CC BY
26
УДК 616.24-002.5-003.2:612.017.1:615.28:579.871.9
шстояние иммунитета в интенсивную фазу химиотерапии Больных инфильТрАТивным
туберкулезом легких с первичной лекарственной устойчивостью миКОБАКТЕрий туберкулеза
И. П. Зиновьев, И. А. Коковихина, В. Г. Новиков
Кировская государственная медицинская академия, ОГУЗ«Кировский областной противотуберкулезный диспансер», г. Киров
Проведено исследование клеточного иммунитета по 11 показателям у 35 больных инфильтратив-ным туберкулезом легких с первичной лекарственной устойчивостью микобактерий туберкулеза до лечения противотуберкулезными препаратами, у 24 больных через 2 месяца и у 12 больных через 6 месяцев интенсивной химиотерапии. у обследованных больных в интенсивную фазу химиотерапии достоверно уменьшаются фагоцитарная активность нейтрофилов и количество СD4- и CD8-лимфоци-тов. Уменьшение количества СD4- и CD8-лимфоцитов рассматривается как достоверный признак вторичного иммунодефицита. Развивающийся вторичный иммунодефицит авторы объясняют ускоренным апоптозом. Установлено достоверное увеличение к 6 месяцам лечения количества CD95-лимфоцитов, что подтверждает ускорение апоптоза. Авторы рекомендуют выделить и узаконить в специальной литературе и практике лечения больных туберкулезом два понятия: апоптозпротекторы и апоптозкор-ригирующая терапия. Апоптозпротекторы и апоптозкорригирующую терапию следует рассматривать как самостоятельный и обязательный раздел патогенетической терапии туберкулеза.
Ключевые слова: инфильтративный туберкулез, интенсивная химиотерапия, первичная лекарственная устойчивость МБТ, вторичный иммунодефицит.
Введение
Лекарственно-устойчивый туберкулез рассматривается как самостоятельная и наиболее актуальная проблема современной фтизиатрии [5]. Состояние иммунитета больного туберкулезом определяет клинику, течение и прогноз заболевания. Состояние иммунитета в интенсивную фазу химиотерапии туберкулеза не изучено.
Цель работы — изучить основные показатели клеточного иммунитета у впервые выявленных больных инфильтративным туберкулезом легких с первичной лекарственной устойчивостью (ПЛУ) микобактерий тубер-
кулеза (МБТ) до лечения противотуберкулезными препаратами, через 2 и через 6 месяцев интенсивной химиотерапии, провести статистическую обработку, анализ полученных результатов и сравнить соответствующие показатели больных и здоровых.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
исследования
Изучен клеточный иммунитет в динамике у 35 впервые выявленных больных ин-фильтративным туберкулезом легких с первичной полирезистентной лекарственной устойчивостью МБТ, лечившихся в стацио-
Пермский медицинский журнал
2011 том XXVIII № 1
наре областного противотуберкулезного диспансера. В Кировском НИИ гематологии и переливания крови проведено комплексное исследование клеточного иммунитета по 11 показателям. Изучали содержание в периферической крови общего числа лейкоцитов, лимфоцитов, Т- и В-лимфоци-тов, субпопуляций Т-лимфоцитов (СD+-и CD+-лимфоцитов), CD9+-лимфоцитов, иммунодифференцировочный индекс (ИдИ), фагоцитарную активность нейтро-филов (ФАН), фагоцитарный индекс (ФИ), уровень циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК).
Количество Т-лимфоцитов в периферической крови подсчитывали в реакции спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК), содержание В-лимфоци-тов определяли по методу «комплементарного» розеткообразования (ЕАС-РОК). Метод розеткообразования позволяет дать количественную характеристику Т- и В-лимфо-цитов. Содержание в крови субпопуляций Т-лимфоцитов (СD+- и CD+-лимфоцитов) определяли методом непрямой иммуно-флюоресценции на люминесцентном микроскопе МЛ-2 с применением отечественных моноклональных мышиных антител ИКО-86 и ИКО-31. Результаты оценивали в абсолют-
ных показателях. Рассчитывали ИдИ — отношение CD+-лимфоцитов к СD+-лимфо-цитам.
При определении ФАН использовали в качестве фагоцитируемого объекта инертные частицы латекса размером 0,8 микрон, подсчитывая при этом процент фагоцитирующих нейтрофилов (нейтрофилы с фагоцитированным материалом) и фагоцитарный индекс (среднее количество частиц латекса, поглощенных одним нейтрофилом). Концентрацию ЦИК в сыворотке крови больных определяли методом преципитации. Количество ЦИК в единицах оптической плотности (ед. опт. пл.) регистрировали по изменению плотности раствора на спектрофотометре.
Количество CD9íi-лимфоцитов определялось лимфоцитотоксическим тестом (метод Р. Terasaki) у 22 больных в динамике.
Результаты и их обсуждение
Полученные результаты исследования иммунного статуса в интенсивную фазу химиотерапии больных инфильтративным туберкулезом легких с первичной лекарственной устойчивостью МБТ представлены в таблице 1.
№ п/п Показатель Состояние иммунитета
Здоровые До лечения (П=35) Через 2 месяца (П=24) Через 6 месяцев (П=12)
1 Т-хелперы (х109/л) 0,7 0,4* 0,5* 0,4*
2 Т-супрессоры (CD8) (*109/л) 0,45-0,60 0,25* 0,30* 0,24*
3 ФАН (%) 75,0±1,6 64,0±1,8 * 60,5±2,8 * 58,7±3,2*
Примечание. * — статистически достоверная разница при сравнении показателей больных со здоровыми.
Таблица 1
Cостояние клеточного иммунитета в интенсивную фазу химиотерапии у больных инфильтративным туберкулезом легких с первичной лекарственной устойчивостью МБТ
Из таблицы видно, что в интенсивную фазу химиотерапии у обследованных больных по сравнению со здоровыми определяется достоверное уменьшение количества СБ+- и СБ+-лимфоцитов (р<0,001) и ФАН (р<0,001). Достоверное уменьшение СБ+-и СБ+-лимфоцитов характеризует наличие вторичного иммунодефицита в интенсивную фазу химиотерапии больных инфильтратив-ным туберкулезом с первичной лекарственной устойчивостью МБТ [3, 4].
У больных инфильтративным туберкулезом до начала лечения иммунодефицит определяется в 35,3% случаев. Полной нормализации иммунологических показателей на стационарном этапе лечения у эффективно пролеченных больных не достигается.
По нашему мнению, вторичный иммунодефицит обследуемых больных обусловлен ускоренным апоптозом. Чтобы подтвердить наличие ускоренного апоптоза в интенсивную фазу химиотерапии, мы исследовали количество СБ9+-лимфоцитов в динамике. В настоящее время СБ9+-лимфоциты рассматриваются как активатор апоптоза [3]. Количество СБ9+-лимфоцитов у здоровых лиц в Кировской области составляет 18,7±0,57%. Оказалось, что количество СБ9+-лимфоцитов у больных до начала интенсивной химиотерапии составило 19,5±2,56%, а через 6 месяцев увеличилось до 34,5±0,65%. Разница количества СБ9+-лим-фоцитов у больных до лечения и через 6 месяцев химиотерапии статистически достоверна (р<0,001). Эти данные подтверждают, что вторичный иммунодефицит в интенсивную фазу химиотерапии туберкулеза обусловлен ускоренным апоптозом.
Ускоренный апоптоз у обследованных больных также подтверждается результатами исследования активности перекисного окисления липидов (ПОЛ). В настоящее время
повышенная активность ПОЛ рассматривается как универсальный фактор повреждения и гибели клеток живого организма. Повышенная активность ПОЛ разрушает мембрану клетки, нарушает метаболизм и уменьшает функциональную активность клеток [1, 2]. Активность ПОЛ изучена у 26 больных в динамике методом индуцированной хемилюминесценции на хемилюминометре фирмы «Биоавтоматика» (Нижний Новгород). До лечения этот показатель составил 3,93±0,130 т^ через 2 месяца — 3,91± ±0,122 т^ через 6 месяцев — 3,71±0,257 ту Разница показателей больных по сравнению со здоровыми (2,84±0,320 ту) статистически достоверна. Таким образом, активность ПОЛ на протяжении интенсивной фазы химиотерапии достоверно увеличена по сравнению со здоровыми.
Лечение обследованных больных имму-номодуляторами (пирогенал, тактивин, ти-малин, ликопид, полиоксидоний) и антиок-сидантами (тиосульфат натрия, аскорбиновая кислота, аевит, ветерон и препараты янтарной кислоты) не приводило к нормализации показателей иммунитета и снижению активности ПОЛ. В связи с этим целесообразно наряду с применением иммуномодуля-торов и антиоксидантов выделить и узаконить в специальной литературе и практике лечения больных туберкулезом два новых понятия: апоптозпротекторы и апоптозкор-ригирующая терапия. Апоптозпротекторы и апоптозкорригирующую терапию необходимо рассматривать как самостоятельный раздел патогенетической терапии больных туберкулезом.
Выводы
1. В интенсивную фазу химиотерапии больных инфильтративным туберкулезом легких с первичной лекарственной устойчи-
Пермский медицинский журнал
2011 том XXVIII № 1
востью МБТ достоверно уменьшаются СД+-, СД+-лимфоциты и фагоцитарная активность нейтрофилов.
2. Увеличение количества CD^-лим-фоцитов и повышение активности пере-кисного окисления липидов в динамике убеждает, что в интенсивную фазу химиотерапии туберкулеза ускоряется апоптоз. ускоренный апоптоз вызывает вторичный иммунодефицит.
3. Назначение иммуномодуляторов и ан-тиоксидантов в интенсивную фазу химиотерапии не улучшает состояние иммунитета и активности перекисного окисления ли-пидов.
4. Целесообразно наряду с применением иммуномодуляторов и антиоксидантов выделить и узаконить в специальной литературе и практике лечения больных туберкулезом два новых понятия: апоптозпротекторы и апоптозкорригирующая терапия.
5. Апоптозпротекторы и апоптозкор-ригирующую терапию следует рассматривать как самостоятельный и обязательный раздел патогенетической терапии туберкулеза.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1. Владимиров Ю. А. Физико-химические основы патологии клетки//Курс лекций в электронной версии.— e-mail: yuvlad@mail. ru.
2. Есимова И. Е. Состояние липидной фазы мембраны мононуклеарных клеток крови при туберкулезе легких: автореф. дис. ... канд. мед. наук/И. Е. Есимова.— Томск,
2007.— 42 с.
3. Земсков А. М. Клиническая иммунология: учебник для вузов/А. М. Земсков, В. М. Земсков, А В. Караулов.— М.: ГЭОТАР-Медиа,
2008.— 432 с.
4. Коковихина И. А. Основные показатели клеточного иммунитета у впервые выявленных больных лекарственно-устойчивым туберкулезом легких/И. А. Коковихи-на//Тезисы докладов Всероссийской конференции студентов и молодых ученых, посвященной Всемирному дню борьбы с туберкулезом, «Актуальные вопросы фтизиатрии, пульмонологии и торакальной хирургии».— М., 2006.— С. 54—55.
5. Первичная лекарственная устойчивость микобактерий туберкулеза у больных с впервые выявленным деструктивным туберкулезом легких/И. П. Зиновьев, Н. А Эсаулова, В. Г. Новиков, И. А Коковихи-на//Проблемы туберкулеза и болезней легких.— 2009.— № 4.— С. 37—39.
I. P. Zinoviev, I. A. Kokovikhina, V. G. Novikov
immunity state at intensive stage
of chemotherapy in infiltrative
pulmonary tuberculosis patients with primary drug resistance of tuberculous mycobacteria
Investigation of cellular immunity by 11 indices was performed in 35 infiltrative pulmonary tuberculosis patients with primary drug resistance of tuberculous mycobacteria before treatment with antituberculous preparations, in 24 patients 2 months after treatment and in 12 patients 6 month after intensive chemotherapy. Among the patients examined at the intensive stage of chemotherapy, a reliable reduction of phagocytic neutrophile activity and CD+- and CD+-lym-phocyte number was detected. Reduction of CD+- and CD+-lymphocyte number is considered to be an established sign of secondary immunodeficiency. The developing
47
secondary immunodeficiency is explained by accelerated apoptosis. Reliable elevation of CD9+-lymphocyte number by the 6th month of treatment that confirms accelerated apoptosis was stated. The authors recommend to single out and legalize in special literature and medical practice the following two concepts: apoptosis-protectors and apoptosis-correcting therapy. Apoptosis-pro-tectors and apoptosis-correcting therapy should be considered as an independent and obligatory part of pathogenetic therapy in tuberculosis.
Keywords: infiltrative tuberculosis, intensive chemotherapy, primary drug resistance of tuberculous mycobacteria, secondary immunodeficiency.
Контактная информация: Зиновьев Илларион Павлович, доктор мед. наук, профессор кафедры фтизиопульмонологии Кировской государственной медицинской академии, 610000, г. Киров, ул. К. Маркса, 3, тел. 8 (8332) 27-09-00
Материал поступил в редакцию 25.06.2010
