CC BY
11
ловушка, Bruker Daltonic). Разделение выполняли при градиентном элюировании двумя фазами: А (1 % об. ацето-нитрила, 0,1 % об. муравьиной кислоты, 2 мМ формиата аммония в воде) и В (1 % об. воды, 0,1 % об. муравьиной кислоты, 2 мМ формиата аммония в ацетонитриле). Объем вводимой пробы 5 мкл. Масс-спектрометр использовали в режиме UltraScan с изменением полярности; регистрация спектров МС1-МС3 (Target MSMS). Режим фрагментации standard; амплитуда фрагментации 0,8 В, модуляция 40-250 %, время 40 мс. Один анализатор был оборудован стандартным источником для электрораспылительной ионизации, второй - источником IonBooster, фокусирующим поток при электрораспылении. Все условия настройки ХМС систем соответствовали тем, что были рекомендованы методическими указаниями ToxTyper. Сбор данных осуществляли в информационно-зависимом автоматическом режиме. Для идентификации обнаруживаемых соединений пользовались библиотекой ToxTyper 1_1 Library, содержащей масс-спектры МС1-МС3 и времена удерживания аналитов.
Для приготовления модельных растворов использовали поверочные контроли мочи человека, содержащие амфетамин, метамфетамин, 3,4-метилендиоксиамфе-тамин (MDA), 3,4-метилендиокси-Ы-этиламфетамин (MDEA), 3,4-метилендиоксиметамфетамин (MDMA), Ы-метил-1-(3,4-метилендиоксифенил)-2-бутанамин (MBDB), секобарбитал, 7-аминофлунитразепам, бромазе-пам, оксазепам, нордиазепам, золпидем, 11-нор-Д9-ТГК-карбоновую кислоту, бензоилэкгонин, экгонин метиловый эфир, морфин, кодеин, дигидрокодеин, 6-моноацетил-морфин, метадон, EDDP (2-этилиден-1,5-диметил-3,3-дифенилпирролидин), бупренорфин, норбупренорфин, пропоксифен, ЛСД (диэтиламид лизергиновой кислоты), метаквалон, фенциклидин (всего 28 соединений). Концентрации аналитов составляли 75 % и 125 % от величин пороговых концентраций, рекомендованных Европейским обществом по тестированию на наркотики (EWDTS).
Подготовку проб выполняли двумя методами.
1. Извлечение ацетонитрилом (500 мкл) из мочи (100 мкл) при охлаждении (-18 °C, 15 мин.). Пробу (5 мкл) вводили в хроматограф в виде раствора в смеси ацетонитри-ла и воды (100 мкл) с концентрацией ацетонитрила 10 % об. Степень концентрирования около 0,8.
2. Последовательная жидкостно-жидкостная экстракция из мочи (1 мл) в присутствии избытка гидрокарбоната натрия: а) смесью 1-хлорбутана и изоамилового спирта (99:1), б) этилацетатом. Пробу (5 мкл) вводили в хроматограф в виде раствора в смеси ацетонитрила и воды (100 мкл, 50 % об.). Степень концентрирования 10.
Образцы, получаемые при обоих способах пробопод-готовки, анализировали десятикратно на обоих анализаторах, отличающихся видом ионных источников. Критерием правильности идентификации считали результат работы анализатора, получаемый в автоматическом режиме.
Рис. 1. Сравнение вероятностей истинно-положительных идентификаций (от 100 %) при использовании обычного ионного источника и источника IonBooster для разных способов пробоподготовки и концентраций аналитов.
Получаемые вероятности истинно-положительных идентификаций для всех соединений приведены на рис. 1. При использовании ионного источника 1опБоо81ег и для выбранного набора аналитов вероятность обнару-
жений увеличивается на 2-6 %. Снижение вероятности обнаружения наблюдали только в случае тетрагидрокан-набинолкарбоновой кислоты (метаболита тетрагидрокан-набинола).
ВЫВОДЫ
Применение источника 1опБооз1ег в скрининговом анализе мочи позволяет несколько увеличить вероятность обнаружений. В зависимости от концентраций аналитов и способа пробоподготовки это увеличение составляет от 2 до 6 %. Термолабильные соединения рекомендуется определять при использовании обычного ионного источника.
CURRENT TRENDS IN MONITORING OF DRUG-RELATED DEATHS IN SLOVAKIA
CSc. Prof. J. Sidlo1, Dr. I. Steliar2
• institute of Forensic Medicine (head CSc. Prof. J. Sidlo), School of Medicine, Comenius University, Bratislava, Slovakia
• 2National Monitoring Centre for Drugs (head Dr. I. Steliar), Bratislava, Slovakia
• Abstract: Using illicit drugs as well as psychoactive medicaments represents a serious health and social problem. Obtained data serve as one of the bases for shaping anti-drug policy and strategy not only at national but also international level.
• Keywords: drug-related deaths, autopsy, toxicology, monitoring
INTRODUCTION
Using illicit drugs as well as psychoactive medicaments represents a serious health and social problem. Monitoring of illicit drugs and psychoactive medicaments related deaths and mortality rates among drug users is one of the essential indicators of the seriousness of drug-related problem. Obtained data serve as one of the bases for shaping anti-drug policy and strategy not only at national but also international level.
The aim of the paper is to present the results of analysis of cases of illicit drugs and psychoactive medicaments related deaths in the period of years 2004-2014 in the Slovak Republic.
MATERIAL AND METHODS
The study included all those deceased who died in relation to drug abuse and were submitted to medico-legal autopsy and toxicological investigation in Slovakia within eleven-year period ofthe years 2004-2014. The obtained data were analyzed according to methodology of European Monitoring Centre for Drugs and Drug Addictions as direct and indirect deaths. Cases included in both of groups were evaluated according to occurrence of cases in particular years, sex, age, drugs detected, cause of death, external cause of death and compared.
RESULTS
The results of analyses show a comparatively low mortality rate related to psychoactive substances, there were reported 1123 cases in total, i.e. less than 2 % of all autopsies. In absolute figures so-called indirect deaths concerning deaths under the influence of psychoactive substances - 654 cases (58 %o), prevail over so-called direct deaths where a cause of death is overdosing by psychoactive substances - 469 cases (42 %o). Out of the total number of cases, 74 % were related to men and 26 %o to women. More than 47 % of the cases were related to the age up to 34 years. To illicit drugs were related more than 53 % of deaths. The most frequently detected drugs in the group of direct deaths were from the group of psychoactive medicaments and opiates. In
the group of indirect deaths the situation was similar, except of opiates, higher prevalence was of the substances from the group of amphetamines/methamphetamines and cannabinoids. Fatal poisonings number related to illicit drugs varied from 4 to 6 per million inhabitants aged 15-64 years per year.
CONCLUSIONS
The results of our study showed high participation rate of psychoactive medicaments on fatal cases related to psychoactive substances abuse. This fact highlights the need to pay more attention to the indication of the treatment and to control of prescription in treated psychiatric patients especially those at risk of suicide. As to fatal overdosing with illicit drugs, low mortality rate found out in the period of years 2004-2014, ranks Slovakia among countries with the lowest death rate from these causes in Europe.
■ N-METHYLAMPHETAMIN - RETURN OF THE LEGEND
Klotzbach Heike
• MDK Thüringen (German Health Insurance Medical Service)
N-Methylamphetamin (Crystal Meth) is a centrally effective sympathomimetic stimulant which was already used by soldiers in World War II. Desirable effects lie in increase of physical and mental capacity, reduce of fatigue and counteracting feelings of fear, pain and hunger. Under the trade name «Pervitin» the substance was used and abused in Germany not least in competitive sports until 1988 and made its return as an illicit drug during the recent years.
Whereas consumption of heroin and cocaine in Germany is decreasing, cases of amphetamine usage, Crystal Meth in particular are getting more and more popular. This refers to ascertained police cases as well as to persons seeking for help from drug counseling facilities. Desired effects as increased psychomotor drive and self confidence lead to continuous application resulting in substance habituation and dose increase with side effects of psychotic episodes of paranoia mainly in combination with sleep deprivation. Beside medical and economic consequences also social and legal aspects referring to experiences in Thuringia, such as roadworthiness and culpability are introduced. Moreover the role of this drug as a low cost alternative of cocaine matching with the requirements of meritocracy, high speed and continuous maximum power is discussed.
■ ОБНАРУЖЕНИЕ МЕТАБОЛИТОВ НОВОГО СИНТЕТИЧЕСКОГО КАННАБИНОИОА: ЭКСПЕРТИЗА ГРУППОВОГО ОТРАВЛЕНИЯ
А.М. Григорьев1, А.П. Солошенко1, Т.Е. Саулина1, Н.А. Крупина1,2
• 1Бюро судебно-медицинской экспертизы Московской области (нач. - д.м.н., проф. В. А. Клевно)
• 2Кафедра судебной медицины (зав. -д.м.н., проф. В. А. Клевно) ФУВ ГБУЗ МОНИКИ им. М. Ф. Владимирского
• Аннотация: Экспертиза группового отравления, произошедшего в Московской области, привела к заключению о том, что его причиной послужило употребление нового синтетического каннабиноида, идентифицированного как ^(1-амино-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил)-1-(4-фторбензил)-1Н-индазол-3-карбоксамид («ADB-FUBINACA»). Это соединение является амидной формой найденного ранее каннаби-
миметика - метил 2-(1-(4-фторбензил)-1Н-ин-дазол-З-карбоксамид^З-диметилбутаноата, считающегося причинои групповых отравлений в ряде городов России в 2015 г. Новое соединение обнаружили в изъятом порошке и в трупной крови умершего в результате отравления. Методом жидкостной хромато-масс-спектрометрии, включающей применение двух масс-спектрометров (QTOF и ионная ловушка) в моче восьми лиц, находившихся в коматозном состоянии, предположительно идентифицировали ряд метаболитов, представляющих собой продукты моно- и ди-гидроксилирования, глюкуронидирования моногидроксильных производных, гидролиза терминальной амидной группы с последующим глюкуронидировани-ем или моногидроксилированием, гидролиза амидной связи в боковой цепи с последующим глюкуронидированием карбоксигруппы. • Ключевые слова: ГХ-МС, ЖХ-МС, синтетические каннабиноиды, метаболиты, моча, кровь
ВВЕДЕНИЕ
Синтетические каннабимиметики (каннабиноиды, СК) - группа соединений, объединенная по признаку подобия их фармакологического действия, обязательно включающего значительную аффинность к каннабиноид-ным рецепторам млекопитающих. Малая структурная селективность этих рецепторов объясняет широкое структурное разнообразие соединений, входящих в группу СК. Данная особенность вместе с простотой синтеза субстанций и изготовления готовых форм (курительных смесей, «спайсов») приводит к значительной популярности СК. Вариабельность структур СК, а также их быстрый и практически полный метаболизм крайне осложняет проведение химико-токсикологических и судебно-химических экспертиз. Несмотря на значительный объем информации о метаболизме СК, появление каждого нового соединения требует проведения работ по поиску и структурной идентификации метаболитов.
В данном докладе приведены результаты работ, выполненных при экспертизе группового отравления, вызванного употреблением нового СК и произошедшего в Московской области.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Исследование проводили с помощью газовой и двух жидкостных хромато-масс-спектрометрических систем.
Предварительный скрининг всех образцов осуществляли на хромато-масс-спектрометре Agilent Technologies с хроматографом 7890B и масс-спектрометром 5977A, настроенным на работу при положительной электронной ионизации в режиме сканирования, диапазон 40-550 Да. Разделение выполняли на колонках HP-5ms (30 м х 0,25 мм х 0.25 мкм) в градиентных условиях. Ввод проб без сброса (splitless). Объем вводимой пробы 1 мкл. Поиск соединений проводили с помощью библиотек NIST11, MPW2011, а также внутрилабораторной библиотеки.
Жидкостные системы, настроенные на ионизацию в режиме электрораспыления, применяли для поиска и идентификации метаболитов.
Первая состояла из хроматографа 1260 Infinity с колонкой Zorbax Eclipse Plus C18 (2,1x100 мм, 3,5 мкм) и масс-спектрометра 6520 (QTOF, Agilent Technologies). Разделение выполняли при градиентном элюировании и регистрации спектров МС и МС2 (Target MSMS).
Вторая состояла из хроматографа UltiMate 3000 с колонкой Acclaim RSLC 120 C18 (2,1x100 мм, 2,2 мкм)
