promising laboratory marker for predicting the effectiveness of immunotherapy treatment technologies.

Conclusions. The growth of tumor cells in the initial stages of RCC is accompanied by a significant increase in the content of pro-inflammatory cytokines/chemokines and colony-stimulating factors in the blood serum. During the progression of tumor growth in patients with RCC, there is an activation of the release of growth factors such as TGF-01 and VEGF into the bloodstream. Mediators of the tumor microenvironment entering the peripheral bloodstream (cytokines/chemokines, colony-stimulating and growth factors) are prognostic indicators for evaluating the effectiveness of immunotherapy technologies for the treatment of tumor diseases.

Key words: immuno-oncological biomarkers; tumor microenvironment; renal cell carcinoma.

For citation: Zakharova N.B., Ponukalin A.N.,Chekhonatskaya M.L., Komyagina Yu.M., Bucharskaya A.B. Diagnostic value of immunoregulatory mediators in depending on the extent of tumor growth in renal cell carcinoma. Experimental and Clinical Urology, 2022;15(1):20-25; https://doi.org/10.29188/2222-8543-2022-15-1-20-25

ВВЕДЕНИЕ

В последнее десятилетие наблюдается рост заболеваемости почечно-клеточным раком (ПКР), происходящим из эпителиальных клеток почечных канальцев. В мире ПКР занимает 9 место по распространенности онкологических заболеваний [1]. Несмотря на достижения в области методов визуализации данной патологии, позволяющие выявлять до 50-60% случаев локализованного ПКР, у 25-30% больных уже при первичном обследовании, выявляют отдаленные метастазы [1, 2].

Развитие эффективных методов лечения метастатических стадий ПКР в настоящее время связывают с внедрением в клиническую практику иммунотерапии. ПКР представляет собой одну из наиболее иммуно-ин-фильтрированных опухолей с высоким уровнем инфильтрации Т-клетками, содержащую опухолетранс-формированные макрофаги (ТАМ) и иммунные инфильтраты [3]. Цитокины и хемокины, экспрессируе-мые ТАМ, подавляют противоопухолевые иммунные механизмы и вызывают прогрессию опухолевого роста. Высокую эффективность при лечении заболевания показали комбинированные стратегии лечения, сочетающие антиангиогенную терапию и иммунотерапию, основанную на подавлении иммунных контрольных точек («контрольные точки» - молекулы на определенных иммунных клетках, которые необходимо активировать (или инактивировать) для начала иммунного ответа) [4]. В последние годы установлено, что исследование содержания молекулярно-генетических биомаркеров в сыворотке крови и тканях, характеризующих активность инфильтрирующих опухоль иммунных клеток или опухолевое микроокружение (МкО), дает возможность провести оценку эффективности имму-ногенных эффектов противоопухолевой терапии, а также прогнозировать развитие ее осложнений [5]. Одним из ведущих участников формирования МкО являются белки-медиаторы иммунорегуляторных процес-

сов - цитокины/хемокины, колониестимулирующие и факторы роста, вырабатываемые как клетками опухоли, так и ее микроокружения [6]. Перестройка цитокино-вой сети МкО связана с развитием эпителиально-мезен-химального перехода (ЭМП), автономной цитокиновой сети, сопровождающей прогрессию опухолевого роста и активацией метастатического процесса [7]. Для оценки эффективности иммунотерапии показано прогностическое значение таких цитокинов, как TNFa (фактор некроза опухоли-альфа), TGF-^1 (трансформирующий фактор роста), IL-6 (интерлейкин 6), IL-8 (ин-терлейкин 8) и IL-10 (интерлейкин 10) и др. [8].

В настоящее время имеются данные о следующих биомаркерах, влияющих на успех иммунотерапии рака:

• опухолевая мутационная нагрузка;

• общий иммунный статус пациента;

• наличие инфильтратов Т-лимфоцитов;

• экспрессия опухолевого PD-L1;

• чувствительность опухолевых клеток к уничтожению Т-клеток (включая экспрессию MHC (major histocompatibility complex), функциональный путь рецептора IFN-g);

• воспаление, опосредованное миелоидными клетками (высокий уровень С-реактивного белка и IL-6);

• высокий уровень лактатдегидрогеназы в сыворотке (что отражает как опухолевую нагрузку, так и анаэробный гликолиз) [9-11].

Диагностическое значение иммунорегуляторных медиаторов в периферической крови в качестве прогностических биомаркеров иммунотерапии у больных ПКР подтверждено лишь небольшим числом исследований [12]. Это ограничивает дальнейшее развитие эффективных стратегий лечения больных ПКР. Необходимы дополнительные исследования по поиску молекулярных маркеров при ПКР. Цель исследования - установить диагностическое значение изменений уровня медиаторов опухолевого микроокружения в сыворотке крови у больных ПКР в зависимости от стадии заболевания. Н

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

В исследование включено 66 больных ПКР, проходивших обследование и лечение в отделении онкоуроло-гии НИИ фундаментальной и клинической уронефро-логии ФГБОУ ВО «Саратовского ГМУ им. В.И. Разумовского» Минздрава России. Общая характеристика больных с ПКР представлена в таблице 1. Все обследованные больные были разделены на две группы в соответствии со стадиями TNM. В первую группу вошли пациенты с 12 стадиями заболевания и один больной с синхронным ПКР (38 пациентов), во вторую - с 3-4 стадиями (28 пациентов). Контрольную группу составили 30 практически здоровых лиц (мужчин - 16, женщин - 14, средний

Таблица 1. Характеристика больных ПКР Table 1. Characteristics of patients with RCC

Показатель Indicator Количество пациентов, n (%) Number of patients, n (%)

Пол Gender

Мужской / Male 36 (54,5)

Женский / Female 30 (45,5)

Средний возраст - 60,9 лет, [37-77] Average age - 60.9 years, [37-77]

Гистологический тип опухоли Histological type of tumor

Светлоклеточный рак Clear cell cancer ее (100)

Степень дифференцировки Degree of differentiation

G - 1 30 (45,5)

G - 2 26 (39,4)

G - З 7(10,6)

G - 4 3 (4,5)

Тип роста опухолевого узла Type of tumor node growth

Смешанный У Mixed 39 (59,1)

Экстраренальный У Extrarenal 16 (24,3)

Интраренальный У Intrarenal 11 (16,6)

Стадия по TNM TNM Stage

T - I 33 (50)

pT^NOMO 16

pT1bNOMO 17

T - II 4 (6,0)

pT2a NOMO 2

pT2b NOMO 2

Синхронный ПКР pT2N0M0, T1N0M0 Synchronous RCC pT2NOMO, T1NOMO 1 (1,5)

T - III 17 (25,8)

pT3aN0M0 14

pT3bN1M0 2

pT3cN1M0 1

T - IV 11 (16,7)

pT1N0M1 1

pT3aN0M1 7

T3bN0M1 1

T3cN0M1 1

T4N0M1 1

возраст - 56,6 лет). Исследуемые группы больных были сопоставимы по полу и возрасту.

Всем включенным в исследование больным ПКР проведено комплексное обследование согласно клиническим рекомендациям по диагностике и лечению больных раком почек [13]. Морфологическое исследование полученного материала (после проведенного оперативного лечения) проводилось по стандартной технологии. При обзорном морфологическом анализе срезы толщиной 5-7 мкм, окрашенные гематоксилином и эозином, использовали для определения гистологического типа опухоли, степени дифференцировки, выраженности вторичных изменений и распространенности опухолевого процесса по классификацию ВОЗ [14].

Исходя из комплекса результатов обследования, отобраны пациенты, соответствующие следующим критериям включения:

• больные ПКР без подтвержденных метастазов и с метастазами со стадией заболеванияТ^-bNOMO, T2a-bNOMO, T3a-bN0-1M0, T1-4N0M1;

• гистологический тип опухоли - светлоклеточ-ный почечно-клеточный рак;

• отсутствие предшествующего и сопутствующего специального лечения (иммунотерапия или таргетная терапия).

Дополнительно до оперативного вмешательства пациентам основной и контрольной групп проведено определение в сыворотке крови уровня медиаторов, вырабатываемых клетками МкО, методом твердофазного иммуноферментного анализа. Перечень исследуемых параметров представлен в таблице 2.

Для определения уровня в сыворотке крови TNFa, INFy, МСР-1, VEGF использовали коммерческие наборы

Таблица 2. Медиаторы МкО сыворотки крови

Table 2. Mediators of blood serum tumor microenvironment

Название Title Аббревиатура Abbreviation

Цитокины/хемокины Cytokines/chemokines

Фактор некроза опухоли альфа Tumor necrosis factor alpha TNFa

Интерферон гамма Interferon gamma INFy

Моноритарный хемоаттрактантный протеин1 Monocytic chemoattractant proteinl МСР-1

Колониестимулирующие факторы Colony-stimulating factors

Гранулоцитарный - колониестимулирующий фактор / Granulocyte - colony stimulating factor G- CSF

Гранулоцитарный-макрофагальный колониестимулирующий фактор Granulocytic-macrophage colony stimulating factor GM-CSF

Факторы роста / Growth factors

Фактор роста эндотелия сосудов Vascular Endothelial growth factor VEGF

Трансформирующий фактор роста-бета1 Transforming growth Factor-betal TGF-ß1

реагентов (АО «Вектор Бест», Новосибирск), TGF-ß1, G-CSF, GM-CSF - моно- и поликлональные антитела к этим медиаторам (R&DSystems, Великобритания) и трех-стадийный «сэндвич» - вариант иммуноферментный анализ (ИФА). Образцы сывороток, содержащих латентную форму TGF-ß1, до начала исследования активировали (при инкубации 60 мин в среде с pH 1,0-2,0 и дальнейшей нейтрализацией до pH 7,2-7,6).

Статистическая обработка результатов исследования

Статистическая обработка данных выполнена с использованием пакетов прикладных программ Statis-tica 10 и SAS JMP 11. Для оценки изменения уровня медиаторов в сыворотке крови применяли методы описательной статистики с расчетом уровня достоверности различия между группами обследованных по критерию Манна-Уитни и Краскела-Уоллиса. Чувствительность и специфичность медиаторов МкО определяли с помощью ROC-анализа с расчетом AUC (Area under ROC curve - площади под кривой). Значимым считали значение площади под ROC-кривой, превышающее 0,70. Критический уровень значимости p-value для всех используемых процедур принимали равным 0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Результаты исследования медиаторов опухолевого микроокружения были изучены для двух группа больных ПКР и представлены в таблицах 3 и 4. Как видно у больных ПКР уже на 1 и 2 стадиях заболевания имеет место нарастание в сыворотке крови уровня цитоки-нов/хемокинов и колониестимулирующих факторов за исключением содержания INFy (табл. 3) по сравнению с группой условно здоровых. Уровень INFy незначительно снижается у пациентов на 1-2 стадиях заболевания. Повышение уровня провоспалительных цитоки-нов, колониестимулирующих и факторов роста в сыворотке крови можно считать ассоциированным с опухолевым ростом воспалительным процессом на фоне сохраненной иммунной защиты МкО. У больных ПКР

с 3 и 4 стадиями ПКР заболевание сопровождается статистически значимыми сохранением высокого уровня в сыворотке крови цитокинов/хемокинов и колониести-мулирующих факторов, снижением уровня INFy и дальнейшим подъемом концентрации факторов роста, подтверждающих прогрессию и диссеминацию опухолевого процесса. Уровни TGF-ß^ VEGF у больных ПКР с 3-4 стадией заболевания превышали их содержание в группе сравнения и в группах пациентов с опухолевым ростом в пределах органа.

То есть, паракринный выход в кровоток многочисленных биоактивных молекул (цитокинов/хемокинов и колониестимулирующих факторов) или создание индуцированного злокачественными клетками профиля медиаторов воспаления вызывает экспрессию факторов роста.

Для подтверждения диагностического значения медиаторов изменения МкО в периферическом кровотоке построены ROC-кривые и посчитаны площади под ними (табл. 4). Величина площади под кривой для практически всех медиаторов, и факторов воспаления, и факторов роста по экспертной шкале достигала хорошего качества прогностической модели прежде всего в группе пациентов с 1-2 стадиями с ПКР. Точки разделения больных с 1-2 стадиями заболевания (для G-CSF-69,3 пг/мл, GM-CSF- 7,8 пг/мл, ТОТа-3,9пг/мл, INFy-17,5 пг/мл, МСР-1- 332 пг/мл, VEGF- 408,3 пг/мл, TGF-ß1- 49 550пг/мл) практически для каждого из им-мунорегуляторных медиаторов, характеризовали эти стадии с чувствительностью 100 до 60% и эффективностью от 87,3 до 66,4%. То есть результаты исследования медиаторов еще раз показали, что генетические изменения опухолевых клеток (утрата опухолевого су-прессора VHL) определяет особенности МкО, превращая в опухоль с высоким уровнем инфильтрации Т-клетками [15, 16]. В группах пациентов с 3 и 4 стадиями ПКР наибольшие площади под кривой показали факторы роста - 94,4 до 100%. Точкой разделения для VEGF стала концентрация 404,2 - 527,2 пг/мл, с чувствительностью 100-82,5% и эффективностью 92,3 - 71,3%, для TGF-ß1-49 550 - 58 500 пг/мл, с чувствительностью 94,4% и эффективностью 79,6 - 89,1%. H

Таблица 3. Уровень иммунонорегуляторных медиаторов в сыворотке крови у больных ПКР до оперативного вмешательства Table 3. The level of immunoregulatory mediators in the blood serum of patients with RCC before surgery

Показатель, пг/мл Indicator, pg/ml M ± S Контрольная группа Control group M ± S 1-2 стадия 1-2 stage of cancer M ± S 3-4 стадия 3-4 stage of cance Уровень P (df=3) Level P (df=3) Уровень P (Контрольная группа/ 1-2 стадии ПКР) Level P (Control group/ 1-2 stage of cancer) Уровень P (Контрольная группа/ 3-4 стадии ПКР) Level P (Control group/ 3-4 stage of cancer)

TNFa 2,50 ± 1,12 7,87 ± 3,14 8,56 ± 2,69 <0,0001 <0,0001 <0,0001

INFy 22,07 ± 3,79 19,96 ± 3,69 14,17 ± 2,02 <0,0001 0,6539 <0,0001

МСР-1 190,08 ± 90,14 345,28 ± 110,23 348,62 ± 116,05 <0,0001 0,0003 0,0010

G-CSF 7,88 ± 3,12 135,63 ± 41,55 126,79 ± 28,34 <0,0001 <0,0001 <0,0001

GM-CSF 1,03 ± 0,22 11,52 ± 2,96 7,58 ± 1,87 <0,0001 <0,0001 0,0050

VEGF 316,57 ± 93,52 295,01 ± 102,55 661,49 ± 427,25 <0,0001 0,9717 0,0267

TGF1ß 28 910,00 ± 16 642,02 33 442,00 ± 8 341,03 61 182,35 ± 17 306,79 <0,0001 0,4043 <0,0001

ОБСУЖДЕНИЕ

Выявленное нарастание в сыворотке крови содержания цитокинов/хемокинов и колониестимулирую-щих факторов за исключением ЮТу уже на 1-2 стадиях ПКР или в периоде разрастания опухолевых клеток в пределах органа можно считать следствием начального этапа взаимодействия генетически измененных раковых и иммунных клеток МкО. Паракринная секреция многочисленных биоактивных молекул клетками МкО формирует нарастание провоспалительных цитоки-нов/хемокинов в сыворотке крови. Совершенно очевидно, что подъем уровня медиаторов воспаления в периферическом кровотоке приводит к изменению активности противоопухолевого иммунного ответа. Он создает среду для экстравазации и метастазирования злокачественных клеток. То есть мутационные изменения гена Фон Хиппель-Линдау (УНХ) или потеря опухолевого супрессора VHL у больных ПКР с одной стороны приводит в движение гипоксический путь, усиливающий ангиогенез и гиперваскуляризацию опухолевой ткани, с другой - превращает опухолевую ткань в «горячую» или иммуно-инфильтрированную опухоль с высокими содержанием ТАМ и инфильтрацией Т-клетками [17-19]. Это приводит к вышеописанному нарастанию в периферическом кровотоке содержания цитокинов/хемокинов и колониестимулирующих факторов уже на 1-2 стадиях ПКР.

Такая перестройка цитокиновой сети МкО у больных ПКР сопровождает развитие ЭМП, появление автономной цитокиновой сети, прогрессией опухолевого

роста и метастазированием [20]. У больных с 3-4 стадиями ПКР перестройка системы иммунной защиты, по-видимому, вследствие как роста самой опухолевой ткани, так и числа ТАМ, сопровождается нарастанием содержание факторов роста, TGF-P1 и VEGF в сыворотке крови [21]. Установленные особенности изменения в периферическом кровотоке содержания медиаторов иммуноре-гуляторных процессов представляют дополнительную информацию активности опухолевого роста и характеризуют нарушение состояния иммунной системы МкО. Медиаторы МкО (ЮТ-а, МСР-1, G-CSF, VEGF, TGF-P1) сыворотки крови обладают оптимальным соотношением чувствительности и специфичности при у больных ПКР, что позволяет получить дополнительную информацию об активности неопластического процесса.

ВЫВОДЫ

1. Рост опухолевых клеток на начальных стадиях ПКР сопровождается значимым увеличением уровня провоспалительных цитокинов/хемокинов и колоние-стимулирующих факторов в сыворотке крови. При прогрессировании опухолевого роста у больных ПКР имеет место активация выброса в кровоток таких факторов роста как TGF-P1 и VEGF.

2. Попадающие в периферический кровоток медиаторы МкО (цитокины/хемокины, колониестимули-рующие и факторы роста) относятся к прогностическим показателям для оценки эффективности имму-нотерапевтических технологий лечения опухолевых заболеваний. □

Таблица 4. Влияние стадии ПКР до оперативного вмешательства на уровень иммунорегуляторных медиаторов в сыворотке крови

Table 4. The effect of the RCC stage before surgery on the diagnostic level of immunoregulatory mediators in the blood serum

Показатели Indicators Точка отсечения, пг/мл Cut-off point, pg / ml Au ROC Чувствительность Sensitivity Специфичность Specificity Эффективность Effectiveness Хи-квадрат Chi-square Уровень P Level P (df=1)

Контрольная группа/ группа с 1 и 2 стадией ПКР Control group/1-2 stage of RCC

TNFa 3,9 0,68 96% 38% 67,09% 10,1 0,0015

INFy 17,5 0,71 80% 65% 72,73% 14,2 0,0002

МСР-1 332,0 0,68 60% 72% 66,36% 7,9 0,0051

G-CSF 69,3 0,72 100% 38% 69,09% 12,9 0,0003

GM-CSF 7,8 0,92 100% 74% 87,27% 38,2 <0,0001

VEGF 408,3 0,79 96% 69% 82,55% 29,1 <0,0001

TGFIb 49 550,0 0,68 96% 54% 75,27% 18,5 <0,0001

Контрольная группа/ группа с 3-4 стадией ПКР Control group/3-4 stage of RCC

TNFa 4,6 0,74 100% 44% 72,22% 11,6 0,0007

INFy 15,3 0,84 82% 79% 80,86% 22,8 <0,0001

МСР-1 195,4 0,67 100% 34% 67,46% 8,2 0,0042

G-CSF 103,0 0,67 88% 49% 68,72% 7,7 0,0054

GM-CSF 5,7 0,54 0,00% 68% 34,13% 7,2 0,0073

VEGF 408,3 0,67 82% 60% 71,34% 9,8 0,0018

TGFIb 38 400,0 0,76 94% 65% 79,60% 18,8 <0,0001

Л1ШАША/ШЕШШ

1. Bray F, Ferlay J, Soerjomataram I, Siegel RL, Torre LA, Jemal A. Global cancer statistics 2018: GLOBOCA, N estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries. CA Cancer J Clin 2018;68(6):394-424; https://doi.org/10.3322/caac.21492.

2. Алексеев Б.Я., Калпинский А.С., Мухомедьярова А.А., Нюшко К.М., Каприн А.Д. Таргет-ная терапия больных метастатическим раком почки неблагоприятного прогноза. Онкоу-рология 2017;13(2):49-55; https://doi.org/10.17650/1726-9776-2017-13-2-49-55. [Alekseyev B.Ya., Kalpinskiy A.S., Mukhomediarova A.A., Nyushko K.M., Kaprin A.D. Targeted therapy in patients with poor-prognosis renal cell carcinoma. Onkourologiya 2017;13(2):49-55. https://doi.org/10.17650/1726-9776-2017-13-2-49-55. (in Russian)].

3. Heng DY, Xie W, Regan MM, Warren MA, Golshayan AR, Sahi C, et al. Prognostic factors for overall survival in patients with metastatic renal cell carcinoma treated with vascular endothelial growth factor-targeted agents: results from a large, multicenter study. J Clin Oncol 2009;27(34):5794-9. https://doi.org/10.1200/JC0.2008.21.4809.

4. Heng DY, Xie W, Regan MM, Harshman LC, Bjarnason GA, Vaishampayan UN, et al. External validation and comparison with other models of the International Metastatic Renal-Cell Carcinoma Database Consortium prognostic model: a population-based study. Lancet Oncol 2013;14(2):141-8; https://doi.org/10.1016/S1470-2045(12)70559-4.

5. Nixon AB, Schalper KA, Jacobs I, Potluri S, Wang IM, Fleener C. Peripheral immune-based biomarkers in cancer immunotherapy: can we realize their predictive potential? J Immunother Cancer 2019 Nov 27;7(1):325; https://doi.org/10.1186/s40425-019-0799-2.

6. Smith HO, Stephens ND, Qualls CR, Fligelman T, Wang T, Lin CY, et al. The clinical significance of inflammatory cytokines in primary cell culture in endometrial carcinoma. Mol Oncol 2013;7(1)1-54; https://doi.org/10.1016/j.molonc.2012.07.002.

7. Kuwada K, Kagawa S, Yoshida R, Sakamoto S, Ito A, Watanabe M, et al. The epithelial-to-mes-enchymal transition induced by tumor-associated macrophages confers chemoresistance in peri-toneally disseminated pancreatic cancer. J Exp Clin Cancer Res 2018;37(1):307; https://doi.org/10.1186/s13046-018-0981-2.

8. Sanmamed MF, Perez-Gracia JL, Schalper KA, Fusco JP, Gonzalez A, Rodriguez-Ruiz ME, et al. Changes in serum interleukin-8 (IL-8) levels reflect and predict response to anti-PD-1 treatment in melanoma and non-small-cell lung cancer patients. Ann Oncol 2017;28(8):1988-1995; https://doi.org/10.1093/annonc/mdx190.

9. Dalgliesh GL, Furge K, Greenman C, Chen L, Bignell G, Butler A, et al. Systematic sequencing of renal carcinoma reveals inactivation of histone modifying genes. Nature 2010(463):360-3. https://doi.org/10.1038/nature08672.

10. Montironi R, Santoni M, Cheng L, Lopez-Beltran A, Massari F, Matrana MR, et al. An overview of emerging immunotargets of genitourinary tumors. Curr Drug Targets 2016(17):750-6. https://doi.org/10.2174/1389450117666151209144649.

11. Slovin SF. The need for immune biomarkers for treatment prognosis and response in genitourinary malignancies. Biomark Med 2017(11):1149-59; https://doi.org/10.2217/bmm-2017-0138.

12. Lopez-Beltran A, Henriques V, Cimadamore A, Santoni M, Cheng L, Gevaert T, et al. The Iden-

tification of Immunological Biomarkers in Kidney Cancers. Front. Oncol 2018(8):456; https://doi.org/10.3389/fonc.2018.00456.

13.Алексеев Б.Я., Волкова М.И., Калпинский А.С., Каприн А.Д., Матвеев В.Б. Клинические рекомендации по диагностике и лечению рака почки. М., 2014; 38 c. URL: http://www.oncology.ru/association/clinical-guidelines/2013/renal-cell-carcinoma/. [Alekseev B.Ya., Volkova M.I., Kalpinsky A.S., Kaprin A.D., Matveev V.B. Clinical recommendations for the diagnosis and treatment of kidney cancer. Moscow, 2014; 38 p. URL: http://www.oncol-ogy.ru/association/clinical-guidelines/2013/renal-cell-carcinoma/. (in Russian)].

14. Travis WD, Brambilla E, Müller Hermelink HK, Harris CC. World Health Organization Classification of Tumours. Pathology and Genetics of Tumours of Lung, Pleura, Thymus and Heart. IARC Press: Lyon 2004; 344 p.

15. Santoni M, Massari F, Di Nunno V, Conti A, Cimadamore A, Scarpelli M, et al. Immunotherapy in renal cell carcinoma: latest evidence and clinical implications. Drugs Context 2018(7):212528; https://doi.org/10.7573/dic.212528

16. Hah YS, Koo KC. Immunology and immunotherapeutic approaches for advanced renal cell carcinoma: a comprehensive review. Int J Mol Sci 2021;22(9):4452; https://doi.org/10.3390/ijms22094452

17. Wang Z, Liu Y, Zhang Y, Shang Y, Gao Q. MDSC-decreasing chemotherapy increases the efficacy of cytokine-induced killer cell immunotherapy in metastatic renal cell carcinoma and pancreatic cancer. Oncotarget 2016;7(4):4760-9; https://doi.org/10.18632/oncotarget.6734.

18. Захарова Н.Б., Понукалин А.Н., Комягина Ю.М., Королев А.Ю., Никольский Ю.Г. Показатель прогрессии злокачественного роста у больных с опухолевыми заболеваниями предстательной железы, мочевого пузыря, почек. Экспериментальная и клиническая урология 2019(3):72-78. https://doi.org/10.29188/2222-8543-2019-11-3-72-78. [Zakharova N.B., Ponukalin A.N., Komyagina Yu.M., Korolev A.Yu., Nikolskiy Yu.G. The indicator of the progression of malignant growth in patients with neoplastic diseases of the prostate, bladder, and kidneys. Eksperimentalnaya i klinicheskaya urologiya = Experimental and Clinical Urology 2019(3):72-78; https://doi.org/10.29188/2222-8543-2019-11-3-72-78. (in Russian)].

19. Komohara Y, Hasita H, Ohnishi K, Fujiwara Y, Suzu S, Eto M, Takeya M.. Macrophage infiltration and its prognostic relevance in clear cell renal cell carcinoma. Cancer Sci 2011;102(7):1424-31. https://doi.org/10.1111/j.1349-7006.2011.01945.x

20. Yin Q, Hung SC,. Rathmell WK, Shen L, Wang L, Lin W, et al. Integrative radiomics expression predicts molecular subtypes of primary clear cell renal cell carcinoma. Clin Radiol 2018;73(9):782-791. https://doi.org/10.1016/jxrad.2018.04.009

21. Алексеева Г.Н., Гурина Л.И., Писарева Л.Ф., Волков М.В., Чердынцева Н.В. Персонализированный подход к лечению метастатического рака почки. Тихоокеанский медицинский журнал 2020;(4):63-67; https://doi.org/10.34215/1609-1175-2020-4-63-67 [Alekseeva G.N., Gurina L.I., Pisareva L.F., Volkov M.V., Cherdy'nceva N.V. Personalized approach to the treatment of metastatic kidney cancer. Tixookeanskij medicinskij zhurnal = Pacific Medical Journal 2020(4):63-67. https://doi.org/10.34215/1609-1175-2020-4-63-67. (in Russian)].

Сведения об авторах:

Захарова Н.Б. - д.м.н., профессор кафедры клинической лабораторной диагностики ФГБОУ ВО «Саратовского государственного медицинского университета им. В.И. Разумовского»; Саратов, Россия; lipidgormon@mail.ru; РИНЦ AuthorlD 712752.

Понукалин А.Н. - к.м.н., доцент кафедры урологии ФГБОУ ВО «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского»; Саратов, Россия; ponukalin@bk.ru; РИНЦ AuthorlD 412895.

Чехонацкая М.Л. - д.м.н., зав.кафедрой лучевой диагностики и лучевой терапии им. проф. Н.Е. Штерна ФГБОУ ВО «Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского» Минздрава России; Саратов, Россия; fax-1@yandex.ru; РИНЦ AuthorlD 502866.

Комягина Ю.М. - соискатель кафедры урологии ФГБОУ ВО «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского» Минздрава России; Саратов, Россия; komiagina.jul@yandex.ru; РИНЦ AuthorlD 1036824.

Бучарская А.Б. - д.б.н., заместитель директора НИИуронефрологии ФГБОУ ВО «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского» Минздрава России; Саратов, Россия; allaalla_72@mail.ru; РИНЦ AuthorlD 283453.

Вклад авторов:

Захарова Н.Б. - концепция, дизайн исследования, проведение и обработка результатов лабораторных исследований, 25% Понукалин А.Н. - сбор материала, обработка данных, 25% Чехонацкая М.Л. - подготовка к публикации, 15% Комягина Ю.М. - статистическая обработка данных, 20% Бучарская А.Б. - редактирование, 15%

Конфликт интересов: Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Финансирование: Работа выполнена в рамках государственного задания Рег. №121032600197-2.

Статья поступила: 27.08.21 Результаты рецензирования: 22.10.21 Исправления получены: 22.11.21, 6.01.22, 7.01.22 Принята к публикации: 17.02.22

Information about authors:

Zakharova N.B. - PhD, MD, Professor, Head of Scientific Research Laboratory, Department of Clinical Laboratory Diagnostics, Saratov State Medical University n.a. V.I. Razumovsky; Saratov, Russia; lipidgormon@mail.ru; https://orcid.org 0000-0001-9410-2240.

Ponukalin A.N. - PhD, associate Professor of Department of urology, Saratov State Medical University n.a. V.I. Razumovsky; Saratov, Russia;ponukalin@bk.ru; https://orcid.org/0000-0003-2547-5654.

Chekhonatskaya M.L. - PhD, MD, Professor, Department of radiation diagnostics and radiation therapy, Saratov State Medical University n.a. V.I. Razumovsky; Saratov, Russia; fax-1@yandex.ru; https://orcid.org/0000-0003-4507-9456.

Komyagina Yu.M. - researche, Department of urology, Saratov State Medical University n.a. V.I. Razumovsky; Saratov, Russia; komiagina.jul@yandex.ru; https://orcid.org/0000-0001-7603-1012.

Bucharskaya A.B. - DR. Sci., Deputy Director of the Research Institute of Uronephrology Saratov State Medical University n.a. V.I. Razumovsky; Saratov, Russia; allaalla_72@mail.ru; https://orcid.org/0000-0003-0503-6486.

Authors' contributions:

Zakharova N.B. - the concept, design of the study, conducting and processing the results of laboratory tests, 25%

Ponukalin A.N. - material collection, data processing, 25% Chekhonatskaya M.L. - preparation for publication, 15% Komyagina Yu.M. - statistical data processing, 20% Bucharskaya A.B. - editing, 15%

Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.

Financing. The article was carried out within the framework of the state task Reg. No. 121032600197-2.

Received: 27.08.21

Peer review: 22.10.21

Corrections received: 22.11.21, 6.01.22, 7.01.22 Accepted for publication: 17.02.22