CC BY
134
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2014 УДК 616.381-002-021.3-07:616.155.33
Зуева Е.Е.1'2, Каган А.В.1, Акопян А.С.1, Голубева В.И.2, Солнцев В.Н.1
диагностическая значимость анализа субпопуляционного состава
моноцитов у детей с первичным перитонитом
'Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, 197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, 6-8;
2Санкт-Петербургский государственный университет, 199034, Санкт-Петербург, Университетская наб., 7-9
Представлены данные обследования детей с первичным перитонитом путем использования проточной ци-тометрии и анализа субпопуляций моноцитов. Установлено, что при первичном перитоните в послеоперационном периоде происходит резкое повышение относительного содержания классических активированных С014Ы!!к'СЕ)16-НЬА-0К+-моноцитов и значительно уменьшается относительное содержание классических неактивированных СD14}"righ^СD16~HLA-DR--моноцитов. Эти данные указывают на изменения соотношения субпопуляций моноцитов у больных с выраженным гнойным воспалением (аппендикулярный перитонит) и у здоровых детей. В позднем послеоперационном периоде соотношение субпопуляций моноцитов восстанавливается, что свидетельствует о транзиторном характере этих изменений.
Ключевые слова: первичный перитонит у детей; проточная цитометрия; активированные моноциты; субпопуляции моноцитов.
Zueva Е. Е.1,2, Kagan A. V.1, Akopyan A. S.1, Golubeva V. I.2, Solntsev V. N.1
DIAGNOSTIC RELEVANCE OF THE ANALYSIS OF MONOCYTE SUBPOPULATIONS IN CHILDREN WITH PRIMARY PERITONITIS
'Pavlov First State Medical University of Saint Petersburg, L'va Tolstogo Str., 6-8, Saint Petersburg, Russian Federation, 197022 2Saint Petersburg State University, 7-9, Universitetskaya nab., Saint Petersburg, Russian Federation, 199034
It was established that in primary peritonitis in the postoperative period a sharp increase in the relative content of classical activated CD14brightCD16-HLA-DR+ monocytes takes place, and the relative content of classical inactivated CD14brightCD16-HLA-DR- monocytes reduced significantly. These data indicate to a change in the ratio of subpopulations of monocytes in patients with severe purulent inflammation (appendicular peritonitis) and in healthy children. In the late postoperative period, the ratio of monocyte subpopulations is recovering, that indicates to the transient nature of these changes.
Key words: primary peritonitis in children; flow cytometry; activated monocytes; a subpopulation of monocytes.
ервичный перитонит выявляется в 5% случаев острой хирургической абдоминальной патологии у детей дошкольного и младшего школьного возраста, чаще у девочек. Установлено, что первичный перитонит развивается у больных, страдающих соматическими заболеваниями, и является тяжелым проявлением присоединившейся инфекции. При этом у больных отмечается наличие отдаленных очагов хронической инфекции дыхательных или мочевыделительных путей, челюстно-лицевой области, костной системы, которые могут быть причиной первичного перитонита [1-4].
Возникновение и течение перитонита могут быть обусловлены не только наличием очагов хронической инфекции, но и снижением устойчивости растущего организма к распространению инфекционного процесса [5-8]. Исход острого воспалительного заболевания органов брюшной полости зависит от соотношения микробных и защитных факторов организма, что требует изучения иммунного статуса и адекватной его коррекции [5, 9, 10]. Однако, несмотря на то
Для корреспонденции: Зуева Екатерина Евгеньевна, доктор мед. наук, проф., зав. лаб. клинической иммунологии и молекулярной диагностики Первого СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова, проф. каф. цитологии и гистологии биолого-почвенного фак. СПбГУ, e-mail: yekaterina, zueva@gmail.com
что иммунный ответ у взрослых и детей многие авторы изучали при вторичном и диализном перитоните, особенности сопротивляемости инфекции пациентов с первичным перитонитом изучены еще недостаточно [11-14].
Течение воспаления у детей имеет определенные особенности - сниженная способность к отграничению местного воспалительного очага, большая склонность к распространению локального очага и превращение его в генерализованный процесс[12, 13]. У детей с аппендикулярным перитонитом выявлены признаки снижения макрофагальной активности и угнетения фагоцитоза [9, 10]. Моноциты являются активными фагоцитами периферической крови и представляют собой гетерогенную группу клеток [15, 16]. Понимание роли и потенциала субпопуляций моноцитов в клеточном иммунном ответе представляется необходимым для разработки новых методов лечения различных форм воспалительной патологии [9, 17-20].
Классические моноциты (С016-) составляют большинство моноцитов крови, им свойственна высокая фагоцитарная и бактерицидная активность, они рассматриваются как предшественники воспалительных макрофагов [15]. Все моноциты, экспрессирующие СЭ1б (далее именуемые как СЭ16+) принято считать провоспалительными, они более активно по сравне-
Зуева Е.Е., Каган А.В., Акопян А.С., Голубева В.И., Солнцев В.Н.
нию с С016-моноцитами (С014++СВ16~) производят цитокины, фактор некроза опухоли, интерлейкины (И-6 и И-10) в ответ на микробную агрессию и активнее при фагоцитозе [16, 21]. С016-негативная субпопуляция моноцитов преобладает у здоровых людей без признаков инфекции. Соотношение С016-позитивных и негативных моноцитов значительно меняется при патологии. Имеются указания на то, что количество С016+-моноцитов значительно увеличивается при широком спектре воспалительных заболеваний независимо от их этиологии. Более высокое содержание СЭ16+ по отношению к С016" обнаружено при болезни Крона, ревматоидном артрите, астме и сепсисе. Выявлено, что у пациентов с сепсисом преобладают С016+-моноциты в отличие от здоровых пациентов [18]. Таким образом, увеличение количества СЭ16-позитивных моноцитов может служить показателем тяжести воспалительного процесса [15, 18, 21].
Определяя интенсивность иммунного ответа, важно оценить не только соотношение классических и неклассических моноцитов, но и экспрессию маркера активации НЬА-ОЯ на каждой субпопуляции моноцитов, которая повышается при воспалении под действием цитокинов [4]. В некоторых ситуациях информативной является оценка НЬА-ОЯ на моноцитах. Уровень экспрессии НЬА-ОЯ на моноцитах отражает иммунный статус человека, поэтому он считается одним из ключевых показателей иммунного статуса при синдроме системного воспалительного ответа ^ШЗ) и сепсисе [18, 20]. Было показано, что моноциты больных септическим шоком в значительно меньшей степени экспрессируют НЬА-ОЯ, чем здоровые. При сепсисе у новорожденных было выявлено, что относительное содержание НЬА-ОЯ+ на моноцитах снижалось и при значениях 43,6% и менее диагностировались септические осложнения. При уровне экспрессии НЬА-ОЯ+ выше 43,6% течение основного заболевания не осложнялось развитием неонатального сепсиса [4].
Однако особенности иммунитета у детей с первичным перитонитом исследованы еще явно недостаточно, что определяет необходимость иммунологического обследования больных с первичным перитонитом.
Материалы и методы
Проведено комплексное обследование 53 детей в возрасте от 3 до 13 лет, которые были распределены на 4 группы. 1-ю группу (п = 13) составили девочки (6,5 ± 2,3 года), обследованные в раннем послеоперационном периоде после операций по поводу первичного перитонита, 2-ю группу (п = 14) 8 мальчиков и 6 девочек (8,6 ± 3,1 года), обследованных после операций по поводу аппендикулярного перитонита, 3-ю группу (п = 15) условно здоровые дети: 7 мальчиков и 8 девочек (6,9 ± 2,6 года), 4-ю группу (п = 11) составили девочки (7,0 ± 2,6 года), обследованные в позднем послеоперационном периоде.
У всех обследованных детей были проведены следующие исследования: определялось общее число лейкоцитов, относительное и абсолютное количе-
ство нейтрофилов, лимфоцитов, моноцитов, эозино-филов, базофилов на гематологическом анализаторе UniCel DxH 800 Beckman Coulter; субпопуляции лейкоцитов, лимфоцитов и моноцитов (относительное содержание) исследовали на проточном цитофлю-ориметре Beckman Coulter FC500; с помощью реагентов CytoDiff™ изучались также Т-лимфоциты и NK-клетки, В-лимфоциты, моноциты, незрелые гра-нулоциты, моноциты, несущие маркер CD16, моноциты, не несущие CD16, Т-лимфоциты, несущие CD16, эозинофилы, базофилы; определялись общее количество моноцитов и субпопуляции моноцитов. В соответствии с современной классификацией определяли все моноциты, несущие маркер CD14 (CDl4bright или CD14++ - высокое содержание CD14, CD14dim или CD14+ - низкое содержание CD14). Затем моноциты, содержащие CD14, анализировали для определения в их составе моноцитов, несущих маркер CD16 (CD16- - классические моноциты, CD16+ - неклассические моноциты). На моноцитах определяли белок HLA-DR, экспрессия которого повышается при воспалительных процессах под действием цитокинов [16, 17]. Для анализа субпопуляций моноцитов использовали тест с реагентами CD14-FITC/CD16-PE/ HLADR-PC5/CD45-PC7. Схема оценки субпопуляци-онного состава моноцитов представлена на рис. 1.
Изучались также следующие параметры: а) относительное количество от всех лимфоцитов: Т-лим-фоцитов, В-лимфоцитов, Т-хелперов, цитотокси-ческих Т-лимфоцитов, NK-клеток, T-NK-клеток, активированных лимфоцитов, активированных Т-лимфоцитов, неактивированных Т-лимфоцитов; б) среди Т-лимфоцитов определяли относительное количество Т-лимфоцитов, несущих CD25. Также вычислялись соотношение Т-хелперов и цитотоксических Т-лимфоцитов и абсолютные значения всех определяемых параметров. Для определения субпопуляций лимфоцитов выполняли 3 стандартных теста, включающих 3 группы реагентов: а) CD45-FITC/CD4-PE/ CD8-ECD/CD3-PC5/CD19-PC7; б) CD3-FITC/CD16+ CD56-PE/CD45-ECD/HLA-DR-PC5; в) CD25-FITC/ CD4-PE/CD3-ECD.
В сыворотке крови методом кинетической нефелометрии определяли содержание иммуноглобулинов классов М, A, G, а также С3- и С4-компоненты комплемента, антистрептолизин, ревматоидный фактор на анализаторе Beckman Coulter Immage 800.
Концентрации циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови определяли на спектрофотометре. Для определения уровня анти-стрептокиназы использовалась плазма из пробирки с цитратом натрия, полученная после центрифугирования. Все данные обработаны статистически с использованием программы Statistica 6.1.
Результаты и обсуждение
Проведенные исследования показали, что у больных детей после операции по поводу первичного перитонита (1-я группа) выявляется высокий уровень активированных классических моноцитов, CD14++ CD16-HLA-DR+: у больных через неделю после опе-
Рис. 1. Схема оценки субпопуляционного состава моноцитов.
1 - дебрис; 2 - гранулоциты; 3 - моноциты; 4 - лимфоциты; 5 - СБМ^-моноциты; 6 - классические и промежуточные моноциты (СВ14Ьпви); 7 -активированные классические моноциты; 8 - неактивированные классические моноциты; 9 - активированные промежуточные моноциты; 10 - неактивированные промежуточные моноциты; 11 - неклассические моноциты; 12 - неактивированные неклассические моноциты; 13 - активированные неклассические моноциты.
Верхний ряд шаблонов: на цитограмме СD45/SS выделена область лейкоцитов; на цитограмме СD14/SS с приложенным к ней гейтом лейкоцитов выделены кластеры классических и промежуточных моноцитов (СD14++(Ьпsht)) и кластер неклассических моноцитов (СD14+(dim)), что позволяет оцениить их относительное содержание среди лейкоцитов. На цитограмме СD16/HLA-DR с приложенным к ней гейтом классических и промежуточных моноцитов (СD14++(Ьпsht)) выделены кластер активированных промежуточных моноцитов (СD16+HLA-DR+), кластер неактивированных промежуточных моноцитов (СD16+HLA-DR"), кластер активированных классических моноцитов (СD16"HLA-DR+) и область неактивированных классических моноцитов (СDl6"HLA-DR"), что позволяет оценить их относительное количество среди всех моноцитов.
Нижний ряд: на цитограмме СD16/SS с приложенным к ней гейтом, содержащим неклассические моноциты, (СD14+(dim)), выделен кластер неклассических моноцитов (СD16+), оценивая их относительное количество среди области (СD14+(dim); на цитограмме HLA-DR/SS с приложенным гейтом неклассических моноцитов (СD14dimСD16+) выделены кластеры активированных неклассических моноцитов (HLA-DR+) и неактивированных неклассических моноцитов (HLA-DR").
3,0 -, 2,52,0 -1,5 -
< 1,0-о
О)
5 0,50 --0,5-1,0 --1,5-
"1 Г
2 3
Группы
МесПап ^ 25%-75%
-1-
4
Мт-Мах
рации он был равен 80,8 ± 14,3%, что было в 1,9 раза больше, чем у детей референтной группы - 43,3 ± 19,3% (р < 0,05).
При анализе относительного содержания субпопуляций моноцитов нами была объединена группа моноцитов, несущих СD16. В группу моноцитов, несущих СD16, были включены активированные и неактивированные промежуточные моноциты, активированные и неактивированные неклассические моноциты (табл. 1).
При сравнения групп больных по показателю, который больше всего отличает пациентов с первичным перитонитом в раннем послеоперационном периоде (1-я группа), - относительному количеству активированных классических моноцитов - нами был предложен коэффициент А, который представляет собой отношение активированных классических моноцитов к неактивированным классическим моноцитам и рассчитывается по следующей формуле:
СD14++ СD16- HLA-DR+, %
Коэффициент А =-
СD14++ СD16- HLA-DR-, %
Рис. 2. Уровень коэффициента А по группам сравнения.
Зуева Е.Е., Каган А.В., Акопян А.С., Голубева В.И., Солнцев В.Н.
Таблица 1
Относительное содержание субпопуляций моноцитов у обследованных больных
Субпопуляция моноцитов Группа пациентов Уровень значимости различий
1-я 2-я 3-я 4-я
Классические активированные (СБ16" НЬА-ВЯ+), % 80,8 ± 14,3 51,7 ± 26,9 43,3 ± 19,3 51,1 ± 27,5 1 vs 2 (0,02); 1 vs 3(0,002)
Классические неактивированные (СБ16- НЬА-ОЯ"), % 10,8 ± 10,4 42,7 ± 25,6 53,1 ± 19,7 44,1 ± 28,6 1 vs 2 (0,008); 1 vs 3 (0,0002); 1 vs 4 (0,02)
Моноциты, несущие СБ16 (СБ16+): сочетание неклассических и промежуточных моноцитов, % 6,4 4,6 2,9 4,4
Анализ показал, что после логарифмирования для коэффициента А, имеющего распределение с положительной асимметрией, возможно применение параметрического критерия сравнения, однофакторно-го дисперсионного анализа АКОУА. В табл. 2 приведены средние значения для каждой из четырех групп и результаты по методу Шеффе, который использует линейные комбинации средних по выборкам. Результаты приведены в форме «среднее геометрическое и 67% доверительный интервал».
Наряду с этим было выявлено, что по содержанию относительного количества активированных классических моноцитов больные с первичным перитонитом в раннем послеоперационном периоде существенно отличались от остальных, а у больных с аппендикулярным перитонитом и первичным перитонитом в отдаленном послеоперационном периоде (2-я и 4-я группы) было выявлено сходное соотношение активированных и неактивированных моноцитов (рис. 2). У детей обеих этих групп соотношение было сдвинуто в сторону активированных моноцитов, в отличие от очень сильного сдвига у больных 1-й группы, равного 17,67, и от соотношения у детей референтной группы, меньше 1 (за счет преобладания неактивированных моноцитов).
Таким образом, наши исследования показали, что у детей с первичным перитонитом в раннем послеоперационном периоде относительное количество активированных классических моноцитов существенно увеличено на фоне значимого уменьшения как отно-
Таблица 2 Данные анализа ANOVA и попарных сравнений по методу шеффе для коэффициента А
Группа Коэффициент А Р Различия между группами
1-я (п = 13) 17,67 (5,94; 29,40)
2-я (п = 14) 1,35 (0,45; 2,25) 0,0001 1 vs 2,3,4
3-я (п = 15) 0,75 (0,25; 1,25)
4-я (п = 11) 1,39 (0,47; 2,31)
сительного, так и абсолютного числа противовоспалительных классических моноцитов. При этом оперативное вмешательство вызывало уменьшение экспрессии НЬА-ОЯ на моноцитах. Однако уже через неделю уровень экспрессии НЬА-ОЯ восстанавливался, если не было отмечено осложнений. Нами установлено также, что при аппендикулярном перитоните у больных в раннем послеоперационном периоде уровень НЬА-ОЯ на моноцитах был немного выше, чем у здоровых детей. Тогда как у больных с первичным перитонитом в раннем послеоперационном периоде значительный уровень экспрессии НЬА-ОЯ на моноцитах может свидетельствовать о том, что первоначального снижения экспрессии не было. В связи с этим можно полагать, что противовоспалительный ответ у этих больных не развивался. В позднем послеоперационном периоде у детей с первичным перитонитом было выявлено восстановление соотношения активированных и классических моноцитов, но до уровня его у детей 2-й группы с аппендикулярным перитонитом, что вместе со слабоувеличенным уровнем ^М также может свидетельствовать о наличии хронического воспаления. Таким образом, хирургическая операция при первичном перитоните, заключающаяся в ревизии брюшной полости и ее санации, удаляет последствия, а не причину этой формы патологии. Доказательством этого является то, что после выписки у большей части больных отмечались боли в животе, частые ОРВИ и инфекции мочевых путей. Можно полагать, что у детей реакция брюшины в виде первичного перитонита является следствием обострения нескольких очагов хронической инфекции и формируется из-за неспособности иммунной системы больных развивать адекватный иммунный ответ на бактериальную инфекцию.
Как нами установлено, при первичном перитоните в послеоперационном периоде происходит резкое повышение относительного содержания классических активированных СВ14Ьп8ыСВ16-НЬА-ВЯ+-моноцишв и значительно уменьшается относительное содержание классических неактивированных СВ14ЬпвЫСВ16~НЬА-ОЯ-моноцитов. Эти данные указывают на изменения соотношения субпопуляций моноцитов у больных с выраженным гнойным воспалением (аппендикулярный перитонит) и у здоровых детей. В позднем послеоперационном периоде соотношение субпопуляций
моноцитов восстанавливается, что свидетельствует о транзиторном характере этих изменений. Возможно, что дальнейшие исследования в этой области с использованием проточной цитометрии и других клеточных технологий позволят разработать критерии диагностики первичного перитонита в остром периоде и предложить способы дифференциальной диагностики с другими формами перитонита.
ЛИТЕРАТУРА
1. Ерюхин И.А., Шляпников С.А. Тяжелая абдоминальная инфекция. Проблема перитонита и абдоминальный сепсис. Consilium Medicum. Хирургия. 2005; 7 (6): 23-5.
2. Teo S., Walker A., Steer A. Spontaneous bacterial peritonitis as a presenting feature of nephrotic syndrome. J. Paediatr. Child Health. 2013; 49(12): 1069-71.
3. Danulescu R.M., Ciobica A., Stanciu C., Trifan A. The role of rifaximine in the prevention of the spontaneous bacterial peritonitis. Rev. Med. Chir. Soc. Med Nat. last. 2013; 117(2): 315-20.
4. Yoshida S. Monocyte HLA-DR expression as predictors of clinical outcome for patients with sepsis. Nihon Rinsho. 2004; 62(12): 2281-4.
5. Брискин Б.С., Хачатрян Н.Н., Савченко З.И., Евстифеева О.В., Гарсия-Мартинес Х.С. Иммунные нарушения и иммуно-коррекция при интраабдоминальной инфекции. Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. 2004; 6: 2.
6. Зуева Е.Е. Иммунная система. Иммунограмма. СПб, Тверь: Триада-Х; 2008.
7. Леонович С.И., Алексеев С.А., Гаин Ю.М. Особенности иммунологического статуса при перитоните и методы его коррекции. Минск; 2000.
8. Макаров А.И. Состояние иммунитета при острой абдоминальной воспалительной патологии. Экология человека. 2008; 4: 11-5.
9. Семикина Е.Л., Сметанина О.Ю., Беляева И.А., Копыльцо-ва Е.А., Закиров Р.Ш. Особенности клеточного иммунитета у новорожденных детей с внутриутробными инфекциями. Российский педиатрический журнал. 2013; 2: 16-20.
10. Притуло Л.Ф., Филоненко Т.Г. Макрофагальная активность как ранний признак септического процесса у детей с острым перитонитом. Таврический медико-биологический вестник. 2011; 14 (1): 116-20.
11. Mandell G., Bennett J., Dolin R. Principles and practice of infectious diseases. 7th ed. Navia M.J., Caroli P.L. Peritonitis primaria en niños sanos. Pediatr. (Barc). 2004; 61 (6): 554-7.
13. Uncu N., Bülbül M., Yildiz N. et al. Primary peritonitis in children with nephrotic syndrome: results of a 5-year multicenter study. Eur. J. Pediatr. 2010; 169 (1):73-6.
14. Dotis J., Printza N., Papachristou F. Peritonitis due to uncommon gram-positive pathogens in children undergoing peritoneal dialysis. Hippokratia. 2012; 16(3): 267-8.
15. Ярилин А.А. Иммунология. ГЭОТАР-Медиа; 2010.
16. Hudig D., Hunter K.W., Diamond W.J., Redelman D. Properties of human blood monocytes. Monocytes from healthy adults are highly heterogeneous within and among individuals. Cytometry B. Clin. Cytom. 2013. doi: 10.1002/cyto.b.21141.
17. Nuutila J., Jalava-Karvinen P., Hohenthal U., Kotilainen P., Pelliniemi T.T., Nikoskelainen J., Lilius E.M. A rapid flow cytometric method for distinguishing between febrile bacterial and viral infections. J. Microbiol. Methods. 2013; 92(1): 64-72.
18. Fingerle G. The novel subset of CD14+/CD16+ blood monocytes is expanded in sepsis patients. Blood. 1993; 82 (10): 3170-6.
19. Heimbeck I. Standardized single-platform assay for human monocyte subpopulations: lower CD14+CD16++ monocytes in females. Cytometry. Pt A. 2010; 77A: 823-30.
20. Hijdra D. Differential expression of TNFR1 (CD120a) and TNFR2 (CD120b) on subpopulations of human monocytes. J. Inflamm. 2012; 9 (1): 38.
21. Suliman M.A., Khalil F.M., Alkindi S.S., Pathare A.V., Almadhani A.A., Soliman N.A. Tumor necrosis factor-a and interleukin-6 in cirrhotic patients with spontaneous bacterial peritonitis. World J. Gastrointest. Pathophysiol. 2012; 3(5): 92-8.
22. Liu R., Jiwane A., Varjavandi A., Kennedy A., Henry G., Dilley A. et al. Comparison of percutaneous endoscopic, laparoscopic and open gastrostomy insertion in children. Pediatr. Surg. Int. 2013; 29(6): 613-21.
REFERENCES
1. Eryuchin I.A., Shlyapnikov S.A. Severe abdominal infection. The problem of peritonitis and abdominal sepsis. Consilium Medicum. Chirurgiya. 2005; 7 (6): 23-5. (in Russian)
2. Teo S., Walker A., Steer A. Spontaneous bacterial peritonitis as a presenting feature of nephrotic syndrome. J. Paediatr. Child Health. 2013; 49(12): 1069-71.
3. Danulescu R.M., ciobica A., Stanciu C., Trifan A. The role of rifaximine in the prevention of the spontaneous bacterial peritonitis. Rev. Med. Chir. Soc. Med. Nat. Iasi. 2013; 117(2): 315-20.
4. Yoshida S. Monocyte HLA-DR expression as predictors of clinical outcome for patients with sepsis. Nihon Rinsho. 2004; 62(12): 2281-4.
5. Briskin B.S., Khachtryan N.N., Savchenko Z.I., Evstifeeva O.V., Garsiya-Маrtines Ch.S. Immune violations and immunocorrec-tion with intra-abdominal infection. Chirurgiya. Zhurnal imeni N.I. Pirogova. 2004; 6: 2. (in Russian)
6. Zueva E.E. Immune system. Immunogram. St Petersburg, Tver: Triada-X; 2008.
7. Leonovich S.I., Alekseev S.A., Gаin Yu.M. Peculiarities of immunological status in peritonitis and methods of its correction. Minsk; 2000. (in Russian)
8. Маkarov A.I. State of immunity in acute abdominal inflammatory pathologies. Ekologiya cheloveka. 2008; 4: 11-5. (in Russian)
9. Semikina E.L., Smetanina O.Yu., Belyaeva I.A., ^piUsova E.A., Zakirov R.Sh. Peculiarities of cellular immunity in newborns with intrauterine infection. Rossiyskiy pediatricheskiy zhurnal. 2013; 2: 16-20. (in Russian)
10. Pritulo L.F., Filonenko T.G. Mаcrophagal activity as an early sign of septic process in children with acute peritonitis. Tm>aricheskiy medico-biologicheskiy vestnik. 2011; 14 (1): 116-20. (in Russian)
11. Mandell G., Bennett J., Dolin R. Principles and practice of infectious diseases. 7th ed. Elsevier; 2010: 1011-34.
12. Navia M.J., Caroli P.L. Peritonitis primaria en niños sanos. Pediatr (Barc). 2004; 61 (6): 554-7.
13. Uncu N., Bülbül M., Yildiz N. Primary peritonitis in children with nephritic syndrome: results of a 5-year multicenter study. Eur. J. Pediatr. 2010; 169 (1): 73-6.
14. Dotis J., Printza N., Papachristou F. Peritonitis due to uncommon gram-positive pathogens in children undergoing peritoneal dialysis. Hippokratia. 2012; 16(3): 267-8.
15. Yarilin A.A. Immunology. GEOTAR^dia; 2010.
16. Hudig D., Hunter K.W., Diamond W.J., Redelman D. Properties of human blood monocytes. Monocytes from healthy adults are highly heterogeneous within and among individuals. Cytometry B. Clin. Cytom. 2013. doi: 10.1002/cyto.b.21141.
17. Nuutila J., Jalava-Karvinen P., Hohenthal U., Kotilainen P., Pelliniemi T.T., Nikoskelainen J., Lilius E.M. A rapid flow cytometric method for distinguishing between febrile bacterial and viral infections. J. Microbiol. Methods. 2013; 92(1): 64-72.
18. Fingerle G. The novel subset of CD14+/CD16+ blood monocytes is expanded in sepsis patients. Blood. 1993; 82 (10): 3170-6.
19. Heimbeck I. Standardized single-platform assay for human monocyte subpopulations: lower CD14+CD16++ monocytes in females. Cytometry. Pt A. 2010; 77A: 823-30.
20. Hijdra D. Differential expression of TNFR1 (CD120a) and TNFR2 (CD120b) on subpopulations of human monocytes. J. Inflamm. 2012; 9 (1): 38.
21. Suliman M.A., Khalil F.M., Alkindi S.S., Pathare A.V., Almadhani A.A., Soliman N.A. Tumor necrosis factor-a and interleukin-6 in cirrhotic patients with spontaneous bacterial peritonitis. World J. Gastrointest. Pathophysiol. 2012; 3(5): 92-8.
Поступила 05.02.14
Сведения об авторах
Каган Анатолий Владимирович, доктор мед. наук, проф., зав. каф. педиатрии и детской хирургии Первого СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова, гл. врач СПбГУЗ ДГБ № 1, e-mail: childone@dgb.spb.ru; Акопян Алита Саргисоена, очный аспирант 3 года каф. педиатрии и детской хирургии Первого СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова, e-mail: alita.as@mail.ru; Голубева Вера Игоревна, биолог лаб. клинической иммунологии и молекулярной диагностики Первого СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова, e-mail: golubevavera639@gmail.com; Солнцев Владислав Николаевич, вед. науч. сотр. каф. биомедицинской статистики Первого СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова, e-mail: vnsol@ vs5962.spb.edu
