CC BY
21
Труды Карельского научного центра РАН № 3. 2020. С.106-111
Опубликована в онлайн-версии в декабре 2019 г. DOI: 10.17076/eb1113
УДК 571.27
CD8+ И CD4+ РЕГУЛЯТОРНЫЕ Т-КЛЕТКИ ПРИ КОЛОРЕКТАЛЬНОМ РАКЕ
Г. А. Жулай1, А. В. Новицкая1, А. В. Чуров1, А. А. Романов2, К. Ы. Мамашов3, А. Е. Тонкушина3
1 Институт биологии КарНЦ РАН, ФИЦ «Карельский научный центр РАН», Петрозаводск, Россия
2 Республиканский онкологический диспансер, Петрозаводск, Россия
3 Кемеровский государственный медицинский университет, Россия
Патогенез колоректального рака (КРР) тесно связан с развитием противоопухолевого иммунного ответа. Важная роль в регуляции иммунного ответа отводится регуляторным Т-клеткам (Treg), которые могут препятствовать эффективному распознаванию и элиминации клеток опухоли. Целью работы было исследование содержания периферических CD8+ и CD4+ Treg-клеток на разных стадиях КРР. Анализ экспрессии мембранных и внутриклеточных маркеров осуществляли методом многоцветной проточной цитометрии. У пациентов с КРР наблюдалось накопление периферических CD8+ и CD4+ Treg-лимфоцитов на всех стадиях КРР. Наряду с этим происходило достоверное снижение числа активированных Т-хелперов.
Ключевые слова: колоректальный рак; CD8; FOXP3; Treg-клетки; иммуносу-прессия; лимфоциты.
G. A. Zhulai, A. V. Novitskaia, A. V. Churov, A. A. Romanov, K. Y. Mama-shov, A. E. Tonkushina. CD8+ AND CD4+ REGULATORY T CELLS IN PATIENTS WITH COLORECTAL CANCER
The pathogenesis of colorectal cancer (CRC) is closely associated with the development of antitumor immune response. An important role in the regulation of the immune response belongs to regulatory T cells (Treg), which may interfere with effective recognition and elimination of tumor cells. The aim of this study was to investigate the stage-specific content of peripheral CD8+ Treg cells in patients with CRC. The expression of membrane and intracellular markers was analyzed by multicolor flow cytometry. Patients with CRC exhibited an accumulation of peripheral CD8+ and CD4+ Treg lymphocytes at all stages of the disease. Along with this, there was a significant decrease in the number of activated T-helpers.
Key wo rds: Colorectal cancer; CD8; FOXP3; Treg cells; immunosuppression; lymphocytes.
Введение ний. В 2018 году в мире было зарегистриро-
вано свыше 1,8 миллиона случаев первичного Колоректальный рак (КРР) - одна из распро- КРР, 881 000 из которых оказались летальными. страненных форм злокачественных заболева- В целом КРР занимает третье место по заболе-
ваемости и второе по смертности [Bray et al., 2018].
Развитие КРР связано с инфильтрацией опухоли клетками иммунной системы [Salama et al., 2009; Nosho et al., 2010]. В частности, ряд исследований демонстрируют, что усиление инфильтрации Т-клетками, экспрессирующими маркеры CD8+ и CD45RO+, коррелирует с благоприятным прогнозом течения КРР. В этом случае высокое содержание в опухоли CD8+ и CD45RO+ Т-клеток тесно связано с низким ин-вазивным потенциалом злокачественной опухоли, ранней стадией заболевания и лучшей выживаемостью пациентов [Galon et al., 2006; Vlad et al., 2015].
Роль регуляторных Т-клеток (Treg) в патологии КРР до сих пор обсуждается и четко не определена. Исследования показали, что Treg-клетки человека фенотипически и функционально разнообразны, что позволяет разделить их на ряд субпопуляций [Sakagu-chi et al., 2010; Byrne et al., 2011; Yoshii et al., 2012]. FOXP3 (forkhead box P3) экспресси-рующие Treg, как правило, подразделяются на CD4+CD25+ естественные Treg, развивающиеся в тимусе, и индуцированные Treg, генерируемые на периферии [Zhang et al., 2015]. Высокое содержание опухоль-инфильтриру-ющих Treg-клеток при КРР ассоциировано с плохим клиническим прогнозом и низкой выживаемостью пациентов [Terme et al., 2013]. Высокое содержание инфильтрирующих опухоль FOXP3+ Treg-клеток обеспечивает супрессию Т-лимфоцитов, специфичных к антигенам опухоли. Таким образом, в случае преобладания Treg-клеток происходит ослабление противоопухолевого иммунного ответа [Betts et al., 2012]. Между тем выделяют FOXP3- Treg-клетки, к которым относят Tr1, Th3, CD8+CD28+/-и Qa1 -рестриктированные T-клетки [Zhang et al., 2015].
Несмотря на то что CD8+ регулятор-ные Т-клетки (CD8+ Treg) были открыты в 1970 году, до сих пор остается спорной их роль в иммунном ответе. Считается, что CD8+ Treg, как и CD4+FOXP3+ Treg-клетки, оказывают иммуносупрессорное действие [Yu et al., 2018].
Учитывая текущее состояние проблемы, изучение функционирования Treg-клеток у пациентов с КРР является важным для детального изучения патогенеза заболевания и создания более эффективных подходов к иммунотерапии. Целью работы было исследование содержания периферических CD8+ и CD4+ Treg-клеток на разных стадиях КРР.
Материалы и методы
В ходе работы проведен анализ 35 образцов периферической крови пациентов с КРР (средний возраст 66 ± 10,5 года) и 46 здоровых доноров (средний возраст 57,7 ± 20,1 года). В исследование были включены пациенты обоих полов в возрасте 18-70 лет с установленным, на основе морфологических, клинических и эндоскопических методов исследования, диагнозом «колоректальный рак». Критериями исключения послужили иные формы новообразований и иммуновоспалительных заболеваний в анамнезе. Пациенты были разделены на две группы (по стадиям КРР): в первую вошли лица с I и II стадиями, во вторую - с III и IV стадиями.
Забор крови для лабораторного анализа осуществлялся из локтевой вены натощак и, в случаях с КРР, до начала терапии. Для взятия материала использовали стандартные вакуумные пробирки с антикоагулянтом ЭДТА-К3 (4 мл). Экспрессию молекул клетками анализировали на проточном цитометре Cytomics FC500 (Beckman Coulter, США) с добавлением моноклональных антител к CD4, CD8, CD25, FOXP3 и соответствующих изотипических контролей. Сначала проводили окрашивание клеток цельной крови моноклональными антителами к поверхностным антигенам, а после использовали протокол для внутриклеточного окрашивания FOXP3. Для внутриклеточного окрашивания предварительно выделяли мо-нонуклеары крови на градиенте плотности фи-колла (1,077 г/мл), а затем применяли набор буферов с возможностью фиксации и перме-абилизации клеток производства eBioscience (США).
Статистическую обработку массива данных проводили в пакете программ Statistica 6.0. Достоверность различия между группами рассчитывали с применением критерия Манна - Уит-ни (уровень значимости р < 0,05). Полученные данные представлены в виде M ± SD.
Исследование выполнено на научном оборудовании Центра коллективного пользования Федерального исследовательского центра «Карельский научный центр Российской академии наук».
Результаты и обсуждение
В настоящее время используются различные маркеры для идентификации Тгед-клеток. Как правило, применяют CD25, CD39, CD73, CD127 и FOXP3. Среди них ключевым маркером является FOXP3, экспрессия и функции которого тесно связаны с функциональной ак-
Содержание Treg-клеток у здоровых доноров и у больных КРР на разных стадиях заболевания (% от CD4+ Т-клеток)
The content of Treg-cells in the healthy donors and in patients with CRC at different stages of the disease (% of CD4+ Т cells)
Больные КРР
Фракция Здоровые доноры Patients with CRC
Fraction Healthy donors I-II стадии III-IV стадии
Stage I-II Stage III-IV
CD4+CD25+ 20,92 ± 8,7 18,28 ± 8,61* 13,85 ± 4,46*
CD4+CD25+FOXP3+ 4,52 ± 1,7 6,88 ± 2,02* 5,20 ± 2,33*
CD8+CD25+FOXP3+ 0,32 ± 0,2 0,94 ± 0,54* 1,42 ± 0,88*
Примечание. *Различия достоверны по сравнению с контролем; КРР - колоректальный рак; данные представлены в виде М ± SD (где М - среднее значение выборки, SD - стандартное отклонение).
Note. *The differences are significant compared with the control; CRC - colorectal cancer; the data are presented in the form M ± SD (where M is the mean and SD is the standard deviation).
тивностью Treg-клеток. Известно, что FOXP3 экспрессируется как в CD4+CD25+ T-клетках, так и в CD8+ T-клетках [Yu et al., 2018]. В работе был проведен анализ количества Treg-клеток с фенотипами CD8+FOXP3+, CD4+FOXP3+ и CD4+CD25+. Полученные данные представлены в таблице.
При прогрессировании КРР были установлены значительные изменения в популяцион-ном составе Treg-клеток. Наиболее высокий уровень CD8+ Т-клеток, экспрессирующих маркер FOXP3, отмечался в периферической крови больных КРР на III-IV стадии заболевания (табл.). Также было отмечено снижение числа активированных CD4+CD25+ Т-хелперов на всех стадиях онкогенеза. Показано сокращение численности CD4+CD25+ в 1,5 раза на поздних стадиях по сравнению с контролем (табл.). Вместе с тем по мере прогрессирования КРР наблюдаются значительные колебания в содержании CD4+FOXP3+ Treg-клеток. На ранних стадиях заболевания (I-II) число CD4+FOXP3+ клеток было выше по сравнению с контролем и составило 6,88 ± 2,02 %, а по мере прогрессирования (III-IV стадия) - 5,20 ± 2,33 % против 4,52 ± 1,70 % в контроле (р < 0,05) (табл.).
Противоопухолевый иммунитет - многокомпонентный процесс, основанный на взаимодействии звеньев адаптивного и врожденного иммунитета, включая множество типов клеток и их продуктов. Патогенез онкозаболеваний, в том числе КРР, сопровождается дисбалансом основных субпопуляций лимфоцитов [Кит и др., 2012]. Важную роль в регуляции иммунных функций играют Treg-клетки. Было показано, что CD8+ Treg-клетки пациентов с КРР наряду с детально изученными CD4+ ^eg также способны эффективно подавлять пролиферацию T-клеток и секрецию ^1-цитокинов in vitro [Chaput et al., 2009; Ward-Hartstonge, Kemp, 2017].
По полученным данным, при КРР происходит значительное увеличение доли CD8+ Treg-клеток на всех стадиях развития КРР, в особенности на III и IV стадиях (табл.). Число CD4+ Treg было повышенным на начальных этапах развития КРР, после чего наблюдался спад в содержании клеток данного фенотипа. Вероятнее всего, подобные изменения связаны с тем, что CD4+ Treg играют более важную роль на ранних стадиях развития опухоли, в то время как CD8+ Treg - на более поздних [Elpek et al., 2007].
В настоящее время доказано, что Treg-клетки принимают непосредственное участие в механизмах канцерогенеза [Schott et al., 2010; Watanabe et al., 2010; Zhang et al., 2015; Чуров и др., 2019]. Увеличение содержания Treg-клеток в периферической крови и ткани опухоли ряд авторов связывают с неблагоприятным прогнозом для больных со злокачественными новообразованиями различной локализации [Schott et al., 2010; Watanabe et al., 2010]. В то же время имеются сведения, указывающие на благоприятный прогноз у онкологических больных при высоком содержании опу-холь-инфильтрирующих CD8+ Treg-клеток [Yu et al., 2018].
В работе продемонстрировано изменение Т-клеточного состава в периферической крови пациентов с КРР, которое выражается в снижении числа активированных CD4+CD25+ Т-хел-перов и увеличении содержания CD4+CD25+ FOXP3+ и CD8+CD25+FOXP3+ Treg-клеток, что свидетельствует о развитии системной имму-носупрессии у больных КРР.
Заключение
Полученные данные показывают, что при КРР происходит значительное изменение баланса субпопуляций регуляторных клеток. Нами выявлено повышенное содержание попу-
ляций CD8+ и CD4+ Тгед-клеток, экспрессирую-щих транскрипционный фактор FOXP3 у больных КРР на ранних и поздних стадиях заболевания. Отмечена тенденция к снижению числа CD4+CD25+ активированных Т-хелперов.
В целом эти данные свидетельствуют об увеличении уровня иммунной супрессии при КРР. Для детального понимания роли различных субпопуляций Тгед-клеток в патогенезе КРР требуется проведение дальнейших исследований, направленных на изучение функциональной роли и молекулярных механизмов супрессорной активности Тгед-клеток, а также поиск маркеров для идентификации Тгед-клеток с целью разработки подходов к их практическому использованию в клинических целях.
Финансовое обеспечение исследований осуществлялось из средств федерального бюджета на выполнение государственного задания КарНЦ РАН (0218-2019-0083).
Литература
Кит О. И., Шапошников А. В., Златник Е. Ю., Ни-кипелова Е. А., Новикова И. А. Местный клеточный иммунитет при аденокарциноме и полипах толстой кишки // Сибирское медицинское обозрение. 2012. Т. 76, №. 4. С. 1-11.
Чуров А. В., Новицкая А. В., Коломейчук С. Н., ОлейникЕ. К. Показатели клеточного иммунитета при ревматоидном артрите: роль цитомегаловирус-ной инфекции // Клиническая лабораторная диагностика. 2019. Т. 64, №. 2. С. 98-103.
Betts G., Jones E., Junaid S. Suppression of tumour-specific CD4+ T cells by regulatory T cells is associated with progression of human colorectal сапсег // Gut. 2012. Vol. 61. P. 1163-1171. doi: 10.1136/gutjnl-2011 -300970
BrayF., Ferlay J., Soerjomataram I., SiegelR. L., Torre L. A., JemalA. Global cancer statistics 2018: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries // CA: a cancer journal for clinicians. 2018. Vol. 68, по. 6. P. 394-424. doi: 10.3322/caac.21492
Byrne W. L., Mills K. H., Lederer J. A, O'Sul-livan G. C. Targeting regulatory T cells in cancer // Cancer Res. 2011. Vol. 71, no. 22. P. 6915-6920. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-11-1156
Chaput N., Louafi S., Bardier A. Identification of CD8+ CD25+ Foxp3+ suppressive T cells in colorectal cancer tissue // Gut. 2009. Vol. 58, no. 4. P. 520-529. doi: 10.1136/gut.2008.158824
Elpek K. G., Lacelle С., Singh N. P., Yolcu E. S., Shirwan H. CD4+CD25+ t regulatory cells dominate multiple immune evasion mechanisms in early but not late phases of tumor development in a B cell lymphoma model // J. Immunol. 2007. Vol. 178. P. 6840-6848. doi: 10.4049/jimmunol.178.11.6840
Galon J., Costes A., Sanchez-Cabo F., KirilovskyA., Mlecnik B., Lagorce-Pages C. Type, density, and location of immune cells within human colorectal tumors predict clinical outcome // Science. 2006. Vol. 313, no. 5795. P. 1960-1964. doi: 10.1126/science.1129139
LasryA., Zinger A., Ben-Neriah Y. Inflammatory networks underlying colorectal cancer // Nature immunology. 2016. Vol. 17, no. 3. P. 230. doi: 10.1038/ni.3384
Nosho K., Baba Y., Tanaka N. Tumour-infiltrating T-cell subsets, molecular changes in colorectal cancer, and prognosis: cohort study and literature review // J. Pathol. 2010. Vol. 222, no. 4. P. 350-366. doi: 10.1002/path. 2774
Sakaguchi S., Miyara M., Costantino C. M., Haf-ler D. A. FOXP3+ regulatory T cells in the human immune system // Nat. Rev. Immunol. 2010. Vol. 10, no. 7. P. 490-500. doi: 10.1038/nri2785
Salama P., Phillips M., Grieu F. Tumor-infiltrating FOXP3+ T regulatory cells show strong prognostic significance in colorectal cancer // J. Clin. Oncol. 2009. Vol. 27, no. 2. P. 186-192. doi: 10.1200/jm. 2008.18.7229
Schott A. K., Pries R., Wollenberg B. Permanent up-regulation of regulatory T-lymphocytes in patients with head and neck cancer // Int. J. Mol. Med. 2010. Vol. 26, no. 1. P. 67-75. doi: 10.3892/ijmm_00000436
Terme M., Pernot S., Marcheteau E., SandovalF., Benhamouda N., Colussi O., Dubreuil O., Carpenti-er A. F., Tartour E., Taieb J. VEGFA-VEGFR pathway blockade inhibits tumor-induced regulatory T-cell proliferation in colorectal cancer // Cancer Res. 2013. Vol. 73. P. 539-549. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-12-2325
Vlad C., Kubelac P., Fetica B., Vlad D., Irimie A., Achimas-Cadariu P. The prognostic value of FOXP3+ T regulatory cells in colorectal cancer // J. Buon. 2015. Vol. 20, no. 1. P. 114-119.
Ward-Hartstonge K. A., Kemp R. A. Regulatory T-cell heterogeneity and the cancer immune response // Clin. Transl. Immunology. 2017. Vol. 6, no. 9. P. e154. doi: 10.1038/cti.2017.43
Watanabe M. A. E., Oda J. M. M., Amarante M. K., Voltarelli J. C. Regulatory T cells and breast cancer: implications for immunopathogenesis // Canc. Metastasis Rev. 2010. Vol. 29, no. 4. P. 569-579. doi: 10.1007/ s10555-010-9247-y
Yoshii M., Tanaka H., Ohira M., Muguruma K., Iwau-chi T., Lee T., Sakurai K., Kubo N., Yashiro M., Sawa-da T., Hirakawa K. Expression of Forkhead box P3 in tumour cells causes immunoregulatory function of signet ring cell carcinoma of the stomach // Br. J. Cancer. 2012. Vol. 106, no. 10. P. 1668-1674. doi: 10.1038/ bjc.2012.141
Yu Y., Ma X., Gong R., Zhu J., Wei L., Yao J. Recent advances in CD8+ regulatory T cell research // Oncol. Lett. 2018. Vol. 15, no. 6. P. 8187-8194. doi: 10.3892/ ol.2018.8378
ZhangX., Kelaria S., Kerstetter J., Wang J. The functional and prognostic implications of regulatory T cells in colorectal carcinoma // J. Gastrointest Oncol. 2015. Vol. 6, no. 3. P. 307-313. doi: 10.3978/ j.issn.2078-6891.2015.017
Поступила в редакцию 23.07.2019
@
References
ChurovA. V., Novitskaya A. V., Kolomeichuk S. N., OleinikE. K. Pokazateli kletochnogo immuniteta pri revmatoidnom artrite: rol' tsitomegalovirusnoi infektsi [Cellular immunity parameters in rheumatoid arthritis: the role of cytomegalovirus infection]. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika [Clinical laboratory diagnostics]. 2019. Vol. 64, no. 2. P. 98-103.
Kit O. I., ShaposhnikovA. V., ZlatnikE. Yu., Nikipelo-va E. A., Novikova I. A. Mestnyi kletochnyi immunitet pri adenokartsinome i polipakh tolstoi kishki [Local cellular immunity in adenocarcinoma and colon polyps]. Sibir-skoe meditsinskoe obozrenie [Siberian Medical Review]. 2012. Vol. 76, no. 4. P. 1-11.
Betts G., Jones E., Junaid S., El-Shanawany T., Scurr M., Mizen P., Kumar M., Jones S., Rees B., Williams G., GallimoreA., GodkinA. Suppression of tumour-specific CD4+ T cells by regulatory T cells is associated with progression of human colorectal cancer. Gut. 2012. Vol. 61. P. 1163-1171. doi: 10.1136/ gutjnl-2011-300970
BrayF., Ferlay J., Soerjomataram I., SiegelR. L., Torre L. A., JemalA. Global cancer statistics 2018: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries. CA: Cancer J. Clin. 2018. Vol. 68, no. 6. P. 394-424. doi: 10.3322/ caac.21492
Byrne W. L., Mills K. H., Lederer J. A., O'Sulli-van G. C. Targeting regulatory T cells in cancer. Can-cerRes. 2011. Vol. 71, no. 22. P. 6915-6920. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-11-1156
Chaput N., Louafi S., Bardier A. Identification of CD8+ CD25+ Foxp3+ suppressive T cells in colorectal cancer tissue. Gut. 2009. Vol. 58, no. 4. P. 520-529. doi: 10.1136/gut.2008.158824
Elpek K. G., Lacelle C., Singh N. P., Yolcu E. S., Shirwan H. CD4+CD25+ T regulatory cells dominate multiple immune evasion mechanisms in early but not late phases of tumor development in a B cell lymphoma model. J. Immunol. 2007. Vol. 178. P. 6840-6848. doi: 10.4049/jimmunol.178.11.6840
Galon J., Costes A., Sanchez-Cabo F., KirilovskyA., Mlecnik B., Lagorce-Pages C. Type, density, and location of immune cells within human colorectal tumors predict clinical outcome. Science. 2006. Vol. 313, no. 5795. P. 1960-1964. doi: 10.1126/science.1129139
LasryA., Zinger A., Ben-Neriah Y. Inflammatory networks underlying colorectal cancer. Nat. Immunol. 2016. Vol. 17, no. 3. P. 230. doi: 10.1038/ni.3384
Nosho K., Baba Y., Tanaka N. Tumour-infiltrating T-cell subsets, molecular changes in colorectal
cancer, and prognosis: cohort study and literature review. J. Pathol. 2010. Vol. 222, no. 4. P. 350-366. doi: 10.1002/path. 2774
Sakaguchi S., Miyara M., Costantino C. M., Haf-ler D. A. FOXP3+ regulatory T cells in the human immune system. Nat. Rev. Immunol. 2010. Vol. 10, no. 7. P. 490-500. doi: 10.1038/nri2785
Salama P., Phillips M., Grieu F. et al. Tumor-infiltrating FOXP3+ T regulatory cells show strong prognostic significance in colorectal cancer. J. Clin. Oncol. 2009. Vol. 27, no. 2. P. 186-192. doi: 10.1200/jm. 2008.18.7229
Schott A. K., Pries R., Wollenberg B. Permanent up-regulation of regulatory T-lymphocytes in patients with head and neck cancer. Int. J. Mol. Med. 2010. Vol. 26, no. 1. P. 67-75. doi: 10.3892/ijmm_00000436
Terme M., Pernot S., Marcheteau E., Sandoval F., Benhamouda N., Colussi O., Dubreuil O., Carpenti-er A. F., Tartour E., Taieb J. VEGFA-VEGFR pathway blockade inhibits tumor-induced regulatory T-cell proliferation in colorectal cancer. Cancer Res. 2013. Vol. 73. P. 539-549. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-12-2325
Vlad C., Kubelac P., Fetica B., Vlad D., Irimie A., Achimas-Cadariu P. The prognostic value of FOXP3+ T regulatory cells in colorectal cancer. J. Buon. 2015. Vol. 20, no. 1. P. 114-119.
Ward-Hartstonge K. A., Kemp R. A. Regulatory T-cell heterogeneity and the cancer immune response. Clin. Transl. Immunology. 2017. Vol. 6, no. 9. P. e154. doi: 10.1038/cti.2017.43
Watanabe M. A. E., Oda J. M. M., Amarante M. K., Voltarelli J. C. Regulatory T cells and breast cancer: implications for immunopathogenesis. Canc. Metastasis Rev. 2010. Vol. 29, no. 4. P. 569-579. doi: 10.1007/ s10555-010-9247-y
Yoshii M., Tanaka H., Ohira M., Muguruma K., Iwau-chi T., Lee T., Sakurai K., Kubo N., Yashiro M., Sawa-da T., Hirakawa K. Expression of Forkhead box P3 in tumour cells causes immunoregulatory function of signet ring cell carcinoma of the stomach. Br. J. Cancer. 2012. Vol. 106, no. 10. P. 1668-1674. doi: 10.1038/bjc.2012.141 Yu Y., Ma X., Gong R., Zhu J., Wei L., Yao J. Recent advances in CD8+ regulatory T cell research. Oncol. Lett. 2018. Vol. 15, no. 6. P. 8187-8194. doi: 10.3892/ ol.2018.8378
ZhangX., Kelaria S., Kerstetter J., Wang J. The functional and prognostic implications of regulatory T cells in colorectal carcinoma. J. Gastrointest Oncol. 2015. Vol. 6, no. 3. P. 307-313. doi: 10.3978/ j.issn.2078-6891.2015.017
Received July 23, 2019
©
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ:
CONTRIBUTORS:
Жулай Галина Анатольевна
младший научный сотрудник группы иммунологии Институт биологии КарНЦ РАН, Федеральный исследовательский центр «Карельский научный центр РАН»
ул. Пушкинская, 11, Петрозаводск, Республика Карелия, Россия, 185910
эл. почта: zhgali-111@yandex.ru тел.: (8142) 769810
Новицкая Анастасия Васильевна
старший биолог группы иммунологии Институт биологии КарНЦ РАН, Федеральный исследовательский центр «Карельский научный центр РАН»
ул. Пушкинская, 11, Петрозаводск, Республика Карелия,
Россия, 185910
эл. почта: anestos@ya.ru
тел.: (8142) 769810
Чуров Алексей Викторович
старший научный сотрудник группы иммунологии, к. б. н. Институт биологии КарНЦ РАН, Федеральный исследовательский центр «Карельский научный центр РАН»
ул. Пушкинская, 11, Петрозаводск, Республика Карелия,
Россия, 185910
эл. почта: achurou@yandex.ru
тел.: (8142) 769810
Романов Александр Анатольевич
заведующий отделением, врач хирург-онколог
Республиканский онкологический диспансер
Лососинское ш., 11, Петрозаводск, Республика Карелия,
Россия, 185002
эл. почта: tiffozi@mail.ru
тел.: (8142) 764230
Мамашов Кылымбек Ырысбекович
студент
Кемеровский государственный медицинский университет ул. Ворошилова, 22а, Кемерово, Россия, 650056 эл. почта: kmamashov@inbox.ru
Тонкушина Анастасия Евгеньевна
студентка
Кемеровский государственный медицинский университет ул. Ворошилова, 22а, Кемерово, Россия, 650056 эл. почта: Tnastya996@gmail.com
Zhulai, Galina
Institute of Biology, Karelian Research Centre, Russian Academy of Sciences
11 Pushkinskaya St., 185910 Petrozavodsk, Karelia, Russia e-mail: zhgali-111@yandex.ru tel.: (8142) 769810
Novitskaya, Anastasia
Institute of Biology, Karelian Research Centre, Russian Academy of Sciences
11 Pushkinskaya St., 185910 Petrozavodsk, Karelia, Russia e-mail: anestos@ya.ru tel.: (8142) 769810
Churov, Aleksey
Institute of Biology, Karelian Research Centre, Russian Academy of Sciences
11 Pushkinskaya St., 185910 Petrozavodsk, Karelia, Russia e-mail: achurou@yandex.ru tel.: (8142) 769810
Romanov, Alexander
Republican Oncology Centre
11 Lososinskoe Sh., 185002 Petrozavodsk, Karelia, Russia e-mail: tiffozi@mail.ru tel.: (8142) 764230
Mamashov, Kylymbek
Kemerovo State Medical University
22a Voroshilov St., 650056 Kemerovo, Russia
e-mail: kmamashov@inbox.ru
Tonkushina, Anastasia
Kemerovo State Medical University
22a Voroshilov St., 650056 Kemerovo, Russia
e-mail: Tnastya996@gmail.com
