CC BY
29
HayKOBHH BicHHK .HbBiBCbKoro Ha^0Ha№H0ro ymBepcurery BeTepHHapHOi MegnuUHH Ta 6i0TexH0H0riH iMeHi C.3. f^H^Koro Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies named after S.Z. Gzhytskyj
doi: 10.15421/nvlvet7132
ISSN 2413-5550 print ISSN 2518-1327 online
http://nvlvet.com.ua/
УДК 619:616.34
Чутлив^ть збудника кишкового ieрсинiозу до дезшфектанпв
Г.В. Козловська annakozlovska@i.ua
Нацюнальний унгверситет 6iopecypcie i природокористування Украгни, вул. Герогв Оборони, 15, м. Кигв, 03041, Укра'та
В cmammi викладено результати до^дження тактивуючоi dii сучасних дезтф^ючих 3acü6ie на збудника кишкового ieрcинiозу Yersinia enterocolitica. Визначено чутливicть лабораторного та польового штaмiв Y. enterocolitica до препaрaтiв «Вiроcaн» та «Бюконтакт». Препарати призначет для проведення профтактичног дезтфекцп тваринницьких примщень та об'eктiв, яю тдлягають ветеринарному нагляду, пунктiв штучного оаментня, заправки дезбaр'eрiв, а також для дезтфекцп транторту, обробки ткубацтних яець. В результaтi трьохкратно проведених доcлiдiв в aнaлогiчних умовах втановлено, що препарати «Вiроcaн» та «Бюконтакт» являются ефективними дезтфектантами в рaзi контамтацй збудником Yersinia enterocoliticaрiзних об'eктiв (бетону, цегли, дерева, кахельног плитки, металу). Вcтaновлено ефективш концентрацй згаданих дезiнфектaнтiв та визначено ектозицй, за яких штами Y. enterocolitica повтжю тактивуются. В^ановлено, що препарат «Вiроcaн» за концентрацй 0,1% виявляе бактерицидну дiю за 30 хв, за концентрацй 0,2-0,5% -за 15 хвилин. Також втановлено, що дезтф^ючт заЫб «Бюконтакт» забезпечуе повне знищення Y. enterocolitica на вах тет-об^ктах за концентрацй 0,01% протягом 30 хвилин, за концентрацй 0,1 - 0,5% - бактерицидна дiя проявляется протягом 15 хв. Рiзницi aнтибaктерiaльноi дп препaрaтiв на лабораторний та польовий штами збудника не тоетерка-лоп.
Knmnoei слова: збудник кишкового iерcинiозу, Y. enterocolitica, iерcинiоз, дезтфектанти, aнтибaктерiaльнa дiя, лабораторний штам, польовий штам, caпронознa тфекщя, велика рогата худоба, cвинi.
Чувствительность возбудителя кишечного иерсиниоза к дезинфектантам
В статье изложены результаты исследования инактивирующих действия современных дезинфицирующих средств на возбудителя кишечного иерсиниоза Yersinia enterocolitica. Определены чувствительность лабораторного и полевого штаммов Y. enterocolitica к препаратам «Виросан» и «Биоконтакт». Препараты предназначены для проведения профилактической дезинфекции животноводческих помещений и объектов, подлежащих ветеринарному надзору, пунктов искусственного осеменения, заправки дезбарьеров, а также для дезинфекции транспорта, обработки инкубационных яиц. В результате трехкратного проведенных опытов в аналогичных условиях установлено, что препараты «Виросан» и «Биоконтакт» являются эффективными дезинфектантами в случае контаминации возбудителем Yersinia enterocolitica различных объектов (бетона, кирпича, дерева, кафельной плитки, металла). Установлено эффективные концентрации упомянутых дезинфектантов и определены экспозиции, при которыхх штаммы Y. enterocolitica полностью инактивируются. Установлено, что препарат «Виросан» при концентрации 0,1% оказывает бактерицидное действие за 30 мин, при концентрации 0,2-0,5% - за 15 минут. Также установлено, что «Биоконтакт» обеспечивает полное уничтожение Y. enterocolitica на всех тест-объектах при концентрации 0,01% в течение 30 минут, при концентрации 0,1 - 0,5% - бактерицидное действие проявляется в течение 15 мин. Разницы антибактериального действия препаратов на лабораторный и полевой штаммы возбудителя не наблюдалось.
Citation:
Kozlovska, G.V. (2016). Sensitivity of intestinal yersiniosis to disinfectants. Scientific Messenger LNUVMBT named after S.Z. Gzhytskyj, 18, 3(71), 144-147.
Г.В. Козловская annakozlovska@i.ua
Национальный универ^тет биореcурcов и природопользования Украины, ул. Героев Обороны, 15, г. Киев, 03041, Украина
Ключевые слова: возбудитель кишечного иерсиниоза, Y. enterocolitica, иерсиниоз, дезинфектанты, антибактериальное действие, лабораторный штамм, полевой штамм, сапронозна инфекция, крупный рогатый скот, свиньи.
Sensitivity of intestinal yersiniosis to disinfectants
G.V. Kozlovska annakozlovska@i.ua
National university of life and environmental sciences of Ukraine, Heroyiv Oborony Str., 11, Kyiv, 03041, Ukraine
The article presents the results of a study of the inactivating action of modern disinfectants pathogen intestinal yersiniosis. Determine the sensitivity of the laboratory and field strains of Yersinia enterocolitica to drugs «Virosan» and «Biokontakt». Preparations intended for preventive disinfection of livestock buildings and facilities subject to veterinary supervision, items of artificial insemination, filling dezbarerov, as well as for disinfection of transport, processing of hatching eggs. As a result, three-time experiments conducted in similar conditions found that the drugs «Virosan» and «Biokontakt» are effective disinfectants in the case of pathogen Yersinia enterocolitica contamination of various objects (concrete, brick, wood and tile, metal). The studies found effective concentrations mentioned disinfectants and the exposure determined under what strains of Y. enterocolitica is completely inactivated. It was established that the preparation «Virosan» at a concentration of 0.1% has a bactericidal effect at 30 minutes, at a concentration of 0.2-0.5% - within 15 minutes. It is also found that the disinfectant «Biokontakt» ensures complete killing Y. enterocolitica in all test sites at a concentration of 0.01% within 30 minutes, at a concentration of 0.1 - 0.5% - bactericidal effects is apparent within 15 min. Differences in their antibacterial action on laboratory and field strains of the pathogen were observed.
Key words: intestinal yersiniosis pathogen, Y. enterocolitica, yersiniosis, disinfectants, anti-bacterial action, laboratory strain, strain field, sapronoticdisease, cattle, pigs.
Вступ
Те, що не лише джерелом, а й резервуаром збуд-ника кишкового iерсинюзу можуть бути рiзноманiтнi фактори довкшля стало аргументом для визнання хвороби сапронозною шфекщею (Jushhuk et а1., 2003). Остання може проявлятись у виглядi типового шфек-цшного захворювання та як харчова токсикошфекщя (ЪепЛепЪ, 2000).
Рiзнi види тваринницько! продукцп, зокрема м'ясш i молочш,можуть бути як факторами передачi iерсинюзно! шфекци (токсикошфекци) так i джерела-ми збудника.Також ними можуть бути рослини тап-родукти рослинного походження, найчаспше овочi та фрукти ^икшЫта et а1., 1997; Vozianova, 2000; Lenchenko, 2000; Jushhuk et а1., 2003).
За даними ВООЗ кишковий iерсинюз мае глобаль-не розповсюдження, зареестрований на територп практично уах кра!н свиу.Хвороба частше дiагнос-туеться в репонах з прохолодним кнматом (Швещя, Дашя, Литва, Латвiя, Росшська Федеращя). У кра!нах швшчно! пiвкулi - Нщерландах, Бельгп, Дани, Норве-гп, Фшлянди, Канадi - за рiвнем захворюваностi iер-синюз займае трете мiсце серед гострих кишкових захворювань людини, поступаючись лише сальмоне-льозу та кампiлобактерiозу (Ushka1ov, 2013).
За даними ВООЗ у крашах £С кожного року ре-еструють випадки кишкового iерсинiозу. Так, у 2011 р. було зареестровано 7017 тдтверджених випадк1в кишкового iерсинiозу, що на 3,5% бiльше, шж у 2010. Хоча спостерiгаеться статистично пщтверджена п'ятирiчна тенденцiя до зниження захворюваностi (Ushka1ov, 2013).
За даними саштарно-ешдемюлопчно! служби Укра!ни у перюд 2006 - 2010 рр. було зареестровано 524 випадки кишкового iерсинiозу у людей. Хворобу дiагностовано в уахобластях, за виключенням Жито-мирсько!. Бiльше всього хворих виявлено на територи
Харшвсько! та Донецько! областей. Частше всього кишковий ieрсинiоз дiагностували у дiтей.
Проблема ieрсинiозiв актуальна i для ветеринарно! медицини. Захворюють переважно свинi i велика рогата худоба. Результати дослщжень авторiвцiе! статп сввдчать про наявнiсть випадк1в контамшацп м'ясно! сировини збудником кишкового ieрсинiозу i в Украíнi. При дослщженш продуктiв забою велико! рогато! худоби Y. enterocolitica була iзольована у 5,8% дослщжених зразк1в, у продуктах забою свиней - у 6,4% зразшв (Skybic'kyj et al., 2013; Kozlovs'ka et al., 2015).
Виразна олiготрофнiсть та термотолерантнiсть Yersinia enterocolitica, наявнють ефективних факторiв патогенностi забезпечують !й можливiсть iснувати як в умовах довкшля так i в органiзмi теплокровних, що обумовлюе високу адаптацiйну l! характеристику та визначае ряд важливих епiдемiологiчних (епiзоотоло-пчних) аспектiв без врахування яких неможливо на-лагодити належний контроль за цим патогеном (Jush-huk et al., 2003; Smirnov, 2004). Розробка засобiв спе-цифiчно! профiлактики кишкового iерсинiозу навряд чи виявиться ефективним i рацiональним елементом в системi профiлактики захворювання. Бiльш перспек-тивним може бути ретельний контроль за циркуляць ею збудника в природi та превентивна дiя на нього рiзноманiтних засобiв, зокрема дезiнфектантiв.
Метою роботи було дослвдження бактерицидно! дп дезiнфектантiв «Вiросан» та «Бiоконтакт», яш широко використовуються у ветеринарнiй медициш та харчовiй промисловостi, на Yersinia enterocolitica.
MaTepia™ та методи дослщжень
Препарат «Вiросан» (виробництво «Бiо-Тест-Лабораторiя», м Ки!в) - комплексний дезшфшуючий (та миючий) засiб, мiстить дiючi речовини: алк1лди-метилбензиламонiю хлорид 25,5 г, глютаровий альде-
пд 11 г, допом1жш речовини - 1зопропш, скипидар, HeioHHi ПАР, воду - до 100 мл.Зпдно шструкцп виро-бника застосовують препарат для миття i дезшфекцп тваринницьких примiщeнь, iнкубатoрiв, пунктiв штучного оаменшня, транспортних засoбiв, поверхонь, об'ектш i обладнання, що шдлягають ветеринарному нагляду. Для прoфiлактичнoï дезшфекцп використо-вують 0,1 - 0,25% розчин (експозищя 15 - 30 хв.), для вимушено1 - 0,5% розчин (експозищя 60 хв.).
Препарат «Бюконтакт» (виробництва ПП «Кронос Агро», Украша) мiстить у своему склащ глioксаль, глутаровий альдегид, ЧАС, пол^ексаметшенгуанвдин, туманоутворюючий компонент.
Препарат призначений для проведення профшак-тично1 волого1 та аерозольно1 дeзiнфeкцiï тваринницьких примщень та об'екпв, як1 щдлягають ветеринарному нагляду, заправки дeзбар'ерiв, а також для дезшфекцп транспорту, обробки шкубацшних яець. Для прoфiлактичнoï дезшфекцп використовують 0,2 -0,3% водний розчин препарату, для вимушeнoï - 0,5% розчин. Для аерозольно1' дезшфекцп використовують 10% розчин. Для обробки шкубацшних яець застосовують 0,2% розчин препарату дрiбнo-крапeльним спреем, або ж методом занурення в робочий розчин на 1 - 3 хвилини.
Щодо дп цих двох препарапв на Y. enterocolitica даш ввдсутш.
Штами Y. enterocolitica: 1. штам лабораторний 20/15-09, серотип О:3, отриманий з Нащонального центру штамiв мiкрooрганiзмiв (ДНК1БШМ, м. Кшв); 2. польовий штам, серотип О:3, видiлeний з м'ясно1' сировини в лабораторп кафедри мiкрoбioлoгiï, вiрусo-логп та бioтeхнoлoгiï НУБiП Украши.
Штам Yersinia enterocolitica вирощували на сере-дoвищi СБТС протягом 48 годин за температури 28±0,2 °С. Мшробну масу змивали стерильним 0,85% розчином NaCl та готували суспeнзiю бактерш конце-нтрацiею 2 млрд. м.т./см3. Пoтiм змiшували ïï зi сте-рильними фeкалiями свинi (у сшвввдношенш 1:2) та наносили на тест-об'екти, рiвнoмiрнo рoзпoдiляючи 1'х по поверхш.
У якoстi тeст-oб'ектiв використовували цеглу (з червоно1' глини), кахельну плитку, дерево не обробле-не та дерево, пофарбоване oлiйнoю фарбою, нержавь
Результати визначення бактерицидно'1 ди
ючу сталь. Тест-об'екти, рoзмiрoм 10 х 10 см (S = 100 см2), перед використанням стeрилiзували в авток-лавi за температури 1210С протягом 60 хв. Контамшо-ваш Yersinia enterocolitica тест-об'екти залишали при шмнатнш тeмпeратурi в горизонтальному положенш до повного висихання пoтiм помщали в eмальoванi кювети (горизонтально та вертикально) i за допомо-гою пульверизатора наносили дезрозчин, iз розрахун-ку 5 см3 на 100 см2 плoщi пoвeрхнi (Jakubchak et al., 2010; Kovalenko and Nedosjekov, 2011;). На контроль-нi зразки замiсть дезрозчину наносили стерильний розчин - 0,85% NaCl на водопроввднш вoдi. Через 15 та 30 хв за допомогою стерильного ватного тампона, просоченого стерильним фiзрoзчинoм, вiдбирали змиви та здшснювали пoсiв на щiльнe живильне сере-довище СБТС. 1нкубували за температури 28 ± 02 °С. Результат враховували через 48 годин та через 7 дiб пiсля поаву. За наявнoстi росту готували мазки, фар-бували за методом Грама, мшроскопували, в окремих випадках ставили РА з дiагнoстичнoю аглютинуючою сироваткою.
Результати та ïx обговорення
В результата трьохкратно проведених дoслiдiв в аналопчних умовах встановлено, що препарати «Bi-росан» та «Бioкoнтакт» являються ефективними дез-iнфeктантами в разi контамшацп Yersinia enterocolitica рiзних oб'ектiв (бетону, цегли, дере-ва,кахельно1' плитки, металу).
Результати дoслiджeнь прeдставлeнi у табл. 1 та 2. Представлеш у таблищ 1 данi свiдчать про те, що препарат <Жросан» за концентрацй 0,01% та експо-зици 15 хв. не виявив бактерицидно!' ди на Y. enterocolitica, сoрбoванoï на усiх дoслiджeних тест-об'ектах. За експозицп 30 хв бактерп були знищeнi лише на кахлi та нeржавiючiй сталi. 0,1% розчин препарату виявив бактерицидну дш за 15 хв на зразках з кахлю, пофарбованому дeрeвi та нержавшчш сталi, за 30 хв - на уах використаних тест-об'ектах. За концентрацй 0,2 - 0,5% дезшфектант знищував Y. enterocolitica протягом 15 хвилин у вах випадках.
Таблиця 1.
Концентрацш препарату, % Тривалють дп дезш-фектанту, хв. Тест - об'ект
бетон цегла кахель дерево дерево, пофарбоване олшною фарбою сталь нержа-вшча
1 2 3 4 5 6 7 8
0,01 15 - - - - - -
30 - - + - - +
0,1 15 - - + - + +
30 + + + + + +
0,2 15 + + + + + +
30 + + + + + +
0,3 15 + - + - + +
30 + + + + + +
0,5 15 + + + + + +
30 + + + + + +
Примтка: «+» - позитивный бактерицидний ефект; «-» - бактерицидна д1я не проявлялась
Таблиця 2
Результати визначення бактерицидно'1 дц препарату «Бюконтакт» на Yersinia enterocolitica, n=3
Назва штаму Концентрацiя препарату «Бю-контакт» Тривалють ди дезшфектанту, хв Тест-об'ект
бетон цегла кахель дерево дерево пофар-боване сталь нержа-вшча
штам Y. enterocolitica 20/1509, серотип О:3 0,01 15 - - + - + +
60 + + + + + +
0,1 15 + + + + + +
60 + + + + + +
0,5 15 + + + + + +
60 + + + + + +
польовий штамY. enterocolitica, серотип О:3 0,01 15 + + + + + +
60 + + + + + +
0,1 15 + + + + + +
60 + + + + + +
0,5 15 + + + + + +
60 + + + + + +
Примтка: «+» - позитивний бактерицидний ефект «-» - бактерицидна д1я не проявлялась.
Як сввдчать представлеш у таблиц 2 даш, дезш-фектант «Бюконтакт» бактерицидно д1яв на Y. enterocolitica навиъ за концентрацп препарату0,01% -повне знищення бактерш протягом 15 хв. зафжсовано на поверхш кахлю, нержавшчо! стал1 та на пофарбо-ваному олшною фарбою дерева За цей час залиша-лись живими мжрооргашзми на поверхш бетону, цегли та дерева (непофарбованого). Проте за ди препарату у цш же концентрацп протягом 60 хв. Y. enterocolitica була знищена на вах тест-об'ектах.
Щодо бактерицидно! ди препарату за його концентрацп 0,1 - 0,5% - вона проявилась на вах тест-об'ектах протягом 15 хв. Таким чином, Y. enterocolitica чутлива до препарату «Бюконтакт» навггь за концентрацп нижчш, шж рекомендовано його виробником для дезшфекци тваринницьких примщень та шших об'екттв ветеринарного контролю.
Висновки
1. Yersiniaenterocolitica являеться чутливою до препа-рапв «В1росан» та «Бюконтакт».
2. Препарати «Шросан» та «Бюконтакт» можуть бути використаш, кр1м випадшв зазначених в шструкщях виробник1в, для дезшфекци р1зних об'екпв (тваринницьких примщеньднкубатор1в, пункттв штучного оаменшня, транспортних засоб1в, обладнання тощо) в раз1 виявлення (чи шдозри) контамшаци !х збудником 1ерсин1озу.
Перспективи подальших дослщжень. З метою роз-робки системи надшного контролю за збудником кишкового 1ерсинюзу буде продовжено еколого-бюлопчне дослщження збудника, пошук ефективних засоб1в i метод1в впливу на нього, зокрема селекщя м1кроб1в-антагон1ст1в - представнишв нормально! мiкрофлори тваринного органiзму та ш
EiS^iorpa^inm iIOCII. lamm
Vozianova, Zh.I.(2000). Zabolevanija, vyzyvaemye iersinijami. Infekcionnye i parazitarnye bolezni. Kiev: Zdorov'ja, 1, 458-497 (in Ukrainian).
Kozlovs'ka, G.V., Skybic'kyj, V.G., Solonin, P.K.ta in. (2015). Vydilennja Yersiniaenterocoliticaz produktiv zaboju velykoi' rogatoi' hudoby. Visnyk Zhyto-myrs'kogo nacional'nogo agroekologichnogo univer-sytetu. Zhytomyr. 1(49), 3,74-79 (in Ukrainian).
Kovalenko, V.L., Nedosjekov, V.V. (2011). Koncepcija rozrobky ta vykorystannja kompleksnyh dezinfektantiv dlja veterynarnoi' medycyny: Monografija. Kyi'v, 2011. 146 (in Ukrainian).
Lenchenko, E.M. (2000). Biologija i jekologija iersinij -vozbuditelej pishhevyh toksikoinfekcij. Avtoreferat dis.dokt. vet. Nauk. Moskva. 244.
Skybic'kyj, V.G., Kozlovs'ka, G.V., Spyrydonov, V.G. ta in. (2013). Zbudnyk kyshkovogo ijersyniozu u produktah zaboju svynej. Veterynarna medycyna Ukrai'ny. 11(213), 19-21 (in Ukrainian).
Smirnov, I.V. (2004). Vozbuditel' iersinioza i blizkie k nemu mikroorganizmy. Klin.mikrobiol. i antimikrob. himioterapija. 6, 1, 10-21 (in Ukrainian).
Ushkalov, A.V. (2013). Epizootychna ta epidemiologichna harakterystyka ijersynioziv. Veterynarna medycyna Ukrai'ny. 11(213), 15-18 (in Ukrainian).
Jushhuk, N.D., Ceneva, G.Ja., Karetkina, G.N., Brodov, L.E. (2003). Iersiniozy. M.: Medicina. 208.
Jakubchak, O.M. Homenko, V.I., Midyk, S.V. ta in. (2010). Veterynarna dezinfekcija. Instrukcija ta metodychni rekomendacii'. K.: Bioprom. 152 (in Ukrainian).
Fukushima, I., Hoshina, K., Gomyoda, M. (1997). Introduction into Japan of pathogenic yersinia through imported pork, beef and fowl. Int. J. food microbiol. 3, 53, 205-212.
Cmammn nadiümna do peda^ii 20.09.2016
