Научная статья на тему 'Действие капронат оксипрогестерона на приживляемость эмбрионов у реципиентов'

Действие капронат оксипрогестерона на приживляемость эмбрионов у реципиентов Текст научной статьи по специальности «Агробиотехнологии»

CC BY
213
35
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
реципиент / эмбрион / приживляемость / криоконсервация / гормональный статус. / recipient / embryo / acceptance / cryopreservation / hormonal status

Аннотация научной статьи по агробиотехнологии, автор научной работы — Горбунов Ю.А., Минина Н.Г., Козел А.А., Бариева Э.И., Андалюкевич В.Б.

Изучено действие гормонального препарата капронат оксипрогестерона пролонгированного действия на изменение гормонального статуса организма, а также приживляемость эмбрионов у реципиентов. Установлено, что проведение двукратной обработки телок-реципиентов 12,5%-ным раствором препарата КОП-17α за 48 ч до пересадки (5-й день цикла) и повторно через 10 дней (15-й день цикла) внутримышечно в дозе 12 мл способствует повышению приживляемости эмбрионов на 9 % за счет своевременной стабилизации баланса половых гормонов в организме реципиента в наиболее ответственные для этого периоды. При осуществлении их криоконсервации эффективно ис-пользование высококонцентрированных защитных сред и процесса витрификации.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Kapronat pregnenoldine effect on embryo acceptance by recipients

The article studies the effect of hormonal drug of kapronat pregnenoldine of prolonged action on the changes in the hormonal status of the body, as well as embryo acceptance by recipi-ents. It has been stated that the double processing of heifer-recipients by KOP-17α 48 hours before the transplantation (5th day of the cycle) and again 10 days after (15th day of the cycle) intramuscularly at a dose of 12ml of 12,5 % solution contributes significantly to the increased embryo acceptance by 9 % due to the timely balancing of sex hormones in the body of the recipient in the most responsible period for that. In the exercise of their effective. In the process of their cryopreservation the use of highly concentrated environment and of vitrification are effective.

Текст научной работы на тему «Действие капронат оксипрогестерона на приживляемость эмбрионов у реципиентов»

Окончание табл. 9

1 2 3 4

Большеголовости 29,79±0,45 28,42±0,64 28,48±0,17

6 месяцев

Длинноногости 49,80±0,12 49,90±0,12 50,08±0,11

Растянутости 85,96±2,78 84,98±3,38 85,69±2,61

Тазо-грудной 114,98+1,07 115,64±4,68 113,15+2,06

Грудной 62,68+0,67 58,73±1,79 58,39±1,29

Сбитости 141,47±5,66 140,78±5,23 139,44±6,23

Костистости 14,75+0,22 14,99±0,22 14,48±0,41

Перерослости 105,24+0,39 103,14±0,56 104,08+0,96

Массивности 121,0±1,43 118,95±1,14 118,86±1,61

Широколобости 58,05+1,93 57,41±0,73 60,57+2,03

Большеголовости 28,92+0,35 27,65±0,49 27,42+0,21

Заключение. Таким образом, использование хрома в рационах бычков 1-й группы в расчете на 1 голову в сутки в возрасте 1 месяца в количестве 2,67; 2 месяцев - 3,67; 3 - 4,80; 4 - 5,94; 5 -7,12 и 6 -8,38 мг, а в рационах телочек соответственно 2,66; 3,56; 4,57; 5,60; 6,74 и 7,95 мг способствовало лучшему росту и развитию отдельных статей тела телят в течение молочного периода.

ЛИТЕРАТУРА

1. Арзуманян, Е.А. Основы интерьера крупного рогатого скота / Е.А. Арзума-нян. - М.: Сельхозиздат, 1957. - 92 с.

2. Малюгин, С.В. Потребность ремонтных телок в хроме при сенажном типе кормления: дис. ... канд. с.-х. наук / С.В. Малюгин. - Саранск, 1996. - 123 с.

3. Прудов, А.И. Скотоводство Мордовии / А.И. Прудов, Н.В. Дугушкин, А.П. Вельматов. - Саранск, 1999. - 342 с.

УДК 636.2:612.64.089.67

ДЕЙСТВИЕ КАПРОНАТ ОКСИПРОГЕСТЕРОНА НА ПРИЖИВЛЯЕМОСТЬ ЭМБРИОНОВ У РЕЦИПИЕНТОВ

Ю.А. ГОРБУНОВ, Н.Г. МИНИНА, А.А. КОЗЕЛ, Э.И. БАРИЕВА, В.Б. АНДАЛЮКЕВИЧ УО «Гродненский государственный аграрный университет» г. Гродно, Республика Беларусь, 230005

(Поступила в редакцию 28.01.2013)

Введение. Многочисленными исследованиями доказано, что эффективность трансплантации эмбрионов зависит от гормонального статуса как доноров, так и реципиентов.

При изучении гормонального статуса у коров с многократными безрезультатными осеменениями Л.Л. Смирновой [5], Н.И. Смысловой

177

и др. [6] установлено, что выживаемость эмбрионов у них зависит от соотношения эстрадиола и прогестерона в сыворотке крови в ранний период после осеменения. Так, животные с нормально развивающимися эмбрионами имели более высокую концентрацию прогестерона на 3-й и 6-й день после осеменения, чем с неоплодотворенными ооцита-ми и дегенерированными эмбрионами. По другим данным, нарушение гормонального статуса организма высокопродуктивных коров-доноров приводит к изменению состава среды яйцеводов и матки, снижению секреции маточных желез, кистозному перерождению яичников [2, 9].

Однако, по мнению I. Sreenan, M. Diskin [8], применение прогестерона оказывает отрицательное влияние на развитие и секреторную активность желтого тела и на его сохранение у коров. Аналогичные данные получили по результатам своих исследований I. Heyman [12], R. Maurer и др., [10, 11, 13], которые также не обнаружили положительное влияние инъекций прогестерона на выживаемость эмбрионов у коров и телок, несмотря на то что обработка стимулировала заметное увеличение размера и образование дополнительного количества желтых тел, а также рост в периферической крови данного гормона.

Таким образом, имеются довольно противоречивые мнения о роли экзогенного прогестерона в повышении приживляемости зародышей после искусственного осеменения или трансплантации эмбрионов. Поэтому изучение влияния гормонального препарата капронат окси-прогестерона на эффективность трансплантации эмбрионов в условиях центра по трансплантации в КСУП «Племзавод «Россь» Волковысско-го района Гродненской области является весьма актуальным. Это позволит осуществлять более ускоренное размножение животных желательного генотипа посредством использования криобанка эмбрионов.

Цель работы - изучить действие гормонального препарата капронат оксипрогестерона (12,5 %-ный раствор КОП) пролонгированного действия на изменение гормонального статуса организма, а также приживляемость эмбрионов у реципиентов.

Материал и методика исследований. Опыты проводили в КСУП «Племзавод «Россь» Волковысского района Гродненской области, а также в научно-исследовательской лаборатории УО «Гродненский государственный аграрный университет».

Уровень содержания прогестерона, эстрадиола-nß, кортизола, тироксина и трийодтиронина в периферической крови телок-реципиентов определяли радиоиммунологическим методом в ГУ «НПЦ Институт фармакологии и биохимии НАН Беларуси» (г. Гродно). Одновременно с взятием крови проводили ректальную пальпацию яичников на клиническую выраженность в них желтых тел по общепринятой методике с некоторыми нашими уточнениями, касающимися телок. Дозировка 12,5 %-ного раствора капронат оксипрогестерона-17а для телок рассчитана согласно рекомендациям Главного ветеринарного управления

Госагропрома РФ [3], который вводили внутримышечно в дозе 12 мл (Ю.А. Горбунов [1]).

Препарат КОП-17а является синтетическим аналогом гормона желтого тела - прогестерона. Химически отличается от него тем, что в положении С17 содержит остаток капроновой кислоты. Будучи эфиром оксипрогестерона, капронат более стоек в организме, чем прогестерон, действует медленнее и оказывает пролонгирующий эффект. После однократной внутримышечной инъекции масляного раствора капронат оксипрогестерона его действие продолжается до 14 дней. Вызывает переход слизистой оболочки матки из фазы пролиферации, вызываемой фолликулярным гормоном, в секреторную фазу, а после оплодотворения способствует ее переходу в состояние, необходимое для развития оплодотворенной яйцеклетки. Его пролонгирующее действие способствует нормальной обеспеченности прогестероном организма животных при обработке в период за 48 ч до пересадки эмбрионов (5-й день полового цикла) и повторно на 15-й день полового цикла, что совпадает с периодами формирования желтого тела, усиления секреции трофобласта, имплантации зиготы в эндометрий, начальной стадии плацентации, т.е. приходится на критические периоды внутриутробного развития.

Для изучения влияния экзогенного прогестерона на приживляе-мость эмбрионов в организме реципиентов были сформированы две группы телок-аналогов по возрасту (14-16 месяцев) и живой массе (380-400 кг) по 36 голов в каждой. Методика исследований, дозы и кратность обработки отображены в табл. 1.

Таблица 1. Схема исследований, доза и кратность введения КОП-17а телкам-реципиентам

Группы n Способ введения, доза, кратность обработки на одну голову

1-я контрольная 36 Внутримышечно, 12 мл физиологического раствора хлористого натрия, двукратно, на 5-й (за 48 ч до пересадки эмбрионов) и повторно - на 15-й дни полового цикла

2-я опытная 36 Внутримышечно, 12 мл 12,5 %-ного раствора КОП 17-а, двукратно, на 5-й (за 48 ч до пересадки эмбрионов) и повторно - на 15-й дни полового цикла

Извлечение, оценку и пересадку эмбрионов, осуществляли согласно рекомендациям по трансплантации эмбрионов в молочном и мясном скотоводстве [4]. Криоконсервацию эмбрионов проводили с использованием высококонцентрированных защитных сред и процесса витрификации согласно методике И.П. Шейко и др. [7].

Результаты исследований и их обсуждение. На первом этапе исследований была изучена степень влияния инъекций препарата КОП-17а на гормональный статус крови телок-реципиентов, а также на клиническую выраженность у них желтых тел. Результаты приведены в табл. 2.

Таблица 2. Содержание гормонов трийодтиронина и тироксина

Группы Трийодтиронин (Т3), нг/мл | Тироксин (Т4), мкг/100мл

Дни взятия проб крови

7-й 17-й 27-й 7-й 17-й 27-й

1-я контрольная 1,47± ±0,15 1,39± ±0,13 1,40± ±0,07 4,10± ±0,35 3,76± ±0,27 3,33± ±0,21

2-я опытная 1,51± ±0,16 1,41± ±0,15 1,25± ±0,05 4,10± ±0,33 4,40± ±0,38 4,45± ±0,40*

*Р<0,05.

Нами не обнаружено достоверных изменений в содержании трийодтиронина (Т3) у опытных телок двух групп в течение полового цикла и после применения инъекций КОП-17а по сравнению с контролем.

Анализ данных по содержанию тироксина (Т4) показал, что концентрация гормона изменяется в неодинаковой для животных разных групп последовательности. Наиболее значительным является снижение его уровня у животных контрольной группы по сравнению с опытной к 27-му дню после начала охоты - 3,33 мкг/100 мл против 4,45 мкг/100 мл (р<0,05).

Сопоставление содержания кортизола в крови телок 1-й и 2-й групп показало, что динамика секреции гормона к концу первой недели после наступления охоты была примерно одинаковой (табл. 3). Уровень гормона в дальнейшем достигал максимальной концентрации к 17-му дню цикла у животных как контрольной, так и опытной групп при дальнейшем несущественном понижении показателя к 27-му дню (соответственно до 18,4 и 17,6 нг/мл).

Таблица 3. Содержание гормонов кортизола и эстрадиола

Кортизол, нг/мл Эстрадиол, пг/мл

Группы Дни взятия проб крови

7-й 17-й 27-й 7-й 17-й 27-й

1-я контрольная 14,81± ±2,75 19,31± ±3,31 18,4± ±3,17 19,30± ±3,39 21,80± ±3,60 24,68± ±3,49

2-я опытная 12,49± ±2,19 18,03± ±3,15 17,6± ±3,07 20,33± ±3,42 25,82± ±3,78 28,12± ±3,91

Изучение динамики эстрадиола в сыворотке крови показало, что концентрация этих гормонов в течение полового цикла изменяется у реципиентов как опытной, так и контрольной групп. Установлено, что к 17-му дню полового цикла при наличии уже хорошо пальпируемых желтых тел у животных обеих групп уровень концентрации эстрадиола повысился: у животных контрольной группы - в среднем на 2,5 пг и составил 21,80 пг/мл, в опытной этот показатель увеличился на 5,49 пг и достиг величины, равной 25,82 пг/мл. Уровень эстрогенной активности имел тенденцию к дальнейшему повышению. К 27-му дню данный

180

показатель по сравнению с 7-м днем у реципиентов контрольной группы увеличился на 5,38 пг/мл (24,68 пг/мл против 19,30 пг/мл), а у животных опытной группы - на 7,79 пг/мл (28,12 пг/мл против 20,33 пг/мл). При этом у животных опытной группы содержание эстрадиола в указанные дни полового цикла было выше, чем у реципиентов контрольной группы.

Концентрация прогестерона также имела тенденцию к увеличению к 27-му дню полового цикла у телок-реципиентов опытной и контрольной групп (табл. 4).

Таблица 4. Содержание прогестерона в крови телок-реципиентов

Группы Прогестерон, нг/мл

Дни взятия проб крови

7-й 17-й 27-й

1-я контрольная 2,08±0,13 2,16±0,21 2,51±0,36

2-я опытная 2,36±0,19 3,21±0,45* 3,42±0,50

*Р<0,05.

Однако у животных опытной группы, которым вводили КОП-17а, содержание прогестерона в крови было несколько выше в сравнении с реципиентами контрольной группы. При этом на 17-й день цикла содержание прогестерона у реципиентов опытной группы было достоверно выше на 1,05 нг/мл в сравнении с контролем: 3,21 нг/мл против 2,16 нг/мл (Р<0,05).

Уровень прогестерона к 27-му дню у животных контрольной группы увеличился на 0,43 (2,51 против 2,08) нг/мл, а у животных опытной группы - на 1,06 (3,42 против 2,36) нг/мл.

Использование технологии криоконсервирования эмбрионов позволяет сохранить ценный эмбриоматериал при отсутствии животных-реципиентов, а также проводить трансплантацию зародышей в строго определенное время с максимальной эффективностью. Усовершенствованный способ криоконсервации эмбрионов крупного рогатого скота с использованием высококонцентрированных защитных сред и процесса витрификации предусматривает насыщение зародышей криопротектором, охлаждение их в парах жидкого азота и погружение в жидкий азот при температуре минус 196 оС. Для этого сначала эмбрионы помещают на 5 мин в первую защитную среду, затем - на 7080 секунд во вторую защитную среду, а затем пайеты с эмбрионами переносят в паты жидкого азота на 60 с.

Приготовление защитных сред осуществляется следующим образом: 1-я защитная среда (10 %-ный раствор глицерина): отмеряют 1 мл химически чистого глицерина и доводят объем раствора до 10 мл фос-фатно-солевым буфером Хенкса, приготовленным ранее с добавлением бычьего сывороточного альбумина (5 г/л), гентамицина (12 мкг/мл) и ампициллина (100 ед/мл); 2-я защитная среда: отмеряют 3 мл химически чистого глицерина, 1,5 мл химически чистого диметилсульфок-сида, 0,5 мл раствора поливидона, смешивают компоненты и доводят

181

раствор до 10 мл фосфатно-солевым буфером Хенкса, приготовленным так, как указано для 1-й защитной среды.

Показатели приживляемости эмбрионов у реципиентов после введения им за 48 ч до пересадки эмбрионов (5-й день полового цикла) и повторно на 15-й день гормонального препарата капронат оксипроге-стерона пролонгированного действия представлены в табл. 5.

Таблица 5. Эффективность применения препарата КОП-17а

Группы n Препараты Стали стельными

голов %

1-я контрольная 36 1 %-ный физиологический раствор хлористого натрия 15 42

2-я опытная 36 12,5 %-ный раствор КОП 17-а 22 51

После пересадки эмбрионов процент стельности в опытной и контрольной группах составил 51 против 42 соответственно. Установлено, что применение капронат оксипрогестерона-17а способствует повышению приживляемости эмбрионов на 7 голов, или на 9 %, за счет своевременной стабилизации баланса половых гормонов в организме реципиента в наиболее ответственные для этого периоды.

Заключение. С целью повышения приживляемости эмбрионов целесообразно проводить двукратную обработку реципиентов 12,5 %-ным раствором препарата КОП-17а за 48 ч до пересадки эмбрионов (5-й день цикла) и повторно через 10 дней (15-й день цикла) внутримышечно в дозе 12 мл. Это способствует увеличению количества стельных реципиентов на 7 голов (9 %). При осуществлении криокон-сервации эмбрионов эффективно использование высококонцентрированных защитных сред и процесса витрификации.

ЛИТЕРАТУРА

1. Горбунов, Ю.А. Использование экзогенного прогестерона (КОП) для предупреждения эмбриональной смертности у коров и телок / Ю.А. Горбунов // Проблемы производства молока и говядины: матер. междунар. конф., Жодино, 19-20 июня 1996 г. / Акад. аграр. наук Респ. Беларусь; БелНИИживотноводства. - Жодино, 1996. - С. 21-22.

2. Горбунов, Ю.А. Методы искусственной регуляции репродуктивной функции у коров при трансплантации эмбрионов и воспроизводстве стада: монография / Ю.А. Горбунов. - Минск: РУП Белорус. науч. ин-т внедр. новых форм хозяйств. в АПК, 2003. - 78 с.

3. Наставление по применению комплекса гормональных препаратов для синхронизации половой охоты у телок. - М.: Россельхозиздат, 2009. - 14 с.

4. Рекомендации по трансплантации эмбрионов в молочном и мясном скотоводстве / В.С. Антонюк [и др.]; Министерство сельского хоз-ва и продовольствия РБ, БелНИИЖ. -Жодино, 1995. - 38 с.

5. Смирнова, Л.Л. Влияние молочной продуктивности коров на уровень воспроизводства стада / Л.Л. Смирнова // Совершенствование методов воспроизводства и искусственного осеменения сельскохозяйственных животных. - М., 2003. - С. 64-69.

6. Смыслова, Н.И. Приживляемость эмбрионов в зависимости от гормонального профиля крови телок-реципиентов / Н.И. Смыслова, М.Н. Ефремова, Ю.Н. Петраков // Биотехнология в животноводстве: бюл. научн. работ / ВИЖ. - Дубровицы, 1997. - С. 5052.

7. Способ глубокого замораживания эмбрионов крупного рогатого скота: пат. 9315 / И.П. Шейко [и др.] // Нац. центр интеллектуал. собственности РБ. - Минск, 2007. - С. 48.

8. Sreenan, I.M. Factors attecting pregnancy rate following embryo-transfer in the cows / I.M. Sreenan, M.G. Diskin // Theriog. - 2007. - Vol. 27. - P. 99-114.

9. Nakagata, N. High survival rate of unfertilized mouse oocytes after vitrification / N. Nakagata // J Reprod. Fertil. - 1999. - P. 479-483.

10. Pope, W.F. Uterine asynchrony: a cause of embryonic loss / W.F. Pope // Biol. Re-prod. - 2008. - Vol. 39. - P. 999-1003.

11. Erb, R.E. Profile of reproductive hormones associated with fertile and non - fertile inseminations of dairy cattle / R.E. Erb, H.A. Gaverik // Theriog. - 2003. - Vol. 5. - P. 227-242.

12. Heyman, I. Embryonic loss in cattle after transfer of fresh, frozen or cultured embryos / I. Heyman // Proc. x Int. Congr. Anim. Reprod. and A.I. - 2004. - Vol. 2. - Р. 228

13. Maurer, R.R. Hormonal asynchrony and embryonic development / R.R. Maurer, S.E. Echterkamps // Theriog. - 2003. - Vol. 12. - P. 11-22.

УДК 636.2.082

СЕЗОН РОЖДЕНИЯ КАК ОДИН ИЗ ФАКТОРОВ, ОБУСЛОВЛИВАЮЩИХ СРОК ПРОДУКТИВНОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ КОРОВ

С.И. КОРШУН, Н.Н. КЛИМОВ, Т.М. КОМЕНДАНТ УО «Гродненский государственный аграрный университет» г. Гродно, Республика Беларусь, 230008

(Поступила в редакцию 28.01.2013)

Введение. Современное состояние молочного скотоводства во многих странах мира характеризуется существенными качественными и количественными изменениями. Особенно четко прослеживаются следующие тенденции: снижение численности маточного поголовья, существенное повышение продуктивности коров, широкое использование голштинского скота североамериканской селекции, расширение применения системы однозначной регистрации и идентификации племенных животных, активное использование биотехнологии, возрастание доли государственных доходов от интенсификации селекции. Практика многих стран с развитым молочным скотоводством показала, что успех этой отрасли был обеспечен путем стабилизации поголовья коров, внедрения в производство прогрессивных методов селекции, широкого использования генофонда высокопродуктивных пород для преобразования имеющегося скота [7].

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Одним из важнейших условий эффективной селекционной работы с молочными породами скота является долголетнее использование маточного поголовья, особенно высокопродуктивных коров. Обоснованная гипотеза о возможности наследования свойства долговечности вызвала во многих странах огромный интерес к исследованию причин долголетия коров. Все чаще и чаще появляются публикации из области зоотехнической геронтологии. Наследуемость продуктивного долголетия низка, и причинами изменения данного показателя могут быть многочисленные факторы генетического и паратипического характера

[1, 4].

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.