CC BY
30
УДК 616.15-07:616.155.34-097.1:615.38.06 https://doi.org: 10.20538/1682-0363-2020-2-48-54
Частота встречаемости антигенов нейтрофилов человека и риск аллоиммунизации у доноров и больных гематологическими заболеваниями
Кробинец И.И., Минеева Н.В., Богданова И.О., Чечеткин А.В.
Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии (РосНИИГТ) Россия, 191024, г. Санкт-Петербург, 2-я Советская ул., 16
РЕЗЮМЕ
Актуальность. Антигены нейтрофилов человека (Human neutrophil antigens, HNA) локализованы на гли-копротеинах, расположенных на поверхностной мембране нейтрофилов. Иммунизация к HNA во время беременности или вследствие трансфузий компонентов крови может привести к выработке аллоантител. Одним из факторов развития аллоиммунизации является частота встречаемости HNA. B связи с этим представляется важным изучить особенности распределения аллелей и генотипов HNA у доноров и больных гематологическими заболеваниями г. Санкт-Петербурга для прогнозирования риска аллоиммунизации.
Цель. Оценить риск HNA аллоиммунизации у доноров и больных гематологическими заболеваниями г. Санкт-Петербурга на основании изучения частот встречаемости аллелей и генотипов HNA.
Материалы и методы. Материалом исследования служили образцы периферической крови 303 доноров г. Санкт-Петербурга и 302 больных гематологическими заболеваниями, получавших терапию в Российском научно-исследовательском институте гематологии и трансфузиологии. Геномная ДНК была выделена из цельной крови методом многоступенчатой очистки с использованием реактива цетилтриметиламмония бромида. Типирование HNA проводили методом аллель-специфичной полимеразной цепной реакции с использованием разработанных олигонуклеотидных праймеров. Сравнения частот встречаемости генотипов HNA у доноров, больных гематологическими заболеваниями, и представителей других популяций проводили с помощью критерия согласия Пирсона х2.
Результаты. Частота встречаемости аллеля HNA-1bd составила 0,584-0,588, а HNA-^ - 0,376-0,384. Частота встречаемости аллеля HNA-1bс составила 0,032-0,036, и данный аллель был представлен в генотипах HNA-1а/bc/bd (0,023-0,036)00, :ША-1а/Ьс (0,020-0,043) и HNA-1bc/bd (0,007-0,010). Генотипы HNA-1bo/ bc и HNA-1null выявлены не были. Аллель «а» систем HNA-3, -4, -5 встречался у большинства исследуемых в каждой группе (0,795-0,804; 0,887-0,898; 0,699-0,708 соответственно). На основании полученных частот встречаемости аллелей и генотипов рассчитали вероятность аллоиммунизации к HNA. Наибольшая величина расчетного риска аллоиммунизации при трансфузиях компонентов крови отмечена при отсутствии в генотипе аллелей HNA-5b, HNA-1a, HNA-3b, HNA-4b и составляет 0,250; 0,233; 0,231 и 0,163 соответственно, что подтверждает результаты аналогичных исследований.
Заключение. Статистически значимых различий в частоте встречаемости аллелей и генотипов HNA-1, -3, -4, -5 у доноров г. Санкт-Петербурга и больных гематологическими заболеваниями не установлено. Наибольшая величина расчетного риска аллоиммунизации при трансфузиях компонентов крови, полученная на основании частот встречаемости аллелей и генотипов, отмечена при отсутствии в генотипе аллелей HNA-5b, HNA-1a, HNA-3b, HNA-4b. Полученные данные согласуются с результатами исследований распределения аллелей и генотипов систем HNA в популяции европейцев и значимо отличаются от популяций Восточной и Юго-Восточной Азии, Африки и Южной Америки. Предложенный метод типирования HNA может быть использован для создания клеточной панели, типированной по антигенам нейтрофилов, с целью определения специфичности аллоантител у доноров, и для диагностики аллоиммунных конфликтов в педиатрии, трансфузиологии и трансплантологии.
Ключевые слова: антигены нейтрофилов, генотипирование, аллель-специфичная полимеразная цепная реакция.
Н Кробинец Ирина Ивановна, е-mail: [email protected].
Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.
Источник финансирования. Авторы заявляют об отсутствии финансирования при проведения исследования.
Соответствие принципам этики. Все пациенты подписали информированное согласие на участие в исследовании и согласие на забор крови. Протокол исследования одобрен локальным этическим комитетом ФГБУ РосНИИГТ ФМБА России (протокол № 56 от 26.12.2018).
Для цитирования: Кробинец И.И., Минеева Н.В., Богданова И.О., Чечеткин А.В. Частота встречаемости антигенов нейтрофилов человека и риск аллоиммунизации у доноров и больных гематологическими заболеваниями. Бюллетень сибирской медицины. 2020; 19 (2): 48-54. https://doi.org: 10.20538/1682-0363-20202-48-54.
Human neutrophil antigen allele frequencies and assessment of HNA alloimmunisation risk in donors and hematological patients
Krobinets I.I., Mineeva N.V., Bogdanova I.O., Chechetkin A.V.
Russian Research Institute of Hematology and Transfusiology 16, 2^ Sovetskaya Str., St-Petersburg, 191024, Russian Federation
ABSTRACT
Relevance. Human neutrophil antigens (HNAs) are localized on glycoproteins which are positioned on the surface membrane of human neutrophils. Alloantibodies against HNA are implicated in a number of clinical conditions, including immune-mediated neutropenia and transfusion reactions. Genotyping for HNA systems is important in the diagnosis of disorders involving alloimmunization to HNA.
Aim. To assess the risk of HNA alloimmunization in donors and patients with hematological diseases in St. Petersburg based on the study of HNA allele and genotype frequencies.
Materials and methods. DNA samples of 303 blood donors and 302 hematological patients were obtained and typed for HNA-1, -3, -4, -5. Polymerase chain reactions with homemade sequence-specific primers were used for typing. Genomic DNA was isolated from whole blood by a multistage purification method using the CTAB reagent. The results were detected in real time using the EVAGreen intercalating dye. Pearson's chi-squared test was used to compare the HNA genotype frequencies in donors, patients with hematological diseases and in other populations.
Results. In the study, the frequency of HNA-1bd allele was 0.584-0.588, of HNA-1a - 0.376-0.384, of HNA-1bc - 0.032-0.036. HNA-1bc allele was represented in the genotypes HNA-la/bc/bd (0.023-0.036), HNA-la/bc (0.020-0.043) and HNA-lbc/bd (0.007-0.010). The genotypes HNA-lbc/bc and HNA-lnull were not identified. Allele "a" of HNA-3, -4, -5 systems was found in the majority of studied individuals (0.795-0.804; 0.887-0.898; 0.699-0.708). The highest calculated risk of HNA alloimmunization was noted in the absence of HNA-5b, HNA-1a, HNA-3b, and HNA-4b alleles in the genotype and was 0.250, 0.233, 0.231, and 0.163, respectively.
Conclusions. Our data are consistent with the results of studies on the HNA allele and genotype frequencies in populations of Europeans and are significantly different from those of East and Southeast Asia, Africa and South America. The frequencies of HNA-1, -3, -4, -5 alleles and genotypes among donors in St. Petersburg and patients with hematological diseases did not have statistically significant differences. It was shown that the highest calculated risk of alloimmunization was observed in the absence of HNA-5b, HNA-1a, HNA-3b, and HNA-4b alleles in the genotype. These data are consistent with the results of similar studies on populations of white Europeans conducted by other authors.
Key words: donor, neutrophil antigens, genotyping.
Conflicts of interest. The authors declare the absence of obvious or potential conflicts of interest related to the publication of this article.
Source of financing. The authors state that they received no specific funding for the study.
Conformity with the principles of ethics. All participants signed an informed consent to participate in the study and have blood samples collected. The study was approved by the local Ethics Committee of Russian Research Institute of Hematology and Transfusiology (Protocol No. 56 of December 26, 2018).
For citation: Krobinets I.I., Mineeva N.V., Bogdanova I.O., Chechetkin A.V. Human neutrophil antigen allele frequencies and assessment of HNA alloimmunisation risk in donors and hematological patients. Bulletin of Siberian Medicine. 2020; 19 (2): 48-54. https://doi.org: 10.20538/1682-0363-2020-2-48-54.
ВВЕДЕНИЕ
Антигены нейтрофилов человека (Human neutrophil antigens, НЫА) локализованы на гликопротеи-нах, расположенных на поверхностной мембране нейтрофилов. Иммунизация к HNA во время беременности или вследствие трансфузий компонентов крови может привести к выработке аллоантител к антигенам нейтрофилов. Антитела к HNA могут стать причиной развития таких клинических состояний, как аллоиммунная нейтропения новорожденных (АНН), аутоиммунная нейтропения, острое трансфузионно-обусловленное повреждение легких (ОТОПЛ), а также фебрильные транс-фузионные реакции, иммунная нейтропения после трансплантации костного мозга и лекарственно-зависимая иммунная нейтропения [1, 2]. Кроме того, по данным литературы, полиморфизм HNA является фактором риска не только вышеперечисленных состояний, но и других заболеваний, включая бактериальные инфекции (периодонтит), хронические воспалительные заболевания (васкулит, системная красная волчанка, ревматоидный артрит), а также восприимчивости к малярии [3]. Сведения о распределении НЫА у доноров в Российской Федерации отсутствуют.
К настоящему времени описано пять систем HNA (HNA-1, -2, -3, -4, -5) [1].
Система HNA-1 включает антигены HNA-1а, HNA-1b, HNA-1с и HNA-1d, расположенные на Fc-y рецепторе IIIb (FcyRIIIb, CD16b). Экспрессия антигена 1b всегда сопровождается экспрессией антигена 1d или 1с. FcyRIIIb представляет собой гликозилфос-фатидилинозитол-заякоренный (ГФИ) гликопроте-ин, экспрессируемый на поверхности нейтрофилов и кодируемый геном FCGRIIIB [4].
Антиген HNA^ расположен на ГФИ-заякорен-ном белке CD177, кодируемом геном CD177 [5]. HNA-2а встречается у большинства индивидуумов; отсутствие HNA-2а обусловлено транскрипционным дефектом гена CD177 [6].
HNA^ и HNA-3b расположены на подобном холиновому транспортеру белке 2 (CTL 2), кодируемом геном SLC44A2 [7].
Антигены систем HNA-4 и HNA-5 локализованы на интегриновых субъединицах аМ (CD11b) и aL (CD11a) и кодируются генами ITGAM и ITGAL соответственно [8].
Наличие каждого аллеля системы НКА-1 определяется комбинацией из шести однонуклеотидных замен ^КР) в гене FCGRШB, расположенных близко друг к другу. Системы НКА-3, -4, -5 включают два аллеля, различия между которыми обусловлены заменой одного нуклеотида в последовательности ДНК кодирующих их генов [1].
Частота встречаемости НКА является одним из факторов развития иммунного ответа [9]. В связи с этим представляется важным изучение распределения аллелей и генотипов НКА в популяции. Для изучения частоты встречаемости НКА используют серологические и молекулярно-генетические методы типирования. Однако серологическое типирова-ние антигенов нейтрофилов может быть затруднено из-за отсутствия некоторых типирующих реагентов, высокой стоимости и непродолжительного срока жизни нейтрофилов. Методы на основе полимераз-ной цепной реакции (ПЦР) являются наиболее оптимальными для типирования НКА-1, -3, -4, -5 [10], однако часто не используются в связи с отсутствием регламентирующих документов и тест-систем для типирования НКА от отечественных производителей.
Цель исследования — оценить риск НКА алло-иммунизации у доноров и больных гематологическими заболеваниями г. Санкт-Петербурга на основании изучения частот встречаемости аллелей и генотипов НКА.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Материалом исследования служили образцы периферической крови 303 доноров г. Санкт-Петербурга и 302 больных гематологическими заболеваниями, получавших терапию в Российском научно-исследовательском институте гематологии и трансфузиологии. Типирование НКА проводили методом аллель-специфичной ПЦР с использованием разработанных олигонуклеотидных праймеров. Геномная ДНК была выделена из цельной крови методом многоступенчатой очистки с использованием реактива цетилтриметиламмония бромида. Детекцию результатов осуществляли в режиме реального времени с использованием интеркалирующего красителя EVAGreen.
Статистическую обработку результатов проводили с помощью компьютерной программы Statistica 7.
Сравнения частот встречаемости аллелей и генотипов НЫА у доноров, больных гематологическими заболеваниями, и представителей других популяций, а также проверку соответствия наблюдаемых распределений равновесию Харди - Вайнберга проводили с помощью критерия согласия Пирсона х2. Уровнем статистической значимости различий считали р < 0,05.
Критическое значение х2 для аллелей систем НЫА-3, -4, -5 при уровне значимости отклонения 0,05 составляет 3,84. Критическое значение х2 для аллелей системы НЫА-1 при уровне значимости отклонения 0,05 составляет 5,991.
Для оценки вероятности аллоиммунизации к антигенам НЫА использовали следующие формулы:
- вероятность аллоиммунизации к аллелю «а» = (aa + ab) х bb,
- вероятность аллоиммунизации к аллелю «b» = (bb + ab) х aa,
где aa, ab, bb - частоты соответствующих генотипов.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Олигонуклеотидные праймеры для типирования HNA методом аллель-специфичной ПЦР были разработаны с помощью программ Primer 3.0 и Primer-BLAST.
Последовательности олигонуклеотидных прай-меров для типирования антигенов систем HNA-1, -3, -4, -5 представлены в табл. 1.
Таблица 1
Последовательность олигонуклеотидных праймеров для типирования HNA-1, -3, -4, -5
Антиген Ген Прямой праймер (5'- 3') Обратный праймер (5'- 3')
HNA-1a FCGR3B CCTCAATGGTACAGGGTGCTC GCCTGGCTTGAGATGAGGTT
HNA-1b/c FCGR3B CCTCAATGGTACAGCGTGCTT CACTGTCGTTGACTGTGGCAT
HNA-1b/d FCGR3B CCTCAATGGTACAGCGTGCTT ACTGTCGTTGACTGTGGCAG
HNA-3a SLC44A2 CTACCTCACGTACCTGAATGCT GCAGGGCAGTCACCATCTC
HNA-3b SLC44A2 CTACCTCACGTACCTGAATGCT GCAGGGCAGTCACCATCTT
HNA-4a ITGAM CTCATGCGAGCCCATCCG ACAAGGAGGTCTGACGGTGA
HNA-4b ITGAM CTCATGCGAGCCCATCCA ACAAGGAGGTCTGACGGTGA
HNA-5a ITGAL ATCATCCCCCACAGATCCAG AGCTGGACCCAGTAAGCATC
HNA-5b ITGAL ATCATCCCCCACAGATCCAC AGCTGGACCCAGTAAGCATC
Примечание. Нуклеотиды, комплементарные SNP, определяющие наличие антигена, выделены жирным шрифтом.
Для анализа специфичности праймеров использовали образцы ДНК 20 доноров, последовательности аллелей HNA-1, -3, -4, -5 которых были определены методом секвенирования. Соответствие результатов секвенирования и аллель-специфичной ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени, а также методом гель-электрофореза в агарозном геле составило 100%. По результатам электрофоретиче-ского разделения неспецифические продукты ПЦР выявлены не были.
Условия проведения ПЦР в реальном времени для аллелей HNA-1, -3, -4, -5 были одинаковыми. Для анализа использовали реакционную (2,5*) смесь для проведения ПЦР в присутствии EVAGreen фирмы «Синтол» (г. Москва), в состав которой входят ПЦР (2,5*) буфер Б (6,25 ммоль MgCL2, KCl,
ТрисНС1 (рН 8,8)), SynTaq ДНК-полимераза, дезок-синуклеозидтрифосфаты, глицерол, Tween 20. Для проведения ПЦР в каждую пробирку добавляли смесь, содержащую 50-100 нг геномной ДНК, реакционную (1х) смесь фирмы «Синтол», по 0,2 мкмоль прямого и обратного праймеров. Конечный объем смеси доводили до 25 мкл бидистиллированной водой. Для проведения ПЦР использовали следующий протокол: 95° - 5 мин, 33 цикла: 95° - 20 с, 68° - 30 с.
Частоты встречаемости аллелей и генотипов НЫА-1, -3, -4, -5 у доноров г. Санкт-Петербурга и больных гематологическими заболеваниями представлены в табл. 2. Отклонение наблюдаемого распределения генотипов от ожидаемого у больных гематологическими заболеваниями и доноров не было статистически значимым.
Таблица 2
Сравнение частот встречаемости генотипов и аллелей систем HNA у доноров и больных гематологическими заболеваниями
Система Генотип Пациенты, n = 302 Доноры, n = 303 X2 P Аллель Пациенты, n = 302 Доноры, n = 303
а/а 0,142 0,142 а 0,376 0,384
а/bc/bd 0,023 0,036 bd 0,588 0,584
HNA-1 а/bc 0,043 0,020 X2 = 0,172, bc 0,036 0,032
а/bd 0,411 0,442 p = 0,918 - - -
bc/bd 0,007 0,010 - - -
bd/bd 0,374 0,350 - - -
Окончание табл. 2
Система Генотип Пациенты, n = 302 Доноры, n = 303 х2> р Аллель Пациенты, n = 302 Доноры, n = 303
а/а 0,623 0,650 X2 = 0,150, p = 0,699 а 0,795 0,804
HNA-3 а/b 0,343 0,307 b 0,205 0,196
b/b 0,033 0,043 - - -
а/а 0,788 0,802 X2 = 0,321, p = 0,571 а 0,887 0,898
HNA-4 а/b 0,199 0,191 b 0,113 0,102
b/b 0,013 0,007 - - -
а/а 0,500 0,488 X2 = 0,124, p = 0,725 а 0,699 0,708
HNA-5 а/b 0,397 0,439 b 0,301 0,292
b/b 0,103 0,073 - - -
Как видно из табл. 2, частоты встречаемости генотипов НКА-1, -3, -4, -5 у больных гематологическими заболеваниями, получавших терапию в Российском научно-исследовательском институте гематологии и трансфузиологии, не имели статистически значимых различий от таковых у доноров г. Санкт-Петербурга. В обследуемых нами группах частота встречаемости аллеля НКА-Ш была выше (0,584-0,588), чем НКА-1а (0,376-0,384). Частота встречаемости НКА-1Ьс составляла 0,032-0,036, и данный аллель был представлен в генотипах ША-1а/ЬсМ (0,023-0,036), ША-1а/ Ьс (0,020-0,043) и НКА-1ЬсМ (0,007-0,010). Генотипы НКА-1Ьс/Ьс и НКА-1ш11 выявлены не были. Аллель «а» систем НКА-3, -4, -5 встречался у большинства исследуемых в каждой группе (0,795-0,804;
0.887-0,898; 0,699-0,708). Распространенность НКА-5а составила 0,699-0,708.
Так как частоты встречаемости генотипов НКА-
1, -3, -4, -5 у больных гематологическими заболеваниями и доноров г. Санкт-Петербурга не имели статистически значимых различий, оценку возможного риска аллоиммунизации против антигенов систем НКА рассчитывали на основании полученных данных о встречаемости аллелей и генотипов НКА в группе, объединяющей доноров и больных гематологическими заболеваниями (табл. 3).
Таблица 3
Оценка возможного риска аллоиммунизации по HNA-1, -3,
-5 при трансфузиях компонентов крови
HNA HNA HNA HNA HNA HNA HNA HNA HNA
la lbd lbc 3a 3b 4a 4b 5a 5b
0,233 0,143 0,064 0,037 0,231 0,01 0,163 0,080 0,250
Как видно из представленных данных, наибольшая величина расчетного риска аллоиммунизации при трансфузиях компонентов крови отмечена при отсутствии в генотипе аллелей НКА-5Ь, НКА-1а, НКА-3Ь, НКА-4Ь и составляла 0,250; 0,233; 0,231 и 0,163 соответственно.
ОБСУЖДЕНИЕ
Полученные данные согласуются с результатами исследований распределения аллелей и геноти-
пов НКА в популяции европейцев [9] и значительно отличаются от других популяций. Так, в популяциях Юго-Восточной Азии, Китая и Японии частота встречаемости аллеля НКА-1а была статистически значимо выше и составляла 0,696; 0,667 и 0,623 соответственно (р < 0,001) [11]. Частота встречаемости НКА-3а составила 0,795-0,804, что значимо превышало таковую в популяции Японии (0,654) [12], и была статистически значимо ниже, чем в популяциях Замбии (0,974) и Бразилии (1,0) (р < 0,001) [13, 14]. Частота встречаемости НКА-4а составила 0,887-0,898, и этот показатель был значимо ниже, чем в популяциях Китая и Бразилии - 0,995 и 1,0 соответственно (р < 0,001) [14, 15]. Полученная частота встречаемости НКА-5а была статистически значимо выше, чем в популяции Замбии (0,5) [13], но статистически значимо ниже, чем в популяциях Китая (0,852), Японии (0,840) и Бразилии (0,855) (р < 0,001) [12, 14, 15].
На основании полученных частот встречаемости аллелей и генотипов рассчитали вероятность алло-иммунизации к НКА. Наибольшая величина расчетного риска аллоиммунизации при трансфузиях компонентов крови отмечена при отсутствии в генотипе аллелей НКА-5Ь, НКА-1а, НКА-3Ь, НКА-4Ь и составляла 0,250; 0,233; 0,231 и 0,163 соответственно, что подтверждает результаты аналогичных исследований, проведенных другими авторами в популяции белых европейцев [10].
Полученные данные могут быть полезны для прогнозирования клинических состояний, связанных с аллоиммунизацией. Однако вероятность развития иммунного ответа в высокой степени зависит от иммуногенности антигена и других факторов, что может объяснять несоответствие расчетного риска аллоиммунизации и существующих данных о специфичности выявленных аллоантител к НКА. Так, например, при низком расчетном риске аллоиммунизации к НКА-3а (0,37) такие антитела приводят к развитию ОТОПЛ. Известно, что анти-НКА-3а аллоантитела, содержащиеся в донорской плазме, являются одной из причин развития ОТО-ПЛ тяжелого течения с летальным исходом [12].
Несмотря на высокий расчетный риск аллоиммунизации к HNA-3b, описаны редкие случаи АНН, вызванной аллоантителами анти-НЫА-3Ь, и в литературе не встречаются данные о случаях ОТОПЛ, вызванного такими антителами. Наиболее частой причиной развития АНН в популяции белых европейцев являются аллоантитела к НЫА-1а, -1b, -1c и -2а [16], однако в литературе описаны случаи АНН, вызванной аллоантителами к HNA-1d, -3 а, -3b, -4а, -4b, -5а [17, 18].
В клинической практике трансфузии грануло-цитного концентрата осуществляют пациентам при значительном снижении абсолютного количества гранулоцитов в крови при наличии инфекции, неконтролируемой антибактериальной терапией, а также при сепсисе новорожденных. В случае переливания несовместимого по антигенам нейтрофилов гемокомпонента у пациента повышается риск развития аллоиммунизации и, как следствие, отмечается отсутствие клинического эффекта трансфузии [19]. Таким пациентам требуется индивидуальный подбор по антигенам систем HNA и HLA. Наличие базы ти-пированных по HNA доноров будет способствовать профилактике аллоиммунизации. Создание клеточной панели, типированной по антигенам нейтрофи-лов, поможет решить проблему диагностики аллоим-мунных конфликтов в педиатрии, трансфузиологии и трансплантологии.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Проведенное исследование позволило изучить особенности распределения аллелей и генотипов HNA у доноров г. Санкт-Петербурга и больных гематологическими заболеваниями и оценить возможный риск HNA аллоиммунизации. Статистически значимых различий в частоте встречаемости аллелей и генотипов HNA-1, -3, -4, -5 у доноров г. Санкт-Петербурга и больных гематологическими заболеваниями не установлено. Наибольшая величина расчетного риска аллоиммунизации при трансфузиях компонентов крови отмечена при отсутствии в генотипе аллелей HNA-5b, HNA-1a, HNA-3b, HNA-4b, что подтверждает результаты аналогичных исследований, проведенных другими авторами в популяции белых европейцев. Полученные данные могут быть полезны для прогнозирования клинических состояний, связанных с аллоиммунизацией. Однако процесс иммунизации после трансфузии и (или) во время беременности связан не только с антигенной несовместимостью, но также зависит от иммуногенности антигена, генетических, эпигенетических факторов и факторов внешней среды, что может объяснять несоответствие расчетного риска аллоиммунизации и су-
ществующих данных о специфичности выявленных аллоантител к HNA.
Представленные данные могут быть полезны для профилактики аллоиммунизации, а также для попу-ляционных исследований. Предложенный метод ти-пирования HNA может быть использован для создания клеточной панели, типированной по антигенам нейтрофилов, с целью определения специфичности аллоантител у доноров, а также для диагностики ал-лоиммунных конфликтов в педиатрии, трансфузио-логии и трансплантологии.
ЛИТЕРАТУРА
1. Bux J. Human neutrophil alloantigens. Vox Sang. 2008; 94 (4): 277-285. DOI: 10.1111/j.1423-0410.2007.01031.x.
2. Reil A., Keller-Stanislawski B., Gunay S., Bux J. Specificities of leucocyte alloantibodies in transfusion-related acute lung injury and results of leucocyte antibody screening of blood donors. Vox Sang. 2008; 95 (4): 313-317. DOI: 10.1111/j.1423-0410.2008.01092.x.
3. Adu B., Dodoo D., Adukpo S., Hedley P.L., Gerds T., Lar-sen S.O., Christiansen M., Theisen M. Fc у receptor IIIB (FcyRIIIB) polymorphisms are associated with clinical malaria in Ghanaian children. PLoS One. 2012; 7 (9): 46197. DOI: 10.1371/journal.pone.0046197.
4. Reil A., Sachs U.J., Siahanidou T., Flesch B.K., Bux J. HNA-1 d: a new human neutrophil antigen located on Fcgamma receptor IIIb associated with neonatal immune neutropenia. Transfusion. 2013; 53 (10): 2145-2151. DOI: 10.1111/trf.12086.
5. Lalezari P., Murphy G.B., Allen F.H. NB1, a new neutro-phil-specific antigen involved in the pathogenesis of neonatal neutropenia. Journal of Clinical Investigation. 1971; 50 (5): 1108-1115. DOI: 10.1172/JCI106582.
6. Kissel K., Scheffler S., Kerowgan M., Bux J. Molecular basis of NB1 (HNA-2a, CD177) deficiency. Blood. 2002; 99 (11): 4231-4233. DOI: 10.1182/blood.v99.11.4231.
7. Curtis B.R., Cox N.J., Sullivan M.J., Konkashbaev A., Bo-wens K., Hansen K. et al. The neutrophil alloantigen HNA-3a (5b) is located on choline transporter-like protein 2 and appears to be encoded by an R > Q154 amino acid substitution. Blood. 2010; 115 (10): 2073-2076. DOI: 10.1182/blood-2009-11-248336.
8. Harris E.S., McIntyre T.M., Prescott S.M., Zimmerman G.A. The leukocyte integrins. Journal of Biological Chemistry. 2000; 275 (31): 23409-23412. DOI: 10.1074/jbc.R000004200.
9. Cardoso S.P., Chong W., Lucas G., Green A., Navarrete C. Determination of human neutrophil antigen-1, -3, -4 and -5 allele frequencies in English Caucasoid blood donors using a multiplex fluorescent DNA-based assay. Vox Sang. 2013; 105 (1): 65-72. DOI: 10.1111/vox.12016.
10. Clay M.E., Schuller R.M., Bachowski G.J. Granulocyte serology: current concepts and clinical significance. Immunohema-tology. 2010; 26 (1): 11-21.
11. Simtong P., Puapairoj C., Leelayuwat C. et al. Assessment of HNA alloimmunisation risk in Northeastern Thais, Burmese and Karen. Transfusion Medicine. 2018; 28 (1): 47-55. DOI: 10.1111/tme.12431.
12. Matsuhashi M., Tsuno N.H., Kawabata M., Mishima Y., Oko-chi1 N., Santoso S., Tozuka M., Takahashi K. The frequencies of human neutrophil alloantigens among the Japanese population. Tissue Antigens. 2012; 80 (4): 336-340. DOI: 10.1111/j.1399-0039.2012.01930.x.
13. Nielsen K.R., Koelbaek M.D., Varming K. et al. Frequencies of HNA-1, HNA-3, HNA-4, and HNA-5 in the Danish and Zambian populations determined using a novel TaqMan real time polymerase chain reaction method. Tissue Antigens. 2012; 80: 249-253. DOI: 10.1111/j.1399-0039.2012.01912.x.
14. Lopes L.B., Baleotti W. Jr., Suzuki R.B., FabronA., ChibaA.K., Vieira-Filho J.P.B., Castro B.S., Kunioshi A.M., Bordin J.O. HNA-3 gene frequencies in Brazilians and a new polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism method for HNA-3a/3b genotyping. Transfusion. 2014; 54 (6): 1619-1621. DOI: 10.1111/trf.12493.
15. Xia W., Bayat B., Sachs U. et al. The frequencies of human neutrophil alloantigens in the hinese Han population of Guangzhou. Transfusion. 2011; 51 (6): 1271-1277. DOI:
10.1111/j.1537-2995.2010.02979.x.
16. Van den Tooren-de Groot R., Ottink M., Husikes E., van Ros-sum A., van der Voorn B., Slomp J., Porcelijn L. Management and outcomes of 35 cases with foetal/neonatal alloimmune neutropenia. Acta Paediatrica. 2014; 103 (11): e467-474. DOI: 10.1111/apa.12741.
17. Lopes L.B., Abbas S.A., Moritz E., Martins J.O., Chiba A.K., Langhi D.M. Jr, Bordin J.O. Antibodies to human neutrophil antigen HNA-3b implicated in cases of neonatal alloimmune neutropenia. Transfusion. 2018; 58 (5): 1264-1270. DOI: 10.1111/trf.14524.
18. Curtis B.R., Roman A.S., Sulivan M.J., Raven C.S., Larison J., Weitekamp L.A. Two cases of maternal alloimmunization against human neutrophil alloantigen-4b, one causing severe alloimmune neonatal neutropenia. Transfusion. 2016; 56 (1): 101-106. DOI: 10.1111/trf.13287.
19. Danlkme M. B., Keashen M., Alavi J. B., Koch P.A., Eisenstaedt R. Granulocyte transfusions and outcome of alloimmunized patients with gram-negative sepsis. Transfusion. 1982; 22 (5): 374-378. DOI: 10.1046/j.1537-2995.1982.22583017461.x.
Сведения об авторах
Кробинец Ирина Ивановна, канд. биол. наук, ст. науч. сотрудник, РосНИИГТ, г. Санкт-Петербург. ORCID 0000-0002-64042387.
Минеева Наталья Витальевна, д-р биол. наук, профессор, рук. лаборатории изосерологии, РосНИИГТ, г. Санкт-Петербург. ORCID 0000-0001-7137-8877.
Богданова Ирина Олеговна, лаборант-исследователь, РосНИИГТ, г. Санкт-Петербург.
Чечеткин Александр Викторович, д-р мед. наук, профессор, директор РосНИИГТ, г. Санкт-Петербург. ORCID 0000-00027569-0697.
(*) Кробинец Ирина Ивановна, е-таД: [email protected]
Поступила в редакцию 14.03.2019 Подписана в печать 25.12.2019
