CC BY
0
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
Мальчикова А.О.1, Фролова И.Н.1, Молчанова И.В.2, Куцевалова О.Ю.3, Ветохина А.В.4, Клясова Г.А.1
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ CANDIDA SPP. — ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ИНВАЗИВНОГО КАНДИДОЗА: РЕЗУЛЬТАТЫ 18-ЛЕТНЕГО МНОГОЦЕНТРОВОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
'ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва, 2ГБУЗ «Челябинская областная клиническая больница», г. Челябинск, 3ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Минздрава России, г. Ростов-на-Дону,
4ГБУЗ «Иркутская ордена "Знак Почета" областная клиническая больница», г. Иркутск
Введение. За последние годы возросла доля возбудителей инва-зивного кандидоза (ИК), не чувствительных к антимикотикам.
Цель. Изучить чувствительность к антимикотикам Candida spp., выделенных из гемокультуры и других стерильных образцов.
Материалы и методы. В проспективном многоцентровом исследовании (2005-2022 гг.) было проведено изучение чувствительности Candida spp., выделенных из стерильных образцов от больных с гематологическими заболеваниями и без гематологических заболеваний из 4 центров России. Идентификацию Candida spp. проводили методом MALDI-TOF MS на анализаторе Microflex (Bruker Daltonics, Германия) в отделе микробиологии и антимикробной терапии ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России. Минимальную подавляющую концентрацию (МПК) флуконазола, вориконазола, каспофун-гина, анидулафунгина и амфотерицина В определяли методом микроразведений в бульоне RPMI-1640 (Sigma Aldrich, США) согласно рекомендациям Института клинических и лабораторных стандартов (Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI M27M44S, 2022 г.). Результаты чувствительности интерпретировали согласно критериям CLSI M27M44S и M57S (2022 г.) для всех штаммов, кроме C. auris. Для C. auris использовали критерии Центра по контролю и профилактике инфекционных заболеваний (CDC, 2020 г.). В каждое исследование были включены контрольные штаммы C. parapsilosis ATCC22019 и C. albicans ATCC90028.
Результаты. В течение 18 лет было исследовано 663 Candida spp. (243 от больных с гематологическими заболеваниями, 420 от больных без гематологических заболеваний; 557 из гемокультуры, 106 из других стерильных образцов). Основными возбудителями ИК были C. albicans (n=272; 40,9%), C. parapsilosis (n=148; 22,3%), C. glabrata (n=56; 8,4%), C. krusei (n=45; 6,8%), C. tropicalis (n=44; 6,6%), C. guilliermondii (n=24; 3,6%), C. auris (n=23; 3,5%). В таблице представлена
их чувствительность. Приобретенная резистентность к флуконазолу была выявлена у 84 (12,7%) Candida spp. (24 C. albicans, 23 C. auris, 18 C. parapsilosis, 14 C. glabrata, 3 C. tropicalis, 2 C. guilliermondii), к ворикона-золу — у 59 (8,9%) штаммов (25 C. albicans, 23 C. auris, 4 C. tropicalis, 3 C. krusei, 2 C. parapsilosis, 2 C. guilliermondii). Включая штаммы с природной устойчивостью, резистентными к флуконазолу были 129 (19,5%) Candida spp., к вориконазолу — 115 (17,4%) Candida spp. Приобретенная резистентность к анидулафунгину была определена у 10 (1,5%) штаммов (4 C. guilliermondii, 3 C. parapsilosis, 2 C. glabrata, 1 C. krusei), к кас-пофунгину — у 18 (2,7%) Candida spp. (8 C. guilliermondii, 4 C. krusei, 3 C. parapsilosis, 2 C. glabrata, 1 C. lusitaniae). Было выделено 10 (1,5%) штаммов Candida spp. со значениями МПК амфотерицина В более 2 мкг/мл, среди которых 7 C. auris, 2 C. krusei и 1 C. tropicalis.
Заключение. Приобретенная резистентность Candida spp. определена наиболее высокой к азолам (к флуконазолу 13%, к вориконазолу 9,0%). Резистентность к эхинокандинам не превышала 3% и была детектирована среди C. parapsilosis, C. krusei, C. guilliermondii и C. glabrata. Сохраняется высокая активность in vitro амфотерицина В.
Таблица. In vitro активность азолов, эхинокандинов и амфотерицина В среди Candida spp.
Candida spp. (n)
С.albicans (272)
C.parapsilosis (148)
C.glabrata (56)
C.krusei (45)
C. tropicalis (44)
C. guilliermondii (24)
C.auris (23)
MПK50/M ПK90/% чувствительных штаммов'
Анидулафунгин Каспофунгин
0,008/0,032/99,6
0,125/1/95,9
0,016/0,125/96,4
0,032/0,25/91,1
0,008/0,032/100
1/8/79,2
0,032/2/100
0,016/0,064/100
0,25/0,5/95,9
0,016/0,125/94,6
0,125/0,5/80
0,016/0,64/100
0,5/16/66,7
0,032/2/100
Вориконазол Флуконазол
0,032/0,5/87,1
0,032/0,25/87,2
0,125/2/н.о.
4/32/**
0,125/1/84,4
0,032/0,25/88,6
0,064/0,5/91,7
64/64/0
0,125/4/88,6
0,25/16/84,5
32/64/п.р.
0,125/2/90,9
1/8/91,7
128/128/0
Амфотерицин В
0,25/1/100
0,064/0,5/100
0,25/1/100
0,25/1/95,6
0,064/0,5/97,7
0,125/1/100
1/4/69,6
Примечание: н.о. - не определено, п.р. - природная резистентность, *для амфотерицина В -без приобретенных механизмов резистентности, **чувствительные дозозависимые 75%
i штаммов «дикого» типа.
Мальчикова А.О.1, Хрульнова С.А.1, Хабибуллин Н.Р.1, Фролова И.Н.1, Ветохина А.В.2, Клясова Г.А.1
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ К ПРОТИВОГРИБКОВЫМ ПРЕПАРАТАМ, ПРОДУКЦИЯ БИОПЛЕНОК И ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ
CANDIDA AURIS, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ ГЕМОКУЛЬТУРЫ
'ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва, 2ГБУЗ «Иркутская ордена
"Знак Почета" областная клиническая больница», г. Иркутск
Введение. Candida auris —— мультирезистентный патоген, частота которого в спектре возбудителей кандидемии возрастает с каждым годом.
Цель. Исследовать чувствительность к противогрибковым препаратам, продукцию биопленок и генетическое разнообразие C. auris, выделенных из крови.
Материалы и методы. В ходе проспективного многоцентрового исследования (2018-2022 гг.) была проведена идентификация 23 штаммов C. auris, выделенных из гемокультуры от больных, находящихся в отделениях реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ). В анализ включали первый по видовой принадлежности штамм C. auris, выделенный от больного. Все штаммы были идентифицированы методом матрично-активированной лазерной десорбционной ионизационной времяпролетной (MALDI-TOF) масс-спектромет-рии на анализаторе Microflex (Bruker Daltonics, Германия) в отделе микробиологии и антимикробной терапии ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России. Минимальную подавляющую концентрацию (МПК) флуконазола, вориконазола, каспофунгина, анидулафунгина и амфотерицина В определяли методом микроразведений в бульоне RPMI-1640 (Sigma Aldrich, США) согласно рекомендациям Института клинических и лабораторных стандартов (Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI M27M44S, 2022 г.). Результаты
чувствительности интерпретировали согласно критериям Центра по контролю и профилактике инфекционных заболеваний (CDC, 2020 г.). В каждое исследование были включены контрольные штаммы C. parapsilosis ATCC22019 и C. albicans ATCC90028. Определение способности C. auris продуцировать биопленки проводили спектро-фотометрическим методом с использованием соли тетразолия (Sigma-Aldrich, США). Штаммы, имеющие значение оптической плотности от 0,1 и более, оценивали как образующие биопленки, менее 0,1 —— как не способные к формированию биопленок. Регионы ITS, D1-D2 рДНК и ген ERG11 были секвенированы по Сэнгеру. Нуклеотидные последовательности анализировали с помощью программного обеспечения Vector NTI Advance, филогенетический анализ —— MEGA X. Нуклеотидные последовательности регионов ITS, D1-D2 рДНК и гена ERG11 C. auris, принадлежащих разным генетическим линиям, были получены из базы GenBank, NCBI.
Результаты. Всего в анализ было включено 23 C. auris, выделенных из гемокультуры от больных в ОРИТ (1 больной с гематологическим заболеванием, 7 —— с COVID-19, 15 —— без без опухоли системы крови). Чувствительность C. auris к антимикотикам представлена в таблице. Все C. auris были резистентны к флуконазолу и вориконазолу, сохраняли чувствительность к каспофунгину и анидулафунгину. Амфотерицин В был не активен in vitro в отношении 7 (30,4%)
