Ю.А. Младзиевская, Г.Н.Решетова
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ СЫВОРОТКИ ФЕМИДАСЕРА® -ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ ДЛЯ КОМПЛЕКСНОГО АНАЛИЗА МИКРООБЪЕКТОВ СУДЕБНО-БИОЛОГИЧЕСКОЙ ЭКСПЕРТИЗЫ
ФГУП Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток и предприятие по производству бакпрепаратов ФМБА России г. Санкт-Петербург
U.A. Mladzievskaya, G.N. Reshetova
FEMIDASERA® - IMMUNOBIOLOGICAL PREPARATIONS FOR COMPREHENSIVE ANALYSIS OF MICROSCOPIC OBJECTS AT FORENSIC
BIOLOGICAL EXAMINATION
Federal State Unitary Enterprise (FSUE) "Saint Petersburg Research Institute of Vaccines and Sera & Enterprise for Production of Bacterial Preparations" of the Federal Medico-Biological Agency, Saint
Petersburg
Ключевые слова: ФЕМИДАСЕРА®, преципитирующие сыворотки, гемагглютинирующие сыворотки, судебно-биологическая экспертиза.
Key words: FEMIDASERA®, precipitating serum, hemagglutinating serum, forensic biological examination.
В статье приведен обзор препаратов группы ФЕМИДАСЕРА®, предназначенных для групповой и видовой диагностики биологических образцов — объектов судебно-медицинской экспертизы. Препараты представляют собой иммунные сыворотки животных, выпускаемые ФГУП СПбНИИВС ФМБА России на протяжении многих лет, которые могут применяться также в организациях службы переливания крови и в научных исследованиях.
This article provides an overview ofpreparations of FEMIDASERA®, designed for group and specific diagnosis of biological - objects of medico-legal examination. Preparations are immune sera of animals produced by FSUE SPbNIIVS EM BA of Russia for many years, which can also be used in blood transfusion service organizations and scientific research.
Анализ следов биологического происхождения является сложной задачей, требующей применения различных методов. В настоящее время наиболее информативными и достоверными являются молекулярно-генетические исследования. В то же время ставшие давно клас
сическими различные иммунологические методы все еще широко применяются. Их использование обусловлено следующими причинами. Во-первых, определение групповой принадлежности по системе ABO позволяет дифференцировать поступающие на
исследование объек
ты и биологические образцы от конкретных лиц. И, во-вторых, при исследовании объектов, молекулярно-генетическое исследование
которых затруднено отсутствием или недостаточным количеством ДНК, только иммунологические методы могут предоставить информацию, которая носит доказательный характер. Немаловажным фактором является также низкая стоимость таких исследований [1,6].
При исследовании микрообъектов необходим комплексный подход, который предполагает исследование биологического материала различными специалистами по заранее выработанной схеме с последующим анализом полученных данных [6]. Иммунологические методы, кроме выполнения своих традиционных задач, таких как установление наличия биологического материала, видовой и групповой принадлежности, должны применяться в качестве скрининга для отбора объектов с целью успешного проведения дальнейшего молекулярногенетического исследования.
Реакция преципитации является одним из основных судебно-биологических методов определения видовой принадлежности пятен крови. Такая иммунологическая реакция может проводиться в жидкой среде
(кольцепреципитация) или геле. Для постановки такой реакции требуются стандартные антитела — преципи- тирующие сыворотки. ФГУП СПбНИ- ИВС ФМБА России выпускает препарат ФЕМИДАСЕРА® Сыворотки преципити- рующие белки сыворотки крови человека и животных адсорбированные диагностические для судебно-медицинских целей в жидком виде по 1 мл в ампулах.
Предприятие производит иммунные сыворотки, преципитирующие белки крови человека, лошади, свиньи, собаки, кошки, крупного и мелкого рогатого скота, кролика, курицы и лося с высоким титром — 1:10000. Все преципитирующие сыворотки
изготавливают путем иммуни
зации кроликов нормальной сывороткой крови человека или животного соответствующего вида. Исключение составляет сыворотка, преципитирующая белки сыворотки крови кролика, которую получают путем иммунизации ослов нормальной кроличьей сывороткой.
Реакцию кольцепреципитации в пробирках осуществляют путем подсла- ивания антигена (или вытяжки из пятен крови с содержанием белка приблизительно 1:1000) под преципитирующую сыворотку.
При разведении гомологичного антигена 1:10000 сыворотки обеспечивают образование колец преципитации через 10 — 30 мин в зависимости от вида сыворотки. В качестве антигенов используются нативные сыворотки крови человека и животных. Сыворотки высокоспецифичны и ни с одним из гетероло-гичных антигенов, разведенных 1:1000 не дают колец преципитации в течение 1 ч. Сыворотки, преципитирующие белки сыворотки крови крупного, мелкого рогатого скота, лося (группа дифференцирующих сывороток) в разведении 1:1000 не образуют колец преципитации с антигенами родственных видов животных в течение 20 мин.
Реакция преципитации в геле менее чувствительна, чем реакция в жидкой среде, но в некоторых случаях обладает преимуществами. Она может быть проведена с мутными объектами и дает перспективы успешного и более доступного дифференцирования крови филогенетически близких животных, например, крупного и мелкого рогатого скота; лося и быка [7].
Срок годности препарата — 1 год при хранении в защищенном от света месте при температуре от 2 до 8°С.
Таким образом, диагностические преципитирующие сыворотки, применяемые для постановки реакции преципитации, позволяют успешно проводить видовую дифференцировку пятен крови.
Рис. 1
В судебной серологии в нашей стране основными методами для установления групповой принадлежности являются реакция гемагглютинации, абсорбции- элюции, количественная реакция абсорбции, реакция «смешанной агглютинации», реакция иммунофлюоресценции [4,5]. В то же время, такие методы, как иммуноферментный анализ и метод иммунохроматографии, ещё не нашли широкого распространения в практике судебно-медицинской экспертизы.
Основное место в судебно- медицинских исследованиях занимает изосерологическая система ABO; иногда в следах крови определяют группы систем Рр, MNSs, Lewis (в распоряжении экспертов имеются
необходимые для этого стандартные сыворотки отечественного производства), Ошидр. Груп-повые антигены изосерологической системы ABO, MNSs и Rh содержатся не только в крови, но и в фиксированных клетках тканей тела [4].
ФГУП СПбНИИВС ФМБА России выпускает препараты для установления групповой принадлежности ФЕМИДАСЕРА® к эритроцитарным антигенам человека ABO, MNSs, Рр адсорбированные диагностические для судебно- медицинских целей. Сыворотки предна
значены для проведения реакции гемагглютинации и реакции адсорбции агглютининов. Область применения препаратов -судебно-медицинская экспертиза, служба переливания крови, научные исследования.
Препараты представляют собой иммунные сыворотки крови кроликов, коз, баранов, иммунизированных эритроцитами или слюной человека.
Адсорбированные диагностические
сыворотки анти-М и антил получают путем иммунизации животных эритроцитами человека и предназначены для определения в судебно-медицинских целях антигенов систем MNSs в жидкой крови человека с помощью реакции гемагглютинации. Титр сыворотки анти-М не менее 1:24, сыворотки антил - не ниже 1:16, сыворотки специфичны в течение 5 мин.
Разработаны методы («смешанная агглютинация», абсорбция-элюция), позволяющие обнаружить групповые антигены в чрезвычайно малых следах, например в пропитанных, испачканных кровью ниточках материи длиной 2-3 мм [2,3]. Для проведения этих исследований используют иммунные диагностические сыворотки ФЕМИДАСЕРА® анти-А и анти-В слюнные и эритроцитарные, хо
рошо зарекомендовавшие себя при ис -следовании образцов со старыми пятнами крови. Описание этих препаратов приведено ниже.
Адсорбированные диагностические
сыворотки анти-Аи анти-В слюнные получают путем иммунизации животных слюной человека и предназначены для выявления антигенов А и В в жидкой крови, пятнах крови и слюны человека в реакциях гемагглютинации и адсорбции агглютининов. Препараты представляют собой иммунные сыворотки крови кроликов (анти-А) и сыворотки крови баранов (анти-В), вступающие в реакцию ге-магглютинации с антигенами А и В системы ABO крови человека. Титр сывороток анти-А и анти-В слюнных с гомологичным антигеном в реакции гемагглютинации (РТА) на плоскости не менее 1:64, в пробирках не менее 1:128. Сыворотки анти-А и анти-В слюнные авидны к гомологичному антигену крови и слюны и специфичны в течение 5 мин.
Адсорбированные диагностические
сыворотки анти-А и анти-В эри- троцитарные получают путем иммунизации животных эритроцитами человека и предназначены для выявления антигенов А и В в жидкой крови, пятнах крови и слюны человека в реакциях ге -магглютинации и адсорбции агглютининов. Препараты представляют собой иммунные сыворотки крови кроликов (анти-А) и сыворотки крови баранов (анти-В), вступающие в реакцию гемагглютинации с антигенами А и В системы ABO крови человека. Титр сывороток анти-А и анти-В эритроцитарных с гомологичным антигеном не менее 1:64. Сыворотки анти-А и анти-В эритроцитар- ные также авидны к гомологичному антигену крови и слюны и специфичны в течение 5 мин.
ФГУП СПбНИИВС ФМБА России выпускает еще один препарат для определения антигенов системы ABO крови че
ловека. Адсорбированную диагностическую сыворотку анти-Н получают путем иммунизации коз слюной человека. Препарат предназначен для выявления антигена Н в жидкой крови и пятнах крови человека в реакциях гемагглютинации и адсорбции агглютининов.
Титр сыворотки анти-Н не менее 1:16. Сыворотка анти-Н специфична в течение 5 мин и авидна к гомологичному антигену в пятнах крови и слюны.
Замыкает ряд препаратов из группы диагностических сывороток для установления групповой принадлежности адсорбированная диагностическая сыворотка анти-Рр которую получают путем иммунизации коз эхинококковой жидкостью. Препарат предназначен для выявления антигена Р! системы Рр в жидкой крови и пятнах крови человека в реакциях гемагглютинации и адсорбции агглютининов. Титр сыворотки анти-Р, не менее 1:64. Сыворотка анти-Р! специфична в течение 5 мин и авидна к гомологичному антигену в пятнах крови.
Все препараты для определения групповой принадлежности крови выпускаются в жидком виде по 1 мл в ампулах, срок годности — 1 год при хранении в защищенном от света месте при температуре от 2 до"8°С.
Установление групповой принадлежности следов и образцов крови с помощью иммунных диагностических сывороток ФЕМИДАСЕРА® является доступным и удобным экспресс-анализом, который позволяет получать достоверные результаты.
Препараты группы ФЕМИДАСЕРА® успешно применяются на протяжении многих лет в Бюро судебно- медицинской экспертизы Российской Федерации и в странах ближнего зарубежья и имеют хорошие отзывы о своем качестве. Они позволяют проводить необходимую первичную диагностику и, в частности, экспресс-диагностику
биологических образцов перед проведением их последующего молекулярногенетического исследования.
Литература
1. БарсегянцЛ.О. Судебно-медицинское исследование вещественных доказательств (кровь, выделения, волосы): руководство для судебных медиков / Л.О. Барсегянц. М.: Медицина, 1999. -271 с.
2. Гальцева Е.Е., Чарный В.И. Целесообразность использования реакций количественной абсорбции и абсорбции-элюции для выявления антигенов АВН в следах выделений малой величины. //Судебная травматология и новые экспертные методы в борьбе с преступлениями против личности, -Каунас. - 1981. - с. 33-35.
3. Колыш М.Ш. Выявление группоспе-цифических антигенов в волосах после контакта их с кровью и выделени
ями /М.Ш. Колыш, Т.И. Уточкина // Судебно-медицинская экспертиза. — 1992. -№2.-С.27-28.
Прозоровский В.И. Судебная медицина. Учебник для юридических институтов и факультетов. — М., «Юридическая литература». — 1968. - 170 с. Солохин A.A., Паков И.Е., Гуртовая С.В., Гальцева Е.Е., Друзь А.Ф. Задачи совершенствования судебно- медицинской экспертизы вещественных доказательств. //Судебно- медицинская экспертиза. - 1985. - №
2. - с. 25-29.
Томилин В.В. Судебно-медицинское исследование вещественных доказательств / В.В. Томилин, Л.О. Барсегянц, A.C. Гладких — М.: Медицина, 1989.- 303 с. Чарный В.И. Установление видовой специфичности белков крови. — М. «Медицина». - 1976. — 128 с.
информация
В Сибирском клиническом центре открылось лор-отделение
14 ноября в Сибирском клиническом центре ФМБА России состоялось открытие лор-отделения, в котором будут проводиться эндоскопические операции носа и околоносовых пазух, лечение гайморита и тугоухости, а также операции по восстановлению слуха (кохлеарные имплантации).
Рост заболеваемости лор-органов неуклонен, поэтому актуальность в открытии нового отделения, где будут проводить эндоскопические вмешательства, операции на гортани, слухолучшающие операции, очевидна. Для этого есть все необходимое оснащение - эндоскопические стойки, моторные системы, электрохирургическое оборудование.
Лор-отделение Центра оториноларингологии СКЦ рассчитано на 17 коек, в год в нем будут пролечивать не менее 750 пациентов. В отделении работают специалисты, имеющие большой профессиональный опыт, ученые степени, они регулярно стажируются в ведущих клиниках страны и Европы. Открытие подразделения позволит реализовать задачу по оказанию высокотехнологичной медицинской помощи. В 2013 году в Центре намечено провести 30 высокотехнологичных медицинских вмешательств, из них 20 - кохлеарных имплантаций. Эти операции будут проводиться детям и взрослым с глухотой и высокой степенью тугоухости. В дальнейшем обучение прооперированных пациентов будет осуществляться на базе СКЦ в Учебно-реабилитационном центре, запуск которого запланирован на следующий год.
Для справки: В августе 2012 года приказом руководителя ФМБА России Владимиром Уйба в СКЦ был создан Центр оториноларингологии, который объединил все службы: амбулаторно-поликлиническую оториноларин- гологическую и сурдологическую. В сентябре в составе Центра появилась фониатрическая лаборатория (для проведения диагностики и лечения различных заболеваний гортани).