CC BY
32
це операции. Перфорация сразу была замечена, поврежденная часть тонкой кишки была выведена в рану и ушита серо-серозным двухрядным швом. Послеоперационный период протекал без осложнений, пациентка выписана в удовлетворительном состоянии.
В 4 случаях в послеоперационном периоде у пациентов возникали параумбиликальные инфильтраты, которые рассосались после проведения курса физиотерапии. Такие случаи возникали на первоначальных этапах освоения методики ЛХ, мы связываем это с тем, что на стадии введения ранорасширителя в брюшную полость по 10 мм троакару в пара-умбиликальной зоне мы не проводили частичного рассечения апоневроза, и при выделении желчного пузыря из брюшной полости и раскрытии ранорасширителя травмировались мягкие ткани, что вело к их воспалению. В дальнейшем мы всегда выполняли надсекание апоневроза с учетом размеров и количества камней в желчном пузыре, при этом желчный пузырь всегда достаточно легко извлекался из брюшной полости, и возникновения воспалительных инфильтратов не отмечалось.
Следует отметить, что с приобретением нами опыта выполнения ЛХ, показания к ЛХ расширялись, и сейчас практически все случаи оперировались лапароскопически, особенно пациенты с избыточным весом. На наш взгляд, тучность — одно из лучших показаний к ЛХ, это связано с более легким послеоперационным течением, по сравнению с открытой операцией. Из оставшихся противопоказаний можно выделить: гангренозный холецистит, выраженную портальную гипертен-
зию, наличие расстройств свертывающей системы крови, а также пациентов, не перено-сящх пневмоперитонеум.
ЛИТЕРАТУРА
1. Галлингер Ю.И., Тимошин А.Д. Лапароскопическая холецистэктомия. — М., 1992. — 86 с.
2. Bruhat М.A., Dubois F. La Chirurgie Abdominopel-vienne par Coelioscopie. //Springer Verlig. — Paris, 1992, Vol.l.
3. Dubois Choleeystectomie et exploration de la voie billiare principale par coelioscopie. Techniques Chirurgicales. Généralités. Appareil Digestif. 40-950 Editions Techniques. //Encycl. Med. Chir. — Paris, 1993. — 17 p.
4. Dubois F., Berthelot G., Levard H. Coelioscopie Cholecystectomy: Experience with 2006 Cases. // World Journal of Surgery. — 1995, Vol.19. — P.748-752.
5. Mouret P. La cholecystectomie endoscopique a 4 ans. //Lyon Chir. — 1991, Vol.87. — P.179.
6. Soper N.J., Stockmann P.T., Dunnegan D.L., Ashley S.W. Laparoscopic cholecystectomy: the new gold standart? //Arch. Surg. — 1992, Vol.427. — P.917-918.
LAPAROSCOPIC CHOLECYSTECTOMY: EXPERIENCE OF 140 CASES V.O. Timoshenko, S. V.Melnik, O.V.Kamag,
A. V. Ugolkov
According our experience, indications to laparoscopic cholecystectomy should be increased. Acute cholecystitis and empyemas are now good indication for laparoscopic cholecystectomy. In this case puncture of the gallbladder is useful coupled with local injection of antiseptics to sterilize the gallbladder cavity in the beginning of the operation. The few remaining contraindications are gangrenous cholecystitis, high portal hypertension, the presence of coagulation diseases, and patients who can not undergo a pneumoperitoneum. We recommend to add incision of aponeurosis for prophylaxis of infiltration of paraum-bilicalis wound.
УДК 616.155.32:612.017.1
ДЕСЯТИЛЕТНИЙ ОПЫТ ТИПИРОВАНИЯ СУБПОПУЛЯЦИЙ ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА С ПОМОЩЬЮ АНАЛИТИЧЕСКОГО КЛЕТОЧНОГО ЭЛЕКТРОФОРЕЗА В ДИАГНОСТИКЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ
Р. Г. Скворцова, II. О.Мплова
(Иркутский государственный медицинский университет — ректор акад.А.А.Майборода,
ЦНИЛ — дир. докт.биол.наук Р.Г.Скворцова, каф.дермато — венерологии — зав. проф.Н.П.Кузнецова)
Резюме. Предложен вариант метода ЭФП-ти-пирооания* основных субпопуляций лимфоцитов крови человека в системе аналитического клеточного электрофореза на микроскопе «Пармок-вант-2>> (Карл Цепе Иена, VEB), позволяющий не только констатировать факт изменения суб-популяционного состава этих клеток у пациента о ходе заболевания, но и улавливать эти изменения на ранних стадиях взаимодействия лиганд-рецептор in vivo и in vitro.
Информативная ценность метода доказана на экспериментальном и клиническом материале при изучении физиологических и патологических, процессов. в основе которых лежат реакции иммунной системы.
Установлена возможность использования элек-трокинегпических свойств лимфоцитов крови для типирования их субпопуляций и на этой основе предложены критерии оценки эффективности лечебных мероприятий при угрозе невынашивания беременности, туберкулезе легких, псориазе и урогенитальных инфекциях. 'ЭФП-пшпирование — распределение лимфоцитов на субпопуляции на основе феномена разной скорости движения их в электрическом поле. НЭП — низкоэлектрофоретически подвижные клетки (В-лимфоциты); СЭП — среднеэлектрофоретически подвижные клетки (Т-супрессоры); ВЭП — высокоэлектрофоретически подвижные клетки (Т-хелперы).
Одним из путей достижения гомеостатического равновесия в экстремальных условиях является включение регуляторных механизмов на уровне различных субпопуляций лимфоцитов.
Несмотря на то, что вопросам рецепрок-ных связей между иммунной и нейроэндокринной системами в последнее время уделяется особенно пристальное внимание [15,2,19], работы, касающиеся изучения возможностей пептидергической защиты на уровне регуляции через субпопуляции лимфоцитов, единичны.
Появившийся в последнее время достаточно точный способ маркировки отдельных субпопуляций лимфоцитов с помощью моноклональных антител (основой метода служит сте-реоспецифическое связывание «лиганд-рецеп-тор»), к сожалению, не всегда может быть использован в клинике, где особенно важно наблюдение за динамикой процесса. Не менее важно цметь информацию о реакции иммунной системы на проведение этиотропной терапии.
Опосредованные внешними факторами реакции реализуются в иммунной системе через поверхностную мембрану иммунокомпе-тентных клеток и, как результат, приводят к смене электрокинетических свойств этих клеток. Важно отметить, что до настоящего времени изучение электрокинетических свойств лимфоцитов велось только с позиций фундаментальных исследований, и лишь в некоторых работах последних лет, учитывая достижения технического прогресса, указывается на перспективность использования электрофоретической подвижности лимфоцитов (ЭФП) для оценки иммуномодулирующих эффектов терапии [17].
В соответствии с вышесказанным, целью исследований было выявление закономерностей изменения ЭФП лимфоцитов при иммунопатологических состояниях и их контролируемая иммунокоррекция.
На основании проведенных нами исследований удалось показать, что с помощью статистического обсчета лимфоцитарных цито-фореграмм, полученных на приборе «Пармок-вант-2», можно выделить три ЭФП-типируе-мые субпопуляции, отражающие основные черты эффекторных (НЭП)* и регуляторных (СЭП, ВЭП)* звеньев иммунной системы [7,14].
Экспериментальные исследования показали, что «маркировка» по ЭФП достаточно надежный способ оценки одного из важнейших параметров иммунного статуса — соотношения регуляторных и эффекторных субпопуляций лимфоцитов.
Известно, что изменение мембранной топографии поверхностных гликопротеидов лимфоцитов, от которых зависит электрический заряд клеток, тесно связано с изменением экспрессии на них рецепторов к различного рода иммуномодуляторам, что непосред-
ственно отражается на функциональной активности клеток [18]. В этой связи было изучено действие ряда иммуноактивных пептидов нейроэндокринного происхождения и показано, что лимфоциты человека экспрессируют на своей поверхности преимущественно дельта-рецепторы к опиатам, причем местом дислокации'опиатных рецепторов, как и глюкокортикоидных гормонов, являются клетки с высокой ЭФП [12,13,10,9,8].
С помощью метода ЭФП-типирования удалось показать, что пептиды тимуса оказывают выраженный модуляторный эффект на соотношение субпопуляций, зависящее от исходного состояния иммунокомпетентных клеток.
Для подтверждения вышеизложенных положений и рекомендаций использования их в практике проводили анализ клинического материала на моделях ряда патологических состояний, ключевым звеном которых являлся дисбаланс иммунной системы.
Показано, что при угрозе невынашивания беременности отмечается увеличение количества НЭП-лимфоцитов и сокращение СЭП-клеток, что можно рассматривать как один из механизмов отторжения плода как аллотрансплантата.
Положительные результаты, полученные в 90% случаев диагностики невынашивания беременности с помощью ЭФП-типирования субпопуляций лимфоцитов крови, дают хороший прогноз для использования этого метода не только для диагностики, но и для контроля за лечением этой патологии.
Известно, что комплекс реакций, вызванных стрессом, в частности инфекцией, наряду с повышением адаптационных возможностей организма в фазе резистентности (по Селье) приводит и к возрастанию его иммунокомпетентности [11, поэтому иммунодефицит при туберкулезе легких рассматривался нами как экстраполяция экспериментальных исследований в клинику.
Показано, что у больных с распространенным прогрессирующим туберкулезом легких значительно снижено число клеток с высокой ЭФП. Слежение за этим показателем в динамике лечения туберкулеза служило достоверным показателем эффективности лечебных мероприятий, так как коррелировало с течением клинической картины заболевания [11].
Если в патогенезе туберкулеза, как правило, преобладает дефицит Т-хелперов (ВЭП), то при таком многофакторном заболевании, каким является псориаз, выявляются иммунодефициты различной направленности [16].
Определение характера иммунодефицита при псориазе с помощью ЭФП-типирования субпопуляций лимфоцитов позволило предпринять ряд мер для эффективного лечения этого заболевания. Так, проследив за изменением соотношения ЭФП-типированных субпопуляций лимфоцитов в процессе ПУВА-
терапии, выяснили ее супрессивное влияние на организм. Применение иммуномодуляторов тималина и тактивина на фоне ПУВА-терапии не только улучшило клиническую картину, но и нормализовало иммунный статус обследованных больных по соотношению ЭФП-типированных лимфоцитов [3,4].
Одной из наиболее распространенных урогенитальных инфекций у женщин является бактериальный вагиноз. При исследовании параметров иммунного статуса у 41 больной показано, что соотношение ЭФП-типированных субпопуляций лимфоцитов диктует необходимость назначения индивидуальной иммунокоррекции, зависящей от варианта соотношения СЭП-, НЭП-, ВЭП-клеток.
Перед назначением этиотропного лечения 17 больных получали тактивин, 11 — тима-лин, 8 — пирогенал, 3 — спленин, 2 — да-ларгин. В результате проведенной терапии клиническое и этиологическое выздоровление отмечено у 92,7% больных. У них наблюдалась нормализация показателей иммунного статуса. Из 30 больных бактериальным ва-гинозом (группа сравнения), не получавших иммунотерапии, клиническое и этиологическое выздоровление установлено только у 73,3% женщин [5,6].
Таким образом, показано, что ЭФП-типи-рование лимфоцитов крови человека является достоверным диагностическим показателем, позволяющим корректно назначать иммунотерапию и контролировать динамику клинического выздоровления у больных с различными патологическими состояниями.
ЛИТЕРАТУРА
1. Горизонтов П.Д. Стресс. Система крови в механизме гомеостаза. Стресс и болезни. //Гомеостаз.
— М.: Медицина, 1976. — С.427-458.
2. Зозуля A.A., Пшеничкин С.Ф. Опиоиды и иммунитет. //Итоги науки и техники. Сер. Иммунология. Т.25: Нейроиммунология: Молекулярные и клеточные аспекты. — М., 1990. — С.50-111.
3. Малова И.О., Скворцова Р.Г. Применение регуляторного пептида даларгина в комплексной терапии псориаза. //Экология, патология и ее фармакокоррекция: Тез. конф. с международным участием. — Чита, 1991. — 247 с.
4. Малова И.О., Скворцова Р.Г., Кузнецова Н.П. Влияние ПУВА-терапии на дисбаланс субпопуляций лимфоцитов при псориазе. //Деп. в НПО «Союзмединформ». — 1991, № L-21056.
5. Малова И.О., Скворцова Р.Г., Рютина И.В. Новые возможности повышения терапевтической эффективности при лечении женщин с бактериальным вагинозом. //Сборник «Изобретательство и рационализация в медицине». — Иркутск, 1994. — С.77-78.
6. Малова И.О., Скворцова Р.Г., Рютина И.В. Совершенствование обследования и патогенетического лечения женщин с бактериальным вагинозом. //Тез.научно-практической конференции дермато-венерологов Урала, Сибири и Дальнего Востока. — Екатеринбург, 1994. — С.26-27.
7. Скворцова Р.Г., Знамировская A.B., Степкина
В.К., Журова В.Е. Оценка Т- и В-популяций лимфоцитов с помощью электрофореза в жидкой фазе в сравнении с методом розеткообразования. //Окружающая среда и здоровье человека. Сборник научн.трудов. — Иркутск, 1985. — С.79-84.
8. Скворцова Р.Г., Малышев В.В. Способ оценки антистрессорной эффективности химических соединений. //Авт.свид.№ 1424493 (СССР). —
1986, ДСП.
9. Скворцова Р.Г., Малышев В.В., Знамировская А.В. Способ определения стрессового состояния животного. //Авт.свид.№ 1329719 (СССР). —
1987.
10. Скворцова Р.Г., Кирдей Е.Г., Слепушкин В.Д., Федосеев А.П., Знамировская А.В. Способ выявления субпопуляции лимфоцитов, экспрессирующих опиатные рецепторы. //Авт.свид.№ 1400277 (СССР). — 1987, ДСП.
11. Скворцова Р.Г., Никитина О.И., Знамировская А.В. Функциональное состояние лимфоцитов у больных туберкулезом подростков в процессе комплексной терапии. //Проблемы туберкулеза.
— 1987, 7. —С.26-29.
12. Скворцова Р.Г. Электрофоретическая подвижность лимфоцитов как показатель экспрессии рецепторов к опиатам на Tm-лимфоцитах. //Тез. докл. I Всесоюзн.иммунологического съезда. — Сочи, 1989. — С.106.
13. Скворцова Р.Г., Кирдей Е.Г., Устюжанинова А.В., Слепушкин В.Д. Влияние опиатов на электрофоретическую подвижность лимфоцитов человека. //Деп. в ВИНИТИ. — № 3861-В90.
14. Скворцова Р.Г. Использование прибора «Пар-моквант-2» для идентификации субпопуляций лимфоцитов периферической крови. //Информационный листок ЦНТИ. — Иркутск, 1988, №456-88. — С.1-4.
15. Смирнов В.А., Шлейкин А.Г. Иммунологический подход к изучению нейромедиаторных систем. //Успехи совр.биол.. — 1990, 110, № 2. —
С.231-243.
16. Baker R.S., Swain A.F., Fry L. et. al. Epidermal T-limphocytes and HLA-DR expression in psoriasis. //Brit. J. Dermatol. — 1984, V.110, № 5. — P.555-564.
17. Imaguchi Т., Shimizu М., Hayashi H. Analysis of electrjphoretic mobility histograms of mouse sple-nocytes and thymocytes during tumor growth and after combined chemotherapy and immunotherapy. //J. Biochem. and Biophys. Meth. — 1989, 18, № 2. — P.883-886.
18. Teschemacher H., Koch G., Scheffter H., Brantt V. Opioid pepttides: Immunological significance? //Neuropeptieds. Abstr. — N.Y., 1989. —P.191-202.
19. Wigg J.N. Electroforesis of lymfoid cells. Characterization of human В and T ctlls in peripheral lymphoid tissues. //Clin. Ex. Immunol. —1973, V. 15. — P.497-506.
TEN-YEAR EXPERIENCE OF HUMAN BLOOD LYMPHOCYTE SUBPOPULATIONS TYPING WITH THE HELP OF ANALYTICAL CELLULAR ELECTROPHORESIS IN IMMUNOLOGICAL PATHOLOGY R.G.Skvortsova, I.O.Malova There is a version of electrophoretic agility — typing of human blood general lymphocyte subpopulations in the system of analitical cell electrophoresis with the use of microscope «Parmoquant-2» (Carl Ceis, lien, VEB). It allows not only to state the fact of subpopulation content of the cells alteration of a patient during the disease course, but also to catch this alterations at the early stages of interaction ligand receptor in vivo and in vitro.
The informative value of the method is proved on experimental and clinical material during the studying of physiological and pathological-.processes, in the basis of which immunnic system reactions are. The possibility of electrocinetic properties of blood lym-phocites using for their subpopulations typing is fixed. On this basis were proposed criteria of therapeutic measures effectivity in the presens off abortion, tu-berculusis, psoriasis and urogenital infections threat.
