CC BY
610
,,„ „„„,„,„,„„,„„. Jj Ставрополья
научно-практическии журнал
УДК 619:615.33:579.861.2:636.7 CQTHGU
DOI: 10.31279/2222-9345-2022-11-48-10-13 Дата поступления статьи в редакцию: 16.11.2022 г.
Е. В. Светлакова, В. Н. Шахова, В. А. Беляев, Н. А. Ожередова
Svetlakova E. V., Shakhova V. N., Belyaev V. A., Ozheredova N. A.
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ К АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫМ ПРЕПАРАТАМ ПАТОГЕННЫХ СТАФИЛОКОККОВ И СТРЕПТОКОККОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ БОЛЬНЫХ СОБАК
SENSITIVITY TO ANTIBACTERIAL DRUGS OF PATHOGENIC STAPHYLOCOCCUS AND STREPTOCOCCIS ISOLATED FROM SICK DOGS
Устойчивость аэробных и анаэробных бактерий к проти-вомикробным препаратам стала серьезной проблемой при лечении инфекций, связанных с этими микроорганизмами. Антибактериальную терапию следует начинать как можно раньше, до постановки микробиологического диагноза. Выделение и идентификация этих бактерий, а также проведение тестов на их восприимчивость довольно сложны и отнимают много времени. Поэтому получение данных, относящихся к моделям резистентности и механизмам резистентности этих бактерий, очень важно для лечения аэробных и анаэробных инфекций. Целью данной работы является определение чувствительности к антибактериальным препаратам патогенных стафилококков и стрептококков, выделенных от больных собак. Исследованию подвергались полевые штаммы условно-патогенных стафилококков и стрептококков, выделенных от больных собак в стадии обострения болезни. В ходе нашей работы была изучена степень распространенности заболеваний собак стафилококковой инфекцией в Ставропольском крае. Изучена чувствительность антибиотиков к выделенным возбудителям и степень их воздействия на культуры в течение трех лет. Выявлено, что стрептококки и стафилококки, выделенные от больных собак, высокочувствительны к байтрилу и энроксилу. Отмечалась резистентность к стрептомицину, тетрациклину и пенициллину.
Ключевые слова: чувствительность, антибиотики, стафилококк, стрептококк, собаки, патогенность, терапевтический эффект.
The resistance of aerobic and anaerobic bacteria to antimicrobial drugs has become a serious problem in the treatment of infections associated with these microorganisms. Antibacterial therapy should be started as early as possible, before a microbiological diagnosis is made. Isolation and identification of these bacteria, as well as conducting tests for their susceptibility, are quite complex and time-consuming. Therefore, obtaining data related to resistance models and resistance mechanisms of these bacteria is very important for the treatment of aerobic and anaerobic infections. The purpose of this work is to determine the sensitivity to antibacterial drugs of pathogenic staphylococci and streptococci isolated from sick dogs. Field strains of conditionally pathogenic staphylococci and streptococci isolated from sick dogs in the stage of exacerbation of the disease were studied. In the course of our work, the degree of prevalence of diseases of dogs with staphylococcal infection in the Stavropol Territory was studied. The sensitivity of antibiotics to isolated pathogens and the degree of their effect on cultures for three years were studied. It was revealed that streptococci and staphylococci isolated from sick dogs are highly sensitive to baitril and enroxyl. Resistance to streptomycin, tetracycline and penicillin was noted.
Key words: sensitivity, antibiotics, staphylococcus, streptococcus, dogs, pathogenicity, therapeutic effect.
Светлакова Елена Валентиновна -
кандидат биологических наук, доцент кафедры эпизоотологии и микробиологии ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный аграрный университет» г. Ставрополь RSCI SPIN-код: 4981-5119 Тел.: 8-903-416-83-55 Е-mail: alenka6121970@mail.ru
Шахова Валерия Николаевна -
кандидат биологических наук, доцент
кафедры терапии и фармакологии
ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный
аграрный университет»
г. Ставрополь
RSCI SPIN-код: 7991-4900
Тел.: 8-918-768-53-27
Е-mail: lerik_perev@mail.ru
Беляев Валерий Анатольевич -
доктор ветеринарных наук, профессор
кафедры терапии и фармакологии
ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный
аграрный университет»
г. Ставрополь
RSCI SPIN-код: 4911-6491
Тел.: 8-928-313-73-06
Е-mail: valstavvet@yandex.ru
Svetlakova Elena Valentinovna -
Candidate of Biological Sciences,
Associate Professor of the Department
of Epizootology and Microbiology
FSBEI HE «Stavropol State Agrarian University»
Stavropol
RSCI SPIN-code: 4981-5119 Теl.: 8-903-416-83-55 Е-mail: alenka6121970@mail.ru
Shakhova Valeria Nikolaevna -
Candidate of Biological Sciences,
Associate Professor of the Department
of Therapy and Pharmacology
FSBEI HE «Stavropol State Agrarian University»
Stavropol
RSCI SPIN-code:7991-4900 Tel.: 8-918-768-53-27 E-mail: lerik_perev@mail.ru
Belyaev Valery Anatolyevich -
Doctor of Veterinary Sciences,
Professor of the Department
of Therapy and Pharmacology
FSBEI HE «Stavropol State Agrarian University»
Stavropol
RSCI SPIN-code: 4911-6491 Tel.: 8-928-313-73-06 E-mail: valstavvet@yandex.ru
в
естник АПК
Ставрополья
№ 4(48), 2022
Ожередова Надежда Аркадьевна -
доктор ветеринарных наук, профессор, заведующая
кафедрой эпизоотологии и микробиологии,
ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный
аграрный университет»
г. Ставрополь
КБС1 БРШ-код: 6611-5091
Тел.: 8-909-766-78-51
Е-таИ: ogeredova-sgau@mail.ru
Ветеринария
11
Ozheredova Nadezhda Arkadyevna -
Doctor of Veterinary Sciences, Professor, Head of the Department of Epizootology and Microbiology
FSBEI HE «Stavropol State Agrarian University» Stavropol
RSCI SPIN-code: 6611-5091 Tel.: 8-909-766-78-51 E-mail: ogeredova-sgau@mail.ru
Антимикробные препараты используются во всем мире не только для лечения инфекционныхзаболеваний, но и в качестве «профилактических» средств для предотвращения инфекций, содействия росту сельского хозяйства и аквакультуры. Интенсивное и неконтролируемое использование человеком антибиотиков в медицине, ветеринарии и сельском хозяйстве, вероятно, привело к появлению и распространению устойчивых к антибиотикам бактерий в окружающей среде. Как правило, бактерии могут развиватьустойчивость к антибиотикам путем спонтанных хромосомных мутаций в бактериальном геноме или путем приобретения генов устойчивости путем горизонтального переноса генов между различными видами бактерий посредством конъюгации, трансформации или трансдукции [1].
Оппортунистические инфекции, вызываемые стрептококками, стафилококками, могут повреждать различные системы организма, приводя к патологическим состояниям организма. Заражение обычно происходит в питомниках, зоомагазинах и приютах для животных. Стафилококковые инфекции очень распространены, и бактерии обычно являются обитателями кожи и слизистых оболочек человека и животных. Они дифференцируются по продукции коагулазы, и коагулазоположительные являются более патогенными, чем коагулазо-отрицательные стафилококки [2].
После первого случая метициллин-резис-тентного Staphylococcus pseudintermedius (MRSP), зарегистрированного в 2005 г., во всем мире было зарегистрировано больше случаев MRSP от домашних животных. Это новая проблема в ветеринарии, и она почти устойчива ко всем противомикробным препаратам, доступным для домашних животных. Однако в Китае его выделяют только у собак с пиодермией. Сообщалось об исследованиях распространенности и характеристике стафилококков в ветеринарных больницах Азии, Европы и Америки. Большую озабоченность вызывает резистентность к противомикробным препаратам бактерий, возникающих у домашних животных, из-за очень тесного контакта домашних животных с людьми. Он представляет собой серьезную угрозу для ветеринарии, а также для здоровья человека. Бактериальные гены, опосредующие устойчивость, быстро развиваются и диверсифицируются. Выявление, а также контроль устойчивости к противомикробным препаратам
важны для непрерывного эффективного лечения против патогенных микроорганизмов. Непрерывное использование противомикробных препаратов способствует развитию и распространению устойчивых к противомикробным препаратам бактерий в популяциях человека и животных [2, 3].
S. aureus и другие стафилококковые бактерии способны образовывать биопленку. Она представляет собой структурное объединение бактерий в закрытом самовоспроизводящемся внеклеточном матриксе. Жизненный цикл биопленки состоит из 4 процессов: 1 - прикрепление: отдельные стафилококковые бактерии заселяют поверхность; 2 - агрегация: бактерии образуют внеклеточный слой: биопленку, окружающую и связывающую их друг с другом, образуя прочное соединение с поверхностью; 3 - рост: под защитой биопленки масса растет и вызывает хроническую инфекцию; 4 - высвобождение: отдельные бактериальные клетки высвобождаются из биопленки, распространяясь производят новые колонии. В итоге биопленка является фактором риска для инфекции, она способствует высокой устойчивости бактерий к антибиотикам, а также защищает бактерии от естественной защиты организма [4].
Целью нашего исследования явилось определение чувствительности к антибактериальным препаратам патогенных стафилококков и стрептококков, выделенных от больных собак.
Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам диско-диффузионным методом является распространенным, более удобным в выполнении по сравнению с другими методами и позволяет установить факт чувствительности возбудителей, относящихся к семейству Coccaceae, к применяемым антибактериальным препаратам.
Исследованию подвергались полевые штаммы условно-патогенных стафилококков и стрептококков, выделенных от больных собак в стадии обострения болезни: в 2019 году - у 59; 2020 году - 28; 2021 году - 26 голов.
Чувствительность к антибиотикам проводилась согласно руководству по клинической лабораторной диагностике «Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам» (2015).
На поверхность агаризованной среды в чашки Петри вносили по 1 мл изучаемой культуры в концентрации 2 млрд мк/мл (стандарт мутности Тарасевича). Увлажняли всю поверхность среды путем покачивания и накладывали по всей
12
,,„ „„„,„,„,„„,„„. Ставрополья
научно-практическии журнал
площади диски с антибиотиками (производство ООО «Нита-Фарм»). В чашке Петри диаметром 9 см вмещалось 6 дисков, а с диаметром 15 см - 8 штук. Затем ставили чашки в термостат с температурой 37 °С, предварительно перевернув, во избежание формирования конденсата и через 24 часа учли результаты.
В ходе наших исследований была изучена степень распространенности заболеваний собак стафилококковой инфекцией в Ставропольском крае. Изучена чувствительность выделенных возбудителей к антибиотикам и степень их воздействия на культуры в течение трех лет (табл.).
Нами установлено, что возбудители кокковых инфекций собак встречаются в виде энзоотических вспышек и болезнь носит сезонный характер. Обострение данных заболеваний проявляется чаще всего в осенне-весенний период. Летом и зимой инфекция практически не отмечается. Так как заболевания считаются хроническими, то владельцы животных уделяют им большое внимание, и финансовое в том числе. Поэтому можно сказать, что данные хронические болезни наносят значительный экономический ущерб.
Таблица - Чувствительность бактерий к антибиотикам (мм)
Наименование антибиотика Зона задержки роста, мм Чувствительность к антибиотикам
2019 г. 2020 г. 2021 г.
Цефотаксим 21,5±1,3 23,75±1,19 21±1,2 СЧ/СЧ/СЧ
Неомицин 14±0,84 24,5±1,23 - СЧ/СЧ/НЧ
Тетрациклин 15±0,9 - - СЧ/НЧ/НЧ
Кобактан 18,8±0,94 23±1,38 23,3±1,31 СЧ/СЧ/СЧ
Байтрил 21±1,1 24,9±1,5 18,25±0,91 СЧ/ВЧ/СЧ
Интерспектин 19±1,13 19,2±0,96 20,3±1,01 СЧ/СЧ/СЧ
Пневмотил 18,2±0,92 - - СЧ/НЧ/НЧ
Флорокс 19±1,11 17,25±1,04 15,2±0,76 СЧ/СЧ/СЧ
Эритромицин 16,6±0,81 11±0,55 - СЧ/МЧ/НЧ
Тилозин 16,6±0,8 14±0,84 16,2±0,97 СЧ/МЧ/МЧ
Азлоциллин 18,8±0,9 13,6±0,68 - СЧ/МЧ/НЧ
Ципровет - 19±1,12 15±0,9 НЧ/СЧ/МЧ
Энромокс 26,9±1,35 13±0,65 - ВЧ/МЧ/НЧ
Интрамицин 23,7±1,19 18±0,88 18±0,85 СЧ/СЧ/СЧ
Меропенем 23,6±1,2 18±0,91 СЧ/СЧ/НЧ
Синулокс 17,75±1,07 19,3±0,92 21±1,26 СЧ/СЧ/СЧ
Дитрим 15±0,9 - - СЧ/-/-
Левофлоксацин 17,7±1,06 - - СЧ/-/-
Энроксил 27±1,62 21,9±1,3 21,6±1,21 ВЧ/СЧ/СЧ
Цефалотин 15,45±0,93 - - СЧ/НЧ/НЧ
Ципрофлоксацин 22,75±1,37 - - СЧ/-/-
Амоксициллин - 11±0,66 14,6±0,88 НЧ/МЧ/СЧ
Рифампицин 14,25±0,83 - 24,5±1,47 МЧ/-/СЧ
Доксилокс 15±0,81 11±0,7 13,6±0,68 МЧ/МЧ/МЧ
Офлоксацин/нофл 13,5±0,62 24,4±1,42 16,1±0,81 МЧ/СЧ/СЧ
Пенициллин 10±0,6 12±0,61 - НЧ/МЧ/-
Линкомицин 21,75±1,2 - - СЧ/-/-
Цефаклор - 17±1,1 16,6±0,8 -/СЧ/СЧ
Гентамицин - 17,3±0,87 17,9±0,9 -/СЧ/СЧ
Марфлоксин - 22,8±1,14 25,9±1,3 -/СЧ/ВЧ
Полимиксин - 17±1,2 12,3±0,62 -/СЧ/МЧ
Стрептомицин - 11,3±0,74 - -/МЧ/-
Фурозолидон - 16,75±0,8 16±0,82 -/СЧ/СЧ
Линковик - 20,5±1,23 16,5±0,73 -/СЧ/СЧ
Примечание: ВЧ - высокочувствительные (зона задержки роста более 25 мм);
СЧ - среднечувствительные (зона задержки роста15-24 мм); МЧ - малочувствительные (зона задержки роста 11-14 мм); НЧ - нечувствительна (отсутствует зона задержки роста).
в
естник АПК
Ставрополья
№ 4(48), 2022
Ветеринария
13
Особо опасными клиническими симптомами при стафилококковой или стрептококковой инфекции у собак являлись: мумифицирование плодов, рождение мертворожденных и нежизнеспособных щенков, кроме этого, у кобелей отмечались гнойные истечения из препуция, часто желто-зеленого цвета, а также обнаружение поражений кожи животных в виде гнойничков, вследствие чего появляются алопеции на коже.
Кроме новорожденных, восприимчивыми животными были собаки от 15 сут до 2,5 мес. и в возрасте 2-3 лет.
При определении чувствительности культур, выделенных от больных особей из мочи, был использован широкий спектр антибиотиков, принадлежащих к различным группам антибактериальных препаратов: цефотаксим, неомицин, тетрациклин, кобактан (д.в. цефкином), бай-трил (д.в. энрофлоксацин), интерспектин (д.в. спектиномицин; линкомицин), пневмотил (д.в. тилмикозина фосфат), флорокс (д.в. флорфе-никол), эритромицин, тилозин, азлоциллин, ци-провет (д.в. ципрофлоксацин), энромокс (д.в. амоксициллин и энрофлоксацин), интрамицин (д.в. бензилпенициллин и дигидрострептоми-цин), меропенем, синулокс (д.в. амоксициллин и клавулановая кислота), дитрим (д.в. триме-
топрим, сульфадимидин), левофлоксацин, эн-роксил (д.в. энрофлоксацин), цефалотин, ципрофлоксацин, амоксициллин, рифампицин, доксилокс (д.в. доксициклин).
Из приведенных в таблице 2 материалов видно, что стрептококки и стафилококки, выделенные от больных собак, высокочувствительны к препаратам - байтрилу и энроксилу, действующим веществом которых является энрофлоксацин. Отмечалась резистентность к стрептомицину, тетрациклину и пенициллину.
Общими методами преодоления бактериальной резистентности являются: разработка новых антибактериальных препаратов, активных против лекарственно-устойчивых микроорганизмов вследствие нового или улучшенного механизма действия, новых физико-химических свойств, способствующих невозможности их распознавания и удаления из бактериальной клетки, способности противостоять действию бактериальных дезактивирующих ферментов; синтез новых антибиотиков с двойным или тройным механизмом действия путем введения новых функциональных групп в молекуле антибиотика; введение антибиотиков вместе с адъювантами, которые помогают преодолеть бактериальную резистентность [5].
Литература
1. Antimicrobial resistance of Staphylococcus aureus, fecal streptococci, Enterobacteria-ceae and Pseudomonas aeruginosa isolated from the coastal water of the Gaza strip-Palestine / Elmanama Abdelraouf A., Hartemann Philippe, Elnabris Kamal J., Ayesh Adnan, Afifi Samir, Elfara Fatma, Aljubb Alaa R. // The International Arabic Journal of Antimicrobial Agentsissn 2016. Vol. 6, № 3:2. P. 1-13.
2. Antimicrobial resistance of staphylococci and streptococci isolated from dogs / D. H. Kalho-ro, M. S. Kalhoro, M. H. Mangi, A. R. Jahejo, S. Kumbhar, G. M. Lochi, G. M. Mari, A. Kaka, A. K. Lund and Y. J. Liu // Tropical Biomedi-cine. 2019. № 36(2). P. 468-474.
3. Саркулова М. Чувствительность микрофлоры к антибиотикам при хроническом простатите // Врач. 2005. № 6. С. 31-32.
4. Абдуллаева А. М., Удавлиев Д. И., Селю-кова Ю. В. Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам // Научно-практический электронный журнал «Аллея Науки». 2018. № 10(26). Alley-science.ru.
5. Zhivich Alexander. Fighting bacterial resistance: approaches, challenges, and opportunities in the search for new antibiotics. Part 1. Antibiotics used in clinical practice: mechanisms of action and the development of bacterial resistance // Microbiology Independent Research Journal. 2017. Vol. 4, № 1. P. 31-51.
References
1. Antimicrobial resistance of Staphylococcus aureus, fecal streptococci, Enterobac-teriaceae and Pseudomonas aeruginosa isolated from the coastal water of the Gaza strip-Palestine / Elmanama Abdelraouf A., Hartemann Philippe, Elnabris Kamal J., Ayesh Adnan, Afifi Samir, Elfara Fatma, Aljubb Alaa R. // The International Arabic Journal of Antimicrobial Agentsissn 2016. Vol. 6. № 3:2. P. 1-13.
2. Antimicrobial resistance of staphylococci and streptococci isolated from dogs / D. H. Kalhoro, M. S. Kalhoro, M. H. Mangi, A. R. Jahejo, S. Kumbhar, G. M. Lochi, G. M. Mari, A. Kaka, A. K. Lund and Y. J. Liu // Tropical Biomedi-cine. 2019. № 36(2). P. 468-474.
3. Sarkulova M. Sensitivity of microflora to antibiotics in chronic prostatitis // Doctor. 2005. № 6. P. 31-32.
4. Abdullaeva A. M., Udavliev D. I., Selyuko-va Yu. V. Determination of the sensitivity of microorganisms to antibiotics // Scientific and practical electronic journal «Alley of Science». 2018. № 10 (26). Alley-science.ru.
5. Zhivich Alexander. Fighting bacterial resistance: approaches, challenges, and opportunities in the search for new antibiotics. Part 1. Antibiotics used in clinical practice: mechanisms of action and the development of bacterial resistance // Microbiology Independent Research Journal. 2017. Vol. 4. № 1. P. 31-51.
