CC BY
112
КЛИНИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА. 2017; 62(8) DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-63-8-502-506
МИКРОБИОЛОГИЯ
ic pathogen, but may also cause skin abscesses in humans after exposure to saliva. Int. J. Infect. Dis. 2010; 14: 838—41.
14. somayaji R., priyantha M.A., Rubin J.E., church D. Human infections due to Staphylococcus pseudintermedius, an emerging zoonosis of canine origin: report of 24 cases. Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 2016; 85(4): 471—6.
15. Guardabassi L., Loeber M.E., Jacobson a. Transmission of multiple antimicrobial-resistant Staphylococcus intermedius between dogs affected by deep pyoderma and their owners. Veterinary Microbiology. 2004; 98: 23—7.
16. Khambarty Em., Bennett R.W., shah D.B. Application of pulsed-gel electrophoresis to the epidemiological characterization of Staphylococcus intermedius implicated in a food-related outbreak. Epidemiol. Infect. 1994; 113: 75—81.
17. Martins p.D., de Almeida T.T., basso A.p., de Moura T.M., Frazzon J., Tondo E.c. et al. coagulase-positive staphylococci isolated from chicken meat: pathogenic potential and vancomycin resistance. Foodborne Pat-hog. Dis. 2013; 10: 771—6.
18. Al-Tarazi Y.H., Albetar M.A., Alaboudi A.R. Biotyping and enterotoxige-nicity of staphylococci isolated from fresh and frozen meat marketed in Jordan. Food Research International. 2009; 42: 374—9.
19. vorob'eva o.N., Denisenko L.I., Zhilina N.M. The etiology of septic processes in burn patients. Byulleten' SO RAMN. 2010; 30(6): 57—63. (in Russian)
20. Akopova I.s., Kolenchukova o.A. science of man: some features of nosocomial microorganism strains of the Staphylococcus genus [Nauki o cheloveke: Nekotorye osobennosti vnutribol'nichnykh shtammov micro-organizmov roda Staphylococcus]. Tomsk: sGMu; 2002. (in Russian)
21. Gordina E.M., Gorovits E.s., pospelova s.v., Afanasevskaya E.v. species spectrum and biological properties of staphylococci isolated from birds in a large poultry farm. Meditsinskiy almanakh. 2014; 2(32): 84—7 (in Russian)
22. ben Zakour N.L., Beatson s.A., van den Broek A.H., Thoday K.L., Fitzgerald J.R. comparative genomic study of the Staphylococcus inter-medius group of animal pathogens. Frontiers in Cellular and Infection Microbiology. 2012; 2: 1—15.
23. perreten v., Kadlec K., schwarz s., Gronlund Andersson U., Finn M.,
Greko C. et al. Clonal spread of methicillin-resistant Staphylococcus pseudintermedius in Europe and North America: an international multi-centre study. J. Antimicrob. Chemother. 2010; 65(5): 1145—54.
24. Performance standards for Antimicrobial Disk and Dilution susceptibility Tests for bacteria Isolated From Animals; Approved standard - Third Edition. CLsi document M31-A3. 2010; 28(8).
25. sasaki T., Tsubakishita s., Tanaka Y., sakusabe A., Ohtsuka M., Hirotaki s. Multiplex-PCR method for species identification of coagulase-positive staphylococcoci. J. Clin. Microbiol. 2010; 48(3): 765—9.
26. Blaiotta G., Fusco V., Ercolini D., Pepe O., Coppola s. Diversity of Staphylococcus species strains based on partial kat (catalase) gene sequences and design of a PCR-restriction fragment length polymorphism assay for identification and differentiation of coagulase-positive species (S. aureus, S. delphini, S. hyicus, S. intermedius, S. pseudintermedius, and S. schleiferi subsp. coagulans). J. Clin. Microbiol. 2010; 48(1): 192—201.
27. Dmitrenko O.A., shaginyan I.A., Gintsburg A.L. study of mec DNA polymorphism in methicillin-resistant Staphylococcus aureus strains isolated in hospitals of different Russian regions. Moleculyarnaya Genetika, Mikrobi-ologiya, i Virusologiya. 2005; 3: 11—7. (in Russian)
28. Woo P.C., Teng J.L., Wu J.K., Leung F.P., Tse H., Fung A.M. et al. Guidelines for interpretation of 16s rRNA gene sequence-based results for identification of medically important aerobic Gram-positive bacteria. J. Med. Microbiol. 2009; 58(8): 1030—6.
29. Yugueros J., Temprano A., Berzal в., sanchez M., Hernanz C., Luengo J.M. et al. Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase-encoding gene as a useful taxonomic tool for Staphylococcus spp. J. Clin. Microbiol. 2000; 38(12): 4351—5.
30. Murugaiyan J., Walther B., stamm i., Abou-Elnaga Y., Brueggemann-schwarze s., vincze s. et al. species differentiation within the Staphy-lococcus intermedius group using a refined MALDI-ToF Ms database. Clin. Microbiol. Infect. 2014; 20(10): 1007—15.
Поступила 28.03.17 Принята к печати 03.04.17
© КОЛЛЕКТИв АвТОРОв, 2017 УДК 615.33:579.871.1].015.8
Харсеева Г.Г.1, Боронина Н.А.1, Гасретова Т.Д.1, Тюкавкина С.Ю.1, Сылка О.И. 1, Миронов А.Ю.2
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ К АНТИБИОТИКАМ ШТАММОВ CORYNEBACTERIUM NON DIPHTHERIAE, ВЫДЕЛЕННЫХ В СТАЦИОНАРАХ РОСТОВА-НА-ДОНУ И РОСТОВСКОЙ ОБЛАСТИ
1 ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет», 344022, Ростов-на-Дону;
2 ФБУН Московский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора, 125212, Москва
Цель работы — изучение чувствительности к антибактериальным препаратам различных видов Corynebacterium non diphtheriae. Штаммы C. non diphtheriae выделены от больных с патологией респираторного и урогенитального тракта, а также люлей, проходивших профилактическое обследование. Чувствительность к антибактериальным препаратам определяли методом серийных разведений в жидкой питательной среде на основании значений минимальной подавляющей концентрации (мг/л). Установлено, что наиболее эффективными антибактериальными препаратами в отношении штаммов C. non diphtheriae, в целом оказались ванкомицин, цефазолин и цефотаксим, а отдельных видов — C. pseudo-diphtheriticum — цефазолин, цефотаксим, гентамицин; C. pseudotuberculosis — ванкомицин, цефазолин, цефотаксим, гентамицин; C. xerosis — цефотаксим; C. striatum — цефазолин и рифампицин. Наименьшую эффективность проявили для штаммов C. non diphtheriae, в целом бензилпенициллин и линкомицин, а отдельных видов - C. pseudodiphtheriticum и C. pseudotuberculosis — линкомицин и эритромицин; C. xerosis и C. striatum — бензилпенициллин, линкомицин и эритромицин. В качестве препаратов выбора в отношении различных видов C. non diphtheriae можно рекомендовать цефалоспорины (цефотаксим и цефазолин), резервных препаратов — гентамицин и ванкомицин.
Ключевые слова: Corynebacterium non diphtheriae; антибиотикочувствительность; количество чувствительных и резистентных штаммов.
Для цитирования: Харсеева Г.Г., ВоронинаН.А., Гасретова Т.Д., Тюкавкина С.Ю., Сылка О.И., Миронов А.Ю. Чувствительность к антибиотикам штаммов Corynebacterium non diphtheriae, выделенных в стационарах Ростова-на-Дону и Ростовской области. Клиническая лабораторная диагностика. 2017;62 (8): 502-506. DOI: http://dx.doi. org/10.18821/0869-2084-2017-62-8-502-506
Для корреспонденции: Харсеева Галина Георгиевна, д-р мед. наук, проф., зав.каф. микробиологии и вирусологии № 2 ГБОУ ВПО «Ростовский государственный медицинский университет»; e-mail: [email protected]
Russian clinical laboratory diagnostics. 2017; 62(8)
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-8-502-506
MICROBIOLOGY
Kharseeva G.G.1, VoroninaN.A.1, Gasretova T.D.1, TyukavkinaS.Yu.1, Sylka O.I.1, MironovA.Yu.2
THE SENSITIVITY TO ANTIBIOTICS OF CORYNEBACTERIUM NON DIPHTHERIAE ISOLATED IN
HOSPITALS OF ROSTOV-ON-DON AND THE ROSTOVSKAIA OBLAST
1The Rostovskii state medical university, 344022 Rostov-on-Don, Russia
2The G.N. gabrichevskii Moscow research institute of epidemiology and microbiology of Rospotrebnadzor, 125212 Moscow, Russia
The purpo.se ofstudy is to analyze .sensitivity ofvarious species Corynebacterium non diphtheriae to antibacterial pharmaceuticals. The strains of C. non diphtheriae are separated from patients with pathology of respiratory and urogenital tract and also from individuals subjected to preventive examination. The sensitivity to antibacterial pharmaceuticals was determined using technique of serial dilution in fluid growth medium on the basis values of minimal inhibitory concentration (mg per l). It is established that the most efficient antibacterial pharmaceuticals in the case of strains C. non diphtheriae proved to be Vancomycin, Cefazolin and Cefotaxime in general. In case of such particular species as C. pseudodiphtheriticum -- Cefazolin, Cefotaxime and Gentamycin; C.pseudotuberculosis -- Vancomycin, Cefazolin, Cefotaxime and Gentamycin; C. xerosis -- Cefotaxime; C.striatum -- Cefazolin and u Rifampicin. The least efficiency was manifested for strains C. non diphtheriae by Benzylpenicillin and Lincomycin in general. In case ofsuch particular species as C. pseudodiphtheriticum and C. pseudotuberculosis -- Lincomycin andErythromycin; C. xerosis and C. striatum -- Benzylpenicillin, Lincomycin and Erythromycin. In case of various species of C. non diphtheriae Cephalosporins (Cefotaxime and Cefazolin) can be recommended as pharmaceuticals of choice and Gentamycin and Vancomycin as reserve pharmaceuticals.
Keywords: Corynebacterium non diphtheriae; antibiotic sensitivity; number of sensitive and resistant strains
For citation: Kharseeva G.G., Voronina N.A., Gasretova T.D., Tyukavkina S.Yu., Sylka O.I., Mironov A.Yu. The sensitivity to antibiotics of Corynebacterium non diphtheriae isolated in hospitals of Rostov-on-Don and the Rostovskaia oblast. Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika (Russian Clinical Laboratory Diagnostics) 2017; 62 (8): 502-506. (in Russ.). DOI: http://dx.doi. org/10.18821/0869-2084-2017-62-8-502-506
For correspondence: Kharseeva G.G., doctor of medical sciences, professor, head of the chair of microbiology and virology N»2. e-mail: [email protected]
Conflict of interests. The authors declare absence of conflict of interests. Acknowledgment. The study had no sponsor support.
Received 15.12.2016 Accepted 15.01.2017
Введение. Corynebacterium non diphtheriae {Corynebacterium pseudodiphtheriticum, Corynebacterium pseudotuberculosis, Corynebacterium xerosis, Corynebacterium riegelii, Corynebacterium striatum и др.) могут быть причиной развития воспалительных заболеваний различной локализации, особенно у пациентов с нарушениями иммунной системы, а также с мультиорганной патологией, в частности пожилых [1—3]. Ранее считалось, что C. non diphtheriae, за исключением C. ulcerans и C. pseudotuberculosis, не патогенны для человека. Однако в настоящее время C. non diphtheriae выделяют от пациентов с острыми заболеваниями верхних дыхательных путей, гнойно-септическими процессами, патологией урогенитального тракта, кожи и др. [4—7]. Формирование устойчивости многих видов коринебактерий к одному или нескольким антибактериальным препаратам способствует их распространению в популяции, в том числе и как возбудителей внутрибольничных инфекций [1, 8]. Антибиотико-устойчивость C. non diphtheriae, особенно ассоциированных с другими микроорганизмами, к двум и более антибактериальным препаратам обусловливает более тяжелое и длительное течение заболевания [8]. Актуален для борьбы с воспалительными заболеваниями, при которых выделяются C. non diphtheriae, оптимальный подбор антибактериальных препаратов на основе определения антибиотикочувствительности и резистентности коринебактерий.
Цель исследования — изучение чувствительности к антибактериальным препаратам различных видов C. non diphthe-riae.
Материал и методы. Исследованы 73 штамма C. non diphtheriae (C. pseudodiphtheriticum, C. pseudotuberculosis, C. xerosis, C. amycolatum, C. striatum, C. ulcerans), выделенные с 2009 по 2011 г. из верхних дыхательных путей {зев, нос) от больных с острым и хроническим тонзиллитом, ангинами, из урогенитального тракта {влагалище, цервикальный канал, моча), от пациентов с острым кольпитом, острым и хроническим пиелонефритом, а также от проходивших про-
филактическое обследование. Штаммы C. non diphtheriae идентифицировали бактериологическим методом в соответствии с методическими рекомендациями [9], а также секве-нированием по 16S рРНК с помощью праймеров для корине-бактерий {ЗАО «Синтол», Москва). Результаты сравнивали с базами данных геномных последовательностей {рибосомная дифференциация микроорганизмов, GenBank).
Определение чувствительности штаммов недифтерийных коринебактерий к антибактериальным препаратам {бен-зилпенициллину, цефотаксиму, цефазолину, эритромицину, гентамицину, рифампицину, линкомицину, ванкомицину) проводили методом серийных разведений {микрометодом) в жидкой питательной среде [10]. Результаты оценивали по значениям минимальной подавляющей концентрации (МПК), мг/л, при которой наблюдали полную задержку роста исследуемого микроорганизма. Для контроля метода использовали чувствительные к антибиотикам эталонные штаммы S. aureus АТСС 29213, E. coli АТСС 25922 и P. aeruginosa АТСС 27853, полученные из ГИСК им. Л.А. Тарасевича Роспотребнадзо-ра. Для характеристики степени чувствительности корине-бактерий к антибактериальным препаратам вычисляли МПК для 50 и 90% исследованных штаммов, а также определяли количество чувствительных и резистентных штаммов C. non diphtheriae [11, 12].
Статистический анализ результатов исследования проводили с помощью программы Statistica 7.0 (StatSoft Inc., США) и MedCalc (версия 9.3.5.0).
Результаты и обсуждение. При исследовании чувствительности различных видов C. non diphtheriae к антибактериальным препаратам путем определения МПК50, МПК (табл. 1) установлено, что эти показатели при исследовании C. pseudo-diphtheriticum были минимальны для ванкомицина, цефа-золина, цефотаксима и гентамицина; C. pseudotuberculosis — ванкомицина, цефазолина, цефотаксима и гентамицина; C. xerosis — цефотаксима; C. amycolatum — бензилпени-циллина; C. striatum — цефазолина. При определении чув-
КЛИНИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА. 2017; 62(8) DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-63-8-502-506
МИКРОБИОЛОГИЯ
Таблица 1
Чувствительность различных видов C. non diphtheriae к антибактериальным препаратам (МПК50, МПК90)
Антибактериальные препараты МПК, мг/л Вид C. non diphtheriae
C. pseudodiphtheriticum C. pseudotuberculosis C. xerosis C. amycolatum C. striatum
Ванкомицин
мпк50 < 0,019 < 0,019 < 0,019 > 5 2,5 < 0,019
мпк90 0,312 0,625 > 5 > 5 2,5 2,5
Линкомицин
МПК50 0,312 2,5 0,312 0,625 > 5 0,312
мпк90 > 5 > 5 > 5 0,625 > 5 > 5
Цефазолин
МПК50 < 0,019 < 0,019 < 0,019 > 5 0,157 < 0,019
МПК90 2,5 0,157 > 5 > 5 0,312 2,5
Цефотаксим
МПК50 < 0,019 < 0,019 < 0,019 > 5 2,5 < 0,019
МПК90 2,5 1,25 0,625 > 5 2,5 0,625
Бензилпенициллин
МПК50 0,039 0,039 0,312 0,157 > 5 0,157
МПК90 2,5 2,5 2,5 0,312 > 5 2,5
Гентамицин
МПК50 < 0,019 0,078 0,625 > 5 > 5 0,039
МПК90 0,078 0,625 > 5 > 5 > 5 > 5
Эритромицин
МПК50 0,312 0,078 0,078 > 5 > 5 0,157
МПК90 2,5 > 5 > 5,0 > 5 > 5 > 5
Рифампицин
МПК50 0,078 0,157 < 0,019 > 5 0,625 0,078
МПК90 2,5 > 5 >5 > 5 0,625 2,5
ствительности C. non diphtheriae к антибактериальным препаратам в целом установили, что на основании расчета показателей МПК50, МПК90 наиболее эффективными оказались ванкомицин, цефазолин и цефотаксим.
На основании полученных величин МПК все исследованные виды C. non diphtheriae разделили на чувствительные и резистентные. Для разграничения этих категорий чувствительности (или резистентности) между собой использовали пограничные концентрации МПК антибиотика, которые сравнивали с показателями NCCLS (Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам США), а также показателями EUCAST (Европейский комитет по тестированию антимикробной восприимчивости) для коринебактерий [11, 12].
Количество чувствительных к антибактериальным препаратам
При определении количества чувствительных (табл. 2) к антибактериальным препаратам коринебактерий установлено, что все исследованные штаммы C. pseudodiphtheriticum (100%) были чувствительны к ванкомицину, цефотаксиму и гентамицину, 85,7% из них — к цефазолину. Наименьшее количество штаммов C. pseudodiphtheriticum проявляло чувствительность к линкомицину (47,6%) и рифампицину (42,9%). При исследовании C. pseudotuberculosis наибольшее количество штаммов (91,7%) были чувствительны к ванко-мицину, цефазолину, цефотаксиму и гентамицину, наименьшее (33,3%) — к линкомицину и рифампицину. Количество чувствительных к указанным антибактериальным препаратам штаммов C. xerosis находилось в пределах 28—88%, при-
Таблица 2
C. non diphtheria,%
Вид Количество штаммов Антибактериальные препараты, M ± m
ванкомицин линкоми-цин цефазо-лин цефотак-сим бензилпе-нициллин гентамицин эритромицин рифампи-цин
C. pseudodiphtheriticum 21 21 10 18 21 14 21 15 9
100 47,6 ± 10,9 85,7 ± 7,6 100 66,7 ± 10,3 100 71,4 ± 9,9 42,9 ± 10,8
C. pseudotuberculosis 12 11 4 11 11 7 11 5 4
91,7 ± 8,0 33,3 ± 13,6 91,7 ± 8,0 91,7 ± 8,0 58,3 ± 14,2 91,7 ± 8,0 41,6 ± 14,2 33,3 ± 13,6
C. xerosis 25 18 14 21 22 7 15 13 12
72 ± 8,9 56 ± 9,9 84 ± 7,3 88 ± 6,5 28 ± 9 60 ± 9,8 52 ± 10 48 ± 10
C. amycolatum 5 4 4 3 4 2 4 3 3
C. striatum 8 7 3 8 6 2 6 4 5
C. ulcerans 2 2 1 2 2 1 2 2 0
C. non diphtheriae 73 63 36 63 66 33 59 42 33
86,3 ± 4 49,3 ± 5,9 86,3 ± 4 90,4 ± 3,4 45,2 ± 5,8 80,8 ± 4,6 57,5 ± 5,8 45,2 ± 5,8
RUSSIAN CLINICAL LABORATORY DIAGNOSTICS. 2017; 62(8) DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-8-502-506
MICROBIOLOGY Таблица 3
Количество резистентных к антибактериальным препаратам штаммов C. non diphtheria, %
Вид Коли- Антибактериальные препараты, M ± m
чество ванкоми- линкоми- цефазо- цефотак- бензилпе- гентамицин эритроми- рифампи-
штаммов цин цин лин сим нициллин цин цин
C. pseudodiphtheriticum 21 0 11 0 0 7 0 1 4
52,4 ± 10, 33,3 ± 10,3 4,8 ± 4,7 19,0 ± 8,6%
C. pseudotuberculosis 12 1 8 0 1 5 1 5 5
8,3 ± 8% 66,7 ± 13,6 8,3 ± 8 41,7 ± 14,2 8,3 ± 8 41,7 ± 14,2 41,7 ± 14,2
C. xerosis 25 7 11 3 3 18 10 10 9
28 ± 9 44 ± 9,9 12 ± 6,5 12 ± 6,5 72 ± 9 40 ± 9,8 40 ± 9,8 36 ± 9,6
C. amycolatum 5 1 1 2 1 3 1 2 1
C. striatum 8 1 5 0 0 6 2 3 1
C. ulcerans 2 0 1 0 0 1 0 0 0
C. non diphtheriae 73 10 37 5 5 40 14 21 20
100 13,7 ± 4 50,7 ± 5,9 6,8 ± 2,9 6,8 ± 2,9 54,8 ± 5,8 19,2 ± 4,6 28,8 ± 5,3 27,4 ± 5,2
чем наибольшее количество штаммов были чувствительны к цефотаксиму и цефазолину (88 и 84% соответственно). Наименьшее количество штаммов проявляли чувствительность к бензилпенициллину (28%). Четыре из пяти исследованных штаммов C. amycolatum оказались чувствительны к ванко-мицину, линкомицину, цефотаксиму и гентамицину. При этом только 2 штамма проявляли чувствительность к бензилпенициллину. Все 8 исследованных штаммов C. striatum оказались чувствительными к цефазолину, к ванкомицину — 7 штаммов. Наименьшее количество из 8 исследованных штаммов C. striatum проявляли чувствительность к линкоми-цину и бензилпенициллину (3 и 2 штамма соответственно). При исследовании двух штаммов C. ulcerans выяснили, что оба они оказались чувствительными к ванкомицину, цефазо-лину, цефотаксиму, гентамицину и эритромицину, в то время как к линкомицину и бензилпенициллину проявил чувствительность только один из штаммов, а к рифампицину чувствительность отсутствовала.
В результате сравнения количества чувствительных к указанным антибактериальным препаратам всех исследованных видов C. non diphtheriae установлено, что большинство штаммов (80,8—90,4%) были чувствительны к ванкомицину, цефазо-лину, цефотаксиму и гентамицину, тогда как наименьшее количество штаммов коринебактерий проявляли чувствительность к бензилпенициллину и рифампицину (45,2% штаммов).
При определении количества резистентных (табл. 3) к антибактериальным препаратам коринебактерий установлено, что среди всех исследованных штаммов C. pseudodiph-theriticum не обнаружены резистентные штаммы к ванкомицину, цефазолину, цефотаксиму и гентамицину. Количество резистентных штаммов C. pseudodiphtheriticum к эритромицину, рифампицину, бензилпенициллину и линкомицину находилось в пределах 4,8—52,4%, причем наибольшее количество штаммов были резистентны к линкомицину (52,4%), а наименьшее — к эритромицину (4,8%). При исследовании C. pseudotuberculosis резистентных штаммов к цефазолину не обнаружено, к ванкомицину, цефотаксиму и гентамици-ну их количество минимально (8,3%), а к линкомицину — максимально (66,7% штаммов). Количество резистентных ко всем указанным антибактериальным препаратам штаммов C. xerosis находилось в пределах 12—72%, причем наибольшее количество штаммов резистентны к бензилпенициллину (72%), наименьшее — к цефазолину и цефотаксиму (12%); 3 из 5 исследованных штаммов C. amycolatum были резистентны к бензилпенициллину. При этом у только у 1 штамма выявлена резистентность к ванкомицину, линкомицину, цефо-таксиму, гентамицину и рифампицину. При исследовании C. striatum ни у одного из штаммов не была обнаружена резистентность к цефазолину и цефотаксиму. Наибольшее число
штаммов (6 из 8 исследованных) проявляли резистентность к бензилпенициллину, наименьшее (1 штамм) — к ванко-мицину и рифампицину. При исследовании двух штаммов C. ulcerans к линкомицину и бензилпенициллину проявил резистентность один из них, тогда как к большинству других антибактериальных препаратов — ванкомицину, цефазолину, цефотаксиму, гентамицину, эритромицину и рифампицину — резистентных штаммов не обнаружено.
По результатам определения количества резистентных к указанным антибактериальным препаратам всех исследованных видов C. non diphtheriae установлено, что к бензилпе-нициллину и линкомицину проявляли резистентность 54,8 и 50,7% штаммов соответственно, тогда как к цефотаксиму, це-фазолину и ванкомицину количество резистентных штаммов коринебактерий (6,8, 6,8 и 13,7% штаммов соответственно) было наименьшим.
Выводы. На основании полученных данных (МПК50, МПК90, количество чувствительных и резистентных штаммов) установлено, что наиболее эффективными антибактериальными препаратами в отношении штаммов C. non diphtheriae в целом стали ванкомицин, цефазолин и цефотаксим, а отдельных видов — C. pseudodiphtheriticum — цефазолин, цефотак-сим, гентамицин; C. pseudotuberculosis — ванкомицин, цефа-золин, цефотаксим, гентамицин; C. xerosis — цефотаксим; C. striatum — цефазолин и рифампицин. Наименьшую эффективность проявили в отношении штаммов C. non diphtheriae в целом бензилпенициллин и линкомицин, а отдельных видов — C. pseudodiphtheriticum и C. pseudotuberculosis — линкомицин и эритромицин; C. xerosis и C. striatum — бензилпенициллин, линкомицин и эритромицин.
В качестве препаратов выбора в отношении различных видов C. non diphtheriae можно рекомендовать цефалоспори-ны (цефотаксим и цефазолин), резервных препаратов — ген-тамицин и ванкомицин.
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
ЛИТЕРАТУРА (пп. 2, 4—8, 11—12 см. REFERENCES) 1. Харсеева Г.Г., Воронина Н.А., Миронов А.Ю., Харисова А.Р. Антибиотикочувствительность штаммов Corynebacterium non diphtheriae, циркулирующих в городе Ростове-на-Дону и Ростовской области. Клиническая лабораторная диагностика. 2012; (10): 62—4. 3. Костюкова Н.Н. Возбудитель дифтерии и условно-патогенные корине-
бактерии. Клиническая лабораторная диагностика. 2001; (6): 25—31. 9. Методические указания МУК 4.2.3065—13. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Лабораторная диагностика дифтерийной инфекции. М.; 2013.
КЛИНИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА. 2017; 62(8) DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-63-8-506-512
МИКРОБИОЛОГИЯ
10. Методические указания МУК 4.2.1890—04. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам. М.; 2004.
REFERENCES
1. Kharseeva G.G., Voronina N.A., Mironov A.Yu., Kharisova A.R. Antibiotic susceptibility strains of Corynebacterium non diphtheriae, circulating in Rostov-on-Don and the Rostov region. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika. 2012; (10): 62—4. (in Russian)
2. Funke G., von Graevenitz A., Clarridge J.E., Bernard K.A. Clinical microbiology of coryneform bacteria. Clin. Microbiol. Rev. 1997; 10(1): 125—59.
3. Kostyukova N.N. The causative agent of diphtheria and opportunistic Corynebacterium. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika. 2001; (6): 25—31. (in Russian)
4. Kaufman D., Ott P., Rueqq C. Laryngopharyngitis by Corynebacterium ulcerans. Infection. 2002; 30(3): 168—70.
5. Knox K., Holmes A.H. Nosocomial endocarditis caused by Corynebacterium amycolatum and other nondiphtheriae Corynebacterium. Emerg. Infect. Dis. 2002; 8(1): 97—9.
6. Izurieta H.S., Strebel P.M., Youngblood T., Hollis D.G., Popovic T. Exudative pharyngitis possibly due to Corynebacterium pseudodiphtheriti-
cum, a new challenge in the differential diagnosis of diphtheria: report of a case and review. Emerg. Infect. Dis. 1997; 3(1): 65—8.
7. Ferrer I., Marne C., Revillo M.J., López A.I., Velasco J.J., García-Moya J.B. et al. Infección urinaria por Corynebacterium riegelii. Enferm. In-fecc. Microbiol. Clin. 2001; 19(6): 284—5. (in Spanish)
8. Reddy B.S., Chaudhury A., Kalawat U., Jayaprada R., Reddy G., Ramana B.V. Isolation, speciation, and antibiogram of clinically relevant non-diphtherial Corynebacteria (Diphtheroids). Indian J. Med. Microbiol. 2012; 30(1): 52—7.
9. Guidelines MUK 4.2.3065—13. Control methods. Biological and microbiological factors. Laboratory diagnosis of diphtheria infection. [Metody kontrolua. Biologicheskie i microbiologicheskie factory. Laboratornaya diagnostika difteriynoy infektsii]. Moscow; 2013. (in Russian)
10. Guidelines MUK 4.2.1890—04. Determination of the sensitivity of microorganisms to antibiotics. [Opredelenie chuvstvitel'nosti mocroorga-nizmov kantibakterial'nympraparatam]. Moscow; 2004. (in Russian)
11. NCCLS. Performanse standards for antimicrobial susceptibility testing; ninth informational supplement M100-S25. 2015; 35(3): 1—231.
12. EUCAST Definitive document. Methods for the determination of susceptibility of bacteria to antimicrobial agents. Clin. Microbiol. Infect. 1998; 4(5): 291—6.
Поступила 15.12.16 Принята к печати 15.01.17
КОЛЛЕКТИв АвТОРОв, 2017
УДК 616.314.17-002.2-085.837.3.015.2:615.831]-078-076.4
царев в.Н., Подпорин М.С., Ипполитов Е.в.
ПРИМЕНЕНИЕ СКАННИРУЮЩЕЙ ЭЛЕКТРОННОЙ МИКРОСКОПИИ И БИОРЕАКТОРА ДЛЯ ОЦЕНКИ ЭРАДИКАЦИИ МИКРОБНОЙ БИОПЛЕНКИ КОРНЕВЫХ КАНАЛОВ ПРИ ЭНДОДОНТИЧЕСКОМ ЛЕЧЕНИИ
ФГБОУ вО «Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова» Минздрава РФ, 127473, Москва
Частота осложнений по результатам эндодонтического лечения хронических форм пульпита и периодонтита остается высокой — от 32 до 50%, что связывают со свойствами микробной биопленки. Исследования этого объекта в корневых каналах и методов эрадикации биопленок находятся в начальной фазе исследования.
Цель — лабораторное обоснование и оценка эффективности комплексного воздействия ультразвуковой обработки и фотоактивируемой дезинфекции корня зуба при хронических формах пульпита и периодонтита, а также оценка эффективности эндодонтического лечения с применением сканирующей электронной микроскопии.
Микрофлору корневых каналов изучали бактериологическим методом (4 бактериальных и 2 грибковых клинических изо-лята). Влияние ультразвуковой обработки в комплексе с системой, фотоактивируемой дезинфекцией, на микрофлору корневого канала оценивали с использованием биореактора. Исследование биопленок системы корневых каналов зуба у больных хроническими формами пульпита (52 человека) и периодонтита (16 человек) проведены с использованием сканирующей электронной микроскопии.
Установлены наличие обильной микробной биопленки в устьях дентинных канальцев и обтурация дентинных канальцев в отдельных случаях. Описаны особенности формирования кривых роста популяций бактерий оральной микрофлоры (Por-phyromonas gingivalis; Fusobacterium nucleatum; Streptococcus sanguinis; Streptococcus mutans; Candida albicans; Candida krusei) в результате комплексного воздействия фотодинамической активации и ультразвука по сравнению с контролем без такового. Комплексное воздействие угнетает рост микробных популяций оральных бактерий и грибов рода Candida.
Ключевые слова: корневые каналы; микробная биопленка; сканирующая электронная микроскопия; эндодонти-ческое лечение; ультразвуковая ирригация; фотодинамическая терапия; биореактор; антимикробная активность in vitro.
Для цитирования: Царев В.Н., Подпорин М.С., Ипполитов Е.В. Применение сканирующей электронной микроскопии и биореактора для оценки эрадикации микробной биопленки корневых каналов при эндодонтическом лечении. Клиническая лабораторная диагностика. 2017; 62 (8): 506-512. DOI:http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-8-506-512 Tsarev V.N., PodporinM.S., IppolitovE.V.
THE APPLICATION OF SCANNING ELECTRONIC MICROSCOPY AND BIO-REACTOR FOR EVALUATING ERADICATION OF MICROBIAL BIOFILM OF ROOT CHANNELS UNDER ENDODONTIC TREATMENT
The A.E. Evdokimov Moscow state medical stomatological university, 127473 Moscow, Russia
Для корреспонденции: Царев Виктор Николаевич, д-р мед. наук, проф., дир. НИМСИ, зав. каф. микробиологии, вирусологии, иммунологии МГМСУ им. А.И. Евдокимова Минздрава РФ, e-mail: [email protected]
