CC BY
6
Покровский А. А.— В кн.: Химические основы процес-' сов жизнедеятельности. / Под ред. В. Н. Орехозича. М., 1962, с. 311—331.
6. Покровский А. А., Тутельян В. А.. Кравченко Л. В.— Биохимия, 1975, № 3, с. 543—551.
7. Рязанова Р. А., Платоненко В. И. — Гиг. и сан., 1980, № 5, с. 29—30.
8. Сасинович Л. М., Паньшина Т. И., Светлый С. С. — Там же, 1983, № 3, с. 30—34.
9. Шицкова А. П. — Там же, 1982, № 6, с. 7—10.
10. Шицкова А. П.. Рязанова Р. А., Г адалина И. Д. — Там же, 1983, № 3, с. 22—24.
11. Amenta J. S.. Sargus M. I.. Baccino F. M. — J. Cell. Physiol., 1978, v. 97, p. 267—284.
12. Lowry О. H.. Rosebrough N. J., Farr A. L. et al. — J. biol. Chem., 1951, v. 193, p. 265—275.
13. Seglen P. O. — Biochem. J., 1978, v. 174, p. 469—474.
14. Wiederanders В., Ansorge S., Bohley P. et al. — Acta biol. med. germ., 1976, Bd 35, S. 269—284.
Поступила 25.05.81
УДК 813.298:547.258.11 ]-07:[в12.351.11 +612.1281:577.152.1
В. Н. Левицкая, С. М. Алехина
действие оловоорганических соединений
на изоферментный спектр лактатдегидрогеназы печени и сыворотки крови крыс
ВНИИ гигиены и токсикологии пестицидов, полимеров и пластических масс, Киев
Оловоорганические соединения, используемые в качестве стабилизаторов поливинилхлоридных материалов «пищевого» назначения, могут быть источником загрязнения пищевых продуктов.
Целью настоящих исследований являлось изучение .влияния оловоорганических соединений (диоктилтиоглико-Шк1та диоктилолова, тноокенэтилендиоктилолова и диалкил-'малеата олова) на активность изоферментного спектра лактатдегидрогеназы (ЛДГ) сыворотки крови, печени и активность некоторых специфических ферментов печени (уроканиназы и сорбитолдегидрогеназы).
Опыты проведены на крысах-самцах массой 200—250 г. Животным 1-й группы перорально однократно вводили диоктилтиогликолят диоктилолова в дозе 420 мг/кг, животным 2-й группы тиооксиэтилендитилолова по 446 мг/кг, 3-й группы — диалкилмалеат олова по 580 мг/кг, что составляет 1/5 LDM этих соединений: крысы 4-й (контрольной) группы получали растительное масло. Через 5, 15 и 30 сут после введения препаратов животных забивали, ткань печени гомогенизировали в 0,85 % растворе хлористого натрия в соотношении 1:100. Для исследований использовали цельную сыворотку крови.
Изоферменты разделяли с помощью электрофореза в полиакриламидном геле при 4 °С в течение 2 ч при силе тока 4 мА на трубочку по методу Г. Маурера [2|. Элект-рофореграммы, окрашенные нитротетразолиевым синим, денситометрировали на денситометрометре БИАН-2 [3]. Долю каждого изофермента выражали в процентах по отношению к сумме всех фракций.
Активность уроканиназы определяли по методу В. А. Буробина [1] и выражали в микромолях уроканино-вой кислоты, разложившейся за I ч инкубации, активность сорбитолдегидрогеназы — по методу Л. М. Пыркзва и соавт. [4] и выражали в микромолях за минуту на 1 мл.
При введении крысам оловоорганических соединений отмечены изменения активности изоферментного спектра лактатдегидрогеназы (ЛДГ) в печени. Через 5 сут после однократного введения препаратов наблюдалось снижение ЛДГ5 на 23—72 %. Значительное уменьшение выявлено при действии оловоорганических соединений, содержащих серу. Такая же закономерность сохранялась через 15 сут (табл. 1). К 30-м суткам после введения препаратов у крыс, получивших серосодержащие оловоорганические соединения, активность ЛДГ5 оставалась сниженной на 20— 32%, тогда как при действии диалкилмалеата олова, не содержащего серы, содержание ЛДГ5 почти не отличалось от контроля. Наряду со снижением активности ЛДГ5 у крыс опытных групп наблюдалось повышение активности ЛДГ2, ЛДГ3 и ЛДг4. Эти сдвиги оказались более выраже. ны у крыс, получивших серосодержащие оловоорганические стабилизаторы.
Изменения активности ЛДГ в сыворотке крови были выражены в меньшей степени, чем в печени. У подопытных животных ЛДГ5 увеличивалась на 9—34%, тогда как ЛДГ2 снижалась на 38—70 % по сравнению с контролем (табл. 2).
Появление в сыворотке крови подопытных животных уроканиназы (0,01—0,16 мкмоль/ч) и сорбитолдсгидрогена-
Таблица 1
Активность изоферментов ЛДГ (в %) в печени крыс при действии оловоорганических соединений (Af±m)
Группа животных Срок исследования, сут ЛДГ, ЛДГ, ЛДГ, ЛДГ, ЛДГ.
Контрольная 5 8,1±0,9 8,3±0,8 13,1±1,1 17,8± 1,1 52,7±3,5
15 4,6±0,5 5,5±0,6 7.6±0,7 13,8±1,2 68,4±4,7
30 6,2±0,7 5,8±0,5 13,3±1,1 !6,2±1,5 58,4±4,9
1-я 2-я 3-я 5 15 30 5 15 30 5 15 30 5,3±0,6* 8,3±0,7* 4,9±0,5 5,9±0,7 5,5±0,9 5,9±0,5 5,1±0,7* 5,6±1,2 6,5±0,8 19,7±1,3* 9,8±15,2* 7,0±0,8 13,8±1,2* 8,0±1,8* 7,0±0,9 13,2±1,1 9,0+0,9* 7,0±0,8 36,8±2,3* 15,2±1,1* 28,4±2,3* 45,5±3,6* 25,1 ±1,9* 16,4±1,4 19,8±1,8 15,6±1,2 13,7=1= 1.1 22,9±1,7* 30,7±2,1* 19,1 ±1,5 20,8±1,5 22,1 ±1,6* 23,1 ±2,5 21,0±1,5 14,0±1,7 14,8±1,0 14,9±1,1* 35,9±2,2* 39,8±3,1* 14,2±1,2* 39,1 ±3,9* 47,3±3,2 40,7±3,8* 55,9±3,5 56,2±3,9
Примечание. Здесь и в табл. 2 звездочка — достоверность различий по сравнению с контролем (/><0,05).
ТаблнцаЛ
Активность иэоферментов ЛДГ (в %) в сыворотке кровн крыс при действии оловоорганичесхих соединений (Л4±ш)
Группа животных Срок исследовании. сут ЛДГ, ЛДГ, ЛДГ, ЛДГ, ЛДГ,
Контрольная 5 31,2±2,1 11,7±!,1 16,1±1,4 8,5±0,7 32,4±2,7
15 24,4± 1,7 10,2±0,9 17,0±1,5 11,0±1,1 37,3±3,2
30 30,1 ±2,0 6,3±0,6 9,3±0,8 14,8±1,3 38,8±3,1
1-я 2-я 3-я 5 15 30 5 15 30 5 15 30 20,5±1,5* 7,2±0,9* 14,8±1,5* 13,1 ±1,2* 9,5±1,1 23,5±2,3 13,1±1,1* 26,9±1,6 29,7±2,7 13,3±1,6 , 14,2±3,1 13,8±1,2* 16,4±1,9 20,0±1,5* 10,9±1,6* •3,1 ±1,8 8,0±0,7 7,1 ±1,1 19,5±2,2 23,0±1,8* 16,9±1,5* 16,0±1,2 21,5±1,5 П,4±2,1 29,0±2,2* 14,0±1,1 9,5±0,8 12,7± 1,2* 14,0±2,6 15,0±2,0 10,8± 1,5 10,1 ±1,4 13,8±1,1 19,9±0,9 Ю,4±1,5 15,1±1,3 34,0±1,1 41,6±1 39,5±2,6 43,7±1,7* 38,9±3,3 39,6±2,8 33,7±1,8 40,7±3,9 38,5±3,3
зы (0,01—0,018 мкмоль/мии на 1 мл) свидетельствовало о поражении печени при действии оловооргаиических соединений. Активность уроканиназы в сыворотке крови крыс, получивших диоктилтиогликолят диоктилолова, была выше в 1,2—4 раза, чем у крыс остальных опытных групп. Повышение активности сорбитолдегидрогеназы отмечалось только на 5-е и 15-е сутки после введения препаратов. По результатам исследований, активность уроканиназы оказалась более чувствительной, чем сорбитолдегидрогеназы.
Разнонаправленный характер изменений активности ЛДГ в печени и сыворотке крови можно объяснить угнетением синтеза фермента в печени при действии оловооргаиических соединений и увеличением проницаемости мембран клеток печени для изоферментов ЛДГ, о чем свидетельствует увеличение активности ЛДГ5 в сыворотке кровн.
Увеличение активности ЛДГ3 и ЛДГ, может быть след. ствием усиления процессов регенерации и пролиферации, что подтверждается данными электронной микроскопии ге-патоцитов печени крыс, получивших аналогичные дозы оловооргаиических соединений.
Таким образом, оловоорганические соединения при поступлении в организм белых крыс в дозе равной 1/5 LDjo,
Нерастворимые пигменты на основе фталоцианина меди (ФЦМ) применяются для окраски резины, волокон, пластических масс, в полиграфии и лакокрасочной промышленности [2]. ФЦМ используются в электронной и лазерной технике, а также в качестве органических катализаторов. Пигменты на их основе нерастворимы в воде, маслах, в большинстве органических растворителей. Они устойчивы к действию света, высокой температуры, кислот и щелочей.
В литературе имеются органиченные сведения о биологической активности ФЦМ [1], показывающие низкую острую токсичность пигмента голубого фталоцианинового. Прн этом, однако, выявлена способность вещества к кумуляции на низких уровнях воздействия, что является в известной мере противоречием, если учесть высокую устойчивость ФЦМ.
Изучение токсических свойств ФЦМ проводилось в остром и подостром экспериментах. Прн внутрижелудоч-ном введении крысам-самкам максимально достижимых
обусловливают изменения изоферментного спектра ЛДГ в печени и сыворотке крови. Серосодержащие оловоорганические соединения вызывают большие сдвиги в изофермент-ном спектре, чем не содержащие серы, и оказывают ге-патотоксическое действие.
Результаты исследований учтены при гигиенической нормировании содержащих и не содержащих серу олоГ воорганическнх соединений, предназначенных для стабилизации поливиннлхлорндных материалов «пищевого» назначения.
ЛИТЕРАТУРА
1. Буробин В. А.— В кн.: Новое в методах исследования, диагностики, лечения и профилактики важнейших заболеваний. М„ 1972, с. 80.
2. Маурер Г. Диск-электрофорез. Теория и практика электрофореза в полиакриламидном геле. М., 1971, с. 189.
3. Панове Д. П. — Лаб. дело, 1974, № 9, с. 542—544.
4. Пырков Л. М., Соколова Г. А., Малкина И. И. — Там же, 1971, № 1, с. 30—31.
Поступила 28.01.84
т
доз ФЦМ в виде 20 % взвеси в 2 % крахмале (6 г/кг) п 50% суспензии в диметилсульфокснде (15 г/кг) гибели животных не наблюдалось. Внутрнбрюшинное введение ФЦМ в дозе 3 г/кг также не вызывало их гибели. Однако было выявлено выраженное нарушение функции почек, сопровождавшееся увеличением содержания белка в моче (2,38 ±0,19 мг/мл в опыте и 1,86 ±0,07 мг/мл в контроле; ¿'■<0,02) и снижением диуреза (соответственно 2,1 ±0,19 и 7,8±0,6 мл; Я<0,001). Отмечено также уменьшение содержания белка в сыворотке кровн. ФЦМ не оказывает раздражающего действия на кожу и не проникает через нее. В течение 30 дней его вводили внутрижслудочно белым крысам-самкам в виде 20 % взвеси в крахмале в дозе 2 г/кг. Клинических проявлений интоксикации не выявлено. Не отличались от контроля масса тела, активность щелочной фосфатазы в сыворотке кровн, порог нервно-мышечного раздражения (реобаза), коэффициенты массы внутренних органов. Вместе с тем на протяжении подост-рого опыта повышалось содержание металлопротеида — це-
УДК 613.632:546.561-07
Б. А. Курляндский, Е. В. Брауде, А. М. Клячкина, Н. Л. Торшина, С. Б. Хохлова, Е. В. Засорина
ИЗУЧЕНИЕ ТОКСИЧНОСТИ ФТАЛОЦИАНИНА МЕДИ
НИИ органических полупродуктов и красителей. Москва
